重组水蛭素Ⅲ工程菌菌种稳定性考察

研究基因工程菌E .coliAS1.35 7在LB培养基中传代 5 0代过程中菌种的稳定性。以菌体和菌落的形态、质粒稳定性 (ST)、质粒酶切图谱和水蛭素的表达量以及比活等方面进行考察 ,以评价工程菌的稳定性。重组水蛭素Ⅲ工程菌在传代 5 0代的过程中质粒稳定性高 ,传代 10代内质粒稳定性 (ST)为 98% ,且表达稳定 ,表达产物可达发酵液可溶性蛋白总量的 6 0 % ,产物的抗凝血酶活力大于 2 .0× 10 3 ATU/ml,传代 5 0代的菌体与菌落呈典型的大肠杆菌形态。重组水蛭素Ⅲ工程菌菌种稳定。

重组人内皮抑素工程菌菌种稳定性考察

研究重组人内皮抑素突变体质粒HM-E的宿主菌E.coliBL21(DE3)在LB培养基中传代50代过程中菌种的稳定性。研究表明,重组人内皮抑素工程菌在传代50代的过程中质粒稳定性(ST)高,为98%,菌体与菌落呈典型的大肠杆菌形态,反复冻融后表达量未下降,目标蛋白在菌体超声的沉淀中质量分数为(58.75±3.78)%,同时,四甲基偶氮唑盐微量反应比色法(MTT)结果表明目的蛋白质量浓度为20μg/mL时对内皮细胞ECV-304具有很高的抑制率,达(94.72±2.10)%。