春兰(Cymbidium goeringii(Rchb.f)Rchb.f.)的核型研究

用改进的染色体标本制片技术 ,报道了春兰 (Cymbidium goeringii (Rchb .f)Rchb .f .)的染色体核型 .研究结果表明 ,春兰体细胞染色体数目 2n =4 0 ,染色体基数x =2 0 .中期染色体中等大小 ,相邻染色体间长度变化不明显 ,染色体相对长度系数组成 (I .R .L .) =2L +2 0M2+14M1+4S .核型公式为 2n =2x =4 0 =2 0m +14sm +4st+2t.主要由中部着丝粒染色体和近中部着丝粒染色体组成 ,未见随体结构 .属于Stebbins核型的 2B型 ,核型不对称系数为 6 4 .2 2 .

香豆素类成分在球花石斛(Dendrobium thyrsiflorum Rchb.f.)根中的分布和相对含量

利用激光共聚焦显微技术(laserscanningconfocalmicroscopy,LSCM)观测了香豆素类成分(coumarins)在球花石斛(DendrobiumthyrsiflorumRchb.f.)根中的分布及相对含量,为合理利用药用石斛提供科学的理论依据。观察结果显示香豆素类成分主要分布于球花石斛根的细胞壁,尤以细胞的角隅处为多;自发荧光强度以外皮层的最高,根被的最低。

贵州野生白及属药用植物种质资源分布规律及核型研究

对贵州野生白及属药用植物种质资源的分布规律进行研究,并以根尖为原材料,采用常规压片法分析染色体核型,研究不同居群核型特征,为野生白及属种质资源保护和人工选育提供依据。结果表明,贵州野生白及属药用植物种质资源全省广布,其中,黄花白及海拔分布范围在398~1300 m之间,生长环境以草丛为主,小白及海拔分布范围在620~1899 m之间,生长环境以草丛、岩壁或石壁为主。核型分析结果表明,8个居群染色体均为二倍体,染色体基数x=16,染色体数目2n=2x=32,着丝点位置有m、sm、st三种,以m类型染色体为主,核型类型有2B、2C两种,以2B型为主,其中,黄花白及的核不对称系数介于59.18%~62.18%之间,小白及的核不对称系数介于57.44%~60.34%之间。黄花白及与小白及在分布区域上存在差异性,前者以中低海拔为主,后者以中高海拔为主;贵州野生白及属药用植物种质资源核型多样,种内和种间均存在一定差异。

白及不同地理群体的分子遗传学评价

以采自6个不同地理区域33份白及资源为试材,利用SRAP标记技术对白及资源进行分子遗传学评价研究,以期为白及品种资源的综合利用、野生资源的就地保护和迁地保护提供参考依据。结果表明:白及资源在物种水平遗传多样性比较丰富,白及居群的遗传多样性指数分别为Ht=0.3267,Hs=0.2356,Gst=0.2506,Nm=1.4952,说明白及居群间存在少量的基因交流,而且遗传变异主要发生在居群内。6个野生居群根据UPGMA聚类,可分为2个支系。居群结构分析结果表明,K=2时,样品分类效果最佳。Mantel test检测表明,白及居群间遗传距离越大居群之间地理距离就越远,呈显著正相关性(r=0.6246;P<0.001)。

基于SRAP标记的三十三份白及种质资源聚类分析及DNA指纹图谱的构建

以白及(BletillastriataRchb.f.)为试材,基于UPGMA法通过13对SRAP引物组合对6个野生居群的33份白及种质资源进行聚类分析并构建DNA指纹图谱,以期为白及品种鉴定和资源收集提供参考依据。结果表明:13对SRAP引物组合共扩增出182条条带(其中有152条为多态性条带),多态性比率为83.52%,平均Shannon’s信息指数(I)和Nei’s基因多样性指数(H)分别为0.4846和0.3243。6个野生居群根据UPGMA聚类,可分为2个支系。我国华南地区广东茂名、广西百色和华中地区湖南张家界3个白及居群聚为一支;西南地区贵州安龙、云南蒙自和四川峨眉山另外3个白及居群聚为另一支。Manteltest检测表明,物种遗传距离和地理距离间存在显著正相关性(r=0.6246;P<0.001)。4对SRAP核心引物组合构建了33份白及品种的DNA指纹图谱。

通过改良RAPD技术获得黑毛石斛、蜂腰石斛和石仙桃的3条SCAR新标记

目的寻找快速区分黑毛石斛、蜂腰石斛和石仙桃的序列特征扩增区域(sequence characterized amplified regions,SCAR)新标记。方法在改良的随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)的基础上对10个物种进行基因组DNA随机扩增、分子克隆和测序,分别设计了可鉴别3个物种的SCAR标记。结果成功筛选出3个SCAR标记,其相应的特异性标记分别为N2-12、A2-17和A6-33;其中SCAR标记N2-12在黑毛种属中扩增出约750 bp的特异性条带,SCAR标记A2-17在蜂腰石斛中扩增出约750 bp的特异性条带,SCAR标记A6-33在石仙桃种属中扩增出约600 bp的特异性条带。结论N2-12、A2-17和A6-33这3对特异性SCAR新标记能快速、准确的区分出黑毛石斛、蜂腰石斛和石仙桃这3个物种,为今后进行该中药道地药材样品的鉴定提供了实验依据。

金线莲和白及组培苗菌根真菌接种效应研究

为了进一步探究金线莲和白及组培苗与接种菌株在菌根共生培养体系中的相互关系,以金线莲和白及无菌组培苗为材料,接种菌株建立组培苗菌根共生培养体系,通过测定各生长阶段组培苗的形态指标和生理指标,来比较组培苗对不同菌株的反应。金线莲A2菌株处理对组培苗地上和地下部分生长均有明显促进作用,其平均鲜重增长率分别比A1、CK_(1)处理高20.9%、19.1%;A2处理的叶片数、株高、根增长率、根数、根长分别比CK_(1)处理高21.7%、2.7 cm、16.9%、48.3%、65.8%。白及B1、B2菌株处理对组培苗地上和地下部分生长均有促进作用,B1、B2处理生长指标都高于对照,B1处理的鲜重增长率、叶片数、株高、根增长率、根数、根长分别比CK_(2)处理高3.9%、41.8%、3.7 cm、25.8%、33.0%、52.6%。综合来看,除了A1菌株在前期有一定的负面影响,其他菌株在整个共生培养期间对组培苗生长均有积极的促进作用。

晶帽石斛组培快繁体系优化

以晶帽石斛为试材,采用正交实验方法,研究了基本培养基、生长素种类对晶帽石斛组培苗生长的影响,分析了NAA、水解乳蛋白、MS培养基有机成分、活性炭4个因素、3个水平条件下晶帽石斛组培苗壮苗培养的生长表现,从而确定最佳培养基组合,以期优化晶帽石斛组培快繁体系。结果表明:Anderson培养基和生长素NAA更适合组培苗生长,植株生长旺盛,叶片大而绿;正交实验结果表明,MS培养基有机成分是影响晶帽石斛组培苗生长的主要因素;其次生长素NAA主要影响植株的株高、茎粗、叶片数、叶长,但对生根量无影响;水解乳蛋白主要影响组培苗生根量,对株高、茎粗、叶片数以及叶长无影响;活性炭在晶帽石斛组培苗生长过程中对组培苗生长影响效果最小。试验最终确定晶帽石斛组培苗生长的最适培养基为以Anderson为基本培养基附加0.10 g·L^(-1)活性炭、1.00 mg·L^(-1)NAA、0.05 g·L^(-1)水解乳蛋白、1倍MS培养基有机成分,并附加30 g·L^(-1)蔗糖。

白及致濒机制及其可持续利用对策

通过研究白及[Bletilla striata(Thunb.)Rchb.f.]的特征和生长特点,分析其致濒机制,并提出合理化建议,为白及的可持续利用提供理论基础。

麝香石斛组织培养过程中生长效应及多糖含量变化

麝香石斛(Dendrobium parishii Rchb.f.)是原种石斛,具有很高的观赏价值和药用价值。试验利用组织培养技术筛选培养基合适的激素浓度,在最优条件下观察麝香石斛试管苗7~108 d的生长情况,分析麝香石斛不同生长阶段植物多糖含量的变化情况和积累规律。结果显示,麝香石斛多糖含量随培养时间的增加而提高,0~40 d增长速率较为缓慢,40~80 d增长较快,之后的多糖含量又开始趋于平缓。

春兰基因组DNA提取方法的研究

本文以春兰(Cymbidiumgoeringii(Rchb.f.)Rchb.f.)为研究试材,对植物基因组DNA提取方法中的若干影响因子诸如药品、试剂配制方法、DNA取材部位、蛋白质去除次数、DNA析出时间、提取样品水浴时间等进行了比较分析,试图找出春兰基因组DNA提取的最佳方法。结果表明:采用进口的CTAB提取效果比国产的CTAB要好,特别适用于花药的提取,蛋白质去除效果很好;SDS提取缓冲液配制方法很重要,不同的SDS缓冲液配制方法,其提取效果差异较大。春兰花苞的DNA提取得率较叶片高,但是叶片DNA的纯度则相反,叶片较花苞高。在提取花苞基因组DNA过程中,增加氯仿/异戊醇抽提次数,对去除DNA中蛋白质、多糖及其它杂质有一定的作用,但是对DNA的损失也是很明显的。从实验效果来看,氯仿/异戊醇抽提次数以2次为宜。提取基因组DNA在异丙醇沉淀时,采取挑取絮状沉淀的方法,也可减少蛋白质、多糖等其它杂质的影响,从而提高DNA纯度。无论是叶片还是花苞材料,采用异丙醇沉淀5min,一般析出的以核酸基因组DNA为主,蛋白质为次,核酸析出量在80%以上。继续沉淀(15min)的产物中DNA含量明显较低,而且沉淀的纯度相对不高,因此异丙醇沉淀时间可以缩短到10min之内以提高DNA的纯度。使用CTAB法提取DNA时,水浴时间至少需要30min,过短的水浴时间会造成DNA得率的下降,同时过长的水浴时间,如超过1h,则可能会引起DNA的降解,或者最后产物中增加其他杂质,因此,适宜的水浴时间当为40￣60min。

球花石斛的化学成分研究(Ⅰ)

目的 :研究兰科植物球花石斛的化学成分 ,以探明其有效成分并为制定中药石斛质量标准提供科学依据。方法 :采用硅胶、SephadexLH 2 0及RP C18等色谱技术分离纯化化合物 ,根据理化性质、光谱数据鉴定结构。结果 :从球花石斛乙醇提取物的乙酸乙酯部位分离得到芴酮类、联苄类、菲类及黄酮类 13个化合物 ,分别鉴定为 4 ,7 二羟基 5 甲氧基芴酮 (Ⅰ )、1,4 ,7 三羟基 5 甲氧基芴酮 (Ⅱ )、2 ,4 ,7 三羟基 4 甲氧基芴酮 (Ⅲ )、2 ,5 ,9 三羟基 4 甲氧基芴 (Ⅳ )、4 ,4′ 二羟基 3,3′ ,5 , 三甲氧基联苄 (Ⅴ )、5 ,4′ 二羟基 3,3′ 二甲氧基联苄 (Ⅵ )、3,5 ,4′ 三羟基 3′ 甲氧基联苄 (Ⅶ )、2 ,5 二羟基 4 甲氧基菲 (Ⅷ )、2 ,5 二羟基 4 甲氧基 9,10 二氢菲 (Ⅸ )、二氢麦黄酮 (Ⅹ )、柯伊利素 (Ⅺ )、高北美圣草素 (Ⅻ )、柚皮素 (ⅩⅢ )。结论 :化合物Ⅸ ,Ⅹ ,Ⅺ为首次从石斛属中分离得到 ,其它化合物均为首次从该种植物中分离得到。

斑叶兰化学成分研究

目的：研究斑叶兰的化学成分。方法：采用多种色谱方法进行分离纯化,通过波谱数据及核对文献鉴定化合物结构。结果：从斑叶兰95%乙醇提取物中分离得到7个化合物,分别鉴定为：丁香醛（Ⅰ）、5-羟甲基糠醛（Ⅱ）、别欧前胡素（Ⅲ）、香草酸（Ⅳ）、阿魏酸（Ⅴ）、单棕榈酸甘油（Ⅵ）和β-谷甾醇（Ⅶ）。结论：其中,化合物Ⅱ～Ⅶ为首次从该属植物中分离得到,化合物Ⅰ～Ⅶ均为首次从该植物中分离得到。

广西蝴蝶兰属(兰科)新资料

报道了中国兰科(Orchidaceae)一新记录种洛氏蝴蝶兰(Phalaenopsis lobbii(Rchb.f.)H.R.Sweet)和广西一新记录种版纳蝴蝶兰(P.mannii Rchb.f.)。根据该2种蝴蝶兰的资源现状,提出了保育对策。

AFLP分子标记技术在名贵春兰鉴别中的应用

从基因水平建立名贵春兰品种的鉴定方法,突破以往只能用传统方法鉴定名贵春兰品种的局限性;利用AFLP分子标记技术对18种主要名贵春兰品种进行了DNA指纹图谱分析,结果筛选出16对引物,这16对引物在18个名贵春兰品种中共扩增出345条带(平均每对引物扩增21.56条带),其中有多态性带169条(平均每对引物扩增多态性带10.56条),多态性比例为48.99%;通过这些多态性条带的不同组合,可明确将供试的18个名贵春兰品种加以区分,并作为18个名贵春兰品种鉴定的依据。

温室蝴蝶兰干物质分配及产品上市期模拟研究

为对温室蝴蝶兰生育过程的基本规律和量化关系有一个清楚的理解和认识,并对其生长系统的动态行为进行预测,从而辅助进行对蝴蝶兰生长和生产系统的适时合理调控,本研究根据温室蝴蝶兰器官生长与温度和辐射的关系,建立了基于分配指数的温室蝴蝶兰干物质分配及产品上市期的模拟模型,并利用试验资料对模型进行了检验。模拟系统是采用C++Builder6.0为编程语言,在Pentium(R)4 CPU、512 MB内存计算机、中文Windows XP操作平台上开发的可执行模型系统。研究结果表明,模型对地上部分干重、根干重、茎干重、叶干重、花梗和花干重的模拟结果与实测值均符合较好,模拟结果与实测值之间的拟合度值分别为0.99、0.99、0.94、0.98、0.97和0.99(均为0.01水平显著相关),预测相对误差分别为1.19%、1.79%、5.66%、1.22%、2.90%和1.53%。与已有的温室作物生长模型相比,本研究建立的模型预测精度较高、功能全面,且模型参数易获取,具有较强实用性。模型能够预测温室蝴蝶兰干物质分配及产品上市期,从而为温室蝴蝶兰生产管理和环境调控的优化提供决策支持。

不同浓度激素配比对重唇石斛组织培养的影响

以重唇石斛(Dendrobium hercoglossum Rchb.f.)成熟种子为外植体,MS为基本培养基,研究了植物生长调节素种类及浓度对重唇石斛继代增殖和生根的影响。结果表明:重唇石斛最佳的启动培养基为MS+6-BA 1.5mg·L^(-1)+NAA 0.5mg·L^(-1)。利于继代增殖的培养基为MS+6-BA 2.0mg·L^(-1)+NAA 0.4mg·L^(-1)+KT 0.2mg·L^(-1)+AC 1.0g·L^(-1),最佳的生根壮苗培养基为MS+6-BA 0.5mg·L^(-1)+NAA 2.0mg·L^(-1)+AC 1.0g·L^(-1),平均根长3.12cm,生根率达到90%以上。

银杏林下套种白及和羊肚菌的栽培技术及效益分析

为充分利用银杏苗圃林下的生态空间,基于白及(Bletilla striata)和羊肚菌(Morchella spp.)各自的生态与生理需求,并借鉴投资组合理论中的风险分散策略,采用白及和羊肚菌作为林下经济作物合理地套种在银杏苗木的林下空间。介绍了银杏苗木、白及、羊肚菌各自的生理特征和栽培技术,详述了银杏苗木-白及-羊肚菌3层复合套种的栽培模式,包括株距要求和田间管理等细节。描述和分析了银杏苗木、白及、羊肚菌单独栽培、两两组合套种和三者复合套种的风险和收益,对系统性风险和非系统性风险进行了区分。结果表明,将投资小、回报周期长、风险低的银杏,投资成本、回报周期、风险水平均为中等的白及和投资大、回报周期短、风险高的羊肚菌科学地整合到同一套林下生态系统中进行栽培,不仅大幅提高了种植户的收入回报,还能有效降低非系统性风险、保障种植户的利益。

白及种子无菌繁殖微型种茎初探

对白及[Bletilla striata(Thunb.ex A.Murray)Rchb.f.]种子无菌繁殖微型种茎进行了初步研究。结果表明,白及种子在KC+200 g/L马铃薯萌发培养基中发芽率最高,达到100%;在1/2 MS+0.2 mg/L NAA生根培养基中,白及各项指标最高,其中生根率为97%,最长根长为2.5 cm;在MS种茎培养基中白及的生长状态最好,平均每株产苗2.8个,最大叶长为3.8 cm,根数为6条/株。

叠鞘石斛与药典品种石斛酚含量对比研究

目的:建立叠鞘石斛与药典收载品种金钗石斛,鼓槌石斛中石斛酚的高效液相色谱含量测定方法.方法:Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.5％冰醋酸(35:65)为流动相,检测波长280 nm,流速1 mg· mL-1,柱温30℃.结果:石斛酚在0.01228～0.2456 mg·mL-1 (r=0.9999)范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为100.39％,RSD为2.17％.结论:本方法操作简单、快捷、重现性好、准确率高,可用于上述三种石斛中石斛酚的含量测定.