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The Activity of Plasma Platelet-activating Factor Derived from Pregnant Women before and after Delivery and lts Relation to Pregnancy-induced Hypertension
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作者 司远征 肖慧珠 +3 位作者 熊忠明 李郁 王凤华 魏文林 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 1996年第3期190-192,共3页
The activity of plasma platelet-activating factor(PAF) from pregnant women before and after delivery was determined. Plasma samples were taken from 74 pregnant women, among whom 24 were normotensive controls, 30 mild ... The activity of plasma platelet-activating factor(PAF) from pregnant women before and after delivery was determined. Plasma samples were taken from 74 pregnant women, among whom 24 were normotensive controls, 30 mild and moderate hypertensive and 20 severe hypertensive. Of the two hypertensive groups(pregnancy-induced hypertension, PIH), PAF activity measured by a bioassay was significantly higher than that of normotensive control at 38 weeks in gestation , indicating a possible role of this potent lipid mediator in the pathophysiological mechanism of PIH. After delivery, PAF activity was obviously increased in all three groups , showing the regulation of placenta in PAF metabolism. 展开更多
关键词 platelet-activating factor acetylhydrolase delivery pregnancy-induced hypertension
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重组人血小板活化因子乙酰水解酶保护小鼠脑缺血再灌注的研究 被引量:1
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作者 吴宜娟 王丽娟 +3 位作者 张雄 代成波 王硕 马桂贤 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期868-870,共3页
目的观察重组人血小板活化因子乙酰水解酶(rPAF-AH)对小鼠脑缺血再灌注的保护作用。方法采用线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,尾静脉注射rPAF-AH预处理后观测模型小鼠神经行为学和脑梗死灶大小的改变,采用Westernblot研究MMP-2... 目的观察重组人血小板活化因子乙酰水解酶(rPAF-AH)对小鼠脑缺血再灌注的保护作用。方法采用线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,尾静脉注射rPAF-AH预处理后观测模型小鼠神经行为学和脑梗死灶大小的改变,采用Westernblot研究MMP-2的表达及活性,同时与奥扎格雷钠注射液、金纳多注射液及假手术对照组比较。结果 rPAF-AH预处理明显降低脑梗死小鼠行为障碍的神经行为学评分和脑梗死灶的大小(P<0.01)。Westernblot分析结果证明,rPAF-AH预处理可降低脑缺血再灌注损伤所诱导的MMP-2蛋白的表达及其活性水平(P<0.01)。结论 rPAF-AH预处理对小鼠脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,这可能得益于其抑制了MMP-2蛋白的高表达及活性增高。 展开更多
关键词 血小板活化因子乙酰水解酶 脑缺血再灌注 基质金属蛋白酶
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人细胞内Ⅰ型血小板激活因子乙酰水解酶重组蛋白的构建、纯化及酶活性研究
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作者 陈晓莹 徐静 +1 位作者 杨军伟 张怡轩 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1152-1156,共5页
目的构建人细胞内Ⅰ型血小板激活因子乙酰水解酶(PAF-AH)重组蛋白并加以纯化,利用不同底物研究酶活性。方法细胞内Ⅰ型PAF-AHβ亚基基因进行PCR扩增,目的基因经纯化、连接载体转化大肠杆菌DH5α感受态细胞构建重组蛋白,提取质粒行琼脂... 目的构建人细胞内Ⅰ型血小板激活因子乙酰水解酶(PAF-AH)重组蛋白并加以纯化,利用不同底物研究酶活性。方法细胞内Ⅰ型PAF-AHβ亚基基因进行PCR扩增,目的基因经纯化、连接载体转化大肠杆菌DH5α感受态细胞构建重组蛋白,提取质粒行琼脂糖凝胶电泳、NdeⅠ和HindⅢ双酶切及测序鉴定。鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞诱导蛋白表达和纯化,15%SDS-PAGE和Western blotting鉴定。分别以乙酸苯酯、l-O-hexadecyl-2-deoxy-2-thioacetyl-sn-glycero-3-phosphocholine(2-Thio PAF)和1-myristoyl-2-(4-nitrophenylsuccinyl)phosphatidylcholine为底物(后两者为血浆型PAF-AH的商业化底物),应用分光光度法检测纯化后重组蛋白的酶活性,以血浆型PAF-AH作为阳性对照。结果人细胞内PAF-AHⅠ型β亚基重组蛋白构建正确,纯化后在大肠杆菌感受态细胞中诱导表达。与阳性对照血浆型PAF-AH比较,纯化后的重组蛋白同样能够水解乙酸苯酯,具有芳香酯酶活性;能快速水解2-Thio PAF,但不能水解1-myristoyl-2-(4-nitrophenylsuccinyl)phosphatidyl-choline。结论成功构建人细胞内Ⅰ型PAF-AH重组蛋白,其对血浆型PAF-AH的两个商业化底物具有完全不同的水解能力,以此可快速区分细胞内和血浆型PAF-AH。 展开更多
关键词 Ⅰ型血小板激活因子乙酰水解酶 血浆型血小板激活因子乙酰水解酶 重组蛋白 纯化 酶活性 底物
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