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题名代谢改造熊蜂生假丝酵母提高酸型槐糖脂产量
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作者
张疆睿
张利华
石依博
沈微
樊游
陈献忠
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机构
江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
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出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第11期2094-2106,共13页
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基金
江苏省自然科学基金(BK20171138)~~
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文摘
【目的】槐糖脂是一类生物表面活性剂,不仅具有常规表面活性剂所具有的增溶、乳化、润湿、发泡、分散、降低表面张力等通用性能,且对环境的耐受性极强。熊蜂生假丝酵母(Starmerella bombicola)能够发酵生产槐糖脂,但槐糖脂具有酸型、内酯型和乙酰化型等不同类型,结构多样,难以分离。本文拟通过代谢工程改造,构建高产酸型槐糖脂的熊蜂生假丝酵母工程菌株。【方法】利用潮霉素抗性基因构建了标记基因重复利用系统Rec-six基因编辑系统,在此基础上将合成内酯型槐糖脂的关键基因--内酯酶基因SBLE敲除获得一株只产酸型槐糖脂的工程菌株Δsble,进一步同源过量表达葡萄糖基转移酶基因UGTB并敲除过氧化物酶体膜转运蛋白编码基因PXA1,构建了高产酸型槐糖脂的酵母工程菌。【结果】与出发菌株相比,重组熊蜂生假丝酵母发酵油酸能够合成单一的酸型槐糖脂,而不再合成内酯型槐糖脂,同时酸型槐糖脂的产量由20 g/L提高到44 g/L,提高了2.1倍。【结论】通过敲除PXA1、SBLE和过表达UGTB来改造熊蜂生假丝酵母,能够有效提高重组菌的酸型槐糖脂产量,为发酵法生产酸型槐糖脂奠定了基础。
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关键词
熊蜂生假丝酵母
酸型槐糖脂
内酯酶
代谢工程
rec-six
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Keywords
Starmerella bombicola
acid-type sophorolipid
lactone
metabolic engineering
rec-six
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分类号
S89
[农业科学—特种经济动物饲养]
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