免疫固定电泳检测室内质量控制样品的研制和评价

目的 制备适用于琼脂糖凝胶免疫固定电泳(IFE)检测的室内质量控制样品,并对其均匀性、稳定性、适用性进行评价。方法 依据实验室内部研制质量控制样品相关指南要求,基于临床样本,自制琼脂糖凝胶IFE检测阴性、弱阳性、阳性质控品,并对其进行均匀性、稳定性和适用性评价。结果 3个浓度水平质控品的均匀性良好。质控品开瓶后,2~8℃冷藏保存4个月,检测结果一致性较好;不启封-40℃冰箱冻存5年,检测结果一致性较好;同品牌其他系列检测系统和不同品牌检测系统检测结果一致性也较好。结论 制备的琼脂糖凝胶IFE检测室内质量质控样品具有良好的均匀性、稳定性、适用性,可满足临床实验室质量控制要求。

D-二聚体质控物的研制及初步评价

目的利用患者混合血浆制备D-二聚体质控物，评价其均匀性和稳定性，并试应用于室内质控。方法依据ISO Guide35及CNAS-GL03的要求，对3个批号自制质控物的均匀性、稳定性进行评价。将质控物试应用于室内质控，同时检测商品质控物作为比较。结果均匀性评价结果显示样品间均匀性良好，差异无统计学意义（P〉0．05）；稳定性评价线性回归分析显示质控物D-二聚体浓度随时间（目前的检测时间为26周）延长无明显趋势变化（P〉0．05），质控物的均匀性和稳定性不确定度范围分别为0．007～0．019mg／L和0．012～0．038mg／L。室内质控结果显示自制两批号质控物与商品质控物的CV分别为3．8％，4．4％和4．6％，3．7％。结论自制质控物的均匀性和稳定性良好，能够用于D-二聚体检测的室内质控。

血浆纤维蛋白原检测质控物的研制及评价

目的研制血浆纤维蛋白原测定质控物,对其外观性状、均匀性和稳定性进行评价,并试应用于室内质控。方法从血浆中提取纤维蛋白原,加入正常血浆或乏纤维蛋白原血浆中,配制成5个批号不同浓度的纤维蛋白原质控物,分装后进行冷冻干燥。参照《中国生物制品检定规程》要求,对制备过程中的质量指标(外观性状、残水量和复溶性)进行评价;参照CNAS-GL03《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》和ISO Guide35《标准物质的定值—通用原则和统计原理》要求,对质控物的均匀性和稳定性进行评价。将质控物试应用于室内质控,并与商品质控物的检测结果进行比较。结果质控物的外观性状符合要求,残水量分布范围为1.92%~2.15%,复溶性良好;均匀性评价数据表明质控物样品间差异无统计学意义(P>0.05);稳定性评价数据的回归分析结果表明,质控物的FIB检测结果随贮存时间变化的线性趋势无统计学意义(P>0.05),质控物的均匀性和长期稳定性不确定度的分布范围分别为(0.009~0.023)g/L和(0.020~0.036)g/L。5个批号自制质控物室内质控检测结果的日间不精密度(CV%)的分布范围为2.3%~3.6%,商品质控物的CV%为3.4%...

同型半胱氨酸质控品的制备和性能评价

目的研制一种液体非定值同型半胱氨酸(Hcy)室内质控品,并初步评价其性能。方法采用混合人血清为基质制备Hcy质控品,依据CNAS-GL03的要求对其均匀性、稳定性进行评价。将自制质控品应用于室内质量控制,并与朗道质控品进行比较。结果自制质控品均匀性和稳定性检测结果均符合要求,与朗道质控品比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论自制质控品具备较好的均匀性和稳定性,可用于临床实验室的室内质量控制。

HBV-DNA质控物的制备及评价

目的制备HBV-DNA荧光定量PCR质控物,评价其均匀性及稳定性。方法利用混合血清样本制备质控物。依据《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》和ISO Guide 35标准随机抽取足够的样本,采用单因子方差分析评价质控物均匀性;用一元线性回归分析评价质控物的稳定性。结果均匀性评价结果显示样品内和样品间均匀性差异无统计学意义(P>0.05),稳定性评价线性回归分析结果显示,HBV-DNA质控物随时间变化无明显趋势变化(P>0.05)。结论 HBV-DNA质控物制备简单,其均匀性、稳定性符合标准。

不同添加剂对自制尿液室内质控物质量的影响

目的为自制尿液复合型室内质控物选择最佳添加剂。方法分析一种包含尿N-乙酰-B-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和尿微量清蛋白(UMA)两个项目的自制复合室内质控物的酶稳定剂、蛋白稳定剂及叠氮钠等添加剂对其稳定性及均一性的影响。结果在-20℃保存温度下,尿NAG项目的稳定天数:无添加,72d;叠氮钠,169d;酶稳定剂,大于365d。同样条件下,尿UMA项目的稳定天数:无添加,99d;叠氮钠,207d;蛋白稳剂定,大于365d。质控物各个保存阶段稳定的同时测得的瓶间均一性良好。结论在制备尿NAG和UMA两项复合室内质控物的同时添加酶稳定剂、蛋白稳定剂和叠氮钠能延长质控物的稳定时间,提高质控物的质量。

网织红细胞计数质控物的均匀性和稳定性评价

目的对制备的网织红细胞计数质控物进行均匀性和稳定性评价。方法依据ISOGuide35《标准物质/标准样品的定值—通用原则和统计原理》对自制质控物的网织红细胞计数百分比进行均匀性、稳定性评价。随机抽取足够数量的样本,用单因素方差分析评价质控物的均匀性,用一元线性回归分析方法评价质控物的稳定性,并根据评价结果进行不确定度的计算。结果均匀性评价结果显示样品内和样品间的差异无统计学意义(P>0.05),两个批号的自制质控物均匀性的不确定度分别为0.372%、0.039%。稳定性数据的回归分析结果显示,质控物网织红细胞计数百分比随储存时间变化的线性趋势无统计学意义(P>0.05),两个批号质控物长期稳定性的不确定度分别为0.069%、0.031%。结论自制网织红细胞计数质控物的均匀性和稳定性符合要求。

T淋巴细胞亚群分析全血质控物的评价及应用调查

目的对自制T淋巴细胞亚群分析全血质控物的均匀性和稳定性进行评价;发放质控物进行室间质量评价。方法依据ISOGuide35《标准物质/标准样品的定值—通用原则和统计原理》的要求,对自制质控物CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+淋巴细胞百分比3个指标的均匀性、稳定性进行评价,同时以进口质控物作为对照。在组织淋巴细胞免疫表型分析项目室间质量评价活动中,向178家实验室同时发放进口质控物和自制质控物,并对调查结果进行分析和比较。结果自制20081027、20081111批号质控物及进口质控物的3个指标均匀性的不确定度范围分别为0.189%～0.318%、0.184%～0.280%、0.209%～0.284%。稳定性评价结果显示,自制质控物的3个指标随着保存时间变化的线性趋势无统计学意义(P>0.05),自制20081027、20081111批号质控物及进口质控物的3个指标长期稳定性的不确定度范围分别为0.554%～1.515%、0.189%～1.006%、0.328%～1.786%。室间质量评价调查结果显示,BD公司仪器组自制质控物与进口质控物的各指标变异系数(CV)范围分别为:2.94%～8.17%、2.84%～6.89%;Beckman Coulter公司仪器组自制质控物与进口质控物的各指标CV范围分别为:3.07%～14.25%、1.84%～5.14%。结论自制质控物的均匀性、稳定性符合要求,可用于流式细胞仪T淋巴细胞亚群分析的质量控制。

抗凝蛋白活性检测质控物的研制及初步评价

目的利用新鲜冰冻血浆制备抗凝血酶、蛋白C、蛋白S活性检测质控物,评价其均匀性和稳定性,并试用于室内质控。方法依据ISO Guide35及CNAS-GL03的要求,对2个批次自制质控物的均匀性和稳定性进行评价。将质控物试应用于室内质控,同时检测商品质控物作为对照。结果均匀性评价结果显示质控物样品间均匀性良好,差异无统计学意义（P〉0.05）,AT、PC和PS的瓶间均匀性不确定度ubb的分布范围分别为0.30%～2.39%,0.16%～2.45%和0.19%～3.62%;复融后在室温和冷藏条件下3种抗凝蛋白活性稳定时间分别为24h和24h、8h和12h、3h和12h。第1批次质控物长期稳定性评价结果显示正常和异常浓度水平的AT和PC质控物的稳定时间为24周,正常浓度的PS质控物稳定时间为19周,异常低浓度的PS质控物稳定时间为12周;3个项目的长期稳定性不确定度ults范围分别为2.45%～3.68%、1.32%～3.19%和3.97%～10.17%。室内质控试应用结果显示3个项目第1批次各批号质控物检测结果的CV均小于厂商规定的批间不精密度,与商品质控物具有可比性。结论质控物的均匀性、稳定性符合相关指南要求,可应用于室内质控。

室内空气污染监测用氨标准样品研究

根据中国对室内空气污染监测的实际需要,介绍了室内空气污染监测用氨标准样品的研制方法,包括试剂的验证、均匀性和稳定性检验、分析定值和测定数据的统计检验等方面。氨标准样品采用重量法制备,用纳氏试剂分光光度法对样品进行均匀性和稳定性研究,并进行不确定度评估。研究结果表明,氨标准样品的均匀性良好,室温条件下可稳定18个月以上;在全面分析不确定度来源的基础上,定值结果为0.494 mg/L,不确定度小于3%。与美国同类标准物质进行比对分析,结果具有可比性。可用于氨测定的质量控制、分析方法评价以及实验室能力验证等方面。

水质检测质量控制用钡标准样品的制备与研究

制备了国家级钡环境标准样品,采用重量法配制,用电感耦合等离子体质谱法进行均匀性及稳定性测试考察。标准值采用多家实验室协作测试方式确定,同时进行不确定度评定。结果表明,钡环境标准样品的均匀性良好,稳定性可达54个月以上,与美国同类标准物质进行比对具有可比性。

水和废水监测用银标准样品的研制

根据我国缺少国家级银环境标准样品的状况,介绍了银环境标准样品的研制过程。银环境标准样品采用重量法制备,用电感耦合等离子体质谱法对样品进行均匀性和稳定性研究。以8家实验室协作分析定值的数理统计结果确定标准值,同时进行不确定度评定。结果表明,银环境标准样品的均匀性良好,稳定性符合要求;与美国同种标准物质具有可比性。样品的国家编号为GSB 07-3178-2014,可用于样品分析的质量控制、仪器校准、分析方法的评价验证及能力验证等方面。

抗布鲁菌血清标准品的研制

目的研制抗布鲁菌血清国家标准品。方法以感染布鲁菌的病牛血清为原料制备抗布鲁菌血清标准品,建立质量标准。通过ELISA方法测定样品中抗布鲁菌纯蛋白衍生物IgG抗体含量,对标准品进行均匀性分析。将冻干抗布鲁菌血清标准品分别置于-20℃、4℃及37℃保存,在不同时间点取样进行凝集活性测定,评估冻干标准品的稳定性。组织3个实验室对该标准品进行协作标定。结果制备了抗布鲁菌血清国家标准品,各项检定符合要求。该标准品具有较好的均匀性。该标准品在-20℃条件下具有较好的稳定性,12个月内凝集活性未见降低。以国际标准品溯源,该标准品的凝集活性为500 IU/支。结论建立了抗布鲁菌血清国家标准品,可用于布鲁菌抗体检测用抗原的标准化及布鲁菌活疫苗的鉴别试验。

血筛四项复合质控品的制备及性能评价

目的制备血筛四项复合质控品,评价其均匀性及稳定性。方法分别筛选乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)表面抗原(HBsAg)、HBV表面抗体(HBsAb)、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗体(Anti-HIV)、丙型肝炎病毒(hepatitis cvirus,HCV)抗体(Anti-HIV)及梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)抗体(AntiTP)检测指标中HBsAg、Anti-HIV、Anti-TP及Anti-HCV分别为单项阳性且其他项均为阴性的血浆,将筛选的血浆稀释至低、中、高水平的工作浓度,制备为血筛四项复合质控品,分析其均匀性及稳定性(比较2~8℃放置14 d、18~25℃放置7 d及反复冻融6次与-20℃以下储存检测结果的变化幅度)。分别使用3个公司的HBV表面抗原、HCV抗体、HIV抗原抗体及TP诊断试剂盒、4个厂家的全自动免疫分析仪检测复合质控品,评估其适用性。结果制备的复合质控品为澄清的淡黄色透明液体,无异物;低、中、高水平的HBsAg、Anti-HIV、Anti-TP和Anti-HCV瓶间CV均<7%;低、中、高水平复合质控品于2~8℃放置14 d、18~25℃放置7 d及反复冻融6次的检测结果降幅均在10%以内。除全自动免疫分析仪Roche e601不适用Anti-HCV项目上外,其余厂家仪器及各公司的诊断试剂盒均能找到适合各自检测的弱阳性质控浓度,可满足各平台的要求。结论成功制备了血筛四项复合质控品,其均匀性及稳定性良好,适合各个检测平台,符合室内质量控制的要求。