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重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株在MDCK悬浮细胞中培养条件的优化 被引量:3
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作者 王博 陈宏 +6 位作者 赵海源 王玉红 杨柳 赵博 李翰志 李莉 朱长动 《吉林畜牧兽医》 2018年第2期5-7,共3页
目的:探索重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株的最佳培养条件,为规模化生产提供参数。方法:通过分析病毒培养液的血清浓度、温度、pH、胰酶终浓度和病毒接种量、收获时间来优化病毒在MDCK上的最佳培养条件。结果:重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株... 目的:探索重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株的最佳培养条件,为规模化生产提供参数。方法:通过分析病毒培养液的血清浓度、温度、pH、胰酶终浓度和病毒接种量、收获时间来优化病毒在MDCK上的最佳培养条件。结果:重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株在MDCK悬浮细胞上增殖的最佳培养条件为按接种量MOI 10^(-3),于胰酶终浓度为5μg/L、温度35.0℃、pH7.3±0.1的无血清病毒培养液中培养,收获时间为48~60 h,以48 h最佳。 展开更多
关键词 MDCK悬浮细胞 重组禽流感病毒 H7N9H7-re1 培养条件
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REST/TUBB3轴对卵巢癌紫杉醇化疗耐药性的影响及作用机制
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作者 余婷玉 方珊珊 +2 位作者 朱言亮 刘波 李泉 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期1129-1135,共7页
目的 探究PE1沉默转录因子(REST)/微管蛋白β(TUBB)3对卵巢癌紫杉醇耐药性影响及作用机制。方法 免疫组织化学法检测卵巢癌紫杉醇敏感及耐药肿瘤组织中REST、TUBB3表达,Western印迹检测卵巢癌紫杉醇敏感及耐药细胞中REST、TUBB3蛋白表达... 目的 探究PE1沉默转录因子(REST)/微管蛋白β(TUBB)3对卵巢癌紫杉醇耐药性影响及作用机制。方法 免疫组织化学法检测卵巢癌紫杉醇敏感及耐药肿瘤组织中REST、TUBB3表达,Western印迹检测卵巢癌紫杉醇敏感及耐药细胞中REST、TUBB3蛋白表达,定量聚合酶链反应(qPCR)检测卵巢癌组织中REST、TUBB3 mRNA表达。不同浓度紫杉醇作用于SKOV3、OVCAR3和SKOV3/tax、OVCAR3/tax细胞后,分析细胞凋亡与周期变化,CCK8检测细胞活力,Western印迹检测REST、TUBB3蛋白表达。过表达或敲低REST后,qPCR和Western印迹分别检测TUBB3 mRNA和蛋白表达,检测细胞凋亡水平和周期阻滞。染色质免疫沉淀法检测H3-ac、H4-ac、HADC1与TUBB3基因第2个CpG位点的结合。结果 REST在卵巢癌紫杉醇耐药肿瘤组织及细胞系中低表达,TUBB3异常高表达于卵巢癌紫杉醇化疗耐药肿瘤组织及细胞系,两者mRNA表达呈显著负相关(P<0.05)。不同浓度紫杉醇作用下,REST蛋白表达逐渐明显降低,TUBB3蛋白表达逐渐明显升高,SKOV3/tax、OVCAR3/tax细胞凋亡水平和细胞周期阻滞显著低于SKOV3、OVCAR3(P<0.05)。过表达REST后,TUBB3表达明显降低,细胞对紫杉醇敏感性明显提高,细胞凋亡水平和细胞周期阻滞显著提高(P<0.05)。敲低REST后H3-ac、H4-ac与TUBB3基因第2个CpG位点的结合增强,促进TUBB3基因转录。结论 在卵巢癌紫杉醇化疗耐药组织及细胞系中,REST低表达,而TUBB3异常高表达,REST和TUBB3的RE-1序列结合调控其转录,在紫杉醇化疗耐药中发挥负调控作用。 展开更多
关键词 卵巢癌 紫杉醇 耐药 re1沉默转录因子(REST) 微管蛋白β(TUBB)3
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系列稀土配合物Re_(1-x)Tb_x(TTFA)_3Phen的合成及光学性能研究 被引量:1
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作者 尹海水 葛文萍 +2 位作者 王睿 申向伟 黎永 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期24-25,共2页
合成了以TTFA、1,10-Phen为第一和第二配体的系列铕和钐、铽(用Re表示钐、铕)双核稀土有机配合物Re1-xTbx(TTFA)3Phen,测试了不同掺杂浓度的各个配合物的紫外吸收光谱和荧光光谱。由紫外吸收光谱可以看出,稀土有机配合物的吸收峰主要来... 合成了以TTFA、1,10-Phen为第一和第二配体的系列铕和钐、铽(用Re表示钐、铕)双核稀土有机配合物Re1-xTbx(TTFA)3Phen,测试了不同掺杂浓度的各个配合物的紫外吸收光谱和荧光光谱。由紫外吸收光谱可以看出,稀土有机配合物的吸收峰主要来自有机配体。讨论了配合物的传能机理。荧光光谱表明,铽离子对钐离子有敏化效应,铽离子对铕离子有强烈的敏化效应。 展开更多
关键词 稀土 双核 re1-xTbx(TTFA)3Phen 敏化
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重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5+H7)对鸸鹋免疫效果的研究 被引量:1
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作者 何世成 王昌建 +5 位作者 翟旺 唐小明 林源 鲁杏华 王卫国 彭志 《中国家禽》 北大核心 2019年第20期66-68,共3页
为评估重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5 Re-8株+H7 Re1株)疫苗对鸸鹋的免疫效果,将55日龄鸸鹋分组后按规定程序进行免疫,定期采集并分离血清,检测H5、H7亚型禽流感病毒的HI抗体滴度。结果显示:免疫前鸸鹋血清H5与H7的HI抗体滴度均低于1 l... 为评估重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5 Re-8株+H7 Re1株)疫苗对鸸鹋的免疫效果,将55日龄鸸鹋分组后按规定程序进行免疫,定期采集并分离血清,检测H5、H7亚型禽流感病毒的HI抗体滴度。结果显示:免疫前鸸鹋血清H5与H7的HI抗体滴度均低于1 log2,首免后14 d,H5亚型和H7亚型HI抗体平均滴度分别达到5.9 log2与5.3 log2,免疫后49 d,H5与H7亚型HI抗体滴度达到最高,分别为8.4 log2与10.0 log2。试验疫苗免疫安全性良好,免疫组鸸鹋能产生明显的免疫反应,加强免疫后抗体有效期最长可达189 d以上。本试验结果为鸸鹋免疫禽流感疫苗提供参考依据。 展开更多
关键词 禽流感 灭活疫苗 H5 Re-8+H7 re1 鸸鹋 免疫
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RE_(1-x)B_xF_(3-y)(RE=Y、La、Ce、Gd;B=Ca、Ba)的敏感性质的研究
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作者 任玉芳 黎明 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期373-375,共3页
LaF_3作为离子选择性电极和对气体的敏感性质已进行了一定的研究,但其他稀土氟化物的敏感性质却未见报道。本文合成了RE_(1-x)B_xF_(3-y),研究了它们的结构、电学性质及敏感性质,得到有可能在150℃使用的固体电解质氧敏材料。 (一) RE_(... LaF_3作为离子选择性电极和对气体的敏感性质已进行了一定的研究,但其他稀土氟化物的敏感性质却未见报道。本文合成了RE_(1-x)B_xF_(3-y),研究了它们的结构、电学性质及敏感性质,得到有可能在150℃使用的固体电解质氧敏材料。 (一) RE_(1-x)B_xF_(3-y)的结构分析 结构分析表明,Ca、Ba置换RE的含量少时,如La_(0.95)Ba_(0.05)F_(3-y)、Ce_(0.95)Ca_(0.05)F_(3-y)的X射线衍射分析结果与LaF_3、CeF_3相似,说明它们是固溶体。而Ca置换RE含量较多时,如Y_(0.71)Ca_(0.29)F_(3-y)、Gd_(0.85)Ca_(0.15)F_(3-主) 展开更多
关键词 稀土氟化物 re1-xBxF3-y 敏感性
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2株H7N9亚型重组禽流感病毒的生物学特性和免疫原性研究 被引量:7
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作者 陈晓涵 吴姣姣 +7 位作者 潘舒心 刘艳晶 施建忠 邓国华 包红梅 陈化兰 曾显营 田国彬 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期924-930,共7页
为评估经反向遗传构建的H7N9亚型重组禽流感病毒(AIV)H7-Re1株和H7-Re2株的生物学特性及免疫原性,本研究将这2株病毒分别以10^4倍稀释接种10日龄SPF鸡胚后,36℃培养,观察鸡胚存活情况并检测病毒HA效价,结果显示96 h时,2株病毒接种的鸡... 为评估经反向遗传构建的H7N9亚型重组禽流感病毒(AIV)H7-Re1株和H7-Re2株的生物学特性及免疫原性,本研究将这2株病毒分别以10^4倍稀释接种10日龄SPF鸡胚后,36℃培养,观察鸡胚存活情况并检测病毒HA效价,结果显示96 h时,2株病毒接种的鸡胚全部存活,培养至72 h时其HA效价均为9 log2,均显著高于亲本分离株。测定2株病毒的静脉内接种致病指数(IVPI),结果显示均为0。将2株病毒分别以10^6 EID50剂量鼻腔内接种5周龄SPF鸡,进行致病性试验,结果显示,接种后14 d内,2株病毒接种鸡均无临床症状,也不排毒。以2株病毒为种毒分别制备油乳剂灭活疫苗,以0.3 mL/只接种3周龄SPF鸡后3周时检测免疫鸡血清中HI抗体,结果显示,两种疫苗免疫鸡平均HI效价均可达到8.0 log2。于免疫后21 d,H7-Re1株免疫组鸡分别攻击10^6 EID50的H7N9亚型低致病力AIV(PG/SHH/S1069/13株)和10^5 EID50的高致病力AIV(CK/GX/SD098/17株),进行攻毒试验,结果显示两种病毒攻毒后免疫鸡均全部存活,且无发病和排毒出现。H7-Re2株免疫组鸡于免疫后21 d分别以10^5 EID50的剂量进行高致病力H7N9亚型AIV(CK/GX/SD098/17株)和H7N2亚型AIV(DK/FJ/SE0195/18株)的攻毒保护试验,结果显示两种病毒攻毒后免疫鸡均不发病、不死亡、不排毒。以上结果表明,以H1N1亚型A/Puerto Rico/8/34株病毒为内部基因供体、经反向遗传学方法构建的H7-Re1株和H7-Re2株均具有生长滴度高、生物安全性高和免疫原性好的特点。本研究为H7N9亚型禽流感疫苗的研制和应用奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感 疫苗种毒 H7-re1 H7-Re2株 生物学特性 免疫原性
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NRSE与NRSF及其对神经元特异性基因表达的调控作用 被引量:4
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作者 王小飞 于盼盼 陆佩华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期595-599,共5页
神经限制性沉默元件(NRSE)是一段长度为21 ̄23bp的保守DNA序列,存在于许多神经元特异表达基因的转录调控区中,神经限制性沉默因子(NRSF)能特异性结合到NRSEdsDNA上,并通过其N端和C端阻遏结构域分别连接共阻遏蛋白Sin3A/B和CoREST,Sin3A... 神经限制性沉默元件(NRSE)是一段长度为21 ̄23bp的保守DNA序列,存在于许多神经元特异表达基因的转录调控区中,神经限制性沉默因子(NRSF)能特异性结合到NRSEdsDNA上,并通过其N端和C端阻遏结构域分别连接共阻遏蛋白Sin3A/B和CoREST,Sin3A招募HDAC对组蛋白进行去乙酰基化修饰,CoREST则作为平台蛋白招募特异的“沉默组件”,以此维持基因沉默.最近的研究显示,NRSEdsRNA能在转录水平与NRSF蛋白直接作用,而不是作为siRNA或miRNA在转录后水平启动神经元特异性基因的表达. 展开更多
关键词 神经元 调控作用 基因表达 NRSF 特异表达基因 DNA序列 转录调控区 特异性结合 dsRNA 特异性基因 转录后水平 miRNA siRNA 阻遏蛋白 基因沉默 直接作用 转录水平 限制性 结构域 酰基化 组蛋白 F蛋白 C端 N端
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Rel/NF-κB/IκB/IKK信号转导途径研究进展 被引量:2
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作者 殷莉群 《国外医学(分子生物学分册)》 CSCD 2000年第4期223-227,共5页
真核细胞核转录因子Rel/NF-кB家族广泛调控着自昆虫至人类的免疫和炎症反应中一系列基因的表达。静息状态下,NF-кB二聚体与抑制性蛋白IкB结合而存在于胞质中。当细胞受外源性刺激时,NF-кB活化进入核内发挥其功能。目前,外源性信号活... 真核细胞核转录因子Rel/NF-кB家族广泛调控着自昆虫至人类的免疫和炎症反应中一系列基因的表达。静息状态下,NF-кB二聚体与抑制性蛋白IкB结合而存在于胞质中。当细胞受外源性刺激时,NF-кB活化进入核内发挥其功能。目前,外源性信号活化NF-кB的机制已初步阐明,Rel/NF-кB/IкB/IKK信号转导途径在蛋白质水平的相互调控,以及在肿瘤发生中的意义的研究也已获得一定进展。本文综述了近年来Rel/NF-кB/IкB/IKK信号转导途径的分子机制及其与肿瘤发病关系的研究进展。 展开更多
关键词 re1/NF-κB IΚB IKK 信号转导途径 肿瘤发生
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REST缓解由PrP106-126毒性多肽诱导的原代神经元死亡
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作者 宋志琦 朱婷 +5 位作者 王进 杨威 崔永勇 周向梅 杨利峰 赵德明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2327-2332,共6页
为检测神经元限制性沉默因子(REST)蛋白过表达或干扰对由PrP106-126毒性多肽引起的原代神经元死亡的影响,首先通过脂质体转染法将已经构建好的pCMV-HA-REST质粒转染原代神经元,或利用靶向REST的小干扰siRNA技术干扰原代神经元中REST蛋... 为检测神经元限制性沉默因子(REST)蛋白过表达或干扰对由PrP106-126毒性多肽引起的原代神经元死亡的影响,首先通过脂质体转染法将已经构建好的pCMV-HA-REST质粒转染原代神经元,或利用靶向REST的小干扰siRNA技术干扰原代神经元中REST蛋白的表达。用PrP106-126毒性多肽刺激构建好的REST过表达或干扰的原代神经元,利用Annexin V-FITC试剂盒检测细胞活性;利用TUNEL和Hoechest试剂盒,在激光共聚焦显微镜下直接观察细胞凋亡情况;在透射电镜下观察原代神经元亚细胞结构的变化和损伤情况;使用JC-1线粒体膜电位试剂盒检测线粒体膜电位的改变,同时检测凋亡相关蛋白FOXO1、细胞色素C以及Caspase-3的变化情况。结果显示,受到多肽刺激后,REST的过表达可减轻由毒性多肽引起的神经元死亡、神经元空泡化、细胞器损伤,抑制线粒体膜电位的改变,维持促存活蛋白FOXO1的表达,阻止线粒体向胞浆中释放细胞色素C以及Caspase-3的激活。相应地,干扰REST后,可加剧毒性多肽对神经元的损伤并抑制FOXO1的表达。这表明REST蛋白的过表达可缓解由PrP106-126毒性多肽引起的神经元死亡,对神经元起保护作用,为进一步阐释REST对朊病毒及相关神经退行性疾病引起的病理性损伤的治疗作用和神经保护机制提供依据。 展开更多
关键词 神经元限制性沉默因子 朊病毒病 PrPl06—126 原代神经元 神经元死亡 神经保护作用
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The Modelling of Temporal Data in the Relational Database Environment
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作者 孙远 《Journal of Computer Science & Technology》 SCIE EI CSCD 1995年第2期163-174,共12页
This research takes the view that the modelling of temporal data is a fundamental step towards the solution of capturing semantics of time. The problemsinhereat in the mod6iling of time are not unique to datahase proc... This research takes the view that the modelling of temporal data is a fundamental step towards the solution of capturing semantics of time. The problemsinhereat in the mod6iling of time are not unique to datahase processing. Therepresentation of temporal knowledge and temporal reasoning arises in a widerange of other disciplines. ln this paper an account is given of a techniquefor modelling the semantics of temporal data and its associated normalizationmcthod. It discusses the techniques of processing temporal data by employinga Time Sequence (TS) data model. It shows a number of different strategieswhich are used to classify different data properties of temporal data, and it goeson.to develop the model of temporal data and addresses issues of temporal dataapplication design by introducing the concept of temporal data normalisation. 展开更多
关键词 Temporal data re1ational database time sequence model temporal normalization
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