舒肌汤对L-DOPA诱发的帕金森病肌僵直大鼠的作用及其脑组织TH、DA含量和FosB、p-ERK蛋白的影响

目的:观察舒肌汤对左旋多巴(Levodopa,L-DOPA)诱发的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)肌僵直模型大鼠的影响,并探讨其作用机制。方法:L-DOPA诱导建立PD肌僵直大鼠模型,随机分为模型组(等体积生理盐水),舒肌汤低、中、高剂量组(10、20、40 g/kg),同时设假手术组(等体积生理盐水)作为对照,每组6只大鼠,每天灌胃给药1次,连续给药28 d。给药完成后通过旋转次数实验、翻正反射实验、肌电图检测行为学表现。免疫组化检测脑组织酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达水平。ELISA检测脑纹状体组织多巴胺(dopamine,DA)和TH的含量。Western blot检测脑纹状体组织FBJ鼠科骨肉瘤病毒癌基因同源物B(FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog B,FosB)、磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylation-extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠旋转次数、翻正反射时间与评分、肌肉动作电位波幅和潜伏期显著升高或延长(P<0.01),MCV显著降低(P<0.01);与模型组相比,舒肌汤组大鼠旋转次数、翻正反射时间与评分、肌肉动作电位波幅和潜伏期显著降低或缩短(P<0.05),MCV显著升高(P<0.01)。免疫组化结果显示舒肌汤可上调脑组织TH表达水平;ELISA结果显示舒肌汤可上调DA和TH含量。Western blot结果显示舒肌汤可下调FosB、p-ERK蛋白表达水平。结论:舒肌汤对帕金森病模型大鼠肌僵直有显著疗效,其作用机制可能与上调DA和TH含量、下调FosB、p-ERK蛋白表达有关。

力竭运动及恢复期大鼠纹状体5-HT、DA及其代谢物浓度的动态变化研究

目的:观察一次性力竭运动过程及恢复期大鼠纹状体细胞外液中多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)及其代谢物浓度的动态变化规律。方法:采用活体微透析结合毛细管电泳-激光诱导技术,连续观察清醒大鼠在一次性力竭运动过程及恢复期纹状体细胞外液中酪氨酸(Tyr)、5-HT、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、色氨酸(Trp)和DA浓度的动态变化。结果:大鼠纹状体细胞外液中Trp、5-HT、5-HIAA水平运动初期均未见显著变化(P>0.05),运动后期、力竭及恢复期均显著高于安静水平(P<0.05,P<0.01);DA、Tyr水平在运动后期、力竭及恢复期显著高于安静水平(P<0.05,P<0.01);DA/5-HT运动初期显著升高(P<0.05,P<0.01),运动后期出现下降趋势,力竭前15 min降至最低点,而恢复期略有回升,但运动后期、力竭及恢复期与安静状态相比均无显著差异。结论:力竭运动过程中大鼠纹状体细胞外液中DA和5-HT的动态变化具有阶段性特征,运动疲劳过程中状体内DA和5-HT两种神经递质的代谢水平均显著增强,而其中以5-HT的作用占优。

瓜蒌薤白汤对大鼠肺纤维化形成阶段造模后(14d～28d)下丘脑、海马DA、NE、5-HT的干预作用

目的:了解瓜蒌薤白汤对肺纤维化形成阶段干预作用。方法:普通级大鼠分为正常组、模型组、泼尼松组、瓜蒌薤白汤组。除正常组外均用气管内注入平阳霉素复制肺纤维化模型,造模后14d用药,28d处死后测下丘脑及海马DA、NE、5-HT。结果:模型组下丘脑NE、DA、5-HT与海马5-HT高于正常组(P<0.05);瓜蒌薤白汤组下丘脑与海马NE、DA低于模型组与泼尼松组,5-HT低于模型组而高于泼尼松组(P<0.05)。结论:瓜蒌薤白汤能抑制模型下丘脑NE、DA、5-HT及海马5-HT的升高,并能降低海马NE、DA含量。

6-OHDA诱导帕金森病大鼠模型行为学及脑内神经递质的动态变化

目的:观察6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导帕金森病大鼠模型(PD)不同时间点行为学及左侧纹状体内多巴胺(DA)和乙酰胆碱(Ach)含量的变化。方法:采用6-OHDA左侧纹状体两点注射法建立PD大鼠模型,观察术后不同时间点大鼠经阿扑吗啡(APO)诱导出现旋转行为改变,ELISA法测定各时间点大鼠左侧纹状体区DA和Ach含量,HE染色观察左侧中脑黑质区多巴胺能神经细胞的病理形态学改变。结果:行为学方面:假手术组各时间点大鼠经APO诱导无旋转行为;6-OHDA组大鼠经APO诱导出现异常旋转行为,48 h后右侧旋转速度逐渐增快,4周右侧旋转速度达到高峰,4周到8周恒定右侧旋转速度稳定。DA和Ach含量变化:假手术组各时间点DA和Ach无明显变化。6-OHDA组造模术后6h,DA含量降低,术后1周、2周、4周DA含量明显减少,术后4周与8周DA含量比较无明显差异。HE染色:假手术组各时间点左侧黑质区神经元细胞形态正常。6-OHDA组6 h少量神经细胞肿胀,24 h、48 h、1周可见大量神经细胞肿胀,部分核裂变,胶质细胞增多,2 w时神经细胞肿胀减轻,核仁明显偏移或破裂,神经元数量减少,4周、8周神经细胞凝固性坏死,伴有大量胶质细胞弥漫性或局限性增生。结论:6-OHDA组造模后,随着造模时间延长,大鼠左侧纹状体内DA含量逐渐下降,Ach含量逐渐上升,于术后4周达到稳定状态,与大鼠右侧旋转行为表现一致;HE染色见左侧纹状体神经元随时间延长表现为变性、坏死,胶质细胞增生。

DA大鼠的繁殖性能及部分生物学特性参数的测定

目的建立我国新的近交系品系DA种群,观察其生长繁殖性能及部分生物学特性。方法从丹麦M&B公司引进近交系大鼠DA,建立种群,从其扩大群中随机抽取15对鼠,统计其繁殖率;抽取50只DA鼠(雌雄各半)测其部分血液生化。结果近交系种群扩大成功,DA大鼠平均产仔数为5.5,成活率为90.8%,所测生理生化值接近Wistar大鼠。结论DA大鼠已适应我国环境,种群引进成功;性别对脏器重量、系数和血生化影响显著。

有氧运动对焦虑大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的水平影响研究

目的 :观察焦虑大鼠和有氧运动焦虑大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的含量的变化。方法 :清洁级SD雄性大鼠60只随机分成3组,即:A组自然对照组(national control group)(n=20),B组基础对照组(Foundation control group)(n=20),C组有氧运动组(aerobic exercise group)(n=20)。用昼夜颠倒的方法制焦虑大鼠模型。将B组、C组40只大鼠白天置于黑暗密闭空间,晚上用灯管照明,共持续14 d。自然对照组和基础对照组:40只大鼠每天自由饮食。有氧运动组:让焦虑模型大鼠20只每周1、3、5进行持续1 h的动物跑台跑步训练,共持续6周。结果 :有氧运动组大鼠与基础对照组相比,大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的含量明显低于基础对照组(P<0.01);有氧运动组大鼠与自然对照组相比,大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的含量低于自然对照组(P<0.05);自然对照组与基础对照组比较:大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的含量明显低于基础对照组(P<0.01)。结论 :适宜的有氧运动可以缓解大鼠的焦虑程度,降低焦虑大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的水平,是一种有效地缓解焦虑的方法,值得广泛推广。

DA大鼠骨髓来源的树突状细胞的培养和鉴定

目的分离DA大鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC),并进行体外培养及鉴定。方法取出DA大鼠的股骨、胫骨之间骨髓腔的骨髓细胞,并联合应用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)20 ng/mL和10 ng/mL重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4),体外培养7 d,诱导DA大鼠骨髓细胞分化为树突状细胞(DC);ELISA检测未成熟树突状细胞(imDC)培养上清液IL-12水平,倒置显微镜观察BMDC增殖情况以及形态变化,扫描电子显微镜观察DC的形态,流式细胞术分析imDC表面特异性标志物OX62/CD103、CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的表达;混合淋巴细胞反应检测imDC诱导T淋巴细胞的增殖能力。结果DA大鼠骨髓细胞经体外培养可获得大量imDC;imDC高表达OX62,低表达CD40、CD80、CD86、MHC-Ⅱ;rmIL-10处理的imDC上清液IL-12含量随着培养时间的延长不断降低,rmIL-4处理组则相反;imDC诱导T淋巴细胞增殖的能力较弱。结论成功建立简易分离培养高纯度的DA大鼠imDC的方法。

快速眼动睡眠剥夺对抑郁模型大鼠纹状体5-HTDA及腺苷的影响

目的：通过对抑郁模型大鼠的快速眼动睡眠剥夺，观察大鼠强迫游泳不动时间及大鼠纹状体5-羟色胺、多巴胺和腺苷水平的变化，了解睡眠剥夺快速改善抑郁情绪的可能机制。方法将30只成年健康雄性大鼠分为正常对照组（A组）、抑郁模型组（B组）、抑郁模型＋睡眠剥夺组（C组），在建立慢性轻度不可预见性应激的抑郁模型后，采用小平台水环境法对大鼠进行72 h快速眼动睡眠剥夺，以强迫游泳实验检测大鼠的不动时间，采用高效液相色谱-荧光检测法测定3组大鼠纹状体5-羟色胺、多巴胺水平，采用高效液相色谱-紫外检测法测定3组大鼠纹状体腺苷水平。结果21 d慢性轻度不可预见性应激后，大鼠的强迫游泳不动时间显著延长（ P＜0．05），快眼动睡眠剥夺后大鼠强迫游泳不动时间显著缩短（P＜0．01）。A组、C组大鼠纹状体5-羟色胺及腺苷水平均显著高于B组（ P＜0．05或0．01），C组大鼠纹状体多巴胺水平显著高于A组、B组（P＜0．01）。结论快速眼动睡眠剥夺可以逆转大鼠的抑郁样行为，并提高大鼠纹状体5-羟色胺、多巴胺水平，腺苷可能参与了睡眠剥夺的抗抑郁过程。

卞丝肼对6-OHDA损毁大鼠纹状体AADC活性的影响

目的观察卞丝肼对6-羟多巴胺(6-OHDA)所致帕金森病模型大鼠纹状体芳香L-氨基酸脱羧酶(AADC)活性的影响。方法采用6-OHDA建立帕金森病大鼠模型(黑质纹状体去神经支配),用生理盐水制作假损毁大鼠作为对照;注射卞丝肼60分钟后,处死大鼠,迅速摘除大脑,并取出纹状体,进行匀浆处理。取匀浆上清液加入到培养基中培养后用高效液相色谱柱(HPLC)进行DA含量测试。结果在假损毁大鼠中,10 mg/kg卞丝肼和50 mg/kg卞丝肼可以使纹状体AADC活性明显降低(P<0.01)。在6-OHDA损毁大鼠纹状体中,10 mg/kg卞丝肼和50 mg/kg卞丝肼明显降低AADC活性,分别为对照物组的25%和12%(P<0.01)。然而,10 mg/kg卞丝肼和50 mg/kg卞丝肼组之间无统计学差异。结论卞丝肼降低6-OHDA损毁大鼠黑质纹状体AADC活性,影响L-DOPA代谢。

大鼠尾壳核衰老变化定量分析:Ⅱ.多巴胺(DA)系统

本实验结果表明:衰老大鼠(26—27月龄)尾壳核多巴胺(DA)神经末梢膨体较成年组(3—4月龄)明显减少,而单个膨体内DA含量较成年组显著增多,提示纹状体DA系统在衰老过程中可能具有一定的代偿机制。本文对其意义进行了讨论。

局部注射奥曲肽对DA大鼠类风湿性关节炎的疗效评估

目的:探讨奥曲肽局部注射对DA大鼠类风湿性关节炎(RA)的疗效。方法:DA大鼠尾根部皮内一次性注射降植烷300μl建立RA模型,成模后连续4周每周1次足底注射奥曲肽0.005 mol.L-1,观察其对DA大鼠RA的疗效。结果:使用奥曲肽后,DA大鼠四肢掌指关节、指间关节以及踝关节红肿减轻,爪容积减小,关节活动度提高,机械缩爪阈值提高。结论:局部注射奥曲肽对DA大鼠RA具有较好的治疗作用,能够不同程度地缓解关节疼痛,改善关节功能。

大鼠在体心肌短暂缺血不同时间对再灌注心律失常的影响

[目的]探讨大鼠在体心肌短暂缺血不同时间后出现再灌注心律失常的变化。[方法]Wistar大鼠60只，随机分为6组。分别结扎冠状动脉左前降支0、5、10、15、30、60min后，再灌注45min，连续监测从缺血前至再灌注后45min的心电图变化。取心肌组织测丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）含量的变化。[结果]冠状动脉缺血7～10min有心律失常的发生，为室早、室速、室颤。可自愈。再灌注期：缺血5min组，再灌注后室早发生率20％；缺血10min组，再灌注后室速发生率为100％，室颤发生率100％；缺血15min组，再灌注后室早发生率80％，室速发生率40％，无室颤；缺血30min组，再灌注后室旱发生率40％；缺血60min组，无再灌注心律失常。随缺血时间的延长，MDA逐渐增高，SOD逐渐下降（P〈0．05）。[结论]再灌注心律失常与缺血持续时间呈“钟”型分布，氧自由基在再灌注心律失常中不起重要作用。

老年与成年大鼠纹状体多巴胺含量及黑质部凋亡相关蛋白表达的研究

目的研究老年与成年SD大鼠纹状体多巴胺含量及黑质部凋亡相关蛋白Bad、Bcl-2的表达情况,并探讨两者之间的关系。方法取老年SD大鼠6只作为老年组,成年SD大鼠6只作为成年组;采用高效液相色谱-质谱联用法测定纹状体内多巴胺含量;免疫印迹法检测黑质Bad、Bcl-2的表达。结果老年组纹状体DA含量(4.13±0.209 ng/mg)低于成年组(5.65±0.188ng/mg)(P<0.05);老年组黑质部抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(1.08±0.047)低于成年组(1.36±0.085)(P<0.05);促凋亡蛋白Bad的表达(0.79±0.051)高于成年组(0.57±0.071)(P<0.05)。结论老年SD大鼠纹状体DA含量降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡Bad表达增高。

原发性脑干损伤致死大鼠的脑干组织代谢组学分析

目的应用代谢组学方法观察原发性脑干损伤(primary brain stem injury,PBSI)致死大鼠脑干组织代谢产物的变化规律,探索诊断PBSI的潜在生物标志物。方法建立PBSI、非脑干脑损伤和剪头处死大鼠模型,采用基于LC-MS技术的代谢组学方法,获得脑干代谢图谱并将其注释到HMDB数据库,应用偏最小二乘-判别分析法(partial least square-discriminant analysis,PLS-DA)、随机森林算法筛选出与PBSI诊断相关的潜在代谢标志物。结果通过PLS-DA筛选出86种与PBSI相关的潜在代谢标志物,并通过随机森林算法建模和预测,准确率为83.3%。对注释到HMDB数据库的818种代谢标志物进行随机森林建模和预测,准确率高达88.9%。根据在死因鉴定中重要程度的排序,最终筛选出最为重要且在PBSI大鼠模型中显著上调的代谢标志物为HMDB0038126(京尼平苷酸)、HMDB0013272(N-月桂酰甘氨酸)、HMDB0005199[(R)-去甲猪毛菜碱]和HMDB0013645(N,N-二甲基鞘氨醇)。结论京尼平苷酸、N-月桂酰甘氨酸、(R)-去甲猪毛菜碱和N,N-二甲基鞘氨醇有望成为PBSI诊断的重要代谢物指标,进而为法医学实践提供线索。

加味丹栀逍遥散对抑郁模型大鼠行为学及中枢单胺类神经递质的影响

目的探讨加味丹栀逍遥散对应激所致大鼠抑郁模型的干预作用。方法将实验动物随机分为空白组、模型组、加味丹栀逍遥散组、氟西汀组每组各10只。除空白组外,其他各组大鼠每天给予一种应激因子刺激,以复制抑郁模型。模型组:每天随机给予一种应激因子刺激。加味丹栀逍遥散组:每天灌服加味丹栀逍遥散水煎液(1.2 mL/100 g),每日1次,并随机给予1种应激因子刺激。氟西汀组:每天灌服氟西汀悬浮液(0.154 mg/mL)30分钟后随机给予1种应激因子刺激,每日1次。通过监测实验动物的体重增长变化、糖水消耗量以及旷场实验,观察加味丹栀逍遥散对抑郁模型大鼠的行为学影响,检测实验动物下丘脑、垂体中单胺类神经递质的含量。结果糖水消耗试验:与模型组相比,加味丹栀逍遥散组能显著提高应激所致的糖水偏好比(P<0.01);旷场实验加味丹栀逍遥散组与模型组大鼠相比,可增加大鼠水平运动得分(P<0.05)。与模型组相比,氟西汀组、加味丹栀逍遥散组下丘脑多巴胺(DA)、五羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)含量均有一定程度增加,具有显著差异(P<0.01或<0.05)。氟西汀组、加味丹栀逍遥散组实验动物与模型组比较,其垂体中DA、5-HT、NE含量均有一定程度增加,具有显著差异(P<0.01或<0.05)。结论加味丹栀逍遥散对抑郁模型大鼠具有抗抑郁作用,推测其机制可能与影响中枢5-HT、DA含量有关。

不同电针百会、太阳穴对帕金森模型大鼠多巴胺能神经元保护作用的研究

目的:探讨不同电针(音乐电针、脉冲电针)百会、太阳穴对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法:采用单侧纹状体双靶点注射6-OHDA建立大鼠帕金森病模型。实验分为空白组、假手术组、模型组、阳性组、脉冲电针组和音乐电针组,分别给予相应处理4周。应用高效液相色谱测定纹状体多巴胺(DA)含量和原位末端标记法(TUNEL)检测黑质细胞凋亡水平。结果:模型组大鼠纹状体DA含量下降,黑质神经元细胞凋亡显著,不同电针百会、太阳穴可使DA含量升高,使神经元细胞凋亡程度减轻,且音乐电针组作用优于脉冲电针组。结论:不同电针百会、太阳穴治疗帕金森病的作用机制可能是通过增加DA的含量,抑制细胞凋亡从而减少多巴胺神经元的丢失来实现的;同时音乐电针治疗可以提高临床疗效。

HSD与多巴胺伍用对初进高原大鼠失血性休克合并肺水肿的治疗作用

目的 探讨高渗氯化钠右旋醣酐 (7.5 %NaCl 6 %Dextran4 0 ,HSD)与多巴胺 (DA)合用对初进高原大鼠失血性休克合并肺水肿的的治疗效果。方法 初进高原SD大鼠 4 2只 ,复制失血性休克合并肺水肿模型。实验分为非处理组、失血性休克合并肺水肿对照组、乳酸林格氏液对照组 (4ml kg ,LR)、HSD单用组(4ml kg)、多巴胺单用组 (2mg kg ,DA)和HSD与DA合用组 ,每组 7只动物。观察给药后 15、30、6 0和 12 0分钟时相点大鼠血流动力学指标变化、30分钟和 12 0分钟大鼠血气指标变化以及 12 0分钟大鼠肺脑含水量变化。结果 HSD或DA单用可显著升高休克合并肺水肿大鼠血压 (MAP)、左心室内压 (LVSP)和左室内压最大变化速率 (±dp dtmax)等血流动力学指标 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,改善部分血气指标如pH值、[HCO3- ]、血氧饱和度 (O2 sat)和降低肺、脑含水量。二者合用效果优于两者单用。结论 HSD与DA伍用有较好的改善高原失血性休克合并肺水肿的血流动力学指标 ,改善血气指标和减轻肺水肿的作用 ,可作为治疗高原休克合并肺水肿的早期救治措施之一。

银杏叶提取物对老年大鼠的抗衰老研究

目的研究银杏叶提取物(GBE)对老年大鼠抗衰老的作用。方法GBE连续胃饲老年大鼠30 d后取血液、肝脏、脑组织,测定其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、丙二醛(MDA)含量及单胺氧化酶(MAO)活力。结果与老年对照组比较,老年实验组血液和肝脏中SOD、GSH-Px活力显著增高,MDA含量显著降低,其中GBE低剂量组与老年对照组比较P<0.05,高剂量组与老年对照组比较P<0.01,MAO活力未见显著差异;老年实验组脑组织中MDA含量和MAO活力显著降低,其中GBE低剂量组与老年对照组比较P<0.05,GBE高剂量组与老年对照组比较P<0.01。结论GBE可显著增高老年大鼠血液、肝脏和脑组织中SOD、GSH-Px活力,使血液、肝脏和脑组织中MDA含量显著降低,具有一定的抗衰老作用。

LC-MS/MS法同时测定CUMS大鼠血浆中3种单胺类神经递质

目的建立测定大鼠血浆中五羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）的LC-MS/MS方法,观察慢性不可预见性温和应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）抑郁大鼠血浆单胺类神经递质DA、5-HT、NE的变化情况.方法♂SD大鼠22只,分为对照组（n=10）和模型组（n=12）,模型组每天给予9种慢性不可预见性温和刺激因子,造模21d后,分别于造模前后进行行为学测定及眼眶采血;采用苯甲酰氯作为柱前衍生化试剂,将3种待测物及内标衍生化后进入LC-MS/MS检测,测定造模前后血浆中5-HT、NE、DA3种神经递质浓度.结果造模21d后,与对照组相比,模型组大鼠体重明显降低（P〈0.05）,水平得分、垂直得分均明显降低（P〈0.01）,同时糖水消耗量明显降低（P〈0.01）.血浆中5-HT、NE、DA的浓度在1.47～752、1.75～898、2.05～1053μg·L^-1范围内线性关系良好,最低定量限分别为1.47、1.75、2.05μg·L^-1,以质控样品计算,在各浓度水平下,此法的回收率均大于70%,日内和日间精密度小于15%,符合生物样品分析要求.造模21d后,模型组血浆中5-HT、NE、DA的浓度分别为（3.99±1.21）、（6.24±1.94）、（6.07±1.98）μg·L^-1,与对照组相比均明显降低（P〈0.01）.结论CUMS造模成功后,血浆中的3种神经递质分别呈下降趋势。

保神开郁冲剂影响失眠鼠中枢递质的实验研究

通过建立失眠大鼠模型 ,予保神开郁冲剂高、低剂量组及各对照组灌胃治疗 ,利用荧光分光光度法检测大鼠中脑、桥脑、延脑等 5-羟色胺 (5 - HT) 、5-羟吲哚乙酸 (5 - HIAA) 、去甲肾上腺素 (NA) 、多巴胺(DA) 含量的变化 ,分析保神开郁冲剂增加深睡 ,提高睡眠质量的机理。结果显示 ,保神开郁冲剂高、低剂量组能够使 5- HT含量增加 ,NA、DA的含量降低 ,并与其它对照组呈显著性差异(P<0 .0 5 ) ,保神开郁冲剂增加深睡的内在机理是影响脑内 5- HT、NA、DA的含量而作用于睡眠—觉醒机制的。