结直肠癌中RegⅣ和EGFR的表达及临床意义

目的探讨RegⅣ与EGFR在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织及正常结直肠黏膜组织中的表达,并分析二者表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化结合组织芯片法检测92例CRC组织及对应正常黏膜组织(距癌边缘>5 cm)中RegⅣ与EGFR的表达,并分析二者表达的相关性。结果 (1)CRC组织与正常黏膜组织中RegⅣ的阳性率分别为53.3%(49/92)与8.7%(8/92);EGFR的阳性率分别为55.4%(51/92)、4.3%(4/92)。RegⅣ与EGFR在CRC组织中的表达均高于正常黏膜组织(P<0.05)。(2)REGⅣ与EGFR的表达与CRC分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05),二者表达与患者性别、年龄、肿物大小以及浸润深度均无关(P>0.05)。(3)CRC组织中RegⅣ与EGFR的表达呈正相关(rs=0.343,P=0.001)。结论 RegⅣ与EGFR在CRC组织内的表达均增高,并且呈正相关关系,提示二者共同参与CRC的发生与发展,联合检测RegⅣ和EGFR可为研究CRC的治疗、生物学行为及预后提供理论依据。

RegⅣ基因在结直肠癌细胞系中的mRNA表达及pcDNA-RegⅣ的构建与转染

目的:探讨RegⅣ基因在4种结直肠癌细胞系中的表达水平,构建并转染pcDNA-RegⅣ重组质粒,为阐明RegⅣ基因在结直肠癌发生发展中的作用机制奠定基础。方法:采用RT-PCR方法检测HT-29、Caco-2、Sw480、LoVo细胞系的RegⅣ基因表达水平,将获得目的基因RegⅣ克隆于pcDNA3.1/(-)质粒上,用PCR、酶切进行鉴定后,脂质体转染至低表达甚至不表达RegⅣ的结直癌细胞系,用G418筛选后进行RT-PCR鉴定。结果:HT-29、Caco-2细胞系RegⅣ基因高表达,Sw480细胞系表达较前两者弱,LoVo细胞系RegⅣ阴性表达;构建的重组质粒中含有RegⅣ基因,经pcDNA-RegⅣ转染的LoVo细胞RegⅣ基因呈阳性表达。结论:RegⅣ基因在不同的结直肠癌细胞系中表达水平不同。成功构建和转染了pcDNA-RegⅣ,可使得RegⅣ(-)的LoVo细胞系RegⅣ基因呈阳性表达。

RegⅣ在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨再生基因Ⅳ(RegⅣ)在胃癌组织中表达的临床意义。方法:采用二步法免疫组化技术(Envision),检测RegⅣ蛋白在48例术前未经化疗的胃癌组织及正常胃黏膜中的表达。结果:48例胃癌组织中RegⅣ阳性表达23例,阳性率47.9%,在正常胃黏膜中无表达。RegⅣ蛋白表达与胃癌分化程度、淋巴结转移、TNM分期密切相关。结论:RegⅣ在胃癌组织中高表达,可能参与胃癌发生发展等过程并起作用。检测RegⅣ蛋白的表达对于判断胃癌预后有一定的价值。

RegⅣ与胃肠道肿瘤关系的研究进展

人类Reg基因家族属于钙依赖凝集素超家族，主要在近端胃肠道表达，并在有炎症损伤的部位异位表达，在细胞增殖和分化过程中起重要作用。RegIV基因是Reg家族新发现的一员，其表达具有严格的调控，主要表达于胰腺及胃肠道。研究表明，其与胃肠道肿瘤的发生发展、转移以及预后有着密切的关系。本文将对RegIV的结构、分布以及与胃肠道肿瘤关系的研究进展作一综述。

RegⅣ基因在大肠癌中抗凋亡作用的体外研究

目的观察RegⅣ基因在大肠癌细胞系中的表达情况及其体外抗凋亡作用。方法采用RT-PCR和免疫组织化学染色法检测4种大肠癌细胞系中RegⅣ基因的表达,通过MTT法分析不同浓度的姜黄素对4种大肠癌细胞系(HT-29、Caco2、Sw480和Lovo)的生长抑制作用,应用流式细胞仪评价RegⅣ基因的抗凋亡作用。结果RegⅣmRNA在HT-29细胞系高表达,Caco2细胞系较高表达,Sw480细胞系较低表达,Lovo细胞系不表达;RegⅣ蛋白在HT-29细胞胞核和胞质内表达阳性,Lovo细胞胞核和胞质表达阴性,Sw480细胞胞质内表达阳性,Caco2细胞胞质内表达弱阳性。不同浓度的姜黄素对4种细胞系的生长抑制作用强弱依次为Lovo>Sw480>Caco2>HT-29;用20μmol.L-1的姜黄素处理24 h后,4种细胞系的凋亡率大小依次为Lovo>Sw480>Caco2>HT-29。结论RegⅣ基因高表达与大肠癌发生可能有关;RegⅣ基因在大肠癌中可能具有抗凋亡作用。

RegⅣ、VEGF-C在结肠癌中的表达及意义

目的:研究RegⅣ和VEGF-C、D2-40在结肠癌组织中的表达,并探讨RegⅣ与淋巴管新生的关系。方法:采用免疫组化方法检测60例结肠癌和20例正常结肠组织中RegⅣ和VEGF-C表达情况,并用D2-40标记微淋巴管,计数微淋巴管密度(Lymphatic microvessel density,LMVD)。结果:RegⅣ和VEGF-C在结肠癌中高表达,与正常组比较有显著性差异,并且两者呈正相关。D2-40表达的LMVD计数在结肠癌组显著增加(P<0.05)。结论:结肠癌组织RegⅣ和VEGF-C高表达并呈正相关性,说明两者共同促进了结肠癌的发生和发展,VEGF-C是淋巴管生成的调控因子,结肠癌组织中微淋巴管密度增加,推测RegⅣ可能间接的促进了微淋巴管的形成,促进了结肠癌的转移,为结肠癌的治疗思路提供了参考。

RegⅣ基因对胰腺癌细胞PANC-1增殖、侵袭、转移能力的影响

目的探讨RegⅣ基因对胰腺癌细胞PANC-1增殖、侵袭、转移能力的影响。方法取对数生长期的PANC-1细胞,于孵育箱中培养至70%~80%融合,分别以Puro-P-RegⅣ-shRNA慢病毒载体(P-RegⅣ-shRNA组)以及Puro-shRNA慢病毒空载体(P-NC-shRNA组)感染细胞,并设立不感染组(PANC-1组)。48 h后,分别用qRTPCR法和Western blotting法检测各组RegⅣmRNA及蛋白的表达。通过CCK-8试验检测细胞增殖情况,利用划痕试验和Transwell小室侵袭试验分别检测细胞的转移和侵袭能力。将10只5周龄的雌性裸鼠随机分成P-RegⅣ-shRNA裸鼠组和P-NC-shRNA裸鼠组,每组5只。取对数生长期的P-RegⅣ-shRNA和P-NC-shRNA组细胞分别注射入上述两组中。自接种日起每天观察肿瘤结节生长情况,6周后处死裸鼠并取出瘤体称重并测量瘤体体积。结果P-RegⅣ-shRNA组中RegⅣmRNA和蛋白的表达水平较PANC-1组和P-NC-shRNA组均下降(P均<0.05)。P-RegⅣ-shRNA组细胞增殖活力较P-NC-shRNA组和PANC-1组下降(P均<0.05)。与PANC-1组、P-NC-shRNA组比较,P-RegⅣ-shRNA组48 h细胞迁移距离缩短,穿膜细胞数减少(P均<0.05)。PANC-1组、P-NC-shRNA组各观察指标比较,P均>0.05。与P-NC-shRNA裸鼠组比较,P-RegⅣ-shRNA裸鼠组肿瘤生长速度慢,肿瘤体积小(P均<0.01)。结论下调RegⅣ基因可抑制胰腺癌细胞PANC-1增殖、转移、侵袭。

RegⅣ和HIP在胃肠道腺癌中的表达及临床意义

研究再生基因4(RegⅣ)和肝细胞癌-肠-胰腺中表达的基因(HIP)在胃肠道腺癌中的表达及其临床意义。构建微阵列组织芯片,应用免疫组织化学技术检测胃肠道腺癌及其相应的癌旁组织中RegⅣ和HIP的表达。结果显示,与对照组相比,RegⅣ的表达显著下降,HIP的表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。RegⅣ与HIP在胃肠道腺癌组织中的表达呈负相关,且与患者组织学分级均不相关。提示RegⅣ、HIP在胃肠道腺癌中表达具有一定关联性,可能为胃肠道腺癌治疗靶点提供重要依据。

REGⅣ、ORP150与miRNA-223联合检测对胃癌的诊断价值

目的研究REGⅣ、ORP150与miRNA-223联合检测对胃癌的诊断价值。方法以126例胃癌患者作为研究对象,另选同期体检正常者126例为对照组。对观察组以及对照组、不同分期以及分化程度胃癌患者的REGⅣ、ORP150与miRNA-223水平进行比较。分别对REGⅣ、ORP150与miRNA-223水平联合检测的诊断效能进行分析。结果观察组患者的REGⅣ、ORP150显著高于对照组,miRNA-223水平显著低于对照组,差异存在统计学意义(P<0.05)。胃癌Ⅰ~Ⅱ期组患者的REGⅣ、ORP150水平显著低于Ⅲ~Ⅳ期组,Ⅰ~Ⅱ期组患者的miRNA-223水平显著高于Ⅲ~Ⅳ期组;随着患者的分化程度的进展,患者的REGⅣ、ORP150水平显著升高,miRNA-223水平显著降低。胃癌的进展(分化程度、TNM分期)与REGⅣ、ORP150呈现正相关,与miRNA-223呈现负相关。REGⅣ、ORP150与miRNA-223水平联合检测对胃癌的诊断灵敏度显著高于单独检测,通过ROC曲线分析,对于胃癌的诊断而言,患者的REGⅣ、ORP150与miRNA-223水平的临界值分别为6.11 ng/mL,10.52 ng/mL以及4.77 fmoL/L。结论REGⅣ、ORP150与miRNA-223联合检测对胃癌的诊断具有重要意义。

血清PGⅠ、PGⅡ及RegⅣ水平检测在胃癌患者中的临床意义

目的研究血清PGⅠ、PGⅡ及RegⅣ水平检测对胃癌患者的临床意义。方法整群选取该院2012年3—12月收治的216例胃部病变患者,检测所有患者血清中PGⅠ、PGⅡ、Reg Ⅳ以及CEA、CA19-9水平,其中18例胃癌患者,设为胃癌组,198例胃病患者,设为胃病组。结果血清PG和Reg Ⅳ联合检测胃癌的敏感性、特异性分别为83.3%、78.2%,血清CEA联合CA19-9检测胃癌的敏感性、特异性分别为55.6%、59.1%。PG联合Reg Ⅳ检验胃癌的敏感性、特异性都明显比CEA联合CA19-9检验高。差异有统计学意义。结论 PG和Reg联合检验具有很高的敏感性和特异性,对胃癌的诊断具有高的辅助诊断价值。

RegⅣ、EGFR、PI3K蛋白在胃腺癌中的表达及意义

目的：研究再生基因蛋白Ⅳ（ Regenerating gene typeⅣ，RegⅣ）、表皮生长因子受体（ Epider-mal growth factor receptor ，EGFR）及磷脂酰肌醇3-激酶（ Phosphatidylinositol -3-kinase，PI3K）蛋白在胃腺癌中的表达及临床意义。方法应用S-P免疫组化技术检测73例胃腺癌及其相应的癌旁正常组织中RegⅣ、EGFR和PI3K蛋白的表达情况。结果73例胃腺癌组织中RegⅣ、EGFR、PI3K蛋白的阳性表达率分别为50．7％（37/73）、56．2％（41/73）、69．9％（51/73）均高于癌旁正常组织20．5％（15/73）、19．2％（14/73）、21．9％（16/73），差异具有统计学意义（ P＜0．05）；RegⅣ的表达与肿瘤分化程度相关，差异有统计学意义（P＜0．05）；EGFR蛋白的表达与浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关，差异有统计学意义（P＜0．05）；PI3K蛋白的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关有统计学意义（P＜0．05）。 RegⅣ与EGFR、PI3K蛋白在胃腺癌组织中的表达呈正相关（r＝0．343、0．248，P＜0．05），EGFR与PI3K蛋白在胃腺癌组织中的表达呈正相关（ r＝0．384，P＜0．05）。结论 RegⅣ可能通过激活EGFR/PI3K/Akt信号通路在胃腺癌的发生发展中发挥重要作用。

RegⅣ、血管内皮生长因子在胃癌中表达及其与微血管密度关系的研究

目的探讨胃癌组织RegⅣ、血管内皮生长因子(VEGF)表达及其与微血管密度(MVD)、临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学(S-P)染色法检测89例手术切除胃癌组织中RegⅣ、VEGF和CD34的表达,计算MVD,结合临床病理特征分析。结果 89例胃癌组织中RegⅣ和VEGF蛋白表达率分别为41.57%(37/89)、75.28%(67/89),表达均明显高于癌旁组织;胃癌组织中MVD为(54.90±2.61)个/mm2,明显高于癌旁组织(9.12±3.12)个/mm2,统计学比较差异显著(P<0.05)。RegⅣ、VEGF表达与MVD分别与肿瘤分化呈负相关(P<0.05),与癌组织浸润深度、淋巴转移和临床分期呈正相关(P<0.05)。结论 RegⅣ、VEGF在胃癌组织中呈高表达,并与癌细胞增殖、癌血管形成有关,联合检测可作为判断胃癌生物学行为的重要指标。

Reg Ⅳ蛋白在结肠癌组织中表达及与其发生发展的关系

目的探讨RegⅣ蛋白表达与结肠癌发生发展的关系。方法采用SABC免疫组织化学法,检测102例结肠癌组织及50例正常结肠黏膜中RegⅣ表达。结果正常结肠黏膜中RegⅣ无表达,结肠癌组织中RegⅣ阳性表达率为34.31%,其中G1、G2和G3期结肠癌组织其阳性表达率分别为0、22.22%和68.66%,不同病理分级间其表达有显著性差异(P<0.05);T0～T4期其阳性表达率分别为0、33.33%、44.44%、52.38%和71.42%,各期间比较差异有显著性(P<0.05),两者回归方程为γ=5.955+15.83X,相关系数γ=0.973。结论结肠癌中RegⅣ高表达与其病理分级及临床分期密切相关,可作为结肠癌分化程度的一个判断指标。

Reg Ⅳ mRNA在结直肠癌的表达及临床意义

目的:分析RegⅣmRNA在新鲜结直肠癌患者的表达及其与性别、淋巴结转移、临床分期之间的关系。方法:收集长治医学院附属和平医院和南方医科大学附属南方医院结直肠癌患者新鲜结直肠癌组织30例和正常结直肠组织30例,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测结直肠癌组织及正常组织中RegⅣmRNA表达水平。结果:RegⅣmRNA在结直肠癌组的表达量是正常结直肠组表达量的8.73倍(t=3.721,P<0.05),RegⅣmRNA在结直肠癌的表达和患者的性别无关(t=0.074,P>0.05),与淋巴结转移呈正相关(t=4.369,P<0.05),与临床分期无关(F=0.398,P>0.05)。结论:RegⅣmRNA在结直肠癌高表达,RegⅣmRNA的表达可能与结直肠癌患者的淋巴结转移密切相关。

RegⅣ在食管癌变过程中的表达

目的:探讨RegⅣ基因在食管癌变过程中的表达。方法:应用免疫组织化学S-P法检测RegⅣ基因在17例癌变组和40例非癌变组中的表达。结果:RegⅣ在癌变组中的表达增高(P<0.05)。结论:RegⅣ基因的表达和食管癌的发生有关,该基因表达的变化可能是食管癌变过程中的早期事件。

柳氮磺胺吡啶及美沙拉嗪对溃疡性结肠炎结肠黏膜RegIV蛋白表达的影响及意义

目的探讨柳氮磺吡啶（SASP）及美沙拉嗪对溃疡性结肠炎结肠黏膜RegIV蛋白表达的影响及意义。方法收集溃疡性结肠炎患者60例，分成SASP组（A组）和美沙拉嗪组（B组），随访及治疗8NN复查肠镜及黏膜活检，通过RT-PCR、免疫组化检测RegⅣ表达水平。结果RT-PCR、免疫组化结果提示RegIV在两组治疗前表达差异无统计学意义（P〉0．05）；治疗后两组表达均明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）；美沙拉嗪组下降水平〉SASP组（P〈0．05）；RegⅣ表达水平与溃疡性结肠炎活动度呈正相关（r=0．872，P〈0．001）。结论美沙拉嗪较柳氮磺胺吡啶对RegⅣ有更强的抑制作用。

再生基因Ⅳ在子宫内膜样腺癌中的表达及与细胞增殖的关系

目的检测子宫内膜样腺癌中再生基因Ⅳ(RegⅣ)和增殖相关抗体增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67表达,分析其临床意义。方法 65例子宫内膜样腺癌术后存留的蜡块组织作为观察组,30例复杂性增生的子宫内膜组织作为对照组,21例因子宫肌瘤行子宫全切后的非肿瘤性子宫内膜组织作为正常对照组。应用免疫组化SP法检测三组中RegⅣ、PCNA和Ki67的表达。结果三组中RegⅣ、PCNA和Ki67的表达差别有统计学意义。观察组中RegⅣ、PCNA和Ki67的表达均与肿瘤的浸润深度和最大径均密切相关,RegⅣ的表达与分化程度密切相关。相关分析显示观察组中RegⅣ和PCNA、RegⅣ和Ki67的表达均呈正相关性。结论子宫内膜样腺癌中RegⅣ高表达是肿瘤形成和进展的重要因素,RegⅣ对肿瘤细胞的增殖有一定的调节作用。

再生基因家族与消化系统肿瘤

再生基因家族自1988年被发现以来,其在糖尿病、炎症创伤和肿瘤尤其是消化系统肿瘤中的作用越来越受到重视.目前,越来越多的再生基因家族成员被发现.随着相关研究的逐步深入,再生基因家族在肿瘤中所起的重要作用,尤其是RegⅣ在消化系统肿瘤中作用越来越引起人们的注意.

再生基因4及其编码产物在消化道肿瘤中的作用

再生基因4（ regenerating islet - derived family, member 4, REG4 ）是一个新发现的基因，可能参与肿瘤尤其是消化道肿瘤的发生和发展。本文就Reg4基因及其编码产物RegⅣ蛋白所在家族、结构、功能及其与消化道肿瘤的关系、所参与的信号转导通路等问题作一综述。