春兰基因组DNA提取方法的研究

本文以春兰(Cymbidiumgoeringii(Rchb.f.)Rchb.f.)为研究试材,对植物基因组DNA提取方法中的若干影响因子诸如药品、试剂配制方法、DNA取材部位、蛋白质去除次数、DNA析出时间、提取样品水浴时间等进行了比较分析,试图找出春兰基因组DNA提取的最佳方法。结果表明:采用进口的CTAB提取效果比国产的CTAB要好,特别适用于花药的提取,蛋白质去除效果很好;SDS提取缓冲液配制方法很重要,不同的SDS缓冲液配制方法,其提取效果差异较大。春兰花苞的DNA提取得率较叶片高,但是叶片DNA的纯度则相反,叶片较花苞高。在提取花苞基因组DNA过程中,增加氯仿/异戊醇抽提次数,对去除DNA中蛋白质、多糖及其它杂质有一定的作用,但是对DNA的损失也是很明显的。从实验效果来看,氯仿/异戊醇抽提次数以2次为宜。提取基因组DNA在异丙醇沉淀时,采取挑取絮状沉淀的方法,也可减少蛋白质、多糖等其它杂质的影响,从而提高DNA纯度。无论是叶片还是花苞材料,采用异丙醇沉淀5min,一般析出的以核酸基因组DNA为主,蛋白质为次,核酸析出量在80%以上。继续沉淀(15min)的产物中DNA含量明显较低,而且沉淀的纯度相对不高,因此异丙醇沉淀时间可以缩短到10min之内以提高DNA的纯度。使用CTAB法提取DNA时,水浴时间至少需要30min,过短的水浴时间会造成DNA得率的下降,同时过长的水浴时间,如超过1h,则可能会引起DNA的降解,或者最后产物中增加其他杂质,因此,适宜的水浴时间当为40￣60min。

白及致濒机制及其可持续利用对策

通过研究白及[Bletilla striata(Thunb.)Rchb.f.]的特征和生长特点,分析其致濒机制,并提出合理化建议,为白及的可持续利用提供理论基础。

麝香石斛组织培养过程中生长效应及多糖含量变化

麝香石斛(Dendrobium parishii Rchb.f.)是原种石斛,具有很高的观赏价值和药用价值。试验利用组织培养技术筛选培养基合适的激素浓度,在最优条件下观察麝香石斛试管苗7~108 d的生长情况,分析麝香石斛不同生长阶段植物多糖含量的变化情况和积累规律。结果显示,麝香石斛多糖含量随培养时间的增加而提高,0~40 d增长速率较为缓慢,40~80 d增长较快,之后的多糖含量又开始趋于平缓。

从文献分析看我国白芨研究进展

利用《中文科技期刊全文数据库》等检索工具,采用文献计量法,对我国1975～2008年学术刊物上发表的白芨研究文献进行统计分析,研究年发文量、合作度、合作率、期刊分布、研究单位等指标和内容,定量分析出我国白芨研究的主要人物、研究领域、研究单位及现状,明确了各年研究的重点、热点、核心人物和主要机构,以期对我国白芨研究有全面的了解,这对白芨的进一步研究和学科的发展有重要的指导作用。

叠鞘石斛中联苄类成分的定性定量分析

目的建立叠鞘石斛中联苄类成分的定性、定量分析方法。方法运用薄层色谱法对叠鞘石斛中联苄类成分石斛酚（gigant01）和杓唇石斛素（moscatilin）进行定性分析，采用高效液相色谱法测定石斛酚的含量，以Shim—packCLC—ODS柱为固定相，流动相乙腈-0．2％甲酸（35-65），检测波长280nm，柱温25℃。结果石斛酚在0．196～12．54μg内峰面积与进样量呈良好的线性，r=0．9999；平均回收率100．6％；RSD3．0l％。结论通过10批不同来源的叠鞘石斛的鉴别和含量测定，证明方法灵敏，准确可靠，重复性好。在不同采收期的叠鞘石斛中，石斛酚的含量在春季4，5月份和秋季10，11月份相对高于其他月份。

白及种子萌发与快速繁殖技术的研究

将不同胚龄的白及种子接种到不同培养基中进行培养,对白及种子萌发率、萌发时间、丛生芽增殖、生根等方面进行了研究。结果表明:白及种子萌发率与其胚龄及有胚率成正相关,萌发时间则与胚龄及有胚率成负相关;胚龄16周的种子在1 g/L花宝1号+2 g/L花宝2号的培养基上萌发率可达84%;胚龄等于或大于20周的种子萌发率不受培养基成分的影响,均可达100%,萌发时间只需7 d;丛生芽增殖的最佳培养基为1/2 MS+4.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+100 g/L CM,其增殖倍数达4.41倍;诱导生根较好的培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA,生根率达90%。

球花石斛茎中香豆素类成分的定位与相对定量

目的 探讨不同生长年限、不同部位球花石斛(DendrobiumthyrsiflorumRchb.f.)茎中香豆素类 (coumarins)成分的分布与相对含量变化,为合理评价及利用药用石斛提供科学依据。方法利用激光共聚焦显微技术(laserscanningconfocalmicroscopy,LSCM)观察二月份采收的球花石斛1-3龄茎的基部、中部和顶部的香豆素类成分。所记录数据经正态性、方差齐性检验后进行方差分析(ANOVA),并使用Tukey′s检验作多重比较。结果 香豆素类成分主要分布在球花石斛茎的维管束部位并以维管束外侧纤维的壁较多。统计分析显示香豆素类成分的含量在不同年龄茎的各个部位之间差异极显著或显著,显著值分别为:基部P=0.004(<0.01);中部P=0.009(< 0.01);顶部P=0.036(<0.05)。结论 若以利用香豆素类成分为目的,建议二月采收时,宜选择2龄茎。

球花石斛多糖免疫调节作用的研究

本研究目的为评价球花石斛多糖对正常小鼠免疫功能的影响。球花石斛采用碱提醇沉法得到球花石斛多糖,分别以400、600、800mg/kg小鼠灌胃给药连续10d。通过免疫器官重量检测,碳廓清试验,脾脏T、B淋巴细胞转化试验来观察其对免疫功能的影响。结果显示低、中剂量组的脾脏指数与对照组比较有显著性差异(P<0.01),中、高剂量组的吞噬指数、校正吞噬指数和B淋巴细胞增殖能力与对照组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05),表明球花石斛多糖可显著增加脾脏重量,增强巨噬细胞的碳廓清能力和B淋巴细胞的增殖能力。提示球花石斛多糖具有免疫增强作用,是一种良好的免疫调节剂。

白及的研究概述及其资源利用对策

白及作为我国民间的传统中药,其药用历史源远流长。近年来,由于人为的过度采挖和天然生境的破坏,其野生自然资源急剧减少,濒临灭绝,被国家列为重点保护的野生药用植物之一。对白及的本草考证、生物学特性、化学成分、药理药效等方面的研究进行概述,并对今后研究工作的开展和自然资源的合理利用、开发与保护提出了建议,以期为大宗中药材的可持续利用、药物研发、道地药材的选育、药材质量的评估、生产管理及GAP规范化种植过程中SOP质量标准的制定提供一定的科学理论依据。

叠鞘石斛化学成分研究

目的研究叠鞘石斛化学成分。方法叠鞘石斛乙酸乙酯部位采用硅胶柱层析、重结晶等方法分离纯化,并通过理化性质和波谱技术鉴定化合物结构。结果从叠鞘石斛中分离得到10个化合物,分别鉴定为松柏醛(1)、香兰素(2)、香草酸(3)、丁香醛(4)、丁香酸(5)、5-乙酰氧甲基糠醛(6)、5-羟甲基糠醛(7)、邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(8)、草木樨苷甲酯(9)、4,5-二羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲(10)。结论所有化合物均为首次从叠鞘石斛中分离得到。

金莲花和短瓣金莲花茎叶中总黄酮含量的动态测定

目的:研究2种金莲花茎叶中总黄酮含量的积累动态。方法:以芦丁为对照品,采用分光光度法于500nm处测定4～9月份采集的两种金莲花的茎叶中总黄酮的含量。结果:2种金莲花茎叶的总黄酮含量最大值分别为6.34%和5.82%,且均在6月下旬达到峰值。结论:2种金莲花的茎叶部分可以作为金莲花的新药源;北京地区金莲花茎叶的最佳采收时间为6月下旬。

草乌水牛角配伍的实验研究

草乌与犀角配伍属于中药的“十九畏”内容之一。实验用水牛角代替犀角与草乌配伍，在生理条件及免疫功能低下的条件下就二者配伍前后进行镇痛、抗炎、免疫、血液等药理指标的观察研究，结果表明：对镇痛、抗炎、白细胞、胸腺、凝血时间等指标，单用时有作用，合用后作用不如单味；对脾指数，单用合用均无影响；水牛角有一定的降温作用，与草乌合用后对体温均无影响。提示二药配伍可属中药七情中的“相恶”范畴。

北乌头提取物对舞毒蛾体内酶活性的影响

采用系统溶剂法对北乌头甲醇提取物进行分离,用饲料混药法测定4种萃取物对舞毒蛾的胃毒毒力,测定了北乌头乙酸乙酯萃取物对舞毒蛾幼虫体内解毒酶、保护酶、消化酶活力的影响。试验结果表明:北乌头乙酸乙酯萃取物杀虫作用显著,为主要杀虫活性物质;舞毒蛾幼虫经北乌头乙酸乙酯萃取物亚致死浓度(LC20)处理后,其体内羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活性均表现为持续抑制,处理72 h,乙酰胆碱酯酶活力为对照的50.6%,抑制作用极显著(P<0.01);超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶活性均表现为先激活后抑制,处理24 h,过氧化氢酶活力为对照的1.613倍,激活作用极显著(P<0.01),处理72 h,超氧化物歧化酶活力为对照的84.2%,抑制作用极显著(P<0.01);脂肪酶和淀粉酶活性均表现为持续抑制,处理72 h,脂肪酶活力为对照的53.9%,抑制作用极显著(P<0.01);蛋白酶活性表现为先激活后抑制,处理24 h,蛋白酶活力为对照的1.431倍,激活作用极显著(P<0.01),处理72 h,蛋白酶活力为对照的90.4%,抑制作用显著(P<0.05)。综上,北乌头乙酸乙酯萃取物可影响舞毒蛾幼虫的解毒酶、保护酶及消化酶,扰乱其正常生理代谢。

白及种子无菌繁殖微型种茎初探

对白及[Bletilla striata(Thunb.ex A.Murray)Rchb.f.]种子无菌繁殖微型种茎进行了初步研究。结果表明,白及种子在KC+200 g/L马铃薯萌发培养基中发芽率最高,达到100%;在1/2 MS+0.2 mg/L NAA生根培养基中,白及各项指标最高,其中生根率为97%,最长根长为2.5 cm;在MS种茎培养基中白及的生长状态最好,平均每株产苗2.8个,最大叶长为3.8 cm,根数为6条/株。

川产道地药材叠鞘石斛茎叶花脂溶性成分气相色谱-质谱联用分析

目的研究叠鞘石斛茎、叶和花脂溶性成分,为叠鞘石斛的综合开发利用提供科学依据。方法运用GC-MS法对叠鞘石斛不同药用部位脂溶性成分进行分离测定,结合质谱库检索系统对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果叠鞘石斛茎中鉴定出33个化学成分,占总含量的75.84%;叶中鉴定出41种化学成分,占总含量的61.56%;花中鉴定出53种化学成分,占总含量的81.90%。结论首次对川产道地药材叠鞘石斛不同部位脂溶性成分进行定性定量研究,共鉴定出93种成分。不同药用部位脂溶性成分有较大差异,主要成分均为脂肪酸类、酯和烃类。

虎头兰组培快繁技术体系研究

通过对虎头兰无胚乳种子无菌萌发过程中原球茎诱导、继代增殖、试管苗生根等不同发育时期的培养基配方筛选研究,初步建立了一套组培快繁技术体系,结果表明:虎头兰无胚乳种子在温度(25±2)℃、光照强度1 500～2 000 lx、光照时间12 h/d的条件下,较适宜的原球茎诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,适宜的增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,适宜的生根培养基为1/2MS+NAA1.0 mg/L。

川产叠鞘石斛挥发油化学成分的GC-MS分析

目的:采用GC-MS联用法对叠鞘石斛挥发油化学成分进行研究,为叠鞘石斛的综合利用提供参考。方法:采用有机溶剂-水蒸气蒸馏法提取挥发油,并运用GC-MS进行分离测定,结合质谱库检索技术对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:叠鞘石斛挥发油中分离出115种成分,鉴定出70种化学成分。结论:首次对叠鞘石斛挥发油化学成分进行定性定量研究,主要为烷烃类、醛类和醇类。

梳唇石斛组织培养

以梳唇石斛为材料,研究不同激素配比对外植体诱导、分化、增殖和生根的影响.实验结果表明,诱导外植体分化增殖效果较好的培养基为:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.4mg/L,生根效果较好的培养基为:1/2MS+香蕉泥(100g/L)+NAA(0.1 mg/L).

黄花石斛HPLC指纹图谱研究

为提供黄花石斛药材质量标准的依据,采用HPLC法建立黄花石斛药材指纹图谱。色谱条件为Spher-i-5-RP-18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长260nm。采用中华人民共和国药典委员会出版的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本:2004A)进行数据分析,最终建立了黄花石斛的HPLC指纹图谱,并标定了14个共有指纹峰;方法学考察结果符合指纹图谱技术要求,可用于建立黄花石斛药材的指纹图谱。

相对论连续谱Hartree-Bogoliubov理论对Er偶同位素链的研究

基于相对论连续谱Hartree-Bogoliubov(RCHB)理论,在NL-SH参数下,研究了从质子滴线到中子滴线Er偶同位素链的基态特性,计算的核结合能和核均方根半径,在有实验数据进行比较的范围内,与实验数据值符合较好。计算结果显示:在中子数为N=82-126的壳层里,在84-92、94-126之间有明显的子壳层结构;62582Er184核是中子滴线核。