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REGULATORY EFFECTS OF HUMAN RECOMBINANT IL-6 ON NATURAL KILLER CELL ACTIVITY OF HUMAN FETAL SPLEENS
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作者 路力生 崔正言 田志刚 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1991年第1期38-41,共4页
In the present study it was proved first that human recombinant interleukin-6(HrIL-6) significantly augmented natural killer(NK) cell activity derived from human fetal spleens against K562 target cells in a 4 hours 51... In the present study it was proved first that human recombinant interleukin-6(HrIL-6) significantly augmented natural killer(NK) cell activity derived from human fetal spleens against K562 target cells in a 4 hours 51Cr release assay. The enhancement of NK activity with 24 hours preincubation in HrlL-6 was dose-dependent, and significantly higher than that of fresh NK cells and controls cultured with RPMI-1640 medium alone (P<0.001). We also found that IL-6 was able to augment NK activity from different fetal spleens at 20 to 40 weeks of gestation (up to 2.24 to 2.78 times), and no difference of NK activity of fetal splenocytes treated by HrIL-6 was observed between different fetal age (32.3% to 45.4%, P>0.05). Furthermore, IL-6-augmented NK activity of fetal splenocytes was very similar to adult levels (P>0.05). These finding strongly indicated that IL-6 plays an important role in the development of NK cell function during the gestational period, suggesting that IL-6 may be of importance in the regulation of host defense mechanisms against malignancies and viral diseases. 展开更多
关键词 IL REGULATORY EFFECTS OF human recombinant il-6 ON NATURAL KILLER CELL ACTIVITY OF human FETAL SPLEENS
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重组人IL-21对人外周血淋巴细胞的活化作用 被引量:1
2
作者 刘勇 陈军浩 吴超 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期544-546,共3页
目的观察重组人白细胞介素21(IL-21)对健康人外周血淋巴细胞的活化作用,检测IL-21对外周血B细胞表面抗原提呈相关分子的表达及对淋巴细胞亚群的影响。方法重组人IL-21与健康人外周血单个核细胞(PBMC)共培养48h,用流式细胞技术检测T、B... 目的观察重组人白细胞介素21(IL-21)对健康人外周血淋巴细胞的活化作用,检测IL-21对外周血B细胞表面抗原提呈相关分子的表达及对淋巴细胞亚群的影响。方法重组人IL-21与健康人外周血单个核细胞(PBMC)共培养48h,用流式细胞技术检测T、B淋巴细胞表面CD69的表达,并与未加IL-21组进行比较;同时用流式细胞术检测B细胞表面主要组织相容性复合体Ⅰ及Ⅱ类分子(MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ)、CD80及CD86的表达量。细胞培养96h后检测淋巴细胞亚群的变化。结果重组人IL-21能显著提高T、B淋巴细胞表面CD69的表达量,与未加IL-21组相比差异有统计学意义(P<0.05),但却不能提高B细胞表面MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80及CD86的表达量。经IL-21刺激后人淋巴细胞亚群中自然杀伤细胞(NK)细胞及自然杀伤T细胞(NKT)细胞比例明显增加。结论重组人IL-21可以活化人的T、B淋巴细胞,同时IL-21刺激后人淋巴细胞亚群中自然杀伤细胞(NK)细胞及NKT细胞比例明显增加。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素21 淋巴细胞
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RhIL-21对NK-92MI细胞生物学活性的影响
3
作者 郑瑞 陈葆国 +3 位作者 颜卫华 李伯利 章卫国 干灵红 《医学研究杂志》 2012年第3期120-124,共5页
目的探讨rhIL-21对NK-92MI细胞免疫功能的影响。方法以不同浓度(25~100ng/ml)的rhIL-21培养NK-92MI细胞24~72h,观察NK-92MI细胞的增殖。以50ng/ml的rhIL-21处理NK-92MI不同时间后,FACS检测NK-92MI细胞的凋亡,NK-92MI细胞表面NKG2D受... 目的探讨rhIL-21对NK-92MI细胞免疫功能的影响。方法以不同浓度(25~100ng/ml)的rhIL-21培养NK-92MI细胞24~72h,观察NK-92MI细胞的增殖。以50ng/ml的rhIL-21处理NK-92MI不同时间后,FACS检测NK-92MI细胞的凋亡,NK-92MI细胞表面NKG2D受体及胞内颗粒酶-B蛋白的表达;细胞杀伤试剂盒检测NK-92MI细胞对靶细胞K-562的细胞毒效应;RT-PCR检测NK-92MI受体NKG2D,效应分子颗粒酶-B、穿孔素及细胞因子IFN-γ基因mRNA的表达;ELISA检测其分泌IFN-γ的水平。结果 RhIL-21虽能抑制NK-92 MI细胞的增殖(P<0.05),但不会促进细胞的凋亡(P<0.05)。RhIL-21能促进NK-92MI细胞穿孔素、IFN-γ、颗粒酶-B、NKG2D受体基因及相应蛋白质的表达上调(P<0.05)。rhIL-21预处理组NK-92MI对K-562细胞的细胞毒效应也明显增强(P<0.05)。结论 RhIL-21能增强NK-92 MI细胞的细胞毒效应,IL-21在肿瘤的免疫治疗中有潜在临床应用价值。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素-21 NK-92MI细胞 干扰素-Γ NKG2D 颗粒酶 穿孔素
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重组人IL-21基因对肝癌细胞的生长抑制作用的研究
4
作者 饶桂荣 朱梅 +4 位作者 杨妙青 杨富强 王洪敏 吴庆洲 陈光明 《华南国防医学杂志》 CAS 2011年第5期367-369,共3页
目的研究重组人白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)基因,对肝癌细胞HepG2的生长的影响。方法采用电击转染技术将质粒pIL21转染到肝癌HepG2细胞,继续培养24 h、48 h、72 h,按四甲基偶氮唑蓝比色法(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)检... 目的研究重组人白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)基因,对肝癌细胞HepG2的生长的影响。方法采用电击转染技术将质粒pIL21转染到肝癌HepG2细胞,继续培养24 h、48 h、72 h,按四甲基偶氮唑蓝比色法(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞生长增殖情况,反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reac-tion,RT-PCR)检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达情况,酶联免疫吸附剂测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测48h的IL-21的表达水平,同时设空白和阴性对照。结果质粒pIL21转染HepG2细胞后继续培养24 h,细胞生长出现抑制现象,48、72 h后出现显著抑制现象。在48 h检测到VEGF基因和IL-21蛋白的低表达。结论重组人IL-21基因可显著抑制肝癌细胞的生长和增殖,这可能与调控VEGF基因的表达相关,提示IL-21具有显著的抗肿瘤活性等生物学功能。 展开更多
关键词 重组质粒 人白细胞介素21 电转染 生长抑制
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联合检测血清FGF-21、RBP4、SF水平在2型糖尿病评估中的价值研究 被引量:10
5
作者 周俊辉 孙力 孙家忠 《标记免疫分析与临床》 CAS 2019年第3期438-442,共5页
目的探究并分析联合检测血清人成纤维细胞生长因21 (FGF-21)、重组人视黄醇结合蛋白-4(recombinant human retinol binding protein-4,RBP4)、血清铁蛋白(serum ferritin,SF)水平在2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)评估中的价值。方法选... 目的探究并分析联合检测血清人成纤维细胞生长因21 (FGF-21)、重组人视黄醇结合蛋白-4(recombinant human retinol binding protein-4,RBP4)、血清铁蛋白(serum ferritin,SF)水平在2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)评估中的价值。方法选取2016年6月至2017年6月我院收治的2型糖尿病患者48例,作为T2DM组;同时选取34例糖耐量异常(impaired glucose tolerance,IGT)患者,作为IGT组,另选取我院进行体检的健康志愿者30例,作为对照组。观察并记录各组受试者FGF-21、RBP4、SF水平,比较其在不同组之间的表达情况。分析并比较单独FGF-21、RBP4、SF以及联合FGF-21、RBP4、SF检测对2型糖尿病的评估效果。采用ROC曲线分析各方法的评估效率。结果 T2DM组血清FGF-21、RBP4、SF水平显著高于IGT组和健康人群(P <0.05),而IGT组患者FGF-21、RBP4、SF水平显著高于健康人群(P<0. 05);用单独的FGF-21、RBP4、SF检测进行评估,特异性差异具有统计学意义(P <0.05),其中,RBP4评估的特异性显著高于FGF-21、SF的评估特异性(P<0.05);对于平行联合检测,FGF-21+RBP4+SF评估的灵敏度、阴性预测值均显著高于FGF-21+SF、RBP4+SF(P<0.05);对于系列联合检测,FGF-21+RBP4+SF评估的特异性显著高于FGF-21+SF(P<0.05);采用FGF-21+RBP4+SF评估时,系列联合检测的灵敏度显著低于平行联合检测(P <0.05),特异性显著高于平行联合检测(P<0.05);FGF-21+SF、RBP4+SF及FGF-21+RBP4+SF评估T2DM,平行联合检测ROC曲线下面积分别为0.761、0.763和0.915,系列联合检测ROC曲线下面积为0.750、0.721和0.904,FGF-21+RBP4+SF评估的ROC曲线下面积显著高于FGF-21+SF、RBP4+SF(P<0.05),具有统计学意义。结论 FGF-21+RBP4+SF联合检测评估效率显著高于各单项检查,能有效提高糖尿病评估灵敏度、特异性及准确率,值得临床推广。 展开更多
关键词 血清人成纤维细胞生长因21 重组人视黄醇结合蛋白-4 血清铁蛋白 2型糖尿病
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不同理化因素对重组人成纤维细胞生长因子21蛋白纯度的影响
6
作者 王长文 刘敏 +4 位作者 刘磊 姜勇 张磊 李艳 王会岩 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期506-509,共4页
目的:研究重组人成纤维细胞生长因子21(rhFGF21)在不同保存条件下的稳定性,阐明温度、pH值、缓冲溶液和反复冻融因素对rhFGF21稳定性的影响,进一步完善纯化rhFGF21的工艺。方法:rhFGF21在不同温度(-20℃、4℃和25℃)、不同pH值缓... 目的:研究重组人成纤维细胞生长因子21(rhFGF21)在不同保存条件下的稳定性,阐明温度、pH值、缓冲溶液和反复冻融因素对rhFGF21稳定性的影响,进一步完善纯化rhFGF21的工艺。方法:rhFGF21在不同温度(-20℃、4℃和25℃)、不同pH值缓冲液(醋酸-醋酸钠缓冲液pH 4.0和pH 5.0、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液pH 5.0和pH 6.0、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液pH 6.0、pH 6.5和pH 7.0,TrisHCl缓冲液pH 7.5和pH 8.0)中及反复冻融条件下分别保存,采用高效液相色谱法(HPLC)检测rhFGF21纯度,同时观察外观性状。结果:于-20℃和4℃分别保存时,rhFGF21的各项性质在观察期内均无明显变化;25℃时,rhFGF21存放14d纯度由0d时(100.00±0.00)%下降至(15.20±0.14)%(P〈0.01);在pH 4.0和pH 5.0缓冲液中25℃条件下保存7d,溶液出现浑浊;在pH 5.0和pH 6.0缓冲液中25℃条件下保存7d,溶液出现浑浊;在pH 6.5和pH 8.0磷酸盐和Tris-HCl缓冲液中,溶液澄清透明;rhFGF21原液反复冻融后其纯度变化差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:rhFGF21在低温和pH 6.5-8.0磷酸盐和Tris-HCl缓冲液中溶液较稳定,反复冻融处理对rhFGF21稳定性也有明显影响。 展开更多
关键词 重组人成纤维细胞生长因子21 纯度 稳定性 理化因素
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国内外精蛋白重组人胰岛素注射液的有关物质比较
7
作者 詹栎 王文晞 《中国处方药》 2024年第2期69-73,共5页
目的精蛋白重组人胰岛素适用于2型糖尿病患者的治疗,现行标准中仅对本品有关物质A_(21)脱氨人胰岛素进行控制,未进行B_(3)和B_(3)iso脱氨人胰岛素限度的控制。采用两种方法对精蛋白重组人胰岛素注射液中的有关物质进行测定并比较国内外... 目的精蛋白重组人胰岛素适用于2型糖尿病患者的治疗,现行标准中仅对本品有关物质A_(21)脱氨人胰岛素进行控制,未进行B_(3)和B_(3)iso脱氨人胰岛素限度的控制。采用两种方法对精蛋白重组人胰岛素注射液中的有关物质进行测定并比较国内外共17批样品的质量。方法采用高效液相色谱法梯度洗脱,色谱柱:Waters Xbridge C_(18)4.6 mm×250 mm(5μm),检测波长:214 nm,柱温:40℃,流速:1.0 ml/min,进样体积:20μl;《中国药典》2020年版方法:流动相A为0.2 mol/L硫酸钠溶液(pH值2.3)-乙腈(82∶18),流动相B为乙腈-水(50∶50);某企业自拟方法:流动相A为0.2 mol/L硫酸钠溶液(pH值3.6)-乙腈(90∶10),流动相B为乙腈-水(50∶50)。结果国内外样品的A_(21)脱氨人胰岛素含量差异不大、国内一家企业B_(3)和B_(3)iso脱氨人胰岛素含量低于其他企业,国内另一家企业有关物质总和高于其他企业;两种方法检出A_(21)脱氨人胰岛素的含量差异无统计学意义(P>0.05),企业自拟方法能检测出更多的有关物质。结论两种方法均快速、简便,可用于比较国内外样品中的有关物质,同时为企业在制定杂质控制限度时提供依据。 展开更多
关键词 精蛋白重组人胰岛素 预混30R A21脱氨人胰岛 B3脱氨人胰岛素 B3iso脱氨人胰岛素
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重组人成纤维细胞生长因子-21对2型糖尿病模型大鼠LXRα及GLUT1 mRNA表达的调节作用 被引量:1
8
作者 邹文萍 张羽飞 +3 位作者 王会岩 武艳 袁晓环 初彦辉 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期386-389,共4页
目的研究重组人成纤维细胞生长因子-21(rhFGF-21)对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠LXRα及GLUT1mRNA表达的调节作用。方法将T2DM大鼠模型随机分组,每日皮下注射rhFGF-21,8周后,测定大鼠空腹FBG、FA、TG、TC、HDL-C、LDL-C含量,采用RT-PCR方法... 目的研究重组人成纤维细胞生长因子-21(rhFGF-21)对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠LXRα及GLUT1mRNA表达的调节作用。方法将T2DM大鼠模型随机分组,每日皮下注射rhFGF-21,8周后,测定大鼠空腹FBG、FA、TG、TC、HDL-C、LDL-C含量,采用RT-PCR方法检测LXRα及GLUT1 mRNA的表达水平。结果(1)rhFGF-21能稳定降低T2DM模型大鼠血糖。(2)rhFGF-21用药组大鼠较T2DM模型组大鼠LXRα和GLUT1 mRNA表达量显著增加。(3)大、中剂量rhFGF-21能显著降低T2DM模型大鼠血清FA、TG、TC、LDL-C含量,同时显著升高血清HDL-C含量。结论rhFGF-21能上调T2DM模型大鼠LXRα、GLUT1 mRNA表达,增加基础水平的葡萄糖转运,从而降低血糖,改善脂质代谢紊乱。 展开更多
关键词 重组人成纤维细胞生长因-子21 2型糖尿病 肝X受体 葡萄糖转运蛋白1
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凝血因子Ⅶ基因表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达 被引量:6
9
作者 吕茂民 王娜 +2 位作者 王栋 于群 章金刚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期44-47,共4页
凝血因子Ⅶ是凝血块形成的起始关键分子之一,它对外源性凝血途径的启动具有重要的作用。为表达具有促凝活性的重组人凝血因子Ⅶ,通过PCR的方法从质粒pUC-FⅦ中扩增人凝血因子ⅦcDNA,并将其定向克隆入真核表达载体pIRESneo中,构建重组表... 凝血因子Ⅶ是凝血块形成的起始关键分子之一,它对外源性凝血途径的启动具有重要的作用。为表达具有促凝活性的重组人凝血因子Ⅶ,通过PCR的方法从质粒pUC-FⅦ中扩增人凝血因子ⅦcDNA,并将其定向克隆入真核表达载体pIRESneo中,构建重组表达载体pIRES-FⅦ,测序正确后用脂质体介导的方法转染BHK-21细胞,经G418加压筛选、细胞有限稀释等方法获得克隆细胞株,收集无皿清培养上清,进行SDS-PAGE、Western blot和活性鉴定。结果成功构建了重组表达载体pIRES-FⅦ,实现了其在BHK-21细胞中的表达,且表达产物具有促凝活性。重组人凝血因子Ⅶ在哺乳动物细胞中的成功表达,为整体止血剂的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 重组人凝血因子Ⅶ 表达载体 BHK细胞 基因表达 止血剂
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盐诱导法高效表达重组人内抑素 被引量:1
10
作者 朱年春 智强 +2 位作者 张礼秀 陈晓明 刘建辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期359-360,共2页
关键词 BL-21(DE3)宿主菌 T7RNA启动子 重组人内抑素
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重组人血管内皮抑制素注射液联合EP化疗、调强放疗对晚期非小细胞肺癌病人的影响 被引量:11
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作者 郑连喜 邓超 +1 位作者 何平 屈敏 《蚌埠医学院学报》 CAS 2020年第8期1013-1016,1019,共5页
目的:探讨重组人血管内皮抑制素注射液联合EP化疗(依托泊苷+顺铂)及调强放疗在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)治疗中的价值。方法:按照随机数字表法将98例晚期NSCLC病人分为观察组与对照组,每组49例。对照组给予EP化疗+调强放疗,观察组在此基... 目的:探讨重组人血管内皮抑制素注射液联合EP化疗(依托泊苷+顺铂)及调强放疗在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)治疗中的价值。方法:按照随机数字表法将98例晚期NSCLC病人分为观察组与对照组,每组49例。对照组给予EP化疗+调强放疗,观察组在此基础上联合重组人血管内皮抑制素注射液治疗。对比2组治疗有效率、疾病控制率,治疗前后血清细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)、糖类抗原50(CA50)以及生存质量;随访2年,统计对比2组生存情况。结果:观察组治疗有效率63.27%,与对照组51.02%比较差异无统计学意义(P>0.05),疾病控制率89.80%,高于对照组71.43%(P<0.05)。治疗后观察组血清CYFRA21-1、CA50水平低于对照组(P<0.01)。观察组生存质量改善率61.22%,高于对照组40.82%(P<0.05)。观察组中位生存时间14个月,对照组中位生存时间11个月。观察组1年生存率59.57%、2年生存率34.04%与对照组的47.83%、26.09%比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EP化疗及调强放疗基础上联合重组人血管内皮抑制素注射液治疗晚期NSCLC,可有效提高疾病控制率、下调血清CYFRA21-1、CA50表达,且有利于改善病人生存质量,但该联合方案并不能显著提高病人生存率。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 EP化疗方案 调强放疗 重组人血管内皮抑制素注射液 细胞角蛋白19片段21-1 糖类抗原50
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重组人成纤维细胞生长因子-21的表达及纯化工艺的优化 被引量:2
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作者 赵宏鑫 邵明龙 +5 位作者 杨苹 张耀方 万晓姗 孔祥鑫 王会岩 李校堃 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第11期1113-1116,共4页
目的优化重组人成纤维细胞生长因子-21(SUMO-rhFGF-21)融合表达工程菌的表达条件及目的蛋白纯化工艺。方法对工程菌的诱导温度、时间及诱导剂浓度进行优化,并进行罐发酵,对菌体裂解液进行离子交换层析、Ni离子亲和层析及分子筛层析等。... 目的优化重组人成纤维细胞生长因子-21(SUMO-rhFGF-21)融合表达工程菌的表达条件及目的蛋白纯化工艺。方法对工程菌的诱导温度、时间及诱导剂浓度进行优化,并进行罐发酵,对菌体裂解液进行离子交换层析、Ni离子亲和层析及分子筛层析等。纯化产物经SDS-PAGE和HPLC鉴定纯度。结果在诱导温度为37℃,诱导时间为4h,IPTG浓度为0.5mmol/L时,目的蛋白的表达量最高,达20.5%;罐发酵收菌量可达66g/L,目的蛋白的表达量达20.2%;纯化后的rhFGF-21纯度达96%以上。结论优化了rhFGF-21的表达条件及纯化工艺,为rhFGF-21用于新药开发奠定了基础。 展开更多
关键词 重组人成纤维细胞生长因子-21 SUMO 融合表达 纯化
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一例21-羟化酶缺乏症并中枢性性早熟男童的3年随访研究 被引量:1
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作者 邵明玮 刘艳霞 +3 位作者 连梦青 赵霖 王芳 秦贵军 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期205-211,共7页
目的报道1例CYP21A2基因复合杂合突变导致的21-羟化酶缺乏症并中枢性性早熟男童的诊治及随访过程。方法患儿6岁时出现生长加速和第二性征发育,血清睾酮、促性腺激素水平及促性腺激素释放激素(GnRH)兴奋试验明确中枢性性早熟的诊断。根... 目的报道1例CYP21A2基因复合杂合突变导致的21-羟化酶缺乏症并中枢性性早熟男童的诊治及随访过程。方法患儿6岁时出现生长加速和第二性征发育,血清睾酮、促性腺激素水平及促性腺激素释放激素(GnRH)兴奋试验明确中枢性性早熟的诊断。根据血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、17-羟孕酮水平及肾上腺计算机断层扫描(CT)检查结果,临床诊断为21-羟化酶缺乏症。结果采用Sanger测序联合多重连接探针扩增技术检测CYP21A2基因,证实存在复合杂合突变。3年的治疗随访过程中,规律监测和评价患儿应用糖皮质激素、GnRH类似物、重组人生长激素的治疗效果。结论糖皮质激素替代遵循最低有效剂量原则。GnRH类似物可有效抑制下丘脑-垂体-性腺轴,而重组人生长激素则未有促增长效果。 展开更多
关键词 21-羟化酶缺乏症 中枢性性早熟 CYP21A2基因 糖皮质激素 促性腺激素释放激素类似物 重组人生长激素
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注射用重组人成纤维细胞生长因子-21食蟹猴急性毒性试验研究
14
作者 项宗尚 宋紫辉 +3 位作者 安梦瑶 吴雅丽 蔡永明 胡金芳 《药物评价研究》 CAS 2018年第9期1611-1616,共6页
目的观察食蟹猴单次sc注射用重组人成纤维细胞生长因子-21(RH-FGF-21)的急性毒性反应。方法 8只健康食蟹猴,随机分成RH-FGF-21组和对照组,RH-FGF-21组6只,对照组2只,均雌雄各半,分别单次sc最大给药浓度和最大给药体积的供试品RH-FGF-21(... 目的观察食蟹猴单次sc注射用重组人成纤维细胞生长因子-21(RH-FGF-21)的急性毒性反应。方法 8只健康食蟹猴,随机分成RH-FGF-21组和对照组,RH-FGF-21组6只,对照组2只,均雌雄各半,分别单次sc最大给药浓度和最大给药体积的供试品RH-FGF-21(9.0 mg/kg)和最大体积的对照品灭菌注射用水(1.0 m L/kg),给药后连续观察21 d。在给药前适应期和给药后观察期内进行动物的一般观察(外观、行为、饮食、反应能力、分泌物和排泄物等)、死亡情况、体质量变化、肛温、进食量、眼科和心电图检查、血液学和血液生化学检测、尿液观察和分析;观察期结束安乐死全部存活动物,进行组织病理学检查。结果动物体质量、肛温、进食量、心电图检查和眼科检查与同期对照组比较均未见明显异常;血液学检测、血液生化检测、尿液观察和分析结果、组织病理学检查也未见由药物引起的异常变化。结论在本试验条件下未发现由药物引起的急性毒性症状,9.0 mg/kg可认为是食蟹猴单次sc RH-FGF-21的最大给药量。 展开更多
关键词 注射用重组人成纤维细胞生长因子-21 食蟹猴 急性毒性
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重组人白介素21的原核表达与体外活性研究的优化 被引量:1
15
作者 王彤 张娟 +4 位作者 厉道娟 罗晨 吴沁航 高美风 王旻 《药物生物技术》 CAS 2013年第4期283-287,共5页
为了构建重组人白介素21(rhIL-21)原核稳定表达和体外活性检测系统,采用Overlap-PCR法合成目的基因;经双酶切整合至pET28,化学转化法转入大肠杆菌BL21(DE3)构建pET-28a-rhIL-21 BL21(DE3)原核表达系统;胞内表达的包涵体经镍亲和层析色... 为了构建重组人白介素21(rhIL-21)原核稳定表达和体外活性检测系统,采用Overlap-PCR法合成目的基因;经双酶切整合至pET28,化学转化法转入大肠杆菌BL21(DE3)构建pET-28a-rhIL-21 BL21(DE3)原核表达系统;胞内表达的包涵体经镍亲和层析色谱柱纯化后,尿素缓冲液梯度透析复性,最终溶于PBS缓冲液;双抗体夹心法ELISA、Western blotting检测复性蛋白的生物活性;细胞增殖抑制试验(MTT法)研究rhIL-21对Jurkat细胞株和HuT102细胞株的作用。实验成功建立了rhIL-21表达纯化与活性评价体系,为进一步研究IL-21的促免疫性疾病发展和抗肿瘤活性奠定了基础。 展开更多
关键词 重组人白介素21 Overlap-PCR 原核表达 亲和层析 复性 细胞增殖抑制
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