期刊文献+
共找到18篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
Antitumor effects of cytokine gene-encoded vaccinia virus on murine melanoma
1
作者 Qun Tao, Dianwen Ju, Tao Wan, Weiping Zhang, Xuetao CaoDepartment of Immunology, The Second Military Medical University, Shanghai 200433 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期316-317,共2页
Recombinant vaccinia virus has many advantagesover more restricted vectors like retrovirus andadenovirus. The proven safety of vaccinia virus, which isrestricted to local and transitory infection, favors clinicalappli... Recombinant vaccinia virus has many advantagesover more restricted vectors like retrovirus andadenovirus. The proven safety of vaccinia virus, which isrestricted to local and transitory infection, favors clinicalapplication of vaccinia virus to deliver cytokines locally. 展开更多
关键词 MELANOMA CYTOKINE restricted murine recombinant encoded DELIVER CYTOTOXIC transfection SUBCUTANEOUS
下载PDF
小鼠T-bet基因重组腺病毒载体的构建 被引量:3
2
作者 檀卫平 黄嘉凌 +5 位作者 刘然义 梁志慧 黄必军 麦贤弟 黄绍良 黄文林 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期546-548,553,共4页
【目的】构建小鼠T-bet基因重组腺病毒载体,为T-bet基因在支气管哮喘治疗中的作用研究提供有效的T-bet生物表达系统。【方法】采用内切酶从质粒T-bet/GFP-RV中切获约1.7kb的小鼠T-betcDNA片段,与穿梭质粒pShuttle连接,再通过稀有酶切位... 【目的】构建小鼠T-bet基因重组腺病毒载体,为T-bet基因在支气管哮喘治疗中的作用研究提供有效的T-bet生物表达系统。【方法】采用内切酶从质粒T-bet/GFP-RV中切获约1.7kb的小鼠T-betcDNA片段,与穿梭质粒pShuttle连接,再通过稀有酶切位点将含T-betcDNA的表达盒与Adeno-X腺病毒载体骨架连接,构建重组载体pAdeno-T-bet,测序鉴定无错配及插入移位等DNA顺序改变,并转染HEK293细胞,出现CPE后取含病毒上清的细胞培养液抽提病毒DNA行PCR鉴定。【结果】PCR及酶切证实:T-betcDNA正确克隆到穿梭质粒pShuttle中,带T-betcDNA的表达盒成功重组到腺病毒载体基因组E1A缺失区,并在HEK293细胞中成功包装出具有感染活性的重组腺病毒pAdeno-T-bet。【结论】本实验成功构建了小鼠T-bet基因重组腺病毒载体,并在HEK293细胞中成功包装出重组腺病毒。 展开更多
关键词 T-BET 腺病毒载体 小鼠 HEK293细胞 基因重组 重组腺病毒 DNA 酶切位点 表达系统 细胞培养液
下载PDF
汉坦病毒重组核蛋白抗体用于鼠肺组织病毒抗原的检测 被引量:3
3
作者 赵凤玲 陈锦英 +2 位作者 吕莉琨 杨东靖 李力 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期510-513,共4页
目的纯化汉坦病毒(HV)SEO型L99株重组核蛋白(rNP),制备抗体用于鼠肺组织HV抗原的检测。方法重组菌株E.coliBL21(DE3)/pET32a-L99S经IPTG诱导表达rNP,采用Ni亲和层析方法纯化,纯化蛋白免疫日本大耳白兔,获取抗血清用于间接免疫荧光法(IFA... 目的纯化汉坦病毒(HV)SEO型L99株重组核蛋白(rNP),制备抗体用于鼠肺组织HV抗原的检测。方法重组菌株E.coliBL21(DE3)/pET32a-L99S经IPTG诱导表达rNP,采用Ni亲和层析方法纯化,纯化蛋白免疫日本大耳白兔,获取抗血清用于间接免疫荧光法(IFA)检测鼠肺组织的HV抗原;并与病人混合血清作为一抗的IFA结果进行比较,部分标本进一步用RT-PCR法进行验证。结果rNP表达量占菌体总蛋白的52.2%,纯化蛋白的总回收率为22.9%;纯化蛋白Western blot分析为单带,纯度达95%以上,用其制备多克隆抗体滴度达1∶512000。IFA检测59份鼠肺标本,用兔rNP抗体和病人混合血清作为一抗其阳性率分别为23.7%和16.9%;两者结果不一致的6份鼠肺经RT-PCR检测HV核酸,均与兔rNP抗体的IFA结果相一致。结论采用rNP抗体进行IFA检测,可显著地提高鼠类HV感染监测的准确性,值得推广使用。 展开更多
关键词 汉坦病毒 重组核蛋白 鼠肺 间接免疫荧光
下载PDF
信号肽重组mBD2在宫颈癌细胞中的稳定表达及活性测定 被引量:3
4
作者 魏晓丽 李明远 +3 位作者 李虹 施桥发 李婉宜 蒋忠华 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期222-225,共4页
目的探讨鼠重组beta防御素2(rmBD2)对SiHa细胞增殖的影响。方法采用脂质体转染法将真核表达质粒pcDNA3.1(+)/rmBD2转染SiHa细胞系,G418筛选出稳定表达细胞克隆。分别采用间接免疫荧光染色、RT-PCR方法检测稳定转染细胞中rmBD2蛋白和rmBD... 目的探讨鼠重组beta防御素2(rmBD2)对SiHa细胞增殖的影响。方法采用脂质体转染法将真核表达质粒pcDNA3.1(+)/rmBD2转染SiHa细胞系,G418筛选出稳定表达细胞克隆。分别采用间接免疫荧光染色、RT-PCR方法检测稳定转染细胞中rmBD2蛋白和rmBD2 mRNA表达,并采用MTT法对稳定转染细胞株进行细胞增殖能力的测定。结果采用100μg/mL的G418浓度筛选质粒转染的SiHa细胞20d,得到了rmBD2稳定表达细胞株SiHa/rmBD2及转染pcDNA3.1(+)空质粒的对照细胞SiHa/K。免疫荧光染色显示SiHa/rmBD2细胞质中均有目的蛋白的表达,转染效率为100%。提取稳定转染4、6、8、10周SiHa/rmBD2细胞总RNA,RT-PCR反应扩增得到220bp左右的目的片段,而SiHa/K及SiHa细胞未见目的蛋白表达。细胞生长曲线显示SiHa/rmBD2细胞的生长速度低于SiHa/K及SiHa细胞(P<0.05)。结论本研究成功筛选了稳定表达rmBD2的细胞株SiHa/rmBD2,并采用间接免疫荧光染色、RT-PCR证实了rmBD2蛋白和rmBD2 mRNA的稳定表达,细胞增殖实验表明rmBD2可以明显抑制肿瘤细胞的增殖,为进一步研究rmBD2的抗肿瘤作用奠定了细胞学基础。 展开更多
关键词 rmBD2稳定表达 免疫荧光 RT-PCR 细胞生长曲线
下载PDF
小鼠TLR-2N末端基因的克隆表达和抗体制备 被引量:1
5
作者 杨翠兰 赵文忠 +2 位作者 刘艳君 朱平 富宁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1609-1611,1615,共4页
目的克隆mTLR-2基因氨基端序列,并表达和纯化N端融合蛋白,制备抗mTLR-2N末端的多克隆抗体。方法采用PCR技术扩增编码mTLR-2N端1~153氨基酸的基因,并将其克隆到pET32A载体中,测序验证;用大肠杆菌表达融合蛋白,并以Probond树脂柱纯化;免... 目的克隆mTLR-2基因氨基端序列,并表达和纯化N端融合蛋白,制备抗mTLR-2N末端的多克隆抗体。方法采用PCR技术扩增编码mTLR-2N端1~153氨基酸的基因,并将其克隆到pET32A载体中,测序验证;用大肠杆菌表达融合蛋白,并以Probond树脂柱纯化;免疫家兔制备多克隆抗体,采用免疫组化、流式细胞术及间接ELISA检测抗体特异性及效价。结果成功构建了融合表达载体pET-N,表达和纯化了相应的融合蛋白,所制备多克隆抗体可与pGEX-N表达的融合蛋白反应,并可结合表达TLR-2的RAW264.7及转染mTLR-2全长基因的CHO细胞。结论获得了mTLR-2N末端重组融合蛋白及其可与天然mTLR-2结合的多克隆抗体。 展开更多
关键词 mTLR-2 重组蛋白 抗体 克隆 基因表达
下载PDF
不可分型流感嗜血杆菌重组Hap蛋白免疫抗小鼠急性感染的实验研究 被引量:1
6
作者 李婉宜 王保宁 +5 位作者 左凤琼 曾蔚 丰锋 邝玉 蒋中华 李明远 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期635-637,641,共4页
目的:观察重组Hap蛋白免疫抗不可分型流感嗜血杆菌(NHTi)感染的免疫保护效果,初步探讨其保护机制。方法:用纯化的Hap重组蛋白与黏膜免疫佐剂霍乱肠毒素B亚单位(CT-B)联合鼻腔免疫C57BL/6小鼠。NHTi琼脂珠悬液对免疫小鼠进行气... 目的:观察重组Hap蛋白免疫抗不可分型流感嗜血杆菌(NHTi)感染的免疫保护效果,初步探讨其保护机制。方法:用纯化的Hap重组蛋白与黏膜免疫佐剂霍乱肠毒素B亚单位(CT-B)联合鼻腔免疫C57BL/6小鼠。NHTi琼脂珠悬液对免疫小鼠进行气管内注射,建立小鼠NHTi急性肺部感染模型。NHTi攻击5d后,收集实验小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞计数,并取其肺组织进行肺部荷菌数检测及肺组织的病理检测。结果:Hap重组蛋白与CT—B的联合免疫能显著降低小鼠BALF中的白细胞总数、中性粒细胞渗出(P〈0.05)及感染小鼠肺组织内NTHi的荷菌数,并减轻感染小鼠支气管、细支气管周围及肺泡内的炎性浸润程度,明显改善其肺组织的病变。结论:鼻腔免疫的Hap重组蛋白在动物体内能发挥良好抗NTHi感染的免疫保护作用,为NTHi新型疫苗的研发提供了理论基础和实验依据。 展开更多
关键词 重组Hap蛋白 CT—B NTHi急性肺部感染模型 黏膜免疫
下载PDF
LTβR-Ig融合蛋白的真核表达及其体外生物学功能的研究 被引量:1
7
作者 周倩 崔淑芳 +3 位作者 樊克兴 吴桐 钱卫珠 郭亚军 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2007年第3期11-15,共5页
目的为了研究LTβR-Ig的生物学功能,构建重组的LTβR-Ig/pcDNA3.1(+)真核表达载体,在CHO细胞中表达,无血清扩大培养,并初步研究了融合蛋白LTβR-Ig的体外生物学活性。方法将鼠LTβR胞外段cDNA与人IgG1 Fc段cDNA共同克隆至真核表达载体pc... 目的为了研究LTβR-Ig的生物学功能,构建重组的LTβR-Ig/pcDNA3.1(+)真核表达载体,在CHO细胞中表达,无血清扩大培养,并初步研究了融合蛋白LTβR-Ig的体外生物学活性。方法将鼠LTβR胞外段cDNA与人IgG1 Fc段cDNA共同克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),转染CHO-K细胞表达,阳性克隆进行无血清培养,采用PtoteinA亲和层析的方法进行纯化;3[H]TdR参入法检测对细胞增殖的影响。结果经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序,结果表明克隆了正确序列的LTβR胞外段序列,成功构建了重组表达质粒LTβR-Ig/pcDNA3.1,并在CHO细胞中稳定表达了LTβR-Ig的融合蛋白,证明LTβR-Ig融合蛋白能抑制混合淋巴细胞反应。结论本研究建立了能稳定表达有生物活性的LTβR-Ig融合蛋白的真核表达系统,为今后研究LTβR在移植排斥中的作用机制,及开展基因重组药物进行疾病的生物治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 鼠LTβR 基因表达 CHO细胞株 LTβR—Ig融合蛋白
下载PDF
pcDNA3.1-mAFP真核表达载体的构建及其在293细胞中的表达
8
作者 匡志鹏 谢裕安 +2 位作者 梁安民 罗小玲 吴继宁 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1059-1061,共3页
目的构建真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,观察其在293肿瘤细胞中的表达情况。方法从Hepa1-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增小鼠甲胎蛋白(mAFP)基因编码区全长序列,测序确认后,插入到pcDNA3.1真核表达载体中,双酶... 目的构建真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,观察其在293肿瘤细胞中的表达情况。方法从Hepa1-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增小鼠甲胎蛋白(mAFP)基因编码区全长序列,测序确认后,插入到pcDNA3.1真核表达载体中,双酶切鉴定。用Lipofectamine脂质体将构建的重组载体转染293肿瘤细胞,检测AFP蛋白在293细胞中的表达情况。结果成功克隆了mAFP基因编码区全长序列,构建出重组真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,脂质体转染后可检测到mAFP基因在293细胞中的表达。结论该研究成功构建了重组pcDNA3.1-mAFP真核表达载体,为进一步开展原发性肝癌的靶向性基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠甲胎蛋白 重组真核表达载体 PCDNA3.1 原发性肝癌
下载PDF
树突状细胞联合重组腺病毒Ad-Mig基因治疗小鼠淋巴瘤的实验研究
9
作者 刁汇玲 高金祥 +2 位作者 杨丽娟 蒋淑君 张建宾 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期824-827,共4页
目的观察树突状细胞(DC)和腺病毒介导的小鼠Mig基因对小鼠淋巴瘤的抗肿瘤效果。方法利用EG7细胞皮下注射C57BL/6小鼠建立小鼠淋巴瘤模型,单独或联合应用DC和携带Mig基因的重组腺病毒(Ad-Mig)直接进行瘤内注射治疗,观察小鼠皮下肿瘤生长... 目的观察树突状细胞(DC)和腺病毒介导的小鼠Mig基因对小鼠淋巴瘤的抗肿瘤效果。方法利用EG7细胞皮下注射C57BL/6小鼠建立小鼠淋巴瘤模型,单独或联合应用DC和携带Mig基因的重组腺病毒(Ad-Mig)直接进行瘤内注射治疗,观察小鼠皮下肿瘤生长情况。采用HE染色观察肿瘤组织的变化,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CTL和NK的杀伤活性。结果 DC能显著抑制荷瘤小鼠皮下肿瘤的生长,使肿瘤组织中炎细胞数量增多而肿瘤细胞数量明显减少,能显著增强荷瘤小鼠脾细胞NK和CTL杀伤活性。与单独应用DC相比,DC与Ad-Mig联合应用可明显提高抗肿瘤效果。结论 DC对小鼠淋巴瘤有显著治疗效果,且与Ad-Mig基因联合应用能进一步提高抗肿瘤效果。 展开更多
关键词 树突状细胞 重组腺病毒Ad-Mig 细胞毒性T淋巴细胞 NK细胞
下载PDF
重组鼠IL-1β和/或慢性缺氧刺激对大鼠颈动脉体中p-ERK1/2表达的影响
10
作者 范娟 彭正午 +1 位作者 王曦 王百忍 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期386-390,共5页
目的:观察慢性低压性缺氧和重组鼠白介素-1β(rmIL-1β)刺激对大鼠颈动脉体(carotid body,CB)中磷酸化细胞外信号调节蛋白激1/2(p-ERK1/2)表达的影响。方法:雄性SD大鼠分为8组,分别为缺氧刺激0、1、2、3周组和缺氧0、1、2、3周的同时伴r... 目的:观察慢性低压性缺氧和重组鼠白介素-1β(rmIL-1β)刺激对大鼠颈动脉体(carotid body,CB)中磷酸化细胞外信号调节蛋白激1/2(p-ERK1/2)表达的影响。方法:雄性SD大鼠分为8组,分别为缺氧刺激0、1、2、3周组和缺氧0、1、2、3周的同时伴rmIL-1β刺激组。对CB进行免疫组化染色,并用Western Blot法对p-ERK1/2进行半定量分析。结果:相对于缺氧0周组,缺氧2周和缺氧3周组大鼠CB中p-ERK1/2的含量明显增加。相对于单纯给予缺氧,缺氧同时给予rmIL-1β刺激后引起大鼠CB体中p-ERK1/2表达量的增加。结论:慢性缺氧和rmIL-1β刺激均可致颈动脉体p-ERK1/2上调;慢性缺氧伴rmIL-1β刺激比单纯缺氧或rmIL-1β刺激可引起p-ERK1/2更显著的增加。 展开更多
关键词 颈动脉体 大鼠 缺氧 重组鼠IL-1β 磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1 2
下载PDF
rmuGM-CSF增强巨噬细胞抗白念珠菌活性研究
11
作者 陈兴平 张华丽 《医药导报》 CAS 2004年第12期896-898,共3页
目的 :研究重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (rmuGM CSF)对巨噬细胞抗白念珠菌活性的调节作用。方法 :分别将浓度为 10 0 ,2 0 0 ,3 0 0 ,40 0U·mL 1 的rmuGM CSF与小鼠腹腔巨噬细胞共同培养 2~ 5d ,然后测定巨噬细胞的抗白... 目的 :研究重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (rmuGM CSF)对巨噬细胞抗白念珠菌活性的调节作用。方法 :分别将浓度为 10 0 ,2 0 0 ,3 0 0 ,40 0U·mL 1 的rmuGM CSF与小鼠腹腔巨噬细胞共同培养 2~ 5d ,然后测定巨噬细胞的抗白念珠菌活性。结果 :rmuGM CSF可增强巨噬细胞的抗白念珠菌活性 ,作用呈剂量依赖性 ,且随着与巨噬细胞共培养时间的延长 ,增强效应不降低。结论 :rmuGM CSF能增强巨噬细胞的抗白念珠菌活性 ,增强效应强而持久。 展开更多
关键词 重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 巨噬细胞 白念珠菌 小鼠
下载PDF
小鼠白细胞介素-21基因重组腺病毒可控制慢性HBV感染 被引量:1
12
作者 高雪萍 周扬 +4 位作者 郑新春 易璇 唐利波 侯金林 李咏茵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1436-1441,共6页
目的观察小鼠白细胞介素-21基因重组腺病毒(Ad-GFP-mIL-21)在慢性HBV感染小鼠中的表达以及其对病毒清除和HBV特异性抗体产生的作用。方法 Ad-GFP-mIL-21体外感染HepG2.2.15细胞后分别采用ELISA和Western blot检测上清和细胞mIL-21的表达... 目的观察小鼠白细胞介素-21基因重组腺病毒(Ad-GFP-mIL-21)在慢性HBV感染小鼠中的表达以及其对病毒清除和HBV特异性抗体产生的作用。方法 Ad-GFP-mIL-21体外感染HepG2.2.15细胞后分别采用ELISA和Western blot检测上清和细胞mIL-21的表达;尾静脉注射rAAV8-1.3HBV至野生型C57BL/6小鼠体内建立HBV持续表达模型,12周后实验组尾静脉注射Ad-GFP-mIL-21,以注射空载GFP重组腺病毒或PBS为对照组,荧光显微镜观察Ad-GFP-mIL-21在小鼠体内各器官的表达情况,ELISA检测各组小鼠血清HBsAg、HBsAb、HBcAb和mIL-21的水平。结果 Ad-GFP-mIL21可在体外感染HepG2.2.15细胞,且上清mIL-21水平与重组载体的滴度和感染时间相关。注射Ad-GFP-mIL21至HBV持续表达小鼠后第4天观察到绿色荧光主要在肝细胞表达;与处理前相比,注射第4天血清mIL-21水平显著升高(P<0.05),而HBsAg滴度则明显下降;实验组和对照组小鼠在注射第13天血清HBsAb均为阴性;与对照组相比,实验组小鼠血清HBcAb水平显著升高(P<0.05)。结论 AdGFP-mIL-21在HBV持续感染小鼠体内可表达mIL-21,并能下调血清HBsAg滴度和促进HBcAb产生,提示其在体内具有控制慢性HBV感染的作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 小鼠白细胞介素-21 重组腺病毒
下载PDF
重组细胞中鼠细小病毒检测方法的建立及初步应用 被引量:4
13
作者 吴雪伶 樊金萍 +3 位作者 冯建平 宋丽京 孟淑芳 李德富 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第8期1030-1034,1042,共6页
目的建立生物技术产品用重组细胞中鼠细小病毒(Murine minute virus,MMV)污染的检测方法,并进行验证及初步应用。方法以NB324K细胞为指示细胞,建立MMV感染性检测方法,并以不同CCID50的MMV分别感染NB324K细胞,验证方法的灵敏度;通过设计... 目的建立生物技术产品用重组细胞中鼠细小病毒(Murine minute virus,MMV)污染的检测方法,并进行验证及初步应用。方法以NB324K细胞为指示细胞,建立MMV感染性检测方法,并以不同CCID50的MMV分别感染NB324K细胞,验证方法的灵敏度;通过设计针对编码非结构蛋白1(Non-structural protein 1,NS1)保守序列的引物和探针,建立用于重组细胞中MMV检测的实时荧光定量PCR,并对其线性、特异性、精密性、灵敏度、最低检测限及试验可行性和干扰性进行验证;将NB324K细胞感染试验与荧光定量PCR法相结合,建立NB324K细胞感染-PCR法,并通过对大量样本的检测,分析荧光定量PCR法和NB324K细胞感染-PCR法的可行性。结果 NB324K细胞感染试验的灵敏度为0.2 CCID50;荧光定量PCR检测方法最佳线性范围为1×108~1×104拷贝/μl,R2达0.99以上,特异性良好,与其他种属的细小病毒均无交叉反应,试验内和试验间Ct值的变异系数(CV)均小于5%,试验内病毒定量拷贝数的CV在20%~30%之间,试验间病毒定量拷贝数的CV在20%~50%之间,灵敏度为5×103拷贝/μl,最低感染性病毒颗粒检测限为2 CCID50。该方法能够用于细胞样品中MMV的检测,部分样品基质对病毒的检测具有一定的干扰性。NB324K细胞感染-PCR法的灵敏度为0.02 CCID50,检测时间可缩短为96 h,与荧光定量PCR法分别对47份样品进行检测,结果均为阴性。结论成功建立了MMV荧光定量PCR检测方法和NB324K细胞感染-PCR法,可应用于重组细胞中MMV污染的检测,为进一步提高生产用重组细胞的安全性奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠细小病毒 荧光定量PCR 重组 细胞 感染
原文传递
重组骆驼蓬脂转移蛋白对B16实体瘤的抑制作用 被引量:5
14
作者 赵晶 吕慧 +3 位作者 段晓梅 吴婷 李轶杰 孙素荣 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期86-89,共4页
目的:研究重组骆驼蓬脂转移蛋白(Peganum harmala lipid transfer protein,rPhLTP)对鼠黑色素瘤(B16)的体内抑制作用。方法:取B16细胞接种于C57BL/6J小鼠皮下,随机分为5组。测量各组瘤体积并称瘤重,计算抑瘤率。光镜观察脾脏、肝脏等变... 目的:研究重组骆驼蓬脂转移蛋白(Peganum harmala lipid transfer protein,rPhLTP)对鼠黑色素瘤(B16)的体内抑制作用。方法:取B16细胞接种于C57BL/6J小鼠皮下,随机分为5组。测量各组瘤体积并称瘤重,计算抑瘤率。光镜观察脾脏、肝脏等变化;采用免疫组织化学法检测各肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:高、中、低剂量处理组肿瘤相对体积(V/Vo)分别为3.21±0.12、3.57±0.07和3.92±0.42,抑瘤率分别为71.7%、58.1%和29.5%。显微镜下可见rPhLTP实验组肿瘤组织的细胞有不同程度的点、片状坏死。而肝、肺等无明显病理损伤。高剂量组中VEGF阳性表达指数低于生理盐水组(P<0.01),rPhLTP能明显抑制肿瘤血管的生成。结论:rPhLTP能有效地抑制小鼠B16细胞实体瘤的生长,其抗肿瘤的机制可能是通过抑制血管的生成来抑制肿瘤的生长。 展开更多
关键词 重组骆驼蓬脂转移蛋白 鼠黑色素瘤B16 体内 血管生长 抑瘤作用
原文传递
骆驼蓬脂转移蛋白基因真核表达载体的构建及其体内外抗瘤效应的研究 被引量:1
15
作者 赵晶 吕慧 +1 位作者 贾依娜古丽.朱玛拜 孙素荣 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期7-13,共7页
目的:构建骆驼蓬脂转移蛋白(lipid transfer protein from Peganum harmala,PhLTP)基因真核表达质粒,并探讨其对黑色素瘤B16细胞在体内外的抗肿瘤作用。方法:将PhLTP基因亚克隆至pcDNA3.1上,获得重组质粒pcDNA3.1-PhLTP;用脂质体转染法... 目的:构建骆驼蓬脂转移蛋白(lipid transfer protein from Peganum harmala,PhLTP)基因真核表达质粒,并探讨其对黑色素瘤B16细胞在体内外的抗肿瘤作用。方法:将PhLTP基因亚克隆至pcDNA3.1上,获得重组质粒pcDNA3.1-PhLTP;用脂质体转染法将重组质粒及空载体外转染B16细胞,MTT检测其对B16细胞生长的影响。建立B16荷瘤小鼠模型,设重组质粒(pcDNA3.1-PhLTP)、空载(pcDNA3.1)、生理盐水和阳性药物(CTX)组,分别处理小鼠后测量各组肿瘤体积并称瘤重,计算抑瘤率。光镜观察鼠脾、肝等组织变化;免疫组织化学法检测各瘤体中PhLTP、血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。结果:pcDNA3.1-PhLTP转染B16细胞72 h后,细胞增殖能力明显受到抑制(P<0.01)。注射pcDNA3.1-PhLTP组的小鼠肿瘤生长速度明显减慢,肿瘤体积小于空载和生理盐水组(P<0.05)。显微镜下可见重组质粒组肿瘤细胞有不同程度的点、片状坏死,而肝、肺等无明显病理损伤。重组质粒组肿瘤组织中有PhLTP蛋白的表达,且VEGF和bFGF的阳性表达指数都低于空载和生理盐水组(P<0.01)。结论:成功构建了重组表达质粒pcDNA3.1-PhLTP,体内外实验结果显示其能有效地抑制B16细胞的生长,预示了该重组质粒在治疗黑色素瘤中的潜在应用价值。 展开更多
关键词 骆驼蓬脂转移蛋白基因 转染 生长抑制 鼠黑色素瘤B16 血管生成
原文传递
重组鼠IL-1β和/或慢性缺氧刺激对大鼠颈动脉体中TH表达的影响
16
作者 范娟 王曦 +3 位作者 彭正午 郭玲 王百忍 徐学红 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第26期5008-5011,共4页
目的:观察慢性低压性缺氧和/或重组鼠白介素-1β(rmIL-1β)刺激对大鼠颈动脉体(carotid body,CB)中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达的影响。方法:雄性SD大鼠分为8组,分别为缺氧刺激0、1、2、3周组和缺氧0、1、2、3周的同时伴... 目的:观察慢性低压性缺氧和/或重组鼠白介素-1β(rmIL-1β)刺激对大鼠颈动脉体(carotid body,CB)中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达的影响。方法:雄性SD大鼠分为8组,分别为缺氧刺激0、1、2、3周组和缺氧0、1、2、3周的同时伴rmIL-1β刺激组。对CB进行免疫组化染色,并用western blot法对TH进行半定量分析。结果:相对于缺氧0周组,缺氧1周、缺氧2周和缺氧3周组大鼠CB中TH的含量明显增加。相对于正常大鼠,rmIL-1β刺激引起大鼠CB中TH表达量增加。相对于单纯给予缺氧1周和缺氧2周,缺氧1周和缺氧2周同时给予rmIL-1β刺激后引起大鼠CB中TH表达量的增加。结论:慢性缺氧和rmIL-1β刺激均可致颈动脉体TH上调,慢性缺氧伴rmIL-1β刺激比单纯缺氧刺激可引起TH更显著的增加。这个结果提示慢性缺氧或促炎性细胞因子IL-1β刺激不仅能够分别促进颈动脉体中儿茶酚胺类物质的合成,而且IL-1β刺激可以促进慢性缺氧时颈动脉体中儿茶酚胺类物质的合成。这说明促炎性细胞因子可能对大鼠颈动脉体的慢性缺氧感受发挥调节作用。 展开更多
关键词 关键词 颈动脉体 缺氧 重组鼠白介素-1β 酪氨酸羟化酶
原文传递
重组腺病毒Ad-Mig基因治疗裸鼠肾细胞癌的实验研究
17
作者 高金祥 刁汇玲 +2 位作者 刘云启 张慧 马中女 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第24期4672-4675,共4页
目的:研究腺病毒介导的小鼠Mig基因对BALB/c裸鼠肾细胞癌的抗肿瘤效果,探讨肾细胞癌治疗的新途径。方法:利用786-O肾癌细胞皮下注射BALB/c裸鼠建立肾细胞癌模型,应用携带Mig基因的重组腺病毒(Ad-Mig)直接进行瘤内注射治疗,观察裸鼠皮下... 目的:研究腺病毒介导的小鼠Mig基因对BALB/c裸鼠肾细胞癌的抗肿瘤效果,探讨肾细胞癌治疗的新途径。方法:利用786-O肾癌细胞皮下注射BALB/c裸鼠建立肾细胞癌模型,应用携带Mig基因的重组腺病毒(Ad-Mig)直接进行瘤内注射治疗,观察裸鼠皮下肿瘤生长情况和荷瘤裸鼠的生存期;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CTL和NK的杀伤活性。结果:Mig基因能显著抑制荷瘤裸鼠皮下肿瘤的生长,并使鼠生存期明显延长,还能显著增强鼠脾细胞NK和CTL杀伤活性。结论:重组腺病毒Ad-Mig基因对鼠肾细胞癌有显著治疗效果。 展开更多
关键词 重组腺病毒Ad-Mig 肾细胞癌 细胞毒性T淋巴细胞 NK细胞
原文传递
不同浓度的重组鼠内脂素对大龄促排卵SD大鼠子宫内膜容受性的影响
18
作者 刘静 李翠 于倩 《中国优生与遗传杂志》 2022年第4期619-624,共6页
目的 探究不同浓度重组鼠内脂素对大龄促排卵SD大鼠子宫内膜容受性的影响。方法 选取60只大龄SD大鼠,均予以促排卵,根据重组鼠内脂素浓度不同随机分为对照组、低浓度组(50 ng/mL)、中浓度组(100 ng/mL)、高浓度组(150 ng/mL)。观察各组... 目的 探究不同浓度重组鼠内脂素对大龄促排卵SD大鼠子宫内膜容受性的影响。方法 选取60只大龄SD大鼠,均予以促排卵,根据重组鼠内脂素浓度不同随机分为对照组、低浓度组(50 ng/mL)、中浓度组(100 ng/mL)、高浓度组(150 ng/mL)。观察各组大鼠子宫内膜厚度及组织形态、微血管密度(MVD)、妊娠率和胚泡数;检测不同时间各组大鼠性激素水平;检测血管内皮生长因子(VEGF)和内皮一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA及蛋白表达,并分析其相关性。结果 高浓度和中浓度组大鼠子宫内膜厚度、MVD、妊娠率、胚泡数及孕酮(P)、雌二醇(E_(2))水平相差不大且都高于低浓度组(P<0.05),对照组最低。受孕1周内大鼠P、E_(2)水平随时间增长;高浓度和中浓度组大鼠VEGF、eNOS的mRNA及蛋白表达无差别且都高于低浓度组(P<0.05),对照组最低。VEGF与eNOS的mRNA及蛋白表达呈正相关,相关系数分别为0.95、0.92(P<0.001)。结论 重组鼠内脂素能提升大龄促排卵SD大鼠子宫内膜容受性,且最佳浓度为100 ng/mL,其机制可能与VEGF-eNOS-NO信号通路相关。 展开更多
关键词 促排卵 重组鼠内脂素 浓度 子宫内膜容受性 性激素
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部