松材线虫Rbx1基因克隆及蛋白质结构分析

为鉴定潜在的松材线虫防治靶标基因,应用SL法克隆到松材线虫Rbx1,并完成Rbx1蛋白质结构分析。松材线虫Rbx1与泛素途径多个蛋白发生互作。通过Rbx1与E2的分子对接研究,共发现Rbx1与E2分子间存在3个氢键,Rbx1含有1个E2契合"口袋"。分子动力学模拟表明,Rbx1的氮末端是其功能区域。松材线虫Rbx1是潜在的防治靶标基因,以该区域为靶位点设计抑制子或可达到防治该线虫的目的。

Ring-Box 1基因负调控抗病毒天然免疫的初步研究

目的研究Ring-Box 1基因(RBX1/ROC1)对视黄酸诱导基因-I(retinoic acid inducible gene I,DDX58/RIG-I)抗病毒感染信号通路功能的影响,寻找抗病毒治疗的潜在靶标。方法利用PCR扩增RBX1/ROC1基因,将其插入p CDNA3载体,并且通过免疫印迹检测质粒在细胞中的表达;利用荧光素酶报告基因检测RBX1/ROC1基因对DDX58/RIG-I信号通路的影响。结果本研究成功构建Flag-RBXI/ROC1真核表达载体并在HEK293细胞中得到了表达;通过荧光素酶报告基因分析发现RBX1/ROC1基因抑制DDX58/RIG-I信号通路。结论 RBX1/ROC1是宿主天然免疫DDX58/RIG-I抗病毒感染信号通路的负调控分子,为寻找抗病毒靶点打下基础。