人5-羟色胺2c受体基因实时荧光定量PCR方法的建立

目的建立5-羟色胺2c受体（5-HTR2c）基因mRNA表达水平的TaqMan real—time PcR检测方法。方法以β-actin为内参基因，根据GenBank中人5-HTR2c及β-actin基因序列，分别设计了2套特异性引物和TaqMan探针，接着对反应的退火温度、引物浓度、探针浓度、Mg^2＋浓度进行优化，然后以优化的条件建立相对定量标准曲线，并对该方法的稳定性进行了分析。结果5-HTR2c及β-actin基因的real—time PCR扩增效率分别为99.9％和100.0％；相对定量标准曲线的CT值线性范围分别为12．2～35．1和11．5～31．5，相关系数分别为0．999及1．000；批内及批问变异系数（8．0％。结论本研究所建立的针对5-HTR2c mRNA表达水平的Taqman real-time PCR检测方法具有扩增效率高、稳定性好等特点，为进一步探索5-HTR2c的功能及其mRNA表达水平的变化和各种疾病发生、发展的相关性提供了有用的方法学基础。

小麦醇溶-谷蛋白盒结合因子基因表达特性的研究

为了给小麦品质改良的基因工程研究提供参考依据,以小麦醇溶-谷蛋白盒结合因子(Wheat Prola-min-Box Binding Factor,WPBF)基因为研究对象,从定性和定量两个方面,利用RT-PCR与Real Time PCR系统地研究了WPBF基因在小麦不同组织器官中以及在小麦胚乳整个发育过程中表达的时空特异性。结果表明,WPBF基因的表达是胚乳特异性的,表达跨胚乳的整个发育过程,在其表达的高峰阶段,表达强度为参照基因β-Actin的43%。