消痰散结方对荷S180肉瘤小鼠蛋白质代谢的影响

目的运用荷S180小鼠模型,观察消痰散结方改善肿瘤蛋白质代谢状况的作用,探索其作用机制。方法将40只小鼠随机分为消痰散结方组(A组)、化疗(喃氟啶)组(B组)、0.9%氯化钠溶液组(C组),对照组(D组),前三组进行S180肉瘤皮下接种造模;4周后,观察各组体重,血清生化检测总蛋白、白蛋白和C-反应蛋白(CRP)水平,免疫组化观察骨骼肌结构及骨骼肌NF-κB的表达。结果消痰散结方可升高荷瘤鼠血清总蛋白、白蛋白水平,下调血清CRP水平,对骨骼肌结构具有保护作用。结论消痰散结方可以改善肿瘤蛋白代谢状况,其可能途径是通过调节肝脏的蛋白代谢。

消痰散结方对MKN-45人胃癌裸鼠原位移植瘤微卫星不稳定的影响

目的探讨消痰散结方对MKN-45人胃癌裸鼠原位移植瘤微卫星不稳定的作用机制。方法采用MKN-45人胃癌细胞株建立裸鼠皮下瘤模型皮下传3代作为实验模型的瘤源,采用OB胶黏合法建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型。20只模型裸鼠分为模型组和中药组。中药组予消痰散结方干预6周后,测瘤质量,计算抑瘤率并检测5个微卫星不稳定位点(D17S250、D2S123、D5S346、Bat-25和Bat-26)。结果中药组的瘤质量明显低于模型组(P<0.01),其抑瘤率为40.84%。模型组的肿瘤组织中能扩增到5个微卫星位点,其中微卫星位点D2S123、D5S346出现某些延长和缩短。使用消痰散结方干预6周后,微卫星位点D2S123、D5S346的变异趋于稳定。结论消痰散结方能抑制MKN-45人胃癌裸鼠原位移植瘤的微卫星不稳定。

温中消痰方对寒邪干预S_180荷瘤鼠相关因素的影响

目的探讨温中消痰方对寒邪干预S180荷瘤小鼠的影响及对部分相关性指标进行研究。方法用温中消痰方治疗冰水干预的S180荷瘤小鼠,同时用消痰散结方组及化疗组作为对照,观察温中消痰方治疗后小鼠形态学、肛温的变化及各组肿瘤的生长速度、体积的变化,并用放免法检测小鼠血浆中血栓素B2(TXB2)的表达情况。结果温中消痰方组动物畏寒的形态学表现较其它组出现晚、历时短,肛温下降幅度较小;温中消痰方组、消痰散结方组、化疗组(FT-207)的抑瘤率分别为86.69%、75.29%、87.55%;温中消痰方组TXB2水平与消痰散结方组、化疗组相近,与寒模组比较差异显著(P<0.01),与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论温中消痰方对寒邪干预S180荷瘤小鼠肿瘤的生长有抑制作用,并下调TXB2的表达,其抑瘤率和FT-207、消痰散结方相近。

基于差异蛋白质组学解析消痰散结方对胃癌裸鼠模型的影响

目的基于差异蛋白质组学探讨消痰散结方干预胃癌裸鼠模型的部分效应机制。方法20只BALB/c-nu/nu裸鼠随机分为模型组和干预组,每组10只,采用皮下移植人胃癌MKN-45瘤块制备胃癌裸鼠动物模型。建模成功后,模型组、干预组分别灌胃给予生理盐水、消痰散结方,剂量均为0.4mL/(只·d),14d后全部处死取材。双向凝胶电泳(2-DE)分离肿瘤组织总蛋白,基质辅助激光解吸电离时间飞行串联质谱及数据库查询鉴定差异表达蛋白质。结果获得分辨率高和重复性、稳定性好的肿瘤组织2-DE图谱。经质谱鉴定的30个差异表达蛋白质中与细胞周期、增殖、分化与凋亡作用相关的4个蛋白分别是钙调蛋白、钙周期素结合蛋白、热休克蛋白27、热休克蛋白60。与模型组比较,在干预组中热休克蛋白27表达明显增高,热休克蛋白60、钙调蛋白、钙周期素结合蛋白表达显著降低。结论对细胞周期、增殖、分化与凋亡相关蛋白的调节可能是消痰散结方治疗胃癌的效应机制。

肿瘤自分泌相关因子TGFβRⅡ对MKN-45人胃癌调控作用的体外及体内研究

目的从肿瘤自分泌相关因子TGFβRⅡ探讨消痰散结方对MKN-45人胃癌调控作用。方法采用体外细胞培养和体内动物实验的方法,Weston blot法检测不同组别TGFβRⅡ的蛋白含量;real-time PCR法检测不同组别TGFβRⅡ的基因表达。结果体外实验中TGFβRⅡ的蛋白含量分别为空白对照组0.342±0.032、空白药物血清组0.359±0.043、消痰散结方血清组0.825±0.143、替加氟血清组0.969±0.077,四组间比较差异有统计学意义(P<0.01),消痰散结方组与空白对照组、空白药物血清组比较差异均有统计学意义(P<0.01);real-time PCR法检测体外实验中不同组别TGFβRⅡ的基因表达:空白药物血清组6.17±0.77、消痰散结方血清组6.64±0.97、替加氟血清组9.13±2.12,虽组间比较差异无统计学意义(P>0.05),但替加氟组与消痰散结方组均有上调其表达的趋势,替加氟的上调趋势更明显。体内实验中各组TGFβRⅡ的蛋白含量分别为空白对照组0.597±0.04、生理盐水组0.692±0.091、消痰散结方组0.639±0.099、替加氟化疗组0.465±0.064,四组间表达差异有统计学意义(P=0.035),进一步两两比较,替加氟组与生理盐水比较差异有统计学意义(P=0.042)。表明替加氟组不能上调体内实验瘤中TGFβRⅡ的蛋白表达,消痰散结方组与空白对照组比较虽然差异未见统计学意义,但有上调趋势。体内实验各组TGFβRⅡ的基因表达分别为空白模型组1.56±0.39、消痰散结方组3.30±1.17、替加氟化疗组6.44±3.50,不同组别TGFβRⅡ的基因表达差异有统计学意义(P<0.01),替加氟组表达高于模型组及消痰散结方组(P<0.05),消痰散结方组与模型组虽然表达差异无统计学意义,但有明显的上调趋势。结论消痰散结方对TGFβRⅡ蛋白和基因表达均有不同程度的上调作用,表明消痰散结方的治疗胃癌的作用可能是通过上调胃癌自分泌因子TGFβRⅡ发挥作用。