Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1在肺部疾病中作用及机制的研究进展

Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,RAC1)是Ras GTPase超家族的重要成员,在细胞的运动、增殖、黏附等方面发挥核心作用,同时还参与调节血管通透性以及细胞屏障功能。近年来,RAC1在多种肺部疾病发生、发展过程的作用逐渐受到关注,并逐渐成为肺部疾病研究的新方向。本文系统阐述了RAC1的生物学特性并总结了其在肺肿瘤、慢性阻塞性肺疾病、肺损伤和动脉型肺动脉高压中的功能及分子机制,以期为肺部疾病的治疗提供新思路。

Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3在1型糖尿病和树突状细胞中的作用初探

目的初步探索ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3(RAC3)在1型糖尿病(T1DM)和树突状细胞(DC)中的作用。方法选取来自广东省T1DM转化医学研究中2011至2016年入组后规律随访的T1DM患者作为病例组,选择2011至2016年来自中山大学附属第三医院就诊的正常糖耐量者作为健康对照组。病例组和对照组均在筛选阶段进行全外显子组测序,在验证阶段进行基因分型。使用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建C57BL/6小鼠背景的RAC3全身敲除(KO)小鼠模型。使用聚合酶链反应(PCR)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting法分别验证RAC3在DNA、RNA和蛋白水平是否被敲除。通过流式细胞染色检测RAC3 KO小鼠和同窝野生对照(WT)小鼠(每组3只)的DC分化比例以及主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(MHCⅡ)、CD86和CD80等成熟活化指标的表达水平。采用logistic回归分析法比较病例组和对照组之间等位基因频率分布的差异。组间比较采用独立样本t检验。结果筛选阶段共纳入72例T1DM患者和487名健康对照,验证阶段共纳入122例T1DM患者和577名健康对照。筛选阶段结果显示,T1DM患者中RAC3 rs4969478位点的等位基因T频率高于健康对照[分别为7.64%(11/144)和1.13%(11/974),OR=9.38,P<0.001]。验证阶段基因分型结果同样显示,T1DM患者中RAC3 rs4969478位点的等位基因T频率高于健康对照[分别为4.50%(11/244)和1.13%(13/1154),OR=4.14,P<0.01]。WT小鼠和RAC3 KO小鼠的DC分化比例差异无统计学意义(分别为85.6%±1.1%和83.3%±0.25%,P=0.08)。WT小鼠和RAC3 KO小鼠DC中MHCⅡ、CD86和CD80等成熟活化指标的表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论遗传学研究提示RAC3可能是人类T1DM的易感基因,但可能不通过DC参与T1DM的发生。

益气解毒方对鼻咽癌细胞标志物T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1及Ras相关C3肉毒素底物1表达的影响

目的观察益气解毒方对鼻咽癌细胞标志物T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)和Ras相关C3肉毒素底物1(Rac1)表达的影响,探讨其作用机制。方法实验分为对照组、益气解毒方组和阳性药组,分别予生理盐水、益气解毒方药液和5-氟尿嘧啶注射液,干预后置于37℃、5%CO2孵育箱中培养,24 h后采集细胞。免疫组化和Western blot检测细胞Tiam1和Rac1蛋白表达,RT-PCR检测细胞Tiam1和Rac1 mRNA表达。结果与对照组比较,益气解毒方组和阳性药组Tiam1和Rac1的蛋白和mRNA表达明显降低,且益气解毒方组降低更明显(P<0.01)。结论益气解毒方可能通过抑制肿瘤细胞标志物Tiam1和Rac1的表达,达到治疗鼻咽癌的作用。

肝细胞肝癌患者癌组织中Ras相关C3肉毒素底物1、转化生长因子β1表达变化及其意义

目的观察肝细胞肝癌(HCC)患者癌组织中Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)的表达变化,并探讨其意义。方法 73例HCC患者,均行HCC切除术,术中保留HCC组织及相应癌旁组织,采用免疫组化法检测HCC组织、癌旁正常组织Rac1及TGF-β_1,分析其与HCC临床病理特征之间的关系。应用kaplan-Meier生存曲线分析Rac1和TGF-β_1共同表达与HCC预后的关系。结果 HCC组织、癌旁正常组织Rac1的阳性表达率分别为37.0%(27/73)、20.5%(15/73),二者比较,P<0.05;HCC组织、癌旁正常组织TGF-β_1的阳性表达率分别为61.6%(45/73)、28.8%(21/73),二者比较,P<0.05。HCC组织TGF-β_1的表达与肿瘤直径、血清甲胎蛋白表达、门静脉癌栓、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。Rac1与TGF-β_1在HCC中的表达呈正相关(r=0.313,P<0.01),Rac1与TGF-β_1的共同高表达与HCC TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.01)。Rac1与TGF-β_1共同高表达与HCC患者的不良预后呈正相关(r=0.499,P<0.05)。结论 HCC组织中Rac1、TGF-β_1均呈高表达。Rac1、TGF-β_1共同高表达与HCC的进展及不良预后有关。

隐丹参酮调节Rac1/AKT/NF-κB信号通路对脓毒症大鼠肠损伤的影响

目的:探究隐丹参酮(CRY)调节Ras相关C3肉毒素底物1(Racl)/丝氨酸-苏氨酸蛋白酶(AKT)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对脓毒症大鼠肠损伤的影响。方法:建立脓毒症大鼠模型。大鼠分为Control组、Model组、隐丹参酮高、中、低剂量组(7.0mg·kg^(-1)·d^(-1)CRY-H组、14.0mg·kg^(-1)·d^(-1)CRY-M组、28.0mg·kg^(-1)·d^(-1)CRY-L组)和隐丹参酮高剂量+NF-κB通路激活剂组(28mg·kg^(-1)·d^(-1)CRY-H+5 mg·kg^(-1)·d^(-1)PMA组),每组12只,Control组与Model组使用同等剂量生理盐水进行处理,每天1次,连续21d。用试剂盒检测脓毒症大鼠血清炎症因子、氧化应激、肠黏膜屏障指标水平;HE染色观察大鼠肠组织病理形态;免疫组化和免疫印迹法分别检测大鼠肠组织中ZO-1、occludin和通路蛋白表达。结果:与Control组比较,Model组黏膜绒毛排列紊乱,部分黏膜脱落、坏死,大量炎细胞浸润,组织病理评分较高,血清TNF-α、IL-1β、MDA、内毒素、D-乳酸水平上升,SOD水平降低,Rac1、p-AKT/AKT、p-NF-κB/NF-κB表达上调,ZO-1、occludin下调表达(P<0.05);与Model组比较,CRY-L、CRY-M、CRY-H组肠黏膜绒毛相对完整,炎细胞浸润减轻,组织病理评分降低,血清TNF-α、IL-1β、MDA、内毒素、D-乳酸水平降低,SOD水平上升,Rac1、p-AKT/AKT、p-NF-κB/NF-κB表达下调,ZO-1、occludin上调表达(P<0.05);与CRY-H组相比,CRY-H+PMA组肠黏膜细胞有较多炎细胞浸润,组织病理评分升高,血清TNF-α、IL-1β、MDA、内毒素、D-乳酸水平升高,SOD水平降低,Rac1、p-AKT/AKT、p-NF-κB/NF-κB表达上调,ZO-1、occludin下调表达(P<0.05)。结论:隐丹参酮抑制Rac1/AKT/NF-κB信号通路改善脓毒症大鼠肠损伤。

RAC3基因对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3(RAC3)对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集2015年5月至2016年5月在海军军医大学(第二军医大学)长征医院门诊或住院的不明原因自然流产和人工流产妊娠妇女的绒毛组织各20例,应用q PCR法检测绒毛组织中RAC3 m RNA的表达。取C57/B6小鼠孕6.5、14.5和19.5 d的胎盘组织进行m RNA芯片检测。在早期人滋养层细胞系HTR-8/SVneo中干扰和过表达RAC3后,应用CCK-8法和Transwell实验检测RAC3对HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果不明原因自然流产绒毛组织中RAC3 m RNA的表达低于人工流产绒毛组织(P<0.05)。小鼠孕6.5、14.5 d胎盘组织中Rac3m RNA的表达高于孕19.5 d(P均<0.05)。与对照组相比,干扰RAC3表达后HTR-8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力均减弱(P均<0.05),过表达RAC3后HTR-8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强(P均<0.01)。结论 RAC3对早期滋养层细胞的增殖、迁移和侵袭能力具有重要调控作用。

Ras相关的C3肉毒素底物1在草酸所致的肾小管上皮细胞氧化损伤中的作用

目的 观察Ras相关的C3肉毒素底物1（Rac1）在草酸所致的肾小管上皮细胞氧化损伤中的作用.方法 体外培养犬肾小管上皮细胞（MDCK细胞）制成爬片后,随机分为空白对照组（A组）、Rac1抑制组（B组）、草酸组（C组）、Rac1抑制＋草酸组（D组）.B组和D组分别暴露在含Rac1抑制剂NSC23766（100 μmol/L）培养液中,30 min后C组及D组分别更换为含草酸（5 mmol/L）的培养液,余对照更换为磷酸盐缓冲液（PBS）.4h后分别测定各组培养液中过氧化氢（H2 O2）浓度、乳酸脱氢酶（LDH）活性和细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADPH）氧化酶活性,免疫细胞化学染色观察细胞Rac1表达,向培养液中加入草酸钙（0.75 mmol/L）15 min后在倒置显微镜下观察细胞对草酸钙结晶的黏附.结果 A组H2O2浓度、LDH活性及细胞NADPH氧化酶活性分别为（24.23±2.44） mmol/L、（0.62 ±0.06） U/ml、（1 042.83±61.00） RLU/（min＆#183; mg）;B组分别为（24.46±3.39） mmol/L、（0.56±0.06） U/ml、（1 096.67±66.12） RLU/（min＆#183; mg）;C组分别为（67.84±4.25） mmol/L、（1.71 ±0.08） U/ml、（2 852.50±105.71） RLU/（min＆#183; mg）;D组分别为（34.79±3.07） mmol/L、（0.96±0.07） U/ml、（1 118.83±57.56） RLU/（min＆#183; mg）.与A组比较,C组细胞Rac1表达增强（P＜0.05）,NADPH氧化酶活性、H2O2浓度、LDH活性明显增强（P＜0.05）,细胞对草酸钙结晶的黏附数量增多;而与C组比较,D组细胞Rac1表达降低（P＜0.05）,NADPH氧化酶活性、H2O2浓度、LDH活性均显著降低（P＜0.05）,黏附在细胞表面的草酸钙结晶数量减少.结论 草酸通过Rac1调节的NADPH氧化酶致肾小管上皮细胞氧化损伤,抑制Rac1可显著减少活性氧物质的产生及细胞损伤.

Ras相关的C3肉毒素底物1蛋白在胃癌组织中的表达和分布以及与胃癌进展的关系

目的观察胃癌组织中Ras相关的c3肉毒素底物1（Racl）蛋白的表达和分布，探讨Racl蛋白的定位与胃癌进展之间的关系。方法采用免疫组化染色法检测48例胃癌患者肿瘤组织和癌旁组织中Racl蛋白的表达和分布，采用实时荧光PCR法检测48例胃癌组织中T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiaral）和RaclmRNA的表达水平。结果48例胃癌组织中，Racl蛋白阳性表达38例（79．2％），其中31例（64．6％）定位于细胞核。48例癌旁组织中，Racl蛋白阳性表达9例（18．8％），全部定位于细胞质。Racl蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率差异有统计学意义（u=6．43，P〈0．01），Racl蛋白在胃癌和癌旁组织中的核定位率差异亦有统计学意义（χ2=45．795，P〈0．001）。实时荧光PCR检测结果显示，Racl蛋白核定位胃癌组织中Racl和Tiaml mRNA的阳性表达率和中位数均明显高于Racl蛋白非核定位组（均P〈0．05）。Racl蛋白的细胞核定位与胃癌的分化程度、T分期以及局部淋巴结转移相关。结论在多数胃癌组织中，Racl蛋白定位于细胞核，Racl蛋白的核定位可能是Tiaml／Racl信号通路异常活化的表现，也可能预示着胃癌侵袭能力的增强。

PI3K/Akt信号通路参与LPS诱导大鼠肺微血管内皮细胞表达RACK1及rac1

目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)表达活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)和ras相关C3肉毒菌毒物底物1(rac1)的影响。方法体外培养大鼠PMVEC:①LPS量效组:0、1、5、10 mg/L LPS与大鼠PMVEC孵育12 h;②LPS时效组:10 mg/L LPS与PMVEC孵育0、3、6、8、12、24 h;③IGF-1时效组:100 ng/ml IGF-1与PMVEC孵育0、3、6、8、12、24 h;④LPS+LY294002组:100 ng/ml LY294002预孵育PMVEC 1 h后加入10 mg/L LPS继续孵育12 h,设空白组、LPS组和LY294002组为对照。所有干预结束后Western blot法检测RACK1、rac1及p-Akt蛋白表达。结果①LPS量效组:RACK1、rac1及p-Akt蛋白表达量均呈浓度依赖性增加,各蛋白组组内比较差异均有统计学意义:(F=120.455,P<0.001)、(F=165.813,P<0.001)及(F=309.346,P<0.001)。②LPS时效组:RACK1和rac1蛋白表达呈时间依赖性增加,LPS刺激24 h后达最高,各蛋白组组内比较差异均有统计学意义:(F=454.034,P<0.001)和(F=423.630,P<0.001);p-Akt表达自3 h(0.460±0.089)上调,12 h达最高(2.022±0.244),24 h(1.264±0.074)仍高于0 h(0.237±0.063),组间比较差异有统计学意义(F=137.726,P<0.001)。③IGF-1时效组:IGF-1诱导PMVEC表达RACK1、rac1及p-Akt呈时间依赖性增加,各组组间比较差异有统计学意义(F=188.293,P<0.001)、(F=115.071,P<0.001)及(F=60.175,P<0.001)。④LY294002干预组:LPS+LY294002作用PMVEC后:RACK1蛋白表达量较LPS组下调[(0.732±0.137)vs(1.498±0.167),P<0.001];rac1蛋白表达量较LPS组下调[(0.758±0.084)vs(1.384±0.170),P<0.001];p-Akt蛋白表达量较LPS组下调[(0.492±0.148)vs(1.106±0.219),P<0.001]。结论 PI3K/Akt信号通路通过干预RACK1和rac1表达,参与LPS致PMVEC损伤。

Ras相关的C3肉毒素底物1在神经嵴细胞中的作用研究进展

Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)是Rho三磷酸鸟苷(GTP)酶家族的成员,具有GTP酶活性,是多种细胞信号转导过程中的"分子开关",可参与细胞迁移、黏附、增殖及凋亡等过程。Rac1可通过调控神经嵴细胞的肌动蛋白的聚合、膜突起的形成等过程影响神经嵴细胞的迁移,进而可能与先天性巨结肠、心脏流出道缺陷等神经嵴迁移异常的疾病有关。现就Rac1的主要生物学功能及其在肠神经嵴细胞发育机制中的研究进行综述。

溃疡性结肠炎患者血清Rac1、ACE2水平与肠道功能损害的相关性

目的探讨溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者血清Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)、血管紧张素转化酶2(ACE2)水平与肠道功能损害的相关性。方法选取2020年3月至2022年3月驻马店中心医院就诊的UC患者60例为病例组,依据Mayo评分将病例组分为活动期组(36例)、缓解期组(24例),同时以同期健康体检者40例为对照组。分别静脉抽取所有研究对象空腹血液,ELISA法检测血清ACE2水平;q RT-PCR检测血清中Rac1 m RNA水平;同时检测肠道屏障指标(血清二胺氧化酶、细菌内毒素、D-乳酸)水平;采用Pearson法分析UC患者血清中ACE2、Rac1 m RNA水平的相关性以及两者分别与血清二胺氧化酶、细菌内毒素、D-乳酸的相关性。结果与对照组相比,病例组血清中ACE2、Rac1 m RNA水平显著下降,二胺氧化酶、细菌内毒素、D-乳酸水平显著增加(P<0.05);与缓解期组相比,活动期组ACE2、Rac1 m RNA水平显著下降(P<0.05);Pearson法结果显示,UC患者血清中ACE2与Rac1水平呈明显正相关(r=0.390,P<0.05),且分别与二胺氧化酶、细菌内毒素、D-乳酸呈负相关(P<0.05)。结论UC患者血清中ACE2与Rac1水平呈正相关,且分别与肠道屏障指标呈负相关,检测两者水平对于评定肠道功能损害可能具有一定临床价值。

T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1和Ras相关的C3肉毒素底物1蛋白在骨肉瘤和良性骨肿瘤中的表达及意义

目的探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiaml）和Ras相关的C3肉毒素底物1（Racl）蛋白在骨肉瘤和良性骨肿瘤组织中的表达。方法采用免疫组化卵法检测53例骨肉瘤和20例良性骨肿瘤Tiaml和Rac、I蛋白表达。结果53例骨肉瘤Tiaml和Racl蛋白阳性表达率分别为60．7％和52．8％；20例良性骨肿瘤中Tiaml和Racl蛋白阳性表达率分别为10．0％和15．0％，骨肉瘤组织和良性骨肿瘤组织Tiaml和Racl蛋白表达比较差异有统计学意义（x^2=15．203及8．505，P均〈0．05），二者在骨肉瘤组织中的蛋白表达呈正相关（γp=0．476，P〈0．05）。结论在骨肉瘤中Tiaml和Rael蛋白的过表达可能共同参与骨肉瘤的发生。

Ras相关的C3肉毒菌毒素底物1在孕期脂多糖暴露诱导子代大鼠血压升高中的作用

目的探讨Ras相关的C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)在孕期脂多糖暴露诱导子代大鼠血压升高中的作用及机制。方法 12只SD孕鼠随机均分为2组,于孕第8天、第10天、第12天接受等体积生理盐水或脂多糖(0.79mg/kg)腹腔注射,对应子代雄鼠编为对照组(n=18)和脂多糖组(n=18)。4周龄时断奶,5周龄起以袖尾法连续监测血压。16周龄每组随机选取6只进行Rac1特异性抑制剂NSC23766[4mg/(kg·d)]连续皮下注射,每周记录血压、尿钠代谢变化。20周龄时,2组各随机选取6只未接受抑制剂注射的大鼠用于连续监测血压至48周,其余处死、取材,并测定随机血糖、肌酐、尿素氮;HE及Masson染色观察肾脏病理改变;Western blot检测肾脏Rac1表达、胞浆盐皮质激素受体(c-MR)含量和核转位盐皮质激素受体(n-MR)等。结果与对照组比较,脂多糖组出生体质量较低,而20周龄体质量较高(均P<0.01)。20周龄时,与对照组比较,脂多糖组收缩压水平、肾脏Rac1表达和n-MR含量较高;而24h尿量、24h尿钠排泄量和c-MR含量较低(均P<0.01)。20周龄时,与脂多糖组比较,脂多糖+NSC23766组收缩压[(116.6±2.2)比(133.6±3.2)mm Hg]和n-MR含量(1.11±0.10比1.93±0.21)明显下降(均P<0.01);而24h尿量[(32.21±3.65)比(14.12±3.23)mL/(kg·d)]、24h尿钠排泄量[(1.44±0.22)比(0.50±0.18)mmol/(kg·d)]和c-MR含量(0.96±0.05比0.52±0.05)明显升高(均P<0.01)。结论孕期脂多糖暴露可致子代大鼠血压增高,尿钠排泄障碍,Rac1表达增高,Rac1-MR信号过度活化参与孕期脂多糖刺激诱导子代血压增高的过程。

乳腺癌组织中Ras相关C3肉毒菌毒物底物1和缺氧诱导因子1α蛋白的表达及其临床意义

目的探讨Ras相关c3肉毒菌毒物底物1（Rac-1）与缺氧诱导因子1d（HIF-1α）在乳腺癌中的表达及其与临床分期、组织学分级及激素受体状态的关系。方法乳腺癌标本共139例，应用免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中Rac-1和HIF-1α蛋白的表达，并结合临床病理因素及激素受体状态进行统计学分析。结果Rac-1、HIF-1α在乳腺癌组织中的阳性率分别为64．75％（90／139）和65．47％（91／139），二者均与TNM分期及组织学分级有关（均P〈0．05），与年龄、性别、组织类型、月经状态无关（均P〉0．05）。Rac-1、HIF-1α在三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌组织中表达差异无统计学意义（X2=1．1229，x2=0．1786，均P〉0．05）。在乳腺癌组织中，Rac-1与HIF-1α的表达呈正相关（L=0．414，P〈0．01）。结论Rac-1和HIF-1α在乳腺癌组织中的表达具有相关性，可能成为反映乳腺癌生物学行为的新型分子标志物，阻断二者之间的联系在乳腺癌的治疗中可能具有较高的临床意义。

前列腺癌组织TGF-β1/Rac1通路蛋白表达与根治术后生化复发的相关性

目的:探讨前列腺癌组织转化生长因子-β1(TGF-β1)/Ras相关C3肉毒素底物1(Rac1)通路蛋白表达与根治术后生化复发的关系。方法:回顾性分析2015年02月至2018年02月在本院行前列腺癌根治性切除术的200例患者的临床资料,均于手术时留存前列腺癌组织与癌旁组织标本。采用免疫组织化学法检测前列腺癌组织与癌旁组织中TGF-β1、Rac1、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达情况并比较阳性表达率。另统计根治术后随访3年期间患者生化复发情况并据此将其归为生化复发组与未生化复发组,对比生化复发组与未生化复发组前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin、E-cadherin蛋白阳性表达率,采用Cox回归模型分析前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin、E-cadherin蛋白表达情况与患者根治术后生化复发的关系。结果:前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织,E-cadherin蛋白阳性表达率明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05);根治术后随访3年,生化复发率为14.50%(29/200),生化复发组前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin蛋白阳性表达率高于未生化复发组(P<0.05),E-cadherin蛋白阳性表达率低于未生化复发组(P<0.05);经Cox回归模型分析显示,术前PSA水平、标本Gleason评分、包膜侵犯、精囊侵犯、神经周围侵犯、血管侵犯、手术切缘阳性、TGF-β1蛋白阳性、Rac1蛋白阳性、Vimentin蛋白阳性均是前列腺癌患者根治术后生化复发的危险因素(HR=3.350、3.117、4.702、5.618、6.328、5.114、6.007、3.019、3.077、2.740,P<0.05),E-cadherin蛋白阳性是其保护因素(HR=0.471,P<0.05)。结论:前列腺癌组织中TGF-β1、Rac1、Vimentin蛋白均高表达,而E-cadherin蛋白低表达,其表达情况均与患者根治术后生化复发存在一定的关系,TGF-β1、Rac1、Vimentin蛋白阳性表达可增加术后生化复发的概率,而E-cadherin蛋白阳性表达可降低术后生化复发的风险,此对临床具有一定的指导作用。

miR-223-3p通过靶向RAC1调控肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖和凋亡

目的:探讨miR-223-3p通过调控Ras相关C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,RAC1)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:选用2016年8月至2018年8月吉林市中心医院手术切除的30例HCC组织及其癌旁组织标本和人HCC细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2及人正常肝细胞QSG-7701,用qPCR检测HCC组织和细胞系中miR-223-3p的表达水平。分别将miR-223-3p mimics、miR-223-3p inhibitor和siRAC1转染至SMMC-7721细胞,通过CCK-8、克隆形成实验和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测SMMC-7721细胞的增殖、克隆形成和凋亡水平。用双荧光素酶报告基因实验检测miR-223-3p与RAC1的靶向关系,Western blotting检测细胞中RAC1蛋白的表达水平。结果:miR-223-3p在HCC组织的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01),其表达水平与肿瘤大小、TNM分期及肿瘤分化病理特征相关(P<0.05或P<0.01);miR-223-3p在HCC细胞系表达水平显著低于QSG-7701细胞(均P<0.01),以在SMMC-7721细胞中表达水平最低。双荧光素酶报告基因实验证实RAC1是miR-223-3p靶基因,miR-223-3p靶向负调控RAC1的表达。转染miR-223-3p mimics显著抑制SMMC-7721细胞的增殖和克隆形成能力(P<0.05或P<0.01),并促进细胞凋亡(P<0.01);转染miR-223-3p inhibtor则逆转miR-223-3p mimics对细胞的抑制作用。结论:过表达miR-223-3p抑制HCC细胞增殖和克隆形成能力并促进细胞凋亡,其机制可能与靶向下调RAC1表达有关。

胃癌切除术后T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1及Ras相关C3肉毒毒素底物1表达变化分析及临床意义

目的探讨胃癌切除术后T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)与Ras相关C3肉毒毒素底物1(Rac1)表达变化情况及其临床意义。方法选取自2016年1月至2017年5月宜昌市第一人民医院收治的胃癌患者120例,分析患者胃癌组织中Tiam1和Rac1表达与病理特征间的关系,以及切除术治疗前后患者胃癌组织Tiam1和Rac1表达变化情况。结果 Tiam1表达及Racl表达均与胃癌患者的浸润深度、分化程度、淋巴结转移及TNM分期等因素存在显著相关性(P<0.05)。Tiam1表达阳性组织的Rac1阳性率显著高于Tiam1表达阴性的组织(P<0.05)。同时,Tiam1及Rac1阳性表达呈显著正相关(P<0.05)。胃癌切除术后患者Tiam1阳性率及Rac1阳性率显著低于治疗前(P<0.05)。结论胃癌转移发生受各种因素的影响,阻断Tiam1及Racl信号转导通路有利于抑制肿瘤转移,改善胃癌切除术的治疗效果。

1,25二羟维生素D3对哮喘小鼠的Rac1-IL33-ILC2通路的作用

目的观察1,25二羟维生素D31,25-(OH)2-D3对哮喘小鼠Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)、白细胞介素-33(IL-33)和2型固有淋巴细胞(type 2 innate lymphocytes,ILC2)的影响。方法将30只7周龄BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、哮喘组、干预组,每组各10只小鼠,卵清蛋白混合液致敏并雾化吸入建立哮喘小鼠模型,干预组每次激发前腹腔注射1,25(OH)2-D3混合液0.08 ml,对照组和哮喘组以生理盐水代替。末次激发24 h后对小鼠肺组织中IL-33、Rac1、ILC2进行检测并比较。结果与对照组比较,哮喘组Rac1下降,IL-33水平增高,ILC2数目升高。且Rac1与IL-33、ILC2呈明显的负相关性(r=-0.954、r=-0.957,P<0.05)。干预组IL-33及ILC2数目较哮喘组显著下降,Rac1较哮喘组显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘小鼠存在Rac1下降,IL-33水平增高,ILC2数目升高的免疫变化;1,25-(OH)2-D3可能通过上调哮喘小鼠Rac1的表达,导致IL-33等细胞因子水平产生减少,进而抑制ILC2的活化、减轻哮喘的免疫炎症。

胰腺癌患者血清中RAC3基因启动子区甲基化的检测及临床意义

目的:探讨Ras相关的C3肉毒素底物3(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 3,RAC3)基因启动子区甲基化修饰与胰腺癌发生发展的相关性。方法:选择胰腺癌患者35例为观察组,健康体检者35例为对照组,采用甲基化特异性PCR法(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)分别检测两组研究对象血清中RAC3基因启动子区甲基化的状态,分析RAC3基因启动子区甲基化与胰腺癌患者临床病理特征之间的关系。结果:观察组血清中RAC3基因启动子区甲基化的检出率为77.14%(27/35),而对照组血清中未检出,观察组RAC3基因启动子区甲基化明显高于对照组(P<0.01)。进一步统计分析显示,RAC3基因启动子区甲基化与胰腺癌的大小、肿瘤病理分期、远处转移相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、临床分级无明显相关性。结论 :RAC3基因启动子区高甲基化修饰与胰腺癌的发生及恶性进展密切相关。

NSC23766改善大鼠脑缺血后认知功能缺陷

目的：探讨Rac1在大鼠海马CA1区缺血性神经元损伤中的作用.方法：健康成年雄性SD大鼠制作四动脉闭塞全脑缺血模型,实验动物随机分为Sham、缺血再灌组（ischemia/reperfusion,I/R）、溶剂对照（Vehicle）组（I/R＋生理盐水）、NSC23766组（I/R＋NSC23766）.采用激光共聚焦显微镜技术观察海马CA1区生存神经元.利用Morris水迷宫观察脑缺血再灌注后大鼠的空间学习记忆功能的变化情况.结果：与缺血再灌注组相比,Rac1抑制剂NSC23766组海马CA1区神经元生存数量增加;大鼠缺血后的空间学习记忆缺陷明显得到改善.结论：Rac1的激活可能是导致大鼠缺血再灌注后神经元损伤的重要因素,其抑制剂NSC23766可有效减轻这种损伤,为临床治疗缺血性脑中风提供理论依据.