提高枯草杆菌(B.subtilis)原生质体再生率的研究(简报)

细菌原生质体制备和再生是研究细胞融合的前提条件,但关于其原生质体形成及再生的最适条件迄今尚缺乏系统的研究。再生率不高,且不稳定。本文研究了有关诸因素对供试菌株原生质体化及其活性的影响,尤其是提高再生率的措施。试验所用材料,菌株B.Subtilis Ki-2-132(Thr^-,Val^-,Ile^-,Str^+)由中国科学院遗传所赠送;

产碱性果胶酶的枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备与再生条件

原生质体融合技术是一种重要的微生物育种方法. 以能产碱性果胶酶的枯草芽孢杆菌ZGL14为出发菌株，探讨影响其原生质体制备和再生的主要因素. 通过研究菌龄、溶菌酶浓度、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂的pH值、再生培养基类型和培养方式等对枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备与再生的影响，确定其最优化条件. 结果显示：枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备的最优条件为菌龄9 h，溶菌酶浓度0.2 mg/mL，酶解时间10 min，酶解温度32 ℃，渗透压稳定剂的pH值 7.0. 在此条件下，枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体的形成率为98%，再生率达30%. 枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体再生培养基以琥珀酸钠作为渗透压稳定剂并结合Ca2＋再生效果较好，再生方式以单层培养较好. 本研究获得了枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备和再生的最佳条件，可为实现其融合育种提供技术支持. （图7 表1 参14）