4T1乳腺癌细胞株接种联合慢性束缚应激诱导乳腺癌合并抑郁小鼠模型构建探索

目的研究4T1乳腺癌细胞株接种联合慢性束缚应激方法构建乳腺癌合并抑郁症小鼠模型核心行为症状、生物学指标、病理学等改变。方法BABL/c小鼠随机分为正常(Control)组、束缚(Stress)组、移植瘤(Tumor)组和束缚移植瘤(Stress+Tumor,S+T)组,将4T1细胞株接种于Tumor和S+T组小鼠腋下,待成瘤后,给予Stress和S+T组小鼠束缚应激21 d。造模期间监测各组小鼠体重、摄食量。实验结束后,采用糖水偏好、旷场、高架十字迷宫、强迫游泳等试验评价各组小鼠抑郁样行为。小鼠处死后,测量小鼠瘤体重量和体积;采用ELISA方法检测各组小鼠血清肿瘤标志物糖类抗原(CA199)、癌胚抗原(CEA)、血管内皮生长因子(VEGF)以及相关神经递质5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、皮质酮(CORT)的含量;运用HE染色法观察小鼠肿瘤和海马组织病理学改变。结果S+T组小鼠体重、摄食量显著降低,瘤体重量和体积明显增大,血清肿瘤标志物(CA199、CEA、VEGF)水平显著升高,快感和对新环境的探索欲望减弱,紧张和绝望行为显著增强,血清神经递质5-HT和NE水平显著降低,CORT水平显著升高;另外肿瘤组织细胞排列松散,间质减少,病理性核分裂象增多,海马CA3区神经元细胞排列和形态紊乱,核内空泡化样改变明显。结论4T1乳腺癌细胞株接种联合慢性束缚应激诱导的乳腺癌合并抑郁小鼠模型出现了乳腺癌和抑郁症双重典型症状和生物学指标改变,可为乳腺癌合并抑郁实验研究提供较好的模型参考。

基于TGF-β1/CD147信号探讨慢性束缚应激促小鼠乳腺癌进展及逍遥散调节机制研究

目的基于TGF-β1/CD147信号探讨慢性束缚应激促小鼠乳腺癌进展及逍遥散调节机制。方法40只BABL/c小鼠随机分为移植瘤组(Tumor)、模型组(Model)、逍遥散组(Xiaoyaosan)和米非司酮组(Mifepristone),将4T1细胞株接种于各组小鼠腋下,待成瘤后,除Tumor组外其余各组小鼠均进行慢性束缚应激21天,同时Xiaoyaosan组和Mifepristone组小鼠给予相对应的药物灌胃,Tumor组和Model组小鼠灌胃生理盐水。造模结束后,小鼠麻醉断头处死,测量小鼠瘤体重量和体积、内脏指数;采用ELISA方法检测各组小鼠血清肿瘤标志物糖类抗原ca199(Carbohydrate antigen199,CA199)、癌胚抗原(Carcino-embryonic antigen,CEA)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)的含量,血清多巴胺(Dopamine,DA)和皮质酮(Corticosterone,CORT)的含量,以及肿瘤组织转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)和白介素10(Interleukin 10,IL-10)的含量。采用免疫组化和Western blot方法检测各组小鼠肿瘤组织巨噬细胞极化标志物诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)和精氨酸酶1(Arginase-1,Arg-1)的表达,以及肿瘤组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(Extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN,CD147)及其下游信号分子基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinases 2),MMP2、基质金属蛋白酶9(MMP9)和VEGF的表达。结果与Tumor组比较,Model组小鼠肿瘤重量和体积,血清CA199、CEA、VEGF、CORT含量,肿瘤TGF-β1和IL-10含量均显著增加;内脏指数和血清DA含量显著减少;肿瘤巨噬细胞M2型极化标志物Arg-1的表达显著增加,M1型极化标志物iNOS的表达显著降低;肿瘤CD147及其下游信号分子MMP2、MMP9和VEGF蛋白表达显著增加,逍遥散和米非司酮均可有效逆转以上改变。结论慢性束缚应激促小鼠乳腺癌进展的机制与肿瘤相关巨噬细胞M2型极化释放TGF-β1增加、激活CD147及其下游相关信号有关,而逍遥散可缓解应激条件下皮质酮增高引起的巨噬细胞M2型极化,减少TGF-β1的生成,抑制CD147及其下游信号,从而抑制慢性应激引起的小鼠乳腺癌进展。

滋水清肝饮对慢性束缚应激抑郁小鼠海马ERK、GSK3β、CREB、BDNF蛋白表达的影响

目的基于ERK/GSK-3β/CREB/BDNF信号通路探究滋水清肝饮对慢性束缚应激(CRS)抑郁小鼠的作用。方法除空白组外,其余小鼠建立CRS抑郁模型,造模成功后分为模型组、盐酸氟西汀组(10 mg/kg)和滋水清肝饮低、中、高剂量组(8.835、17.670、35.340 g/kg),给予相应剂量药物干预,同时继续进行CRS处理。给药7、14 d进行糖水偏好实验及行为学实验。给药14 d后,HE染色观察小鼠海马组织形态学改变,采用试剂盒检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,ELISA法检测血清5-羟色胺(5-HT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)水平,RT-qPCR法检测海马组织BDNF、TNF-α、IL-1βmRNA表达,Western blot法检测海马组织ERK1/2、p-ERK1/2、GSK3β、p-GSK3β、CREB、BDNF蛋白表达。结果与模型组比较,给药14 d后,盐酸氟西汀组和滋水清肝饮中剂量组小鼠糖水偏好率升高(P<0.01),悬尾不动时间和强迫游泳不动时间缩短(P<0.01),海马组织神经细胞损伤有所改善,血清MDA、TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05,P<0.01),SOD活性和5-HT水平升高(P<0.05,P<0.01),海马组织TNF-α、IL-1βmRNA表达降低(P<0.01),BDNF mRNA和p-ERK1/2、p-GSK3β、CREB、BDNF蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论滋水清肝饮可改善慢性束缚应激小鼠抑郁样行为,其机制可能与调节小鼠海马ERK/GSK3β/CREB/BDNF信号通路有关。

束缚应激致高脂血症ApoE^(-/-)小鼠心肌损伤的分子靶标筛选与机制分析

目的采用蛋白质组学技术筛选慢性束缚应激致高脂血症小鼠心肌损伤的标志物及其潜在机制。方法通过束缚ApoE-/-小鼠建立高脂血症合并慢性应激模型,运用蛋白质组学与生物信息学等技术描绘慢性应激对高脂血症小鼠心肌损伤的特征性分子改变及相关调控机制,并从中探索潜在的诊断标志物。结果蛋白质组学分析结果显示,与高脂血症组相比,高脂血症合并束缚应激组小鼠共有43个显著上调与58个显著下调的差异表达蛋白质。其中,GBP2、TAOK3、TFR1、UCP1是极具诊断潜力的分子标志物。KEGG通路富集分析结果表明,铁死亡是加剧高脂血症合并束缚应激模型心肌损伤的重要机制通路。mmu_circ_0001567/miR-7a/Tfr-1和mmu_circ_0001042/miR-7a/Tfr-1可能是该模型中与铁死亡相关的重要circRNA-miRNA-mRNA调控网络。结论慢性束缚应激可能通过铁死亡加剧高脂血症小鼠的心肌损伤,本研究筛选出4个具有潜在应用价值的心肌损伤分子诊断标志物,为高脂血症合并应激致心脏性猝死的研究提供了新的方向。

姜黄素通过抑制JNK介导的炎症缓解慢性束缚应激诱导的大鼠心脏功能障碍

目的:探讨姜黄素对慢性束缚应激抑郁模型大鼠心功能障碍的影响。方法:将32只重(200±20)g的6周龄雄性Wister大鼠分为对照组、模型组、低剂量姜黄素组和高剂量姜黄素组,每组8只。模型组和给药组大鼠每天随机时段给予慢性束缚应激5 h,对照组大鼠正常条件饲养;在每天的应激结束后,低、高剂量姜黄素组大鼠分别给予100和200 mg/kg的姜黄素灌胃,对照组和模型组大鼠则给予等体积的生理盐水。上述实验操作均连续28 d。实验期间每周称量一次体重;在第14和28天进行蔗糖偏好实验和测量血清皮质酮含量来评价大鼠的抑郁状况;HE和Masson染色法观察心肌组织学变化;超声心动图检查各组大鼠心脏功能;RT-qPCR检测炎症因子和纤维化因子的mRNA表达;Western blot检测相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠体重增长显著减缓(P<0.05),蔗糖偏好率显著降低(P<0.01),血浆皮质酮水平显著升高(P<0.01);HE染色结果显示,与对照组相比,模型组大鼠心肌细胞肥大;Masson染色发现,模型组大鼠心脏纤维化显著高于对照组(P<0.01);免疫组化结果也表明,I型胶原阳性表达显著增加(P<0.01);RT-qPCR结果显示,与对照组相比,模型组大鼠心肌组织中炎症因子(肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和白细胞介素1β)和纤维化因子(α-平滑肌肌动蛋白、I型胶原和III型胶原)表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);Western blot结果显示,与对照组相比,模型组大鼠心肌组织中c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白的磷酸化水平显著升高(P<0.01)。与模型组相比,低、高剂量姜黄素均可逆转上述指标。结论:姜黄素能抑制慢性束缚应激大鼠的心脏炎症和纤维化,其机制可能是通过抑制JNK信号通路实现的。

岩体地基抗剪刚度系数试验研究

地基抗剪刚度系数反映了地基对上部结构在水平方向的约束强弱程度,直接影响地基上浇筑的混凝土结构温度约束应力的大小,是控制混凝土底板温度裂缝的关键参数之一。为完善温度约束应力计算中地基抗剪刚度系数的取值,基于岩体地基防水层底板温度应力监测现场试验,计算得到岩体地基防水层构造条件下地基抗剪刚度系数取值;而后进行了岩体地基上的防水层、垫层、滑动层3种构造条件的动力特性测试试验,基于量纲分析计算出了垫层和滑动层构造条件下的地基抗剪刚度系数取值。

DNA甲基化调控BDNF表达在急性束缚应激小鼠抑郁行为中的作用研究

目的:通过对小鼠进行24 h束缚应激构建快速抑郁样行为模型,探究DNA甲基化调控BDNF表达在小鼠抑郁行为中发挥的作用。方法:使用8~10周龄体质量20~22 g的ICR雄性小鼠作为实验对象,随机分为两组,即正常组(Control)和抑郁组(Restraint),通过行为学检测小鼠是否产生抑郁行为,并检测小鼠海马脑区脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体TrkB的mRNA及蛋白表达变化。检测小鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)、DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)的mRNA表达变化以及焦磷酸测序检测小鼠BDNF启动子区域甲基化水平。结果:与Control组相比,Restriant组的移动总距离缩短(P<0.05);与Control组相比,Restriant组的糖水偏好比率下降(P<0.05);Restriant组的体质量变化与Control组相比,其体质量恢复的幅度下降(P<0.05);与Control组相比,Restriant组BDNF的mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),TrkB的蛋白及mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);DNMT3A、DNMT3B的mRNA表达升高(P<0.05),DNMT1的mRNA表达差异无统计学意义;与Control组相比,Restriant组的BDNF启动子区域DNA甲基化程度明显升高(P<0.05)。结论:小鼠经过24 h束缚应激后,可诱导小鼠产生明显的抑郁样行为,这可能是通过上调DNA甲基化水平进而下调BDNF表达而发挥作用。

辅酶Q10通过下调焦亡信号通路缓解抑郁小鼠的抑郁样行为

目的探讨辅酶Q10对慢性应激束缚模型(CRS)抑郁小鼠的神经保护作用及其机制。方法采用慢性应激束缚模型制备抑郁小鼠。将小鼠分为空白组(CON)、CRS组、单用辅酶Q10高剂量组(Q10-H,200 mg/kg)、模型组+辅酶Q10低剂量组(CRS+Q10-L,50 mg/kg)、模型组+辅酶Q10中剂量组(CRS+Q10-M,100 mg/kg)、模型组+辅酶Q10高剂量组(CRS+Q10-H,200 mg/kg)、模型组+caspase-1特异性抑制剂VX765组(CRS+VX765,50 mg/kg)、模型组+氟西汀组(CRS+FLX,10 mg/kg)(n=8)。应用糖水偏好实验、强迫游泳实验、悬尾实验分析小鼠抑郁样行为;采用免疫组化检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性率;高尔基染色检测神经元突触棘数量;免疫印迹实验检测海马脑区GFAP及焦亡相关蛋白的变化;免疫荧光检测神经元与caspase-1 p10的共定位情况。结果与对照组比较,CRS模型组糖水偏好率显著降低、强迫游泳、悬尾不动时间显著增加(P<0.05),辅酶Q10、VX765及FLX可改善上述情况;与对照组比较,CRS模型组海马脑区GFAP阳性率与蛋白表达量显著减少(P<0.05),神经元突触棘显著减少(P<0.001),GSDMD-N、caspase-1、IL-1β表达显著增加(P<0.05),神经元与caspase-1 p10共标显著增加(P<0.001),辅酶Q10可改善上述情况。结论辅酶Q10通过下调焦亡信号通路缓解抑郁小鼠抑郁样行为。

反复荷载作用下含缺陷灌浆套筒约束应力及钢筋黏结强度的预测模型

为建立地震反复荷载作用下含缺陷灌浆套筒内部灌浆料与钢筋之间黏结强度的预测模型,对套筒的约束体系进行了分析,并根据缺陷的影响机理对缺陷进行了分类;设计了含缺陷的灌浆套筒试件并对其进行了低周反复加载试验研究,得到了含缺陷灌浆套筒约束应力的数学表达式,结合数学表达式建立了含缺陷灌浆料极限黏结强度的预测模型,通过与试验结果对比验证了预测模型的正确性。结果表明:缺陷导致的套筒约束体系失衡是造成套筒黏结性能劣化的重要原因,集中于一侧的缺陷会诱发套筒约束体系的失衡,因此对黏结性能的劣化影响相较于均匀分散的缺陷而言更为显著;随着缺陷率的增大,试件的失效模式从钢筋拉断向钢筋拔出转变;当含缺陷套筒的约束体系基本平衡时,出现钢筋拔出破坏的界限缺陷率约为30%;当缺陷导致套筒约束体系严重失衡时,出现钢筋拔出破坏的界限缺陷率仅为20%;灌浆端是套筒约束作用率先失效的薄弱部位,因此相较机械端出现的缺陷而言,在灌浆端出现的缺陷更容易诱发连接失效;该预测模型可为含缺陷灌浆套筒在地震区的性能评估提供理论参考依据。

慢性束缚应激对小鼠小肠屏障的损伤研究

肠屏障由机械屏障、免疫屏障、化学屏障和生物屏障共同组成,在维持肠腔内环境稳态和肠上皮结构完整性等方面发挥重要作用.首先建构小鼠慢性束缚应激模型并进行血浆激素水平检测和小鼠旷场实验,验证模型是否建构成功.随后通过常规组织学染色、免疫组化、 TUNEL免疫荧光、 ELISA等方法研究慢性束缚应激对小鼠小肠的损伤作用.结果显示,慢性束缚应激显著提高小鼠血浆NE和CORT水平(p<0.05),降低小鼠小肠绒毛高度(V,p<0.05)、增加隐窝深度(C,p<0.05),降低V/C比值(p<0.05)及紧密连接蛋白ZO-1表达量(p<0.01);显著减少小肠杯状细胞和内皮单核淋巴细胞数量(p<0.01),提示慢性束缚应激造成了小鼠肠道损伤和免疫功能抑制.进一步研究发现,慢性应激小鼠肠道内PCNA阳性表达显著减少(p<0.01)、凋亡细胞显著增多(p<0.01);血浆中TNF-α,IL-1β,IL-18含量显著升高(p<0.01),而IL-10显著降低(p<0.01).血浆氧化-抗氧化指标结果显示,慢性束缚应激显著增加小鼠血浆MDA含量(p<0.05),降低T-AOC,SOD,CAT,GSH-Px(p<0.05)活性,提示慢性束缚应激诱导机体氧化应激.该研究表明慢性束缚应激通过引发机体氧化应激,造成肠上皮细胞更新抑制和肠道屏障结构损伤,加重机体炎症反应.

基于有限元和DIC测试对FRP部分约束混凝土柱应变响应及数值模型研究

纤维增强聚合物(FRP)部分约束混凝土应用可以提高混凝土的承载力和经济价值。然而,FRP部分约束混凝土在垂直方向上不均匀应变响应还不够深入,应力-应变模型不够准确。本文通过应变片和数字图像相关(DIC)记录对FRP部分约束混凝土进行了轴向压缩试验,并利用ABAQUS有限元建立了包括0/1,1/4,1/3,1/2,2/3,3/4和1/1约束面积比的部分约束混凝土。试验结果表明:DIC和应变片结果分别反应了垂直和水平方向的应变规律,即试件在应变硬化或应变软化响应下均发生了明显的应变局部化;有限元结果能捕捉到试件表面约束力与x,y和z三轴的应变关系,得到了不同约束面积比的FRP部分约束混凝土柱的应力-应变关系,所提出的应力-应变模型能有较高的预测效果。

束缚应激通过激活Rho/ROCK通路诱导大鼠杏仁核血脑屏障的损伤

目的探讨Rho/ROCK信号通路在束缚应激诱导大鼠杏仁核血脑屏障损伤过程中的作用及机制。方法选取60只SPF级雄性SD大鼠建立束缚应激模型,将大鼠分为4组:Control组(n=15,每日禁食水6 h);Stress组(n=15,每日束缚6 h);Stress+Fasudil组(n=15,每日束缚6 h,束缚前0.5 h给予腹腔注射1 mg/100 g Fasudil溶液);Fasudil组(n=15,每日给予腹腔注射1 mg/100 g Fasudil溶液)。用高架十字迷宫实验(EPM)检测各组大鼠行为学变化,ELISA检测血清CORT和S100B水平,检测脑组织伊文思蓝(EB)的渗漏情况以评估渗透性的改变,免疫荧光法和Western blotting方法检测紧密连接蛋白Claudin-5、Occludin、ZO-1的表达变化,Pull-down实验和Western blotting检测Rho/ROCK通路的激活情况,透射电镜观察脑微血管内皮细胞超微结构的形态变化。结果与Control组相比,Stress组和Stress+Fasudil组大鼠表现出了明显的焦虑样行为;Stress组和Stress+Fasudil组血清CORT含量均显著高于Control组(P<0.001);与Control组和Stress+Fasudil组相比,Stress组EB渗漏含量和S100B含量均显著升高(P<0.05);Stress组紧密连接蛋白的表达显著低于Control组和Stress+Fasudil组(P<0.05);Pull-down实验和Western blot分析证实,Stress组RhoA-GTP(P<0.001)、ROCK2(P<0.001)、p-MLC2(P<0.05)的表达显著高于Control组和Stress+Fasudil组;脑微血管内皮细胞超微结构显示,Stress组呈现显著的形态学改变。结论束缚应激能够通过激活Rho/ROCK信号通路诱导大鼠杏仁核血脑屏障的损伤。

慢性束缚肠道应激损伤小鼠模型的构建与评价

目的结合社会心理应激导致炎症性肠病、肠易激综合征等一系列疾病的特点,建立实验性慢性束缚小鼠肠道应激损伤模型,为探讨慢性束缚应激诱导胃肠病的致病机制以及防治措施奠定基础。方法18只雄性SPF级BALB/c小鼠,适应7 d后,根据体重按随机数字表法分为2组,对照组及慢性束缚应激组。对小鼠进行束缚应激,每天3 h,连续束缚14 d,建立肠道损伤模型。通过观察体重、肠道组织病理形态变化、检测紧密连接蛋白表达、肠上皮细胞凋亡以及炎症细胞因子mRNA表达水平等指标对模型进行评价。结果慢性束缚应激14 d,小鼠表现为体重减轻,十二指肠绒毛高度变短、隐窝结构异常、绒毛/隐窝比下降;结肠黏膜炎性细胞浸润、隐窝结构不规则。蛋白免疫印迹、免疫组化和免疫荧光染色结果显示,慢性束缚应激后小鼠十二指肠和结肠紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1表达显著下降(P<0.05);肠上皮细胞凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3的表达显著增加(P<0.05)。此外,肠道炎症因子和趋化因子mRNA表达结果显示,慢性束缚应激14 d显著提高了小鼠十二指肠IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α、IL-10基因的表达(P<0.05);慢性束缚应激14 d显著提高了小鼠结肠IL-1β、IL-6、MCP-1的表达(P<0.001)。结论利用小鼠行为限制装置对小鼠连续束缚14 d,导致应激小鼠肠道组织结构异常、肠屏障功能障碍、肠上皮细胞凋亡,引发肠道炎症反应,表明慢性束缚应激肠道损伤小鼠模型构建成功。

番茄红素对限制性应激雄鼠生长性能和肠道抗氧化功能的影响

为了探讨番茄红素(LYC)对限制性应激雄鼠生长性能和肠道抗氧化功能的影响,本试验将80只雄鼠随机分为4个组:对照(CON)组、限制性应激(RS)组、LYC[10 mg/(kg·bw)]+限制性应激(LRS)组、玉米油+限制性应激(CRS)组。LRS组和CRS组每天在限制性应激处理前2 h分别灌胃LYC和玉米油(0.5 mL/只),限制性应激时长为5 h/d,连续处理14 d。每日记录各组小鼠应激前后体重和采食量,试验结束后取十二指肠、空肠和回肠组织,ELISA试剂盒检测组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量;Western blot检测组织中磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B(p-AKT/AKT)、核因子E2相关因子(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达量。结果显示,与RS组相比,LRS组雄鼠应激前后体重减少量显著降低(P<0.05),平均日采食量有增加趋势(P>0.05);十二指肠、空肠和回肠组织中SOD活力、GSH-PX活力和T-AOC显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05);回肠p-AKT/AKT显著升高(P<0.05),十二指肠和空肠p-AKT/AKT有升高趋势(P>0.05);十二指肠和空肠中Nrf2蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),回肠中Nrf2蛋白相对表达量有升高趋势(P>0.05);十二指肠、空肠和回肠组织中HO-1蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05)。CRS组以上指标与RS组相比均无显著差异(P>0.05),表明玉米油仅作为溶剂并不发挥缓解作用。结果表明,番茄红素可缓解限制性应激对雄鼠生长性能的不利影响,有效提高雄鼠肠道局部抗氧化水平,其机制可能与激活AKT-Nrf2/HO-1通路有关。

蓝斑核参与抑郁导致的慢性疼痛行为的调控

目的探究蓝斑核(LC)是否参与介导小鼠抑郁伴疼痛行为及可能机制。方法雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和慢性束缚应激(CRS)组,通过新奇抑制进食、悬尾和强迫游泳等行为学实验检测抑郁样行为的形成,评估小鼠CRS模型的建立;使用Von Frey毛刷检测小鼠的机械痛阈;通过c-Fos免疫荧光染色确定LC神经元活性在抑郁伴疼痛小鼠中的改变;利用离体脑片电生理检测LC神经元兴奋性变化;通过化学遗传学技术调控LC活性,观察小鼠的疼痛及抑郁样行为表现。结果与对照组相比,CRS小鼠在束缚第3周(CRS 3W)出现明显的抑郁样行为,模型建立成功;CRS 3W小鼠机械痛阈显著下降,出现机械痛敏;CRS 3W小鼠LC区有大量c-Fos+表达,且90%为去甲肾上腺素(NE)能神经元;CRS 3W小鼠LC中NE能神经元兴奋性降低。而且,化学遗传学激活LC可显著缓解CRS 3W小鼠的机械痛敏。结论CRS 3W小鼠LC中NE能神经元兴奋性下降,化学遗传学激活LC中NE能神经元可缓解CRS 3W小鼠的机械痛敏。

猴椅保定训练对恒河猴应激的影响

目的考察恒河猴猴椅保定30 min连续5次适应性对应激激素水平的影响。方法约3岁恒河猴,雌雄各15只,分3组,每组10只,雌雄各半进行猴椅保定适应性训练,每间隔1 d训练1次,每次训练30 min。组1:不进行适应性训练组,组2:单纯适应性训练组,组3:给予零食和安抚训练组。共训练5次,每次训练结束对3组所有动物采血分析。结果与组1相比,组2和组3在多次猴椅保定适应性训练后可见猴血清皮质酮(CROT)显著性降低(P<0.05或P<0.01),组3的猴β-内啡肽(β-EP)显著降低(P<0.05或P<0.01),组3于第1和第5次适应性训练后5-羟色胺(5-HT)升高(P<0.01)。结论进行猴椅保定的适应性训练能显著降低恒河猴的应激压力,让动物趋于习惯或适应坐猴椅保定的操作。在适应性训练中,给予正向强化的训练方式让受试者在减少应激和攻击性表现更显著,适应性保定训练3~4次就可以让应激压力降到恒定水平。

BIM技术在地下溶洞嵌岩桩基极限承载力评定中的应用

为了提高地下溶洞嵌岩桩基的安全性,提出了BIM技术在地下溶洞嵌岩桩基极限承载力评定中的应用。计算地下溶洞嵌岩桩基在岩层的平均应力,获取的承载机理,明确地下溶洞嵌岩的地质特点,计算地下溶洞嵌岩桩基容许承载力,利用BIM技术,完成地下溶洞嵌岩桩基的BIM建模。根据地下溶洞嵌岩桩基应力分量,计算地下溶洞嵌岩桩基在含溶洞地层中的平均约束应力,通过设定极限承载力阈值,评定地下溶洞嵌岩桩基极限承载力。实验结果表明,所提方法对地下溶洞嵌岩桩基极限承载力的评定结果与工程实际相符,可以缩小评定误差。

慢性束缚应激模型大鼠的不同焦虑程度对自主运动意愿影响的研究

目的:旨在探讨慢性束缚应激焦虑模型大鼠的不同焦虑程度与自主运动意愿的关系。方法:将24只雄性6 w龄SD大鼠分为空白对照组(C组,n=8)和模型组(M组,n=16),模型组进行4 w慢性束缚应激造模,造模完成后采用高架十字迷宫、蔗糖偏好实验来评价动物模型是否成功建立,并根据行为学测试结果将模型大鼠分为轻度焦虑组(M1组,n=8)和重度焦虑组(M2组,n=8);C组安静饲养4 w。采用自主转轮系统监测24 h内大鼠自主运动量。结果:(1)与C组相比,M组大鼠在高架十字迷宫中的总路程、开臂进入次数及开臂路程均减少,结果具有显著统计学差异。(2)与C组相比,M1组和M2组高架十字迷宫总路程(P<0.01)、开臂进入次数(P<0.01)和开臂路程(P<0.05)均显著下降;与M1组相比,M2组高架十字迷宫总路程(P<0.05)、开臂进入次数(P<0.01)和开臂路程(P<0.01)均显著下降。(3)与C组相比,M1组和M2组蔗糖偏好率(P<0.05)显著下降;与M1组相比,M2组蔗糖偏好率(P<0.05)显著下降。(4)与C组相比,M1组和M2组大鼠自主转轮运动量(P<0.05)显著降低,与M1组相比,M2组自主转轮运动量(P<0.05)显著下降。结论:慢性束缚应激大鼠的焦虑程度与自主运动意愿存在相关性,焦虑程度越严重,自主运动意愿越低。

不同侧限及荷载比例工况下泡沫金属冲击性能研究

泡沫金属在实际工程中往往承受复杂多轴加载工况,且受到突发性爆破等极端动荷载的影响,处于多轴动态复杂应力状态。目前,受实验条件限制,泡沫金属难以实现任意比例的真三轴动态实验。本文采用数值模拟方法,采用霍普金森杆和解析刚体,分别施加冲击荷载和侧限荷载,实现了泡沫金属真三轴动态实验,且实验过程中满足应力均匀性条件,同时,探究了不同侧限条件和侧向预压力比例对泡沫金属多轴冲击性能的影响。结果表明:沿着冲击方向施加2 MPa的预压力对应力幅值为200 MPa的梯形应力波双向冲击的泡沫金属冲击性能无明显影响;侧限约束的增强能提高泡沫金属抗冲击承载能力;当冲击变形模式主导胞孔结构变形时,泡沫金属三向预压力比例对其抗冲击能力无明显影响。

基于突触可塑性的抑郁小鼠证候生物学基础研究

目的通过观察母婴分离联合束缚应激诱导抑郁小鼠脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)-原肌球蛋白受体激酶B(tropomyosin receptor kinase,TrkB)-环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)通路与突触可塑性的变化,以及温阳、解郁和温阳解郁合方的调节作用,探讨抑郁小鼠证候生物学基础。方法小鼠出生后5~14 d给予母婴分离8 h/d,离乳后分为母婴分离(MS)组、模型(MS+RS)组、温阳(Wenyang)组、解郁(Xiaoyao)组、温阳解郁(XSF)组及阳性药(Fluoxetine)组,并以正常小鼠为对照(NC)组。NC、MS、MS+RS组小鼠以正常饲料喂养,Wenyang、Xiaoyao、XSF及Fluoxetine组小鼠分别给予二仙汤、逍遥散、温阳解郁方及盐酸氟西汀药混饲料,90日龄后除NC组连续给予21天3 h/d的束缚应激。采用糖水及旷场实验评估抑郁样行为,高效液相-电化学检测海马组织单胺类神经递质含量,免疫组化法观察突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein,PSD95)蛋白表达。实时荧光定量PCR法及Protein Simple分别检测海马组织BDNF、TrkB、CREB、PSD95及突触素(synapsin,SYN)的mRNA和蛋白表达水平。结果与NC组比较,MS+RS组小鼠糖水偏好指数显著下降(P<0.05),运动路程及中央区穿越次数显著减少(P<0.05);海马区5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)含量显著降低(P<0.01);BDNF、TrkB、CREB、PSD95与SYN mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05);海马CA1、CA3区PSD95表达显著减少(P<0.05)。与MS+RS组比较,3个中药干预组上述指标均有不同程度的改善,其中XSF组小鼠糖水偏好指数与Xiaoyao组5-HT含量均有极显著升高(P<0.01);各中药干预对海马BDNF、TrkB、CREB、PSD95及SYN mRNA表达均有显著调节作用,仅温阳与温阳解郁方对海马BDNF、CREB蛋白表达有极显著上调作用(P<0.01);中药各方及氟西汀对海马CA1区、温阳解郁方对CA3区PSD95表达的调节作用显著(P<0.01)。结论温阳与温阳解郁方对抑郁小鼠神经可塑性的影响显著,其可能通过BDNF-TrkB-CREB信号通路调节海马区突触可塑性,改善小鼠抑郁样行为,推测其证候生物学基础与阳虚有关。