四环素对EPO基因表达的调控研究

目的探讨四环素调控系统对重组人促红细胞生成素基因表达的调控。方法将pTRE2hyg-EPO及Tet—On质粒转导人SD大鼠骨骼肌细胞，用RT-PCR、Western印迹实验及红系集落生成实验检测hEPO基因在大鼠骨骼肌内的表达和蛋白的活性，并观察四环素系统对EPO表达的调控作用。结果重组人EPO基因可以在大鼠骨骼肌原代细胞中表达，并受四环素调控系统的控制，并与诱导药物剂量成正比。生成的促红细胞生成素具有生物活性，可明显刺激骨髓红系细胞的生长。结论在细胞水平四环素调控系统可控制转导的EPO基因的表达，并且生成有生物活性的促红细胞生成素，达到基因治疗的要求。