-
题名重组hKGF2原核表达载体的构建及其蛋白质的纯化
被引量:2
- 1
-
-
作者
余德荣
游力
王郡甫
许晓群
赵跃然
高春义
-
机构
山东省医学科学院基础医学研究所山东省肿瘤免疫与基因工程重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室
山东大学山东省立医院生殖医学研究中心
-
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期9-13,共5页
-
基金
国家自然科学基金资助项目(30371304)
-
文摘
角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景。为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取成熟hKGF2cDNA,进行T-A克隆;经测序后,构建pET-30a(+)-hKGF2重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达。镍亲和层析(Ni+-NTA)一步法纯化后获得纯度达95%以上的目的蛋白,生物活性研究表明,重组hKGF2能有效促进人胚胎肾上皮细胞的增殖。
-
关键词
重组hkgf2
克隆
原核表达
镍亲和层析
-
Keywords
recombinant hkgf2 clone prokaryotic expression ni affinity chromatography
-
分类号
Q789
[生物学—分子生物学]
-