5种呼吸道病毒Array-ELISA检测方法的建立

目的:建立能够同时检测常见呼吸道病毒的Array-ELISA方法。方法:未经标记的单克隆抗体作为捕获抗体在96孔板的微孔中点制成阵列,生物素标记的单克隆抗体作为检测抗体,与待检病毒反应后,利用电化学发光法放大反应信号,通过CCD传感器读取反应结果。结果:经过优化后,使用的抗体组合能够检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒和副流感病毒3型,其最低检测限分别为3.1×102、1.3×103、5×103、2.5×103和1.5×104TCID50/m L,各病毒之间未见交叉反应。结论:建立的Array-ELISA方法可用于检测以上5种病毒,具有较高的灵敏性和较强的特异性。

某地区冬季上呼吸道病毒感染情况分析

目的:收集388例冬季就诊患者上呼吸道病毒核酸样本进行检测分析,为该地区冬季呼吸道疾病临床诊疗提供理论支持。方法:选取2023年12月-2024年2月于山东省某三甲医院就诊的呼吸道感染患者,分别采集口咽拭子标本并采用实时荧光定量PCR法对6种上呼吸道病毒(呼吸道合胞病毒、腺病毒、人偏肺病毒、副流感病毒Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型)进行检测,分析患者感染情况。结果:388例患者中,确诊病毒感染199例(51.29%),其中单一病毒感染143例(36.86%),以呼吸道合胞病毒(RSV)为主;两种以上病毒感染56例(14.44%),以呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(Radv)、副流感病毒(PIV)感染为主。在感染人群中,0~5岁儿童病毒感染较其他年龄分组更高,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:该地区冬季因呼吸道疾病就诊患者病原体感染以RSV为主,其中病毒感染高发于婴幼儿。儿科及疾病感染科应加强对重点人群的关注并加强病毒感染防护措施,防止患者之间的交叉感染,做到早发现、早诊断、早治疗,减少院内病区呼吸道病毒的流行。

应用ELISA方法检测四种呼吸道病毒感染的IgG抗体

建立了用来检测儿童下呼吸道呼吸道合胞病毒(RSV)、副流感病毒(PFV)和腺病毒(AdV)急性感染的血清特异性IgG抗体的ELISA方法。所用抗原经去氧胆酸钠处理,制备简单.用量经济。应用本法观察了下呼吸道急性感染患儿血清中RSV、PFV、AdV IgG抗体的水平与动态.检测50份双份血清,特异性IgG抗体4倍增高者,RSV 16例(32％),PFV10例(20％),AdV10例(20％),麻疹8例(16％)。对病毒间混合感染做了初步观察。

ELISA间接法检测呼吸道合胞病毒和副流感病毒血清IgM和IgA抗体

建立了检测呼吸道合胞病毒(RSV)和副流感病毒(PFV)血清特异性IgM和IgA抗体的间接ELISA方法。在方法统一的基础上比较了检测IgG、IgM和IgA抗体的结果,证明检测血清IgM和IgA可以作为RSV和PFV感染的早期诊断指标。检测了120份临床急性下呼吸道感染患儿的血清,RSV-IgM检出率为33.3％,RSV-IgA为36.7％;PFV-IgM为27.5％,PFV-IgA为31.6％。提出了对RSV和PFV感染以检测特异性IgA替代IgM或两者互补的设想。

IgM捕获ELISA应用于婴幼儿急性下呼吸道病毒感染早期诊断

利用抗人IgM μ链单克隆抗体和羊抗人IgMμ链抗体作为捕获抗体,建立了检测呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(AdV)和副流感病毒(PFV)抗体IgM的5层捕获ELISA方法。本法特异性好,较间接ELISA法敏感。用以检测RSV、PFV、AdV的抗体IgM与患儿血清IgG类抗体4倍增高的符合率较高。呼吸道分泌物抗原检测阳性者,血清RSV-IgM阴性率86.67％(13/15);PFV-IgM阳性率76.47％(13/17)。RSV、PFV、AdV感染发病后5天,IgM检出率均达70％以上。同时观察到RSV再次感染其IgM抗体有可能反应加强。本文认为5层捕获ELISA法对RSV、PFV和AdV急性下呼吸道感染是可靠的诊断方法之一。

2425例小儿呼吸道感染7种常见病毒检出情况分析

目的分析急性下呼吸道感染患儿7种常见病毒[副流感病毒Ⅰ(PIVⅠ)、副流感病毒Ⅱ(PIVⅡ)、副流感病毒Ⅲ(PIVⅢ)、呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒A(IVA)、流感病毒B(IVB)、腺病毒(ADV)]的感染情况。方法收集2 425例急性呼吸道感染的住院患儿鼻咽深部分泌物标本,进行呼吸道病毒7项指标检测,从患儿年龄[婴幼儿(≤3岁)1 526例、学龄前儿童(4～7岁)650例、儿童(≥8岁)250例]、病毒分布情况、季节因素等方面进行临床流行病学特点分析。结果 2 425例患儿中有552例7种呼吸道病毒阳性,总阳性率为22.76%;其中单一病毒感染360例(65.22%)、混合病毒感染192例(34.78%);在各年龄组中婴幼儿组感染者377例(68.29%),其中单病毒感染242例(43.84%)、混合病毒感染135例(24.46%)。7种病毒中PIVⅢ感染最多,为196例(35.51%),其次为RSV[183例(33.15%)]。从季节分布来看,春、夏、秋、冬四季的检出率分别为17.79%、19.73%、22.37%、31.01%,以冬季阳性率为最高。结论 PIVⅢ感染是本地区小儿呼吸道病毒感染的主要病毒;≤3岁患儿呼吸道病毒感染率最高;以冬季为呼吸道病毒感染高发期。

呼吸道感染患儿咽拭子病毒检测分析

目的了解某医院住院下呼吸道感染患儿咽拭子常见呼吸道病毒检出情况,为临床疾病诊治提供参考依据。方法采用直接免疫荧光法,对该院2013年5月—2014年4月8 425例下呼吸道感染住院患儿咽拭子进行检测,了解患儿合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IV)-A、IV-B、副流感病毒(PIV)-1、PIV-2和PIV-3感染/携带情况。结果 8 425例住院患儿的咽拭子样本,1 879例患儿咽拭子检出病毒,总检出率为22.30%,其中以RSV检出率最高(11.31%),其次为PIV-3(4.37%)。不同性别患儿呼吸道病毒总检出率比较,差异无统计学意义(P=0.051)。婴、幼儿组RSV检出率最高,学龄前组各病毒检出比例相对接近,而小学组以ADV检出居多(37.50%)。春、冬季患儿以RSV感染为主,分别占62.82%和69.88%;夏季则以PIV-3为主,占41.71%,各病毒所占比例在秋季差异小。结论下呼吸道感染住院患儿咽拭子中7种病毒检出率与年龄、季节等变化有关;婴、幼儿组7种病毒检出率高,以RSV为主。

沈阳市某医院收治的23490例疑似呼吸道感染患者外周血常见呼吸道病毒IgM抗体检测结果分析

目的探讨2017年—2020年各年度沈阳地区呼吸道病毒的流行特征,为临床诊疗提供依据。方法选择2017年—2020年在中国医科大学附属第四医院就诊的疑似呼吸道感染患者23490例,采集患者外周血,采用EILSA法检测血清A型流感病毒(AIV)、B型流感病毒(BIV)、副型流感病毒(PIV)、腺病毒(ADV)、柯萨奇病毒(COX)、人类巨细胞病毒(HCMV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、EB病毒壳抗原(VCA)IgM抗体。收集患者临床资料,分析呼吸道病毒的流行病学特征。结果2017年—2020年间23490例患者中检出呼吸道病毒IgM抗体阳性5750例(24.49%,5750/23490)。PIV、COX、RSV、BIV、ADV、VCA、HCMV、AIV IgM抗体阳性率分别为7.26%(1706/23490)、4.01%(942/23490)、3.90%(916/23490)、3.52%(826/23490)、2.93%(688/23490)、1.76%(413/23490)、1.03%(241/23490)、0%(18/23490)。2017、2018、2019、2020年患者呼吸道病毒IgM抗体阳性率分别为24.16%(1495/6189)、29.09%(1909/6563)、22.98%(1663/7238)及19.51%(683/3500),两两比较,P均<0.05;不同年份间患者呼吸道病毒IgM抗体(AIV除外)阳性率比较,P均<0.05。男、女患者呼吸道病毒IgM抗体阳性率分别为24.14%(3035/12570)、25.3%(2763/10920),二者比较,P<0.05;但是单病毒IgM抗体阳性率比较,差异无统计学意义。0~≤3岁、4~≤6岁、6~≤18岁、19~≤65岁及65~≤105岁患者呼吸道病毒IgM抗体阳性率分别为16.36%(552/3375)、17.28%(345/1997)、18.08%(234/1296)、25.74%(2370/9209)、29.53%(2248/7613)。成年(年龄≥18岁)患者比未成年(年龄<18岁)患者呼吸道病毒IgM抗体阳性率高(P均<0.05)。且不同年龄层的易感病毒存在差异。春、夏、秋、冬季患者呼吸道病毒IgM抗体阳性率分别为25.78%(1448/5617)、26.2%(1335/5096)、22.4%(1289/5821)、24.2%(1676/6926);不同季节患者BIV、PIV、HCMV、RSVIgM抗体阳性率存在差异,P均<0.05。结论2017年—2020年沈阳地区门诊/住院患者呼吸道病毒感染的阳性率仍较高。沈阳地区门诊/住院患者的呼吸道病毒感染以PIV、COX、RSV、BIV、ADV感染为主。呼吸道病毒种类分布在呼吸道感染患者中不受性别影响,与年龄、季节、年份相关。2018年门诊/住院患者呼吸道病毒感染以RSV病毒感染为主,2019、2020年以EB病毒感染为主。成年患者呼吸道病毒感染比例较高。PIV感染主要集中在冬季,夏季较少发生;BIV感染秋季最低;HCMV感染春、秋季较少发生;RSV感染主要发生在春、夏。

海岛地区婴幼儿呼吸道感染的病原学研究

目的探讨海岛地区婴幼儿急性呼吸道感染的病毒病原。方法采取211例急性呼吸道感染患儿的痰液做病毒检测。结果病毒感染35例,其中呼吸道合胞病毒(RSV)感染20例(9.5%),流感病毒感染6例(2.8%),腺病毒9例(4.3%),副流感病毒Ⅲ型4例(1.9%),副流感病毒Ⅰ、Ⅱ型各2例(1%)。结论RSV感染仍是海岛婴幼儿急性呼吸道病毒感染最常见的病原,病毒病原的诊断可为临床诊断和治疗提供可靠的依据。

399例急性呼吸道感染患儿呼吸道病毒检出情况分析

目的探讨儿童呼吸道感染的病毒病原情况,掌握该地区儿童病毒感染的病原学流行趋势,为儿童呼吸道病毒感染的诊断提供帮助,指导合理用药。方法选取呼吸道感染患儿399例,采集鼻咽深部分泌物,采用直接免疫荧光法快速检测呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒A（FA）、流感病毒B（FB）和副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型（PIVⅠ、Ⅱ、Ⅲ）7种呼吸道常见病毒抗原,分析病毒的分布情况,并从患儿年龄、季节因素等方面进行流行病学特点分析。结果在399例患儿中有142例呼吸道病毒抗原阳性,总阳性率为35.6%,其中RSV感染40例（28.2%）,ADV感染26例（18.3%）,FA感染43例（30.3%）,FB感染15例（10.6%）,PIVⅠ感染5例（3.5%）,PIVⅡ感染4例（2.8%）,PIVⅢ感染9例（6.3%）;〈1岁组感染患儿40例（36.0%）、1-3岁组感染患儿48例（32.0%）,〉3岁组感染患儿54例（39.1%）;春夏秋冬四季患儿病毒感染阳性率分别为32.1%,26.9%,29.3%,45.0%,以冬季阳性率为最高。结论 FA和RSV感染是该地区小儿呼吸道病毒感染的主要病原体;3岁以上婴幼儿FA易感,高发于冬季;1岁以下婴幼儿RSV易感,高发于春季。

12274例有上呼吸道感染症状的老年患者常见呼吸道病毒IgM抗体检测结果分析

目的分析12274例有上呼吸道感染症状的老年(年龄≥60岁)患者常见呼吸道病毒感染情况。方法2017年1月1日—2021年12月31日间中国医科大学附属第四医院收治的12274例有上呼吸道感染的老年患者,采集外周血3 mL,采用ELISA法检测血清A型流感病毒(AIV)、B型流感病毒(BIV)、副型流感病毒(PIV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人类巨细胞病毒(HCMV)、腺病毒(ADV)和柯萨奇病毒(COX)及EB病毒,分析呼吸道病毒的流行病学特征。结果12274例样本的呼吸道病毒IgM抗体阳性率27.24%,其中PIV、BIV、VCA、ADV、COX、HCMV、RSV、AIV IgM抗体阳性率分别为5.05%、1.11%、3.32%、3.86%、1.18%、4.81%、0.13%。与男性比较,女性老年患者血清HCMV IgM抗体阳性率高(χ^(2)为5.51,P<0.05)。与其余各年比较,2021年老年患者血清BIV IgM抗体阳性率低(P均<0.05)。与其他季节比较,老年患者春季PIV IgM抗体阳性率高,夏季RSVIgM抗体阳性率高(χ^(2)分别为7.92、126.7,P均<0.05)。结论有上呼吸道感染症状的老年患者呼吸道病毒感染以PIV、BIV、ADV、COX、RSV感染为主。老年患者呼吸道病毒感染与性别、年龄、季节及年份密切相关,随年龄增长,老年患者呼吸道PIV、RSV感染比例升高,女性老年患者更易感染呼吸道病毒,老年患者呼吸道病毒感染集中在春季和夏季,2021年老年患者呼吸道病毒感染主要为BIV感染。

浏阳市2018-2020年14711例儿童7项呼吸道病毒抗原检测结果分析

目的:分析浏阳市儿童7项呼吸道病毒抗原检测结果。方法:选取2018年10月-2020年10月进行7项呼吸道病毒抗原检测的呼吸道疾病患儿14711例,对检测结果进行统计分析。结果:14711例患儿共检测出阳性5537例,阳性率37.64%。7项呼吸道病毒抗原检测中,流感A、流感B及呼吸道合胞病毒的阳性率较高;2020年2-7月呼吸道病毒感染阳性率较低,尤其流感病毒感染人次明显减少;≤3岁患儿的病毒感染率较高。结论:流感A、流感B及呼吸道合胞病毒是浏阳市儿童呼吸道感染的主要病原体,≤3岁患儿最易感染呼吸道病毒,2020年2-7月呼吸道病毒感染率较低,特别是流感病毒感染人次大幅度减少,可能和疫情期间人们防病意识增强以及隔离措施开展有关。

苏州地区单中心6岁以下住院儿童急性呼吸道感染病毒病原分布特征研究

目的分析苏州地区6岁以下住院儿童急性呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection,ALRTI)病毒病原分布特征,为临床抗感染及疾病控制提供理论依据。方法以2011年1月至2016年12月在苏州市立医院本部儿科住院治疗的1 602例ALRTI患儿为研究对象,采用直接荧光免疫法对患儿鼻咽部上皮细胞进行呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(Adv)、流感病毒A(Flu A)和B(Flu B)、副流感病毒1~3(PIVⅠ、Ⅱ、Ⅲ)的检测对照。结果 1 602例ALRTI患儿的共1 602份标本中7种病毒阳性453份(28.28%),阳性率从高到低依次为RSV、PIV(PIVⅢ、PIVⅠ、PIVⅡ)、Flu(Flu A、Flu B)及Adv。不同性别病毒检测阳性率之间差异无统计学意义(P>0.05);不同季节和不同年份的病毒检测阳性率差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄组病毒检测的总体阳性率、RSV阳性率两项的差异有统计学意义(P<0.05),余各项差异均无统计学意义。结论呼吸道病毒是本地区住院儿童ALRTI的常见主要病原之一,其分布存在年龄、季节和年份的差异,本地区以RSV、PIV(主要是PIVⅢ)为主。伴随年龄的增加,总体病毒和RSV感染的阳性率下降。病毒总体感染率以冬季最高,夏季最低;RSV以秋、冬季为主,PIV以春、夏季为主,Flu、Adv和混合感染均以冬季为主。

绍兴市呼吸道感染患儿常见病毒抗原检测结果分析

目的了解绍兴市儿童呼吸道病毒感染常见病毒类型、流行特点及相关检验指标特征,为临床的诊断与预防提供依据。方法以2019年1月—2020年8月在绍兴市妇幼保健院就诊的4269例呼吸道感染患儿为研究对象,采用直接免疫荧光法对采集的鼻咽拭子进行7种常见呼吸道病毒抗原检测,包括腺病毒(adenovirus,ADV)、流感病毒A、B(influenza virus,Flu A/B)、副流感病毒1、2、3(parainfluenza virus,PIV-1、PIV-2、PIV-3)及呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)。结果绍兴市妇幼保健院就诊的儿童呼吸道感染病例中,呼吸道病毒抗原阳性率为9.56%(408/4269),其中RSV的阳性率最高(7.03%,300/4269),2020年1—8月仅有2例标本检测结果为阳性。1~<3岁患儿的病毒检测阳性率最高(14.75%,212/1437),1~<3岁患儿的PIV-3(2.23%,32/1437)和RSV(11.76%,169/1437)检出率明显高于其他年龄组(χ^(2)=20.773、85.128,P均<0.01)。冬季呼吸道病毒阳性检出率最高(16.11%,159/987),冬季Flu A(0.71%,7/987)和RSV(12.87%,127/987)的检出率高于其他季节(χ^(2)=11.089、96.970,P均<0.05),秋季PIV-3(1.98%,20/1012)的检出率最高(χ^(2)=8.036,P<0.05)。呼吸道病毒感染患儿白细胞计数[(5.1±1.9)×10^(9)/L]和中性粒细胞百分比[(40.8±11.3)%]低于正常值,而淋巴细胞百分比(64.7±11.5)%高于正常值。结论RSV是绍兴地区儿童呼吸道病毒感染的主要病原体,1~<3岁儿童的呼吸道病毒阳性率最高,冬季为呼吸道病毒感染高发季节。