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老年心肌梗死患者术中冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂对微循环的影响
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作者 王辉 杨宁 +2 位作者 刘迎午 张荣春 李玉明 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期857-861,共5页
目的探讨血栓抽吸联合冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂对老年ST段抬高型心肌梗死患者急诊经皮冠状动脉介入治疗术中冠状动脉微循环及心功能的影响。方法回顾性选取2021年1月至2023年10月于天津市第三中心医院就诊的并行急... 目的探讨血栓抽吸联合冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂对老年ST段抬高型心肌梗死患者急诊经皮冠状动脉介入治疗术中冠状动脉微循环及心功能的影响。方法回顾性选取2021年1月至2023年10月于天津市第三中心医院就诊的并行急诊经皮冠状动脉介入治疗的老年ST段抬高型心肌梗死患者90例,根据经皮冠状动脉介入治疗术中介入策略不同分为单纯血栓抽吸组(抽吸组)46例和血栓抽吸联合冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂组(联合组)44例。比较2组一般临床资料,术后90 min ST段回落指数≥70%比例,术后即刻心肌梗死溶栓试验(thrombolysis in myocardial infarction,TIMI)血流分级,术后TIMI心肌灌注分级,校正的TIMI血流帧数,心脏超声指标以及住院期间主要不良心血管事件及出血事件。结果联合组术后ST段回落≥70%、术后即刻TIMI血流分级3级、术后TIMI心肌灌注分级3级比例显著高于抽吸组,校正的TIMI血流帧数显著低于抽吸组(P<0.05);抽吸组术后1周的左心室射血分数显著低于联合组[(52.5±6.2)%vs(58.3±6.4)%,P<0.05],联合组术后1周左心室舒张末期内径显著低于抽吸组[(44.1±3.9)mm vs(51.9±2.5)mm,P<0.05];联合组住院期间主要不良心血管事件发生率显著低于抽吸组(20.5%vs 37.0%,P<0.05)。结论在应用抽吸导管的基础上配合冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂可有效降低老年ST段抬高型心肌梗死患者冠状动脉内血栓负荷,改善心肌微循环灌注,降低住院期间主要不良心血管事件发生率且不增加出血风险。 展开更多
关键词 心肌梗死 注射 动脉内 纤溶酶原激活剂 重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂
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应用间接ELISA检测微小隐孢子虫抗体的研究 被引量:11
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作者 何宏轩 张西臣 +3 位作者 尹继刚 李建华 杨举 段明星 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第6期23-26,共4页
以在大肠埃希氏菌中表达的微小隐孢子虫 (Cryptosporidum parvum )子孢子表面抗原CP15为抗原 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗 ,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA。试验筛选出的最佳反应条件为 :大肠埃希氏菌CP1... 以在大肠埃希氏菌中表达的微小隐孢子虫 (Cryptosporidum parvum )子孢子表面抗原CP15为抗原 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗 ,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA。试验筛选出的最佳反应条件为 :大肠埃希氏菌CP15抗原包被量为 1μg/孔 ,用10 0mL/L的兔血清进行封闭 ,以正常大肠埃希氏菌裂解上清液稀释待检血清。试验结果表明 ,应用CP15重组蛋白作为诊断微小隐孢子虫抗体的抗原具有特异性高。 展开更多
关键词 微小隐孢子虫 抗体检测 间接ELISA 重组蛋白 隐孢子虫病 人畜共患病 CPl5蛋白
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抗HBc-ScFv基因复制缺陷型腺病毒载体的构建及其体外表达 被引量:2
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作者 汤正好 马会慧 +3 位作者 臧国庆 余永胜 李刚 姚集鲁 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第6期734-738,共5页
目的:构建表达抗乙型肝炎病毒核心蛋白单链抗体(抗HBc ScFv)的复制缺陷型腺病毒载体,并检测其能否在真核细胞中有效表达目的基因. 方法:采用DNA重组技术将特异性人源性抗卜HBc单链抗体基因克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,与5 型腺病... 目的:构建表达抗乙型肝炎病毒核心蛋白单链抗体(抗HBc ScFv)的复制缺陷型腺病毒载体,并检测其能否在真核细胞中有效表达目的基因. 方法:采用DNA重组技术将特异性人源性抗卜HBc单链抗体基因克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,与5 型腺病毒骨架质粒pAdeasy-1共转染B15183细菌,经细菌内同源重组产生携带抗HBc ScFv基因的重组腺病毒载体pAd—ScFV,经脂质体法转染293细胞,包装产生携带抗HBc scFv基因的重组腺病毒Ad—scFv,体外转染HepG2细胞,PCR和ELISA法检测目的基因及其表达. 结果:构建了表达抗HBc ScFv基因的复制缺陷型腺病毒,病毒滴度达4×1015 PFU/L,并能在真核细胞中有效表达目的基因. 结论:成功构建表达抗HBc ScFv的复制缺陷型腺病毒载体,为进一步开展抗HBc ScFv在抗HBV基因治疗中的作用研究提供实验基础. 展开更多
关键词 缺陷型腺病毒载体 体外表达 基因复制 人源性抗HBc单链抗体 ScFv基因 复制缺陷型腺病毒 ELISA法检测 DNA重组技术 重组腺病毒载体 HepG2细胞 病毒核心蛋白 目的基因 构建表达 真核细胞 293细胞 乙型肝炎 穿梭质粒 基因克隆
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日本血吸虫病人群获得性免疫与再感染──Ⅱ.117名流行区居民外周血单核细胞增生研究 被引量:2
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作者 李毅 G.J.Waine +7 位作者 张新跃 A.G.P.Ross 黎红燕 李岳生 杨文 何永康 彭先平 D.P.McManus 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1999年第5期270-274,共5页
目的了解日本血吸虫病疫区人群外周血单核细胞在一组特异性的重组基因候选疫苗分子刺激下的增生反应。方法选择洞庭湖日本血吸虫病洲岛型疫区两个岛(青山和严家山)117名居民(实验组)和来自非疫区的15名居民(对照组)作为研究对象... 目的了解日本血吸虫病疫区人群外周血单核细胞在一组特异性的重组基因候选疫苗分子刺激下的增生反应。方法选择洞庭湖日本血吸虫病洲岛型疫区两个岛(青山和严家山)117名居民(实验组)和来自非疫区的15名居民(对照组)作为研究对象,观察其外周血单核细胞在体外培养的条件下用日本血吸虫5种疫苗候选抗原的重组基因分子及可溶性成虫抗原刺激时的增生反应,以评价这些候选抗原对细胞的刺激效应。结果其中副肌球蛋白和28kDa谷胱甘肽-S-转移酶(GST)分别对38.5%和42.5%的研究对象有增殖效应(刺激指数≥3.0),与可溶性成虫抗原的刺激水平(51.3%)相当。其它3种重组抗原(脂肪酸结合蛋白、22kDa表膜相关蛋白和3-磷酸甘油醛脱氨酶)仅对3%~8%的对象有刺激作用。严家山和青山岛上分别有90.0%和42.1%的对象的单核细胞对成虫抗原有增殖应答,其差异极显著(X2=16.88,P<0.01);分别有77.3%和34.7%对象的单核细胞对GST存在增殖应答(X2=13.9,P<0.05);对副肌球蛋白和脂肪酸结合蛋白亦存在类似倾向,但无显著性差异。结论重组基因抗原即副肌球蛋白和GST28能诱导疫区人群中38.0/~42.0%的个体产生外周血单核细胞(PBMC)增殖反应,其频率与成虫抗原诱导的相当。来自不同? 展开更多
关键词 日本血吸虫病 人类免疫反应 细胞增殖 重组抗原
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一种挑取重组子克隆的简易方法 被引量:5
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作者 蓝海燕 田颖川 《新疆农业大学学报》 CAS 1999年第3期197-199,共3页
本研究应用菌落PCR 方法挑取重组子克隆,简单易行,可减少提取质粒的工作量,使繁重的实验工作得以简化。
关键词 重组子 克隆 PCR 菌落PCR 简易方法
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维生素D对2型糖尿病肾病大鼠肾脏中转化生长因子-β_1、重组人胶原蛋白-1和结缔组织生长因子表达的影响 被引量:4
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作者 田燕燕 杨烨 +4 位作者 张园园 俞瑞 肖拉提.依马木明 朱佳 朱筠 《中国医药导报》 CAS 2014年第17期8-12,共5页
目的探讨维生素D对糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)和重组人胶原蛋白-1(collagen-1)表达的影响,进一步探讨以上3个基因在糖尿病肾病中相互作用以及维生素D对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法将54... 目的探讨维生素D对糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)和重组人胶原蛋白-1(collagen-1)表达的影响,进一步探讨以上3个基因在糖尿病肾病中相互作用以及维生素D对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法将54只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(18只)、模型组(18只)、治疗组(18只)。其中,模型组及治疗组大鼠均行糖尿病肾病造模,饲以高脂高糖饲料6周,空腹12 h后给予小剂量链腺佐菌素腹腔注射。注射1周后,不同日期测随机血糖(GLU)3次,若3次GLU均≥16.7 mmol/L为2型糖尿病大鼠。2型糖尿病成模后的大鼠在6周和7周时用尿微量蛋白试纸连续测大鼠晨尿3次以上,若为阳性,则为2型糖尿病肾病的大鼠。治疗组给予骨化三醇溶于0.05 mL花生油以0.03μg/(kg·d)灌胃37 d,模型组给予花生油灌胃37 d。处死大鼠,取肾脏,采用HE、电镜技术观测肾脏组织的形态学变化,采用实时荧光定量PCR技术(RTPCR)评价肾脏TGF-β1、collagen-1及CTGF基因表达的变化。结果①模型组TGF-β1、collagen-1及CTGF基因表达高于正常对照组(P<0.05),治疗组TGF-β1、collagen-1及CTGF基因表达明显低于模型组(P<0.05)。②采用HE、电镜技术可以看出治疗组病理组织形态学,尤其是组织结构完整性明显优于模型组。结论糖尿病肾病大鼠中,维生素D可以通过下调TGF-β1、collagen-1及CTGF基因的表达,对糖尿病肾病起保护作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 维生素D 转化生长因子1 结缔组织生长因子 重组人胶原蛋白-1
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抗虫植物基因工程研究进展 被引量:57
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作者 朱新生 朱玉贤 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第3期282-288,共7页
虫害是造成农业减产的主要原因之一。据不完全统计,全世界每年因虫害引起的作物减产达总产量的15%,损失高达数千亿美元。在我国,因虫害水稻减产在lO%以上;小麦减产近20%;
关键词 抗虫植物 基因工程 抗虫育种 作物育种
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重组干扰素治疗慢性丙型肝炎的临床及肝组织学疗效评价 被引量:5
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作者 江元森 彭文伟 +2 位作者 姚集鲁 陆玮伦 吕凌 《中山医科大学学报》 CSCD 1994年第4期287-291,共5页
报告84例慢性丙型肝炎(CHC)患者,通过临床、血清学、肝组织学、分子生物学和免疫组织化学等方法,观察应用重组α-干扰素加传统护肝治疗的效果,疗程24周,并与单用传统护肝治疗的对照组治疗前后各项指标变化比较。疗程结束... 报告84例慢性丙型肝炎(CHC)患者,通过临床、血清学、肝组织学、分子生物学和免疫组织化学等方法,观察应用重组α-干扰素加传统护肝治疗的效果,疗程24周,并与单用传统护肝治疗的对照组治疗前后各项指标变化比较。疗程结束时结果显示:治疗组64例中,血清ALT复常率为70.3%,HCV-RNA阴转率为67.2%,肝组织学好转率为65.6%,肝组织内HCV-RNA阴转率为51.5%,肝组织内HCV-Ag抗原的免疫组化检出率从治疗前的15.6%减至治疗后的6.3%,分别显著高于对照组(P<0.05)。疗程结束后随访3~6个月,测定HCV-RNA并动态观察血清ALT的变化,部分病人有复发,但治疗组ALT复常率及HCV-RNA阴转率仍达70.0%。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 免疫组织化学 干扰素
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蛋白酶体β5亚单位基因真核表达载体的构建 被引量:1
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作者 张铁英 柳夏林 +1 位作者 吴明星 刘奕志 《国际眼科杂志》 CAS 2010年第6期1047-1048,共2页
目的:构建蛋白酶体亚单位β5基因真核表达质粒。方法:从人晶状体上皮细胞株SRA01/04中提取总RNA,经RT-PCR扩增获得β5亚单位的全长cDNA片段,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1上。结果:RT-PCR法扩增出约792bp的β5亚单位基因全部编码序列... 目的:构建蛋白酶体亚单位β5基因真核表达质粒。方法:从人晶状体上皮细胞株SRA01/04中提取总RNA,经RT-PCR扩增获得β5亚单位的全长cDNA片段,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1上。结果:RT-PCR法扩增出约792bp的β5亚单位基因全部编码序列的片段。酶切鉴定和测序分析证实所插入的β5亚单位的基因序列完全正确。结论:成功构建了蛋白酶体β5亚单位基因真核表达重组质粒。 展开更多
关键词 β5亚单位 蛋白酶体 基因重组
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Use of agents stimulating erythropoiesis in digestive diseases 被引量:2
10
作者 Rosario Moreno López Beatriz Sicilia Aladrén Fernando Gomollón García 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2009年第37期4675-4685,共11页
Anemia is the most common complication of inflammatory bowel disease (IBD). Control and inadequate treatment leads to a worse quality of life and increased morbidity and hospitalization. Blood loss, and to a lesser ex... Anemia is the most common complication of inflammatory bowel disease (IBD). Control and inadequate treatment leads to a worse quality of life and increased morbidity and hospitalization. Blood loss, and to a lesser extent, malabsorption of iron are the main causes of iron def iciency in IBD. There is also a variable component of anemia related to chronic inflammation. The anemia of chronic renal failure has been treated for many years with recombinant human erythropoietin (rHuEPO), which significantly improves quality of life and survival. Subsequently, rHuEPO has been used progressively in other conditions that occur with anemia of chronic processes such as cancer, rheumatoid arthritis or IBD, and anemia associated with the treatment of hepatitis C virus. Erythropoietic agents complete the range of available therapeutic options for treatment of anemia associated with IBD, which begins by treating the basis of the inflammatory disease, along with intravenous iron therapy as f irst choice. In cases of resistance to treatment with iron, combined therapy with erythropoietic agents aims to achieve near-normal levels of hemoglobin/hematocrit (11-12 g/dL). New formulations of intravenous iron (iron carboxymaltose) and the new generation of erythropoietic agents (darbepoetin and continuous erythropoietin receptor activator) will allow better dosing with the same eff icacy and safety. 展开更多
关键词 Erythropoiesis-stimulating agents recom-binant human erythropoietin DARBEPOETIN Continuous erythropoietin receptor activator Inflammatory bowel disease ANEMIA
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抗阿尔茨海默病重组真核表达载体的构建
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作者 何颖 黄力 +3 位作者 章亚男 黎怀星 陈蕊雯 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期55-57,共3页
目的 :将淀粉样蛋白 N端的抗原表位基因以 4种不同的组合与小鼠 Ig G重链区基因融合 ,构建抗阿尔茨海默病的重组质粒。方法 :通过 RT- PCR技术从小鼠脾组织中克隆 Ig G重链区 c DNA,将柔性接头与抗原表位基因序列设计在 5′端引物中 ,... 目的 :将淀粉样蛋白 N端的抗原表位基因以 4种不同的组合与小鼠 Ig G重链区基因融合 ,构建抗阿尔茨海默病的重组质粒。方法 :通过 RT- PCR技术从小鼠脾组织中克隆 Ig G重链区 c DNA,将柔性接头与抗原表位基因序列设计在 5′端引物中 ,然后以克隆出的小鼠 Ig G重链区 c DNA为模板 ,用 PCR法克隆出由柔性接头将抗原表位和 Ig G重链区基因融合在一起的序列 ,并插入到 p VAX质粒载体中。结果 :扩增出来的 4种不同组合的抗原表位基因和 Ig G重链区基因融合序列大小分别为 999、1 0 2 0、1 0 0 5、1 0 2 6 bp,均与 Gen Bank上登录的相符 ;p VAX重组质粒酶切结果表明融合基因正确地插入到 p VAX载体中 ,全自动测序亦显示抗原表位基因和 Ig G重链区基因为所需基因 ,接头序列也完全正确。结论 :成功构建了抗阿尔茨海默病的 4种表位基因 - Ig G重链区融合表达的重组质粒 。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 重组真核表达载体 抗原 基因序列 基因表达
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表达鸡新城疫病毒HN蛋白的生物学活性
12
作者 刘惠莉 曹殿军 +2 位作者 刘洪云 胡建华 孙凤萍 《上海农业学报》 CSCD 1999年第4期51-55,共5页
以重组NDV HN 基因禽痘病毒(rFPV)为研究对象,观察重组病毒在鸡胚成纤维细胞上表达的动态变化,并对表达蛋白生物学活性进行了检测。结果表明:重组病毒感染鸡胚成纤维细胞12 h 即可检测到表达蛋白,72 h 左右表达量... 以重组NDV HN 基因禽痘病毒(rFPV)为研究对象,观察重组病毒在鸡胚成纤维细胞上表达的动态变化,并对表达蛋白生物学活性进行了检测。结果表明:重组病毒感染鸡胚成纤维细胞12 h 即可检测到表达蛋白,72 h 左右表达量明显增多;利用Western blot可检测到68 kD和74 kD两种分子量的蛋白,与NDV HN蛋白糖基化和非糖基化蛋白形式的分子量一致。表达蛋白具有红细胞吸附活性和神经氨酸酶活性,该活性可被NDV HN单抗所抑制。由此进一步证明重组NDV HN表达蛋白具有与天然NDV HN 蛋白相似的生物学活性,可作为研制NDV 生物工程疫苗目的基因。 展开更多
关键词 新城疫病毒 HN蛋白 生物学活性
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重组人生长激素治疗大面积烧伤的临床评价
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作者 马印东 贾军 +2 位作者 宋国栋 辛乃军 黄国宝 《潍坊医学院学报》 2005年第4期254-256,共3页
目的探讨重组人生长激素(rhGH)治疗大面积烧伤的有效性和安全性。方法将伤后3d内入院的大面积烧伤患者随机分为治疗组和对照组,每组12例。治疗组从伤后第3天开始每日给予rhGH0.3IU/kg皮下注射,持续14d。对照组则每日给予安慰剂。治疗期... 目的探讨重组人生长激素(rhGH)治疗大面积烧伤的有效性和安全性。方法将伤后3d内入院的大面积烧伤患者随机分为治疗组和对照组,每组12例。治疗组从伤后第3天开始每日给予rhGH0.3IU/kg皮下注射,持续14d。对照组则每日给予安慰剂。治疗期间定期检测患者的一般情况、蛋白质代谢变化、肿瘤坏死因子(TNF-α),C反应蛋白(CRP)、血糖及尿钾、钠、氯,并进行组间比较。结果治疗组血清白蛋白、前白蛋白及转铁蛋白逐渐升高;TNF-α和C反应蛋白明显下降;血糖升高;尿钾、钠、氯的排出量减少。结论rhGH能有效促进蛋白质合成,提高机体免疫功能,缩短住院时间,但要正确选择用药时机和剂量。 展开更多
关键词 烧伤 生长激素(人) 肿瘤坏死因子 C反应蛋白
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rL-IL29对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响及相关机制 被引量:1
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作者 杭敏 严玉兰 +2 位作者 邵小美 张日婷 步雪峰 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2018年第2期99-103,共5页
目的:探讨表达IL-29的重组新城疫病毒LoSota株(recombinant Newcastle disease virus LoSota line expressing IL-29,rL-IL29)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制。方法:体外培养肺腺癌A549细胞,以rL-IL29感染的A549细胞为... 目的:探讨表达IL-29的重组新城疫病毒LoSota株(recombinant Newcastle disease virus LoSota line expressing IL-29,rL-IL29)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制。方法:体外培养肺腺癌A549细胞,以rL-IL29感染的A549细胞为rL-IL29组,LoSota株新城疫病毒(NDVL)感染的A549细胞为NDVL组及PBS处理的A549细胞为对照组。蛋白质印迹法检测各组A549细胞中NDV HN、IL-29蛋白的表达;CCK8法、划痕试验及Transwell侵袭实验检测rL-IL29对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测细胞E-钙黏蛋白、MMP2、波形蛋白及AKT/NF-κB通路相关蛋白的表达水平。结果:A549细胞感染rL-IL29后,NDV HN及IL-29蛋白均稳定表达,且明显高于NDVL组及对照组;rL-IL29及NDVL感染A549细胞后能够抑制细胞的增殖、迁移及侵袭,且rL-IL29作用更强;与对照组及NDVL组比较,rL-IL29感染后A549细胞中E-钙黏蛋白表达量明显增加,波形蛋白、MMP2(66 kDa/72 kDa)、p-AKT及P65蛋白表达明显减弱(均P<0.05)。结论:rL-IL29可能通过阻碍AKT/NF-κB信号通路上调E-钙黏蛋白表达和下调波形蛋白、MMP2蛋白表达,从而抑制肺腺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒 白细胞介素-29 肺腺癌 迁移 侵袭
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人淋巴毒素基因在中国仓鼠细胞中表达 被引量:1
15
作者 刘军涛 李昌本 +2 位作者 倪铁华 邹益民 赵寿元 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1991年第3期208-213,共6页
将人淋巴毒素(HuLT)基因插入哺乳动物细胞表达载体质粒p91023,经磷酸钙-DNA共沉淀法转入中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷型(CHO-DHFRˉ)细胞,获得了DIIFR+细胞克隆。RNA点渍杂交分析和MTT染料还原测定淋巴毒素的生物活性,均证明HuLT基因在DH... 将人淋巴毒素(HuLT)基因插入哺乳动物细胞表达载体质粒p91023,经磷酸钙-DNA共沉淀法转入中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷型(CHO-DHFRˉ)细胞,获得了DIIFR+细胞克隆。RNA点渍杂交分析和MTT染料还原测定淋巴毒素的生物活性,均证明HuLT基因在DHFR+细胞里巳被转录和转译,并被分泌到细胞外。其杀伤靶细胞——L929细胞的生物活性不低于每毫升培养液200单位。 展开更多
关键词 淋巴毒素基因 细胞毒活性 基因表达
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基于重组蛛丝蛋白的多层级瞬态衍射光学传感元件 被引量:3
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作者 高子涵 蔡晓晴 +1 位作者 孙龙 周志涛 《微纳电子技术》 北大核心 2019年第10期776-782,共7页
针对传统衍射光学元件(DOE)与MEMS加工工艺难以兼容、传感应用方面灵敏度低的问题,提出了一种基于基因重组蛛丝蛋白材料、利用热纳米压印工艺制成的多层级瞬态可溶DOE。重组蛛丝蛋白性能可按需定制,重复性高,具有极佳的生物相容性,高精... 针对传统衍射光学元件(DOE)与MEMS加工工艺难以兼容、传感应用方面灵敏度低的问题,提出了一种基于基因重组蛛丝蛋白材料、利用热纳米压印工艺制成的多层级瞬态可溶DOE。重组蛛丝蛋白性能可按需定制,重复性高,具有极佳的生物相容性,高精度、高效率、低成本的纳米压印工艺可实现DOE的快速制备,同时控制其降解速率。纳米压印工艺制备的重组蛛丝蛋白DOE最小特征尺寸可达2μm,衍射图案强度为杂散光强度的12倍。随着元件的降解,DOE的衍射图案效率降低,说明了DOE所携带信息随其可控溶解而溶毁,从而可以实现信息的多层级溶毁及生物传感领域的多层级药物实时释放监测。 展开更多
关键词 重组蛛丝蛋白 衍射光学元件(DOE) 纳米压印 多层级 瞬态器件
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三结构域重组纤连蛋白多肽在大肠杆菌中表达及其产物的纯化与鉴定
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作者 李明才 冯作化 +1 位作者 李东 张桂梅 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第5期381-384,共4页
在大肠杆菌中表达了一种抗肿瘤转移多肽——人纤连蛋白(FN) 的CellI-Hep Ⅱ-CellⅡ三结构域重组多肽(CH82), 表达效率达21% 。在低温 (22 ℃) 培养表达时, CH82大部分为可溶性产物, 经DEAE... 在大肠杆菌中表达了一种抗肿瘤转移多肽——人纤连蛋白(FN) 的CellI-Hep Ⅱ-CellⅡ三结构域重组多肽(CH82), 表达效率达21% 。在低温 (22 ℃) 培养表达时, CH82大部分为可溶性产物, 经DEAE-52 层析及Heparin-agarose亲和层析可得到纯品; 在高温(37 ℃) 培养表达时, CH82 主要以包涵体形式出现, 经尿素变性与复性处理后,可通过Heparin-agarose 亲和层析得到纯品。所得纯品均具有结合肝素和结合细胞的功能, 且结合细胞的能力比双结构域FN更强, 展开更多
关键词 纤连蛋白 重组多肽 表达 蛋白纯化 肿瘤转移
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胸部创伤合并心功能和心肌细胞损害的早期监测与临床观察 被引量:1
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作者 洪生 杨文东 《临床医药实践》 2014年第5期334-337,共4页
目的:探讨血清N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)和心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)在胸部创伤所致心肌挫伤的早期监测价值,并观察重组人生长激素(rhGH)的治疗效果。方法:选择82例胸部创伤合并心肌挫伤患者(挫伤组)和50例健康人(对照组)为研究... 目的:探讨血清N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)和心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)在胸部创伤所致心肌挫伤的早期监测价值,并观察重组人生长激素(rhGH)的治疗效果。方法:选择82例胸部创伤合并心肌挫伤患者(挫伤组)和50例健康人(对照组)为研究对象,挫伤组采用rhGH治疗。血清NT-proBNP检测采用电化学发光免疫分析(ECLIA)法,血清h-FABP检测采用双抗体夹心酶联免疫(ELISA)一步法。结果:治疗前血清h-FABP阳性率(41.4%)显著高于NT-proBNP(29.8%)及心电图(ECG)(17.7%)(P<0.01)。治疗前,胸部创伤合并心肌挫伤患者血清NT-proBNP和h-FABP水平分别与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗后,两者水平均显著低于治疗前(P<0.01),与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。胸部创伤合并心肌挫伤患者血清NT-proBNP与h-FABP呈显著正相关(r=0.719,P<0.01),相关性良好。胸部创伤合并心肌挫伤的82例患者经rhGH治疗后,血清NT-proBNP和h-FABP水平达正常,ECG也无异常表现,无一例死亡病例。结论:rhGH对胸部创伤合并心肌挫伤具有临床治疗作用,血清NT-proBNP和h-FABP的联合检测可早期诊断胸部创伤合并心功能及心肌细胞损害,也可观察临床疗效。 展开更多
关键词 胸部创伤 N末端B型钠尿肽原 心脏型脂肪酸结合蛋白 重组人生长激素 早期诊断 临床疗效
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重组水蛭素与喉癌细胞Hep-2中PAR1、VEGF、MMP-2表达的相关性研究 被引量:9
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作者 杨笑染 刘为民 +5 位作者 庞康 马涛 曲琳 刘铭芳 李江波 陶宝鸿 《宁夏医学杂志》 CAS 2016年第12期1120-1122,共3页
目的检测喉癌及癌旁组织中蛋白酶活化受体1(PAR-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白-2(MMP-2)的表达,及重组水蛭素(Recombinant hirudin)对喉癌细胞Hep-2中PAR-1、VEGF、MMP-2表达的影响,探讨PAR-1、VEGF、MMP-2在喉癌侵袭及转... 目的检测喉癌及癌旁组织中蛋白酶活化受体1(PAR-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白-2(MMP-2)的表达,及重组水蛭素(Recombinant hirudin)对喉癌细胞Hep-2中PAR-1、VEGF、MMP-2表达的影响,探讨PAR-1、VEGF、MMP-2在喉癌侵袭及转移中的作用及重组水蛭素的抗肿瘤机制。方法采用免疫组化方法检测喉癌组织及癌旁组织中PAR-1、VEGF、MMP-2的表达;用免疫细胞化学方法检测重组水蛭素共培养和不加入重组水蛭素培养的喉癌细胞中PAR-1、VEGF、MMP-2的表达。结果 PAR-1、VEGF、MMP-2在喉癌组织及有淋巴结转移的癌旁组织中呈高表达,差异有统计学意义;PAR-1、VEGF、MMP-2在重组水蛭素共培养和不加入重组水蛭素培养的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论证实PAR-1、VEGF、MMP-2参与了喉癌的侵袭及转移;重组水蛭素的抗肿瘤及抑制肿瘤转移作用可能与其降低喉癌细胞中PAR-1、VEGF、MMP-2表达有关。 展开更多
关键词 蛋白酶活化受体-1 血管内皮生长因子 基质金属蛋白-2 喉癌 重组水蛭素
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大鼠β-防御素2真核表达载体构建及转染大鼠角膜上皮细胞的研究
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作者 但婧 宋秀胜 +1 位作者 杨燕宁 李霞 《国际眼科杂志》 CAS 2017年第3期422-426,共5页
目的:应用基因工程技术构建含大鼠β-防御素2(rat beta defensin 2,rBD-2)目的基因的真核重组质粒,通过脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,检测目的基因在转染细胞中的表达,探讨应用该载体获得重组rBD-2在眼表细胞中表达的可行性,并为进一... 目的:应用基因工程技术构建含大鼠β-防御素2(rat beta defensin 2,rBD-2)目的基因的真核重组质粒,通过脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,检测目的基因在转染细胞中的表达,探讨应用该载体获得重组rBD-2在眼表细胞中表达的可行性,并为进一步研究rBD-2的体内外抗微生物活性提供实验基础,以期为感染性角膜病防治提供新方法。方法:将采用PAS(PCR-based Accurate Synthesis)的方法合成rBD-2 DNA片段连接到真核表达载体pI RES2-ZsGreen1的XhoⅠ与BamHⅠ酶切位点之间,构建p IRES2-ZsGreen1-rBD-2真核重组表达载体,重组质粒转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,卡那霉素筛选出阳性克隆子,经酶切、测序鉴定重组载体构建成功后,采用脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,此处实验分为三组即重组载体p IRES2-ZsGreen1-rBD-2转染的大鼠角膜上皮细胞组、未转染的空细胞组以及空载体p IRES2-ZsGreen1所转染的大鼠角膜上皮细胞组,在倒置荧光显微镜下观察细胞转染情况,最后经实时荧光定量RT-PCR相对定量法检测各组转染细胞中rBD-2基因mRNA的表达差异。结果:成功构建p IRES2-ZsGreen1-rBD-2真核重组质粒,应用实时荧光定量RT-PCR相对定量法检测到重组质粒p IRES2-ZsGreen1-rBD-2转染组的大鼠角膜上皮细胞中rBD-2基因的mRNA表达水平明显多于另两组。结论:应用基因工程技术构建的rBD-2真核表达载体p IRES2-ZsGreen1-rBD-2,通过脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,能够使外源rBD-2基因在大鼠角膜上皮细胞中被转录成mRNA。 展开更多
关键词 大鼠β-防御素2 真核表达载体 重组质粒 大鼠角膜上皮细胞
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