Apocynin对缺氧复氧后肾小管上皮细胞MCP-1表达的干预作用

目的:研究缺氧复氧后肾小管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及Apocynin对其影响。方法:选用人肾小管上皮细胞(HK-2)建立缺氧复氧损伤模型,设正常对照组、单纯缺氧复氧组、不同浓度(0.05、0.25、0.5mmol/L)Apocynin干预组。流式细胞术检测细胞内氧化应激水平,流式细胞术检测MCP-1蛋白表达、RT-PCR法测定细胞MCP-1mRNA表达。结果:缺氧复氧后HK-2细胞内氧化应激水平提高,细胞MCP-1蛋白和mRNA表达上调,且随缺氧时间的延长,细胞内氧化应激水平逐渐升高,MCP-1蛋白和mRNA表达逐渐增强;Apocynin呈剂量关系抑制细胞内氧化应激水平,同时呈剂量关系抑制MCP-1蛋白和mRNA表达的上调。结论:缺氧复氧诱导细胞内氧化应激的产生,诱导MCP-1表达上调;Apocynin可以通过抑制细胞内氧化应激抑制MCP-1的上调。

缺氧/复氧后肾小管上皮细胞ICAM-1表达及Apocynin对其干预作用的研究

目的:研究缺氧/复氧后肾小管上皮细胞氧化应激的变化细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白和mRNA的表达及NADPH氧化酶抑制剂Apocynin对其的影响。方法:采用肾小管上皮细胞(HK2)建立缺氧(细胞置于37℃、95%N_2、5%CO_2环境中)/复氧(细胞置于37℃、95%O_2、5%CO_2环境中)细胞模型,设正常对照组,缺氧0.5 h、1 h、2 h/复氧24 h组,及不同浓度(0.05 mmol/L、0.25 mmol/L、0.5 mmol/L)Apocynin干预组。流式细胞术检测细胞内氧化应激水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定细胞ICAM-1 mRNA表达,流式细胞术检测ICAM-1蛋白表达。结果:缺氧/复氧后HK2细胞内氧化应激水平提高,ICAM-1 mRNA和蛋白表达增强,随缺氧时间的延长,细胞内氧化应激水平逐渐升高,ICAM-1mRNA和蛋白表达也逐渐增强;Apocynin呈剂量依赖关系抑制细胞内氧化应激和ICAM-1 mRNA、蛋白表达的上调。结论:缺氧/复氧诱导细胞内氧化应激的产生,诱导ICAM-1表达上调;Apocynin可以通过抑制细胞内氧化应激抑制ICAM-1的上调。