A NEW ALKALOID FROM THE ROOTS OF REHMANNIA GLUTINOSA

The present phytochenucal study was undertaken to investigate the chemical constituents of the 95%EtOH extract of the dried roots of Rehmannia glutinosa.The compounds were isolated and purified by Diaion HP-20,Toyopearl HW-40,silica gel column chromatography and preparative HPLC,and the structures were identified on

试管地黄的不定根膨大过程中4种内源激素的消长

通过分析 4种内源激素IAA、GA3 、ABA和JA在试管地黄形态建成中的动态变化 ,初步探讨了试管地黄形成的生理生化机制。在MS +6 BA 0 5mg·L-1+NAA 0 1mg·L-1+5 %蔗糖培养基中诱导地黄无菌苗茎段形成不定根 ,再转入MS +6 BA 1 0mg·L-1+IBA 0 1mg·L-1+5 %蔗糖继代培养 ,取不同生长时期的根 ,对其内源激素进行分离和纯化 ,经HPLC法进行测定 ,结果表明在试管地黄形成过程中IAA、GA3 、ABA和JA的含量存在动态变化 ,基本呈上升趋势。

地黄根系分泌物化感效应与酚酸类物质的关系研究

目的：通过研究不同生育时期地黄根系分泌物化感潜力和酚酸类物质含量动态变化,揭示酚酸类物质与地黄化感效应之间的关系。方法：利用新型根系分泌物收集装置,收集地黄不同生育时期根系分泌物,采用HPLC分析5种酚酸（香豆酸、对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、阿魏酸）含量变化并通过生物测试（萝卜种子发芽试验）评价其化感潜力,分析根系分泌物化感效应与5种酚酸含量的相关性。结果：地黄不同生育时期根系分泌物浸种后萝卜种子发芽率为97.89%、92.38%、89.52%、85.71%、85.71%、84.76%和83.81%,随生育期推进呈逐渐降低趋势,其中从块根膨大前期开始与对照表现出显著差异;芽长为5.68、5.76、5.91、5.65、5.41、5.28和5.11 cm,呈先升高后降低的趋势,同样从块根膨大前期开始与对照相比差异达到显著水平。HPLC检测地黄不同生育时期根系分泌物均发现了5种酚酸,但其含量未呈现与根系分泌物化感作用相似的变化规律,对两者相关性分析发现,除丁香酸与发芽长度呈显著负相关外（r=-0.833,P〈0.05）,其他酚酸含量均未与萝卜种子发芽率和芽长表现出显著相关性（r=-0.666-0.590）。结论：地黄于块根膨大前期开始表现出显著化感作用,且化感作用随生育期的推进逐渐增强。丁香酸可能是引起地黄化感效应的主导物质。

1株引起地黄根腐的镰刀菌的鉴定及生物学特性研究

采用PSA培养基法,从地黄病根上分离得到镰刀菌.通过菌落形态、色素颜色、菌落生长速率、大型分生孢子、小型分生孢子以及产孢梗等形态学观察,初步认为其为层出镰刀菌;采用真菌rDNA ITS区的通用引物对其DNA进行PCR扩增,PCR产物经连接转化并验证后测序,将测序结果登录GenBank进行BLAST分析,检测结果与形态学鉴定结果一致,表明地黄根腐病病原菌JZ1为层出镰刀菌Fusarium proliferatum(其序列在GenBank中的登录号为HQ113948).生物学活性结果表明:层出镰刀菌在15～35℃均可生长,最适生长温度25℃左右;适宜病菌生长的pH值为7.0;其菌丝在蔗糖上生长最好,硝酸钾是其最佳氮源.

地黄根系分泌物生物活性研究及化感物质的鉴定

采用砂粒为培养地黄苗的基质,利用XAD-4柱循环收集地黄根系分泌物,通过对地黄、莴苣、芝麻、萝卜的生物测定,将有影响的组分进行GC-MS物质鉴定。研究结果显示:根系分泌物的酸性组分和中碱性组分对作物胚根和胚芽伸长都有抑制作用,随添加量的增加抑制加强,其中对萝卜胚根的影响表现为低促高抑。分别将两种组分进行GC-MS物质鉴定,发现在两种组分中都含有长链脂肪酸和阿魏酸等常见的化感物质。

试管地黄诱导技术的研究

目的 :研究小植株离体条件下试管地黄诱导的最佳培养基和培养条件。方法 :选用地黄“85 5”为试验材料 ,研究了植物激素、蔗糖浓度、活性炭和日照时间等对地黄试管苗不定根的形成及膨大的影响。结果与结论 :将试管苗先在 1/ 2MS +IBA 1mg·L-1的培养基中诱导生根后 ,转入诱导培养基中 ,根可膨大形成试管地黄 ,其最适诱导培养基为MS +6 BA 2mg·L-1+NAA 0 .1mg·L-1+蔗糖 5 % ,最适培养条件为 2 5℃、光照 2 0 0 0～ 30 0 0lx ,12h·d-1,培养基中不宜添加活性炭和GA3 。

怀地黄块根内含梓醇结构的组织化学和超微结构研究

应用半薄切片、组织化学和透射电子显微镜观察相结合的方法,研究了梓醇在地黄块根中的贮存位置及其细胞的超微结构。结果表明,地黄块根的韧皮部和木质部的薄壁细胞是梓醇的贮存场所。

怀地黄块根的形态发生和结构发育

观察了怀地黄 Rehmannia glutinosa cv.H ueichingensis Hsiao. 块根的形态发生和生长发育过程中的形态结构变化 .采用怀地黄的传统栽培方法 ,即用上一年的块根作母根进行繁殖 ,分别从母根和不定芽的茎基部发生不定根 .怀地黄不定根的初生结构和维管形成层的发生与一般双子叶植物相同 ,但其次生生长却有两种方式 ,即正常次生生长和异常次生生长 .一类不定根的形成层产生的次生结构与一般双子叶植物相同 ,即次生木质部中主要是导管 ,而薄壁细胞较少 .这类不定根其次生生长为正常次生生长 normal secondary growth ,是担负吸收和固着作用的正常根 .另一种类型的不定根 ,其形成层产生的次生木质部含有大量的薄壁细胞 ,少量的导管分散在薄壁细胞之间 .这种次生生长为异常次生生长 anom alous secondary growth ,从而使不定根膨大 ,形成块根 .因此 ,怀地黄的药用部分在起源和结构上都属于根的性质 。

地黄块根水提液对地黄种子萌发及幼苗生长的影响

目的:了解地黄块根浸提液(Rehmannia glutinosa root extracts,RRE)对地黄种子萌发及幼苗生长的化感效应,寻找地黄连作障碍原因及减轻连作障碍的途径.方法:采用培养试验法,用不同浓度的RRE处理地黄种子,观察种子萌发和幼苗生长并测定相关生理指标,结果:当RRE质量浓度为0.006 5g·mL-1时,种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数与对照差异极显著,根长、苗高和根长/苗高与对照差异显著,具有量效关系,浓度越高抑制效应越强;当质量浓度0.052 0g·mL-1时,则抑制种子的萌发.结论:地黄块根汁液存在化感物质,土壤中的地黄块根分泌物及根系溃烂腐解所释放的化感物质是抑制地黄种子萌发和幼苗生长的主要原因,也是导致地黄连年种植减产绝收的原因.

UPLC法测定地黄叶及块根中的梓醇和毛蕊花糖苷

目的比较地黄叶及块根中梓醇和毛蕊花糖苷的含有量。方法地黄叶及块根甲醇提取液的分析采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);柱温35℃;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量0.2 m L/min;检测波长210 nm。结果梓醇含有量由高到低,依次为地黄嫩叶(149.22 mg/g)>老叶(49.29 mg/g)>块根(33.33 mg/g)>干叶(15.53 mg/g);毛蕊花糖苷含有量依次为地黄老叶(10.27 mg/g)>干叶(10.03 mg/g)>嫩叶(9.56 mg/g)>块根(0.28 mg/g)。结论地黄嫩叶中梓醇的含有量约为老叶的3倍,但毛蕊花糖苷的含有量略低于老叶。地黄叶存放一年后,毛蕊花糖苷的减少量比梓醇小,表明前者稳定性高于后者。而且,这两种成分在叶中的含有量均比在块根中更高。

地黄叶片器官形态建成的研究

目的 :研究地黄叶片器官发生的形态建成 ;建立诱导地黄叶片直接再生植株和试管小地黄的最佳培养基和培养条件。方法 :从无菌脱毒苗上采取不同位置的叶片 ,接种到附加不同激素的培养基中 ,诱导叶片直接再生植株和试管地黄。结果与结论 :MS +6 BA 2 .0mg·L-1培养基最适合叶片再生植株。MS +6 BA 1.0mg·L-1+NAA 0 .5mg·L-1培养基适合诱导试管地黄。最佳培养条件是光照 12h·d-1,光强 2 0 0 0～ 3 0 0 0lx ,温度 (2 5± 1)℃。

试管地黄形成过程中形态发生的研究

目的 :研究试管地黄形成的形态发生过程 ,比较试管地黄与自然条件下生长的地黄在形态解剖上的异同。方法 :取离体条件下和自然条件下不同阶段形成的地黄块根 ,染色后制成石蜡切片 ,于显微镜下观察。结果与结论 :试管地黄在形态解剖方面与自然条件下生长的地黄具有一致性 ,说明试管地黄在诱导过程中未发生结构上的变化。

地黄块根的发育解剖学研究

地黄根的初生构造与次生生长的发生类似一般双子叶植物。但在以后的发育过程中，木栓形成层产生了多层栓内层薄壁细胞，维管形成层则产生了大量高度薄壁组织化的次生维管组织，从而形成了肉质膨大的块根。地黄块根的这种形成方式为一种异常生长。

地黄毛状根的诱导及条件优化

以发根农杆菌Accc10060菌株侵染地黄外植体,研究不同菌液浓度、不同侵染时间和不同共培养时间对地黄毛状根诱导率的影响。结果表明,发根农杆菌Accc10060菌株可成功诱导出地黄毛状根,PCR检测发现发根农杆菌Ri质粒rol C基因已整合到地黄基因组中并得到表达;单因素试验结果显示,在地黄毛状根的诱导过程中,诱导的最佳菌液浓度为OD600=0.6,最佳侵染时间为10 min,最佳共培养时间为4 d。

怀地黄不定芽诱导生根和微型块茎繁殖的研究

研究了以怀地黄(Rehmannia glutinosa)不定芽诱导生根的适宜培养基以及微型块茎繁殖.结果表明:以IBA2.0mg·L-1+BA0.5 mg·L-1,糖浓度40g·L-1培养基生根效果好,根多、粗壮,移栽后成活率可达98.2％;以IBA2.0mg·L-1+BA2.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1,糖浓度为40g·L-1为诱导微型块茎的最佳培养基.

连作地黄的植株形态生理效应研究

目的:本研究以头茬地黄为对照,通过测定地黄生育期内叶绿素含量、光合特性、根系活力及酶活性,研究连作条件下地黄形态生理特性的差异表现。方法:使用SPAD-502叶绿素测定仪测定叶绿素含量,采用LI-6400便携式光合仪测定植物光合特性,并按常规测定植物根系活力及酶系统。结果:连作地黄在生育前期其障碍效应已经发生,并伴随整个生育进程;连作地黄叶绿素含量、光合特性及根系活力都维持在较低的水平,其中处理间地黄叶绿素含量和栽后100 d的根系活力达到显著性差异。结论:连作条件下地黄光合源的不足及(块根)库容阈值的降低,可能是导致地黄连作障碍的主要原因。

地黄对土壤动物数量和群落结构的影响

为研究地黄对土壤小型动物数量和群落结构的影响,本试验通过在地黄种植田采用人为移除地黄凋落物、添加地黄凋落物和移除地黄根系等处理,定期调查了土壤小型动物的数量变化以及其与环境因子的相关性。结果表明,去除根系使土壤螨类的数量减少26.9%,对跳虫和线虫的数量没有影响;添加凋落物导致螨类和跳虫的数量分别增加73.0%和121.9%;去除凋落物对土壤动物的数量没有影响。螨类和跳虫的数量在9月份和10月份较其他月份多,而线虫的数量在5月份的数量高于其他月份。线性相关分析表明,土壤螨类的数量随着土壤pH值的增加而降低。综上可知,地黄根系对土壤动物的影响大于地上凋落物,且主要通过改变土壤环境起作用。同时,由于不同土壤动物种类对添加凋落物和去除根系响应不同,从而使土壤动物的群落结构也发生了改变。本研究结果为解决地黄连作障碍提供了新的研究思路。

“黄芪、当归、生地”角药治疗虚劳(重症迁延期)的理论基础与临床实践

虚劳(重症迁延期)是临床重症患者较常见的疾病阶段,以脏腑阴阳气血亏虚为基本病机,临床配伍"黄芪、当归、生地"角药进行治疗多能取得较满意的疗效。本文从传统认识、现代研究及角药作用等方面阐述其理论基础,结合医案阐明临床应用效果。

怀地黄脱毒试管苗生根移栽技术的研究

怀地黄为传统大宗中药材,为探究其脱毒试管苗生根移栽的最佳条件,提高移栽成活率,以怀地黄脱毒试管苗85-5为材料,探索了不同因子对地黄试管苗管内和管外生根的影响以及适宜于试管苗移栽的基质配比。结果表明:管内生根最适的PP333质量浓度为0.10mg/L,此时试管苗的根数达到28条,株高为4.0cm;接种密度为6个/瓶时,株高、叶片数、根数、根长都达到了较为理想的状态,根数达38条,株高为3.3cm;接种部位为顶芽时根数较多,达到38条,株高达到3.5cm,与侧芽相比有显著性差异;管外生根NAA生根效果明显优于IBA,2种激素最适浓度和处理时间分别为:NAA 50mg/L处理60min,苗存活率100%,生根率90%;IBA 50mg/L处理15min,苗的存活率95%,生根率85%;移栽基质的最适质量比例为草炭土∶蛭石=1∶2。

地黄组织培养研究进展

地黄为玄参科多年生药用草本植物。地黄易受多种病害的侵袭,其中以病毒侵害最为严重,通常田间感染率达100%,致使地黄品种不断退化,直接影响种植者的经济效益。茎尖脱毒培养技术是获得脱毒植株的根本途径。该研究就目前地黄组织培养研究现状,从地黄组织培养中外植体、培养基以及外源激素等方面研究现状进行了综述,目的是为进一步建立和完善地黄幼胚再生体系和转化体系提供参考。