Analysis of Rb gene in primary acute lymphoid leukemia

The structure of the Rb gene in 32 cases of acute lymphoid leukemia (ALL) were studied by Southern blotting using 32P-labeled Rb cDNA 3. 8 kb probe- Structural abnormalities of Rb gene were found in 8 cases of ALL, an incidence of 25%. Two novel fragments (3. 1 kb, 2- 3 kb)were observed in 5 of 8 cases. We used five pairs of Rb gene primers of exons 18, 19, 21, 22, 27 and amplified Rb gene from 6 cases of ALL with abnormal Rb gene- Only one case was free from products of exons 18 and 2l. The results seemed to indicate that abnormalities of Rb gene might be closely associated with initiation and/or promotion of ALL.

急性淋巴细胞白血病Rb基因的分析

应用限制性内切酶片段长度多态性分析了３２例原发急性淋巴细胞白血病Ｒｂ基因的等位基因变化，采用３２Ｐ－标记的ＲｂｃＤＮＡ３．８ｋｂ探针，结果在８例患者中发现Ｒｂ基因结构异常（２５％）．其中４例出现新的３．１ｋｂ和２．３ｋｂ片段，选用Ｒｂ基因外显子１８，１９，２１，２２，２７五对引物，对已发现Ｒｂ基因异常的６例患者进行了分析，发现１例在外显子１８和２１无扩增产物．结果提示：Ｒｂ基因异常与急性淋巴细胞白血病的疾病加剧的关系较疾病的始发关系更为密切。

急性髓系白血病Rb基因的研究

目的：研究Ｒｂ基因异常与急性髓系白血病发病的关系．方法：采用ＤＮＡ印迹杂交和ＰＣＲ技术．结果：在５／１８例原发急性髓系白血病中发现Ｒｂ基因结构异常（２８％），其中２例缺失５．４ｋｂ和出现新片段３．１ｋｂ和２．３ｋｂ．将其中１例用Ｒｂ基因外显子１８，１９，２１，２２，２７五对引物进行分析，未发现异常．结论：Ｒｂ基因异常可能与急性髓系白血病的始发和发展有关．

AML-M1相关TCR Vβ克隆性增殖T细胞的研究

目的 了解急性髓细胞白血病M1亚型 (AML M1 )患者外周血TCRVβ亚家族T细胞的克隆性分布特点。 方法采用RT PCR扩增 9例M1患者外周血的单个核细胞的TCRVβ2 4个亚家族基因 ,分析其TCRVβ亚家族的利用情况。PCR产物进一步经基因扫描分析 ,了解其CDR3长度以判断T细胞的克隆性。结果 不同标本中可检测到 2～ 5个Vβ亚家族T细胞 ,以Vβ2、Vβ3、Vβ1 7和Vβ1 9为常见 ,并在Vβ2、Vβ3、Vβ5、Vβ8、Vβ9和Vβ1 9中发现克隆性生长T细胞。结论 M1病人外周血TCRVβ亚家族T细胞表达呈现明显的选择性和克隆性增殖情况 ,这可能与M1细胞相关抗原有关 ,且克隆性增殖Vβ亚家族分布以个体特异性为主。

急性髓系白血病中DNMT3a基因突变的研究

本研究探讨急性髓系白血病(AML)患者DNMT3a基因突变情况及临床特征。采用PCR扩增产物直接测序法检测77例AML患者DNMT3a基因第882位氨基酸的突变情况,分析突变阳性患者的临床特征。结果表明,59例初诊AML患者中7例(11.9%)具有DNMT3a基因突变,突变类型分别为4例DNMT3a R882C、2例DNMT3aR882H和1例DNMT3a Y874C。7例DNMT3a基因突变患者中2例为M2、1例为M4、4例为M5。27例正常核型中5例(22.7%)发生突变,而21例异常核型中无1例发生突变。CEBPA阳性患者发生DNMT3a突变率明显高于CEBPA阴性患者(p=0.002)。突变患者中有4例(4/7,57.1%)伴有淋系抗原CD4和/或CD7的表达。DNMT3a突变组患者的年龄、性别、骨髓原始细胞数、白细胞数、血小板数、血红蛋白、完全缓解(CR)率、FLT3-ITD、NPM1和c-kit突变与DNMT3a野生型组相比均无统计学意义(p>0.05)。结论:DNMT3a基因突变多见于正常染色体核型AML伴NPM1和/或CEBPA突变阳性患者,其在AML患者预后中的预测价值有待于进一步的深入研究。

急性髓系白血病NPM1基因突变的研究

本研究旨在探讨急性髓系白血病(AML)患者NPM1基因突变情况及临床特征。采用PCR扩增产物直接测序法检测33例AML患者NPM1基因第12外显子的突变情况,了解NPM1基因突变阳性患者的临床特征。结果显示:33例AML患者中共检出8例(24.2%)具有NPM1基因突变,其中M11例、M23例、M41例、M53例。19例正常核型AML患者中7例(36.8%)发生NPM1基因突变,明显高于异常核型组(14例中1例,7.1%)(p<0.05)。NPM1基因突变型患者骨髓原始细胞比例及外周血白细胞计数均高于野生型组(p值均<0.05)。结论:NPM1基因第12外显子的突变多见于正常核型AML患者,突变患者骨髓原始细胞比例及外周血白细胞数量增多。

分化早期小儿急性白血病细胞免疫球蛋白和T细胞受体基因结构的变化

从29例免疫分型的小儿急性白血病中选出髓过氧化物酶染色阴性和不与细胞系相关或成熟细胞系相关的单克隆抗体反应的6例白血病细胞,进一步作免疫球蛋白(包括重链和κ轻链)和T细胞受体(包括δ、γ、β)基因结构的分析。所有6例均有IgH基因的重排,提示这些白血病细胞是β细胞来源。两例CD_(10)阴性和白病细胞.κ链基因没有重排,其中一例的TCRδ、γ、β基因也都处于胚系,另一例的TCRβ处于胚系。在CD_(10)阳性白血病细胞中,其中两例κ链基因丢失,TCR基因结构都有不同程度的变化(重排或丢失)。这些结果可能提示在CD_(10)阳性白血病细胞中能产生功能性IgH的重排,并可导致IgL和TCR基因结构的变化。

急性T淋巴细胞白血病中SIL-TAL1融合基因与6q缺失的相关性研究

本研究旨在探讨SIL-TAL1融合基因在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者中的表达情况,分析伴有SILTAL1阳性的T-ALL患者的临床和细胞遗传学特征。运用巢式逆转录聚合酶链反应检测68例T-ALL患者骨髓标本中的SIL-TAL1的表达,以R显带核型分析和微阵列比较基因组杂交检测核型异常。结果表明:在12例T-ALL患者中检测到SIL-TAL1融合基因的表达,儿童检出率明显高于成人(38.5%vs 4.8%,P=0.001),其中50%(6/12)SIL-TAL1阳性患者存在两种转录本;SIL-TAL1阳性组核型异常率为54.5%(6/11),其中4例伴有6号染色体长臂大片段缺失;2例经array-CGH检测到1p32存在约90 kb的缺失,形成SIL-TAL1融合基因;6号染色体长臂共同缺失区域为6q14.1-q16.3,均为杂合性缺失;SIL-TAL1阳性组中位白细胞计数和乳酸脱氢酶水平均高于阴性组(P<0.05)。结论:SIL-TAL1融合基因与6q杂合性缺失有一定相关性(P=0.005),在儿童中SIL-TAL1的检出率明显高于成人,且常伴有白细胞计数升高、乳酸脱氢酶升高等不良预后因素。

淋巴细胞恶性肿瘤p16基因纯合缺失和突变的研究

为了探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)和急性淋巴细胞白血病(ALL)中p16基因纯合缺失和突变情况,应用聚合酶链反应(PCR)技术与DNA单链构象多态性分析(PCR-SSCP)及DNA测序技术,检测了45例NHL及20例ALL p16基因改变情况。结果发现45例NHL中有4例存在p16基因纯合缺失,占8.9％,20例ALL中有5例存在p16基因纯合缺失,占25％。1例NHL在第2外显子上游第49密码子出现错义突变,由GCC突变为GAC。1例ALL在第2外显子上游65密码子出现错义突变,由GCC改变为GCA。研究结果表明,NHL和ALL中存在一定比例的p16基因纯合缺失,而p16基因突变率较低,提示p16基因纯合缺失在NHL和ALL发生发展中起一定作用。

急性淋巴细胞白血病p16基因纯合性缺失、点突变及启动子甲基化变异

目的 探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者p16基因的失活机制。方法 从29例患者外周血提取白细胞基因组DNA,采用PCR、PCR SSCP、MSP分析方法,对p16基因第二外显子的纯合性缺失、点突变及启动子区CpG岛的甲基化变异进行分析。结果 p16基因第二外显子的缺失率为27. 6% (8 /29),未见其点突变;p16基因启动子区CpG岛的甲基化率为13. 8% (4 /29)。结论 p16基因的失活和ALL的发生发展有一定的关系。

73例慢性髓系白血病患者中IKAROS6表达研究

本研究旨在探讨慢性髓系白血病(CML)患者IKARO S6表达情况及其临床意义。采用PCR扩增产物克隆测序法检测73例CML患者中IKARO S6表达情况,了解IKARO S6阳性患者的临床特征。结果表明,在8例健康对照标本中未检测到IKARO S6表达,在15例CML慢性期和加速期标本中也均未检测到IKARO S6表达,42例急淋变的CML标本中15例(35.71%)表达IKARO S6,16例发生急髓变的CML标本中均未检测到IKARO S6表达;在42例急淋变的CML标本中:IKARO S6表达阳性的患者完全缓解(CR)率为40%(6/15例),显著低于IKARO S6表达阴性组(85.19%,23/27例)(p<0.01);IKARO S6表达阳性的患者缓解后15个月内(2-18个月)复发率66.7%(4/6例),显著高于IKARO S6表达阴性组(21.74%,5/23例)(p<0.05)。结论:IKARO S基因异常表达可见于CML进展为急性淋巴细胞白血病的患者,并以IKARO S6异构体为主。IKARO S基因异常表达可能是CML急变为ALL的一个重要因素和独立的预后指标。

AML-M_1型患者TCR V_βT细胞家族表达抑制情况

目的 了解急性髓细胞白血病M1亚型 (AML -M1)患者TCRVβ亚家族T细胞的分布特点。 方法 采用RT-PCR扩增 8例M1患者外周血的单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因 ,分析了其TCRVβ亚家族的利用情况。 结果 不同标本中可检测到 2～ 8Vβ亚家族的T细胞 ,不同患者中Vβ亚家族T细胞分布不尽相同。 结论 M1患者外周血TCRVβT细胞家族表达部分受抑制 ,提示患者细胞免疫功能的部分缺陷。

先天性聋哑患儿伴面色苍白、贫血1年

1病例介绍(1)病史:患儿女,11岁,因发现面色苍白、贫血1年入院。1年前因咳嗽20余天,加重伴发热5 d就诊我院,无头晕、乏力,无咯血、呕血及黑便。查体无贫血貌,无肝脾大,无杵状指。查血常规示Hb 91 g/L(参考值:113~151g/L),叶酸、维生素Bu正常,地中海贫血基因筛查为基因型aa/aapN/pN,未予特殊处理。

老年白血病bcr/abl融合基因的表达及其临床意义

目的 观察bcr/abl融合基因在老年白血病的表达及其临床意义。 方法 应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)一步法检测 62例老年白血病患者bcr/abl融合基因的表达。 结果 62例患者中bcr/abl融合基因阳性 5 3例 ,阳性率 85 5 % ,其中急性淋巴细胞白血病 (ALL) 17例 ,阳性 9例 (5 2 9% ) ;慢性粒细胞白血病 (CML)45例 ,阳性 44例 (97 88% )。DOCP方案治疗 7例bcr/abl+ ALL患者完全缓解 (CR)率 2 8 6% ,6例bcr/abl-ALL患者CR率 66 7% (P <0 0 1)。 结论 bcr/abl融合基因检测有助于CML和ALL的临床诊断、治疗选择、微小残留病变 (MRD)监测以及预后判断 ;老年ALLbcr/abl融合基因阳性率较高 ,可能是其治疗效果较差的原因之一 ;bcr/abl+ ALL患者CR率明显低于bcr/abl-ALL患者 ;RT PCR一步法特异性好、敏感性高、简便快速 ,尤其适用于MRD的临床监测。

急性白血病p16基因的研究(英文)

为研究p16抑癌基因在急性白血病中的变化,用ABC法研究了61例急性白血病细胞表面p16抗原的表达和用多重PCR法研究了51例急性白血病p16基因的结构缺陷。结果发现白血病患者p16抗原的表达明显低于正常人(P<0.001),其中急性淋巴细胞白血病(ALL)又明显低于急性髓细胞白血病(AML)(P<0.05);但在AML和ALL完全缓解组(CR)和未缓解组(NR),p16抗原表达均无差异(P>0.05)。在30例ALL中仅发现4例p16基因第二外显子纯合子缺失,在21例AML未发现pl6基因的结构变化,说明p16基因的表达缺陷是急性白血病发生和发展中的主要变化,而结构异常并不是其演变中的必需分子事件。

BCL-XL异质性表达与复发急性髓性白血病细胞体外生长类型的关系

选择１５例复发急性髓性白血病（ＡＭＬ）患者，研究ＢＣＬ－ＸＬ的异质性表达与复发ＡＭＬ细胞体外生长类型的关系。用白血病祖细胞培养（ＣＦＵ－Ｌ）判断生长类型，ＲＴ－ＰＣＲ方法检测 ＢＣＬ－ＸＬ ｍＲＮＡ的表达丰度。结果：ＣＦＵ－Ｌ检测中，１０例为生长型，其ＢＣＬ－ＸＬ ｍＲＮＡ ９例高表达，１例为低表达；ＣＦＵ－Ｌ检测 ５例为不生长型，ＢＣＬ－ＸＬ ｍＲＮＡ均为低表达（ Ｐ＜０．０１）。在复发ＡＭＬ中，ＢＣＬ－ＸＬ ｍＲＮＡ的高表达与其细胞体外生长类型有关，提示与其细胞的自分泌生长有关，可以作为复发ＡＭＬ再生耐药的一个判断指标。

ALL病人P16基因的失活与mRNA表达的关系

目的 :探讨 AL L 和各亚型中 P16基因失活和纯合缺失的发生率及 m RNA表达。方法 :对 40例AL L (B- AL L2 8例 ,T- AL L7例 ,前 B- AL L5例 )和 15例对照组骨髓标本 ,采用 PCR法检测 P16基因的纯合缺失 ,REP法检测 P16基因的高度甲基化 ,RT- Nest- PCR法检测其 m RNA的表达。结果 :AL L P16基因高度甲基化或纯合缺失发生率为 80 % ,而对照组无一例 P16基因失活 ;T- AL L中 P16基因纯合缺失高于高度甲基化 ;B- AL L中高度甲基化多于纯合缺失。 5例 P16基因高度甲基化尚有 m RNA表达 ,其余均无表达。结论 :P16基因的异常是 AL L 的主要发病机制之一。 T- AL L P16基因的纯合缺失为主要表现 ,而 B- AL L P16的高度甲基化为主要表现。同时 ,无论 P16基因纯合缺失或高度甲基化 ,均能高度抑制 m

T 细胞受体δ、γ基因在小儿急性白血病中的变化

本文在细胞形态,表面抗原分析的基础上,对20例小儿急性白血症细胞进行TCRδ和γ基因结构的分析。11例属分化早期的白血病中有9例发生TCRδ基因的重排和缺失,其中5例也有TCRγ基因的重排。在5例属非淋巴细胞系的白血病中有3例发生TCRδ基因的重排.3例粒细胞性白血病细胞的TCR基因(δ和γ)均为胚系。有一例细胞表型仅有CD_2表达的白血病细胞,其TCR 基因(δ和γ)也为胚系。结果还显示:TCRδ基因结构发生变化的白血病细胞均有CD_(10)抗原表达。研究提示:TCRδ基因的重排不显示严格的细胞特异性,但是TCR 基因的变化与淋巴细胞系白血病细胞某些表面抗原的表达存在某种联系。

急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中EZH2、PTEN mRNA表达及其相关性

目的观察急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞中果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)、张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)mRNA表达变化,并分析二者的相关性。方法选择AML患者60例纳入AML组,因贫血、不明原因出血等行骨髓穿刺检查者20例为正常对照组。获取两组骨髓单个核细胞,采用实时荧光定量PCR法检测骨髓单个核细胞中的EZH2、PTEN mRNA,分析AML患者骨髓单个核细胞中EZH2、PTEN mRNA表达的相关性。结果 AML组骨髓单个核细胞中EZH2 mRNA相对表达量高于正常对照组,PTEN mRNA相对表达量低于正常对照组(P均<0.01)。AML患者骨髓单个核细胞中EZH2 mRNA与PTEN mRNA表达呈负相关(r=-0.694,P<0.05)。结论 AML患者骨髓单个核细胞中EZH2 mRNA高表达、PTEN mRNA低表达,且二者表达呈负相关;EZH2与PTEN可能参与了AML的发病,且二者之间可能存在一定的相互作用。

成人急性白血病患者骨髓中p16基因的表达

目的:研究成人急性白血病患者p16基因纯合缺失和甲基化变化与其表达之间的关系,探讨其在成人急性白血病发生发展中的生物学意义。方法:分别用多重聚合酶联反应(PCR)技术及甲基化敏感限制性内切酶-PCR技术检测了71例成人急性白血病患者DNA中p16基因纯合缺失及甲基化情况;应用原位杂交及免疫化学技术检测p16mRNA及p16蛋白表达。结果:71例成人急性白血病患者中,2例检测出p16基因纯合缺失。在无p16基因纯合缺失的病例中,5例急性淋巴细胞白血病(5/26)和9例急性髓性白血病(9/43)患者测出p16基因甲基化。p16 mRNA及P16蛋白的阳性率分别为70.4％(50/71例)、61.9％(44/71例)。结论:在成人急性白血病的发生发展中,p16基因甲基化比p16基因纯合缺失更具有意义;p16基因表达异常与成人急性白血病的发生发展密切相关。