牙周组织SOCS6、RORA表达水平对牙周炎患者的预后价值

目的探讨细胞因子信号转导抑制因子6(SOCS6)和维甲酸受体相关孤核受体A(RORA)在牙周炎患者牙周组织中的表达,并分析二者对患者的预后价值。方法选取2021年7月至2023年1月在济南市中医医院接受治疗的224例牙周炎患者作为研究组,另选取224例到济南市中医医院门诊因正畸治疗需要拔除健康牙齿的患者作为对照组。收集其牙周组织并采用实时荧光定量PCR检测牙周组织中SOCS6、RORA表达水平。对牙周炎患者随访3个月,根据随访结果将其分为预后良好组(148例)与预后不良组(76例)。采用多因素Logistic回归分析牙周炎患者预后不良的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析牙周组织SOCS6、RORA表达水平对牙周炎患者预后不良的预测价值。结果与对照组比较,研究组牙周组织SOCS6、RORA表达水平均降低(P<0.05)。224例牙周炎患者均完成随访,预后不良发生率为33.93%(76/224)。预后不良组牙周组织SOCS6、RORA表达水平均低于预后良好组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,患牙位于下颌、患牙为前牙、患牙最深探诊深度、牙周炎严重程度为重度、根形态异常、牙槽骨高度、平均附着丧失均是导致牙周炎患者预后不良的危险因素(P<0.05),牙周组织SOCS6、RORA表达水平均是保护因素(P<0.05)。牙周组织SOCS6、RORA单独预测牙周炎患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.833、0.829,二者联合预测的AUC(0.914)高于SOCS6与RORA单独预测(Z=3.659、3.408,P<0.001)。结论牙周炎预后不良患者牙周组织SOCS6、RORA表达水平均降低,二者均对牙周炎患者预后不良具有一定预测效能,且二者联合预测的效果更优。

慢性牙周炎患者血清RORA的表达水平及其与Th17/Treg细胞平衡的相关性

目的 探讨慢性牙周炎(CP)患者血清维甲酸受体相关孤儿受体A(RORA)的表达水平及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的相关性。方法 选取2019年1月—2021年12月于本院进行检查并接受治疗的90例CP患者作为观察组,并选择同期在本院检查的牙周健康志愿者100例作为对照组,比较两组的年龄、性别、体质指数(BMI)及合并高血压、冠心病、糖尿病等一般临床资料;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组血清中RORA的相对表达水平;采用流式细胞术检测两组Th17、Treg细胞水平;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测两组血清中转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)及白细胞介素-23(IL-23)的水平;采用Pearson法分析CP患者血清RORA与TGF-β、IL-10、IL-23、IL-23及Th17/Treg细胞比例之间的相关性;Logistic回归分析影响CP发生的因素。结果 两组年龄、性别、BMI及合并高血压、冠心病、糖尿病等指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组患者血清中Th17、IL-17、IL-23水平高于对照组,RORA、Treg、TGF-β、IL-10水平低于对照组,且Th17/Treg细胞比例高于对照组(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,CP患者血清中RORA与TGF-β、IL-10呈正相关(P<0.05),与IL-17、IL-23及Th17/Treg细胞比例呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,RORA、TGF-β、IL-10、IL-17、IL-23及Th17/Treg是CP发生的影响因素(P<0.05)。结论 CP患者血清中RORA低表达,Th17/Treg细胞比例失衡,RORA的表达与Th17/Treg细胞比例之间呈负相关,RORA可能通过调节Th17/Treg细胞比例影响CP的发生。

视黄酸相关孤儿受体α对阿霉素诱导心肌损伤的改善作用及机制研究

目的:探讨视黄酸相关孤儿受体α(RORα)对阿霉素(DOX)诱导的心肌损伤的改善作用及机制。方法:采用尾静脉注射RORα过表达慢病毒建立心肌RORα高表达模型。随机将小鼠分为对照组(NC组)、RORα过表达组、DOX组和RORα过表达+DOX组,每组20只。其中,DOX组和RORα过表达+DOX组一次性给予15 mg/(kg·d)DOX腹腔注射,NC组和RORα过表达组给予腹腔注射同等体积0.9%氯化钠溶液。2周后,采用超声检测左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS);采用相应试剂盒检测血浆血浆肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;采用TUNEL法检测小鼠心肌凋亡情况;采用电镜观察心肌线粒体形态;采用比色法检测心肌活性氧簇(ROS)水平;采用Western blot检测RORα和锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白表达水平。结果:与NC组比较,DOX组LVEF和LVFS降低,CK、LDH活性增加,心肌细胞凋亡增加,心肌ROS水平增加,MnSOD蛋白表达降低(均P<0.05),并且心肌线粒体发生损伤。与DOX组比较,RORα过表达+DOX组LVEF和LVFS增加,CK、LDH活性下降,心肌细胞凋亡减少,心肌ROS水平降低,MnSOD蛋白表达增加(均P<0.05),并且心肌线粒体损伤有明显改善。结论:在DOX诱导的心肌损伤中,RORα可能通过调控MnSOD表达发挥改善心肌的作用。

维甲酸相关孤核受体α抵抗小鼠压力负荷型心肌损伤的作用及机制研究

目的探究维甲酸相关孤核受体α(RORα)在小鼠压力负荷引起的心肌损伤中的具体作用。方法通过小鼠主动脉弓缩窄手术(TAC)后8周建立压力负荷型心肌损伤模型。实验小鼠分为以下4组:假手术(Sham)+空载病毒(null)处理组(Sham+null组)、Sham+心肌特异性过表达RORα病毒处理组(Sham+RORα组)、TAC+null组、TAC+RORα组。TAC后8周检测心肌RORα表达水平;心脏收缩功能;心肌纤维化指标包括心肌血管周纤维化百分比、组织间隙纤维化百分比、结缔组织生长因子(CTGF)、I型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达水平;心肌肥厚指标包括心脏体重比、心肌细胞平均横截面积、脑钠肽(BNP)表达水平;氧化应激指标包括活性氧(ROS)产量、丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、核因子红系2相关因子2(Nrf2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)表达水平;炎症反应指标包括核因子-κ-基因结合(NF-κB)含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果与TAC+null组相比,TAC+RORα组小鼠心脏RORα表达水平明显增高;心脏收缩功能显著改善;心肌纤维化指标包括心肌血管周纤维化百分比、组织间隙纤维化百分比、CTGF、CollagenⅠ表达水平显著降低;心肌肥厚指标包括心脏体重比、心肌细胞平均横截面积、BNP表达水平显著降低;氧化应激指标包括心肌ROS生成、MDA含量显著降低,而Nrf2、SOD2表达水平明显增高;炎症反应指标包括心肌NF-κB、TNF-α表达水平显著降低(均P<0.05)。结论心肌特异性过表达RORα处理可通过抑制心肌组织氧化应激和炎症反应、延缓TAC所致的心肌肥厚和心肌纤维化,最终发挥减轻压力负荷型心肌损伤的保护作用。

Th17转录因子RORγt和BATF及Th17相关细胞因子在中性粒细胞亚型哮喘发病中的作用

目的:检测中性粒细胞亚型哮喘(NA)患者痰上清中辅助性T细胞17(Th17)特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、B细胞转录激活因子(BATF)及外周血中Th17细胞相关细胞因子白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素17(IL-17)和白细胞介素22(IL-22)表达水平,探讨其在NA发病中的作用。方法:以56例支气管哮喘患者为研究对象,4.5%生理盐水雾化诱导痰,经细胞MGG染色进行哮喘的炎症亚型分型,分为嗜酸性粒细胞亚型哮喘(EA)组(26例)和NA组(30例),以常规体检者为健康对照组(NC组,28人)。实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测痰上清中BATF和RORγt mRNA表达水平。空腹抽取各组研究对象肘静脉血10mL,Ficoll密度梯度离心后分离外周血单个核细胞(PBMC),ELISA法测定血清中IL-8、IL-17和IL-22蛋白表达水平,流式细胞术检测PBMC中Th17细胞(CD4+IL-17+细胞)的百分率。结果:与NC组和EA组比较,NA组患者血清中IL-8、IL-17和IL-22表达水平均明显升高(P<0.05);与NC组比较,EA组患者血清中IL-8、IL-17和IL-22表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与NC组和EA组比较,NA组患者痰上清中BATF和RORγt mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与NC组和EA组比较,NA组患者PBMC中Th17细胞百分率均明显升高(P<0.01);与NC组比较,EA组患者PBMC中Th17细胞百分率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IL-17转录因子RORγt和BATF参与了NA患者气道炎症发生过程,且Th17细胞及其相关细胞因子IL-17和IL-22的异常表达与NA的全身反应有关联。

IL-38对类风湿关节炎患者辅助性T细胞17转录因子的影响

目的研究类风湿关节炎(RA)患者白细胞介素-38(IL-38)的表达水平,并探讨IL-38对辅助性T细胞17(Th17)细胞转录因子(RORC、STAT3)的影响。方法收集RA患者30例,为RA组,30例体检中心的健康人群作为正常对照组。采用实时荧光定量PCR检测IL-38、RORC、STAT3mRNA水平;ELISA法检测血清IL-38蛋白水平;采用t检验或Mann-Whitney秩和检验。结果(1)实时荧光定量PCR结果显示RA患者IL-38基因表达水平(2.92±1.96)显著低于正常对照组(5.79±3.55),差异有统计学意义(Z=-1.28,P<0.05);RA患者IL-38蛋白表达水平(0.44±0.03)显著低于正常对照组(0.72±0.58),差异有统计学意义(Z=-1.59,P<0.05);(2)RA患者RORC、STAT3基因表达水平(6.29±3.98)、(2.72±2.11)显著高于正常对照组(1.6±0.95)、(0.69±0.67),差异有统计学意义(Z=-1.36,P<0.05;Z=-1.24,P<0.05);且RORC、STAT3基因表达水平分别与IL-38水平呈负相关(r=-0.31,P<0.05;r=-0.25,P<0.05);(3)在体外实验中,RA患者外周血中加入IL-38后,RORC、STAT3基因表达水平(1.87±1.59)、(0.58±0.13)较RA患者(6.29±3.98)、(2.72±2.11)明显下降,差异有统计学意义(Z=-1.48,P<0.05;Z=-1.37,P<0.05)。结论在RA患者体内IL-38浓度下降,使得Th17细胞转录因子RORC、STAT3表达增加,可诱导经典JAK/STAT3信号传导通路活化,促进Th17细胞大量分化,导致关节滑膜增殖、软骨侵蚀和全身性的炎症反应,从而引发RA的发病。

白细胞介素-17在系统性红斑狼疮发病机制中的作用初探

目的探讨白细胞介素(interleukin,IL)-17在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中的表达情况及其与临床指标的相关性。方法采用酶联免疫吸附法检测SLE和健康对照组之间血浆IL-17表达的差异,采用实时荧光定量-聚合酶链反应检测IL-17和维甲酸相关孤儿受体(retinoic acid-related orphan receptor-γt,RORγt)的mRNA基因表达,并且分析它们之间的相关性。结果与比较健康对照组比较,SLE患者组血浆中IL-17浓度明显升高,血浆IL-17和血沉、C反应蛋白和SLE疾病活动性指数(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)之间具有正相关性,但与免疫指标IgG、补体之间没有明显相关性。SLE患者组IL-17 mRNA和RORγt mRNA的表达也较对照组升高,并且与血浆中IL-17的浓度呈正相关。结论 SLE中IL-17的表达水平明显异常,并且与调控基因RORγt mRNA的表达具有一致性。

孤生受体的相互作用对视黄酸应答元件的影响

孤生受体ＣＯＵＰ－ＴＦ和ｎｕｒ７７的功能及其作用机理仍未阐明．以ＤＮＡ瞬时转染和测定氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）活性，以及凝胶阻抑测定，分析ＣＯＵＰ－ＴＦ和ｎｕｒ７７的相互作用对视黄酸应答元件（ＲＡＲＥｓ）的影响．实验表明，ＣＯＵＰ－ＴＦ通过降低ＲＡＲＥｓ的基础活性，来增强ＲＡＲＥ对视黄酸（ＲＡ）的敏感性，而ｎｕｒ７７则拮抗ＣＯＵＰ－ＴＦ的作用．ｎｕｒ７７能够加强不同ＲＡＲＥｓ的转录活性，并且与ＲＡ的诱导无关．结果证实，ｎｕｒ７７通过与ＣＯＵＰ－ＴＦ的直接作用而对ＲＡＲＥｓ产生影响。

血速升颗粒对心肌缺血再灌注大鼠心肌组织的保护作用及机制研究

目的探讨血速升颗粒对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)后的心功能保护作用及机制。方法75只雄性SD大鼠随机数字表法分为假手术组、模型组、血速升颗粒低剂量组、血速升颗粒高剂量组和辛伐他汀组,每组15只。除假手术组,其余各组大鼠制备心肌I/R模型,术后24 h,血速升颗粒低、高剂量组大鼠分别以1、5 g/kg剂量灌胃给药,辛伐他汀组大鼠以20 mg/kg剂量灌胃给药,每天1次,连续给药4周。超声成像系统评估大鼠心脏功能,全自动生化分析仪检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化,TTC染色检测心肌梗死面积,HE染色观察心肌组织病理学改变,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡,蛋白质印迹法和qRT-PCR分别检测心肌组织中缺氧诱导因子2α(HIF-2α)、叉头样转录因子3(FOXP3)、维甲酸相关核孤儿受体-γt(RORγt)的mRNA与蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠FS、EF值显著下降,LVSP显著减小而LVEDP显著增大(P<0.05),心肌梗死面积比例增加(P<0.05),血清中CK、LDH和MDA含量显著增加、SOD含量显著下降(P<0.05),心肌组织出现明显病变,TUNEL阳性细胞数显著增加(P<0.05),心肌组织中HIF-2α、RORγt mRNA与蛋白相对表达量均显著增加,FOXP3 mRNA与蛋白相对表达量显著下降(P<0.05);与模型组比较,血速升颗粒高剂量组和辛伐他汀组大鼠FS、EF值显著升高,LVSP显著增大,LVEDP显著减小(P<0.05),心肌梗死面积比例下降(P<0.05),血清中CK、LDH、MDA含量均显著下降,SOD含量显著升高(P<0.05),同时,心肌组织病变得到明显改善,TUNEL阳性细胞数减少(P<0.05),心肌组织中HIF-2α、RORγt mRNA与蛋白相对表达量均显著下降,FOXP3 mRNA与蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。结论5 g/kg血速升颗粒能够改善I/R引起的心肌损伤,其作用机制可能与调控HIF-2α/FOXP3/RORγt轴有关。

RORγt mRNA、NF-κB、IL-10的水平变化与老年肺炎患者严重程度的关系及诊断价值研究

目的研究RORγt mRNA、NF-κB、IL-10的水平变化与肺炎严重程度的关系及预后的相关性分析。方法选取2015年2月至2018年2月期间的180例老年肺炎患者作为观察组研究对象,以同期180例在我院进行体检的健康人群为对照组。比较两组受试者的RORγt mRNA、NF-κB、IL10的水平以及患者不同疾病程度之间的差异,分析RORγt mRNA、NF-κB、IL-10水平与患者疾病严重程度的相关性,比较单项检测和联合检测效能之间的差异。结果观察组的RORγt mRNA、NF-κB、IL-10水平显著高于对照组;中高风险组患者的RORγt mRNA、NF-κB、IL-10水平显著高于低风险组患者;患者的肺炎严重程度与RORγt mRNA、NF-κB、IL-10水平相关,联合诊断效能显著高于单独检测,通过ROC曲线分析,低风险患者的RORγt mRNA、NF-κB、IL-10临界值分别为1.20、0.99、7.02ng/L,中高风险患者的RORγt mRNA、NF-κB、IL-10临界值分别为1.34、2.31、8.14ng/L。结论随着肺炎患者炎性反应的不断提升,患者的RORγt mRNA、NF-κB、IL-10水平显著升高,通过对患者的ROC曲线分析,RORγt mRNA、NF-κB、IL-10的临界值可作为临床治疗以及诊断的参考。

二烯丙基二硫对人胶质瘤U251细胞增殖及RORα表达的影响

目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胶质瘤U251细胞增殖及维甲酸相关孤核受体α(RORα)蛋白表达的影响。方法采用MTT比色实验、群体倍增时间分析DADS对人胶质瘤U251细胞的生长抑制效应;Western blot技术分析RORα蛋白在DADS处理U251细胞前后的表达改变。结果DADS浓度从15、22.5、30、37.5到45mg/L处理U251细胞,其吸光值比对照组低,而且随浓度增加逐渐降低(P<0.05);相反,随着浓度增加,DADS对细胞增殖的抑制率从32.88%、41.83%、49.50%、59.42%到68.53%逐渐增强(P<0.05);未处理的U251细胞群体倍增时间为21.86h,而DADS处理后的细胞,细胞群体倍增时间延长至36.69h(P<0.05);Western blot结果发现,DADS处理U251细胞24、48h后,RORα蛋白表达(0.69±0.13、1.37±0.25)较未处理组(0.22±0.16)明显上调(P<0.05),且48h处理组高于24h处理组(P<0.05)。结论DADS可抑制人胶质瘤U251细胞增殖,其抑制增殖作用可能与诱导RORα蛋白表达上调有关。

二烯丙基二硫对人胃癌细胞维甲酸相关孤核受体α表达的影响

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)处理前后人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体α(RORα)表达变化情况。方法 将胃癌SGC7901、MGC803细胞分为对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养及细胞形态学观察,采用免疫细胞化学、Western blot分析RORα的表达;半定量RT-PCR检测RORα核酸水平的表达。结果 DADS处理24 h后,胃癌SGC7901、MGC803细胞形态学发生明显改变;RORα在人胃癌SGC7901、MGC803细胞核中呈强阳性表达,与对照组比较表达显著上调;半定量RT-PCR灰度扫描定量分析结果显示,DADS处理24 h后,SGC7901、MGC803细胞中RORα的表达量[(1.09±0.01)与(0.97±0.01)]较对照组[(0.45±0.03)与(0.44±0.02)]显著上调,差异均有统计学意义(P<0.01);Western blot分析及灰度扫描显示,DADS处理人胃癌MGC803、SGC7901细胞8、12、24 h后,RORα蛋白表达量较未处理组显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DADS可诱导人胃癌细胞分化,其诱导分化作用可能与上调RORα表达有关。

载脂蛋白AⅤ研究

载脂蛋白AⅤ对血浆三酰甘油浓度起重要调节作用。内皮细胞过氧化物酶体增生物活化受体α(PPARα)和核转录因子(RORα)可影响载脂蛋白AⅤ的转录。载脂蛋白AⅤ通过对极低密度脂蛋白(VLDL)和脂蛋白脂肪酶(LPL)活性的调节参与血脂的转运与代谢,降低血浆中三酰甘油的浓度。

聚乙二醇干扰素α-2b联合恩替卡韦对慢性乙肝患者RORγt eGFR的影响

目的:探讨聚乙二醇干扰素α-2b联合恩替卡韦对慢性乙肝患者视黄酸相关的孤儿受体(RORγt)、肾小球滤过率(eGFR)的影响。方法:选择2017年6月至2018年6月在我院接受治疗的100例慢性乙肝患者,采用抽签法分为观察组(n=52)和对照组(n=48)。对照组给予恩替卡韦治疗,观察组加用聚乙二醇干扰素α-2b治疗。比较两组患者的临床疗效、RORγt、eGFR、T细胞亚群水平、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-α(INF-α)水平变化情况。结果:两组总有效率分别为75.00%、54.17%,差异显著(P<0.05);治疗前,两组RORγt、eGFR水平无显著差异;治疗后,两组RORγt、eGFR水平均有所改善,且观察组优于对照组(P<0.05);治疗后,两组T细胞亚群水平均有所改善,且观察组治疗后较对照组对比改善更明显(P<0.05);治疗前,两组血清细胞因子水平无显著差异;治疗后,两组血清细胞因子水平均有所改善,且观察组INF-α水平高于对照组,IL-17、IL-4水平低于对照组(P<0.05)。结论:聚乙二醇干扰素α-2b联合恩替卡韦治疗慢性乙肝效果显著,可能与其可有效改善RORγt、eGFR水平有关。

Notch1/ROR-γt通路在自身免疫性甲状腺炎发病过程中的作用研究

目的探讨果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)/维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt)通路在自身免疫性甲状腺炎(AIT)发病过程中的调控机制,为相关药物研发及临床治疗提供理论参考。方法免疫组化法测Notch1、ROR-γt分别在桥本氏甲状腺炎组织标本及正常甲状腺组织标本中表达水平。将免疫CBA/j小鼠随机分为正常对照组、模型组、Notch1通路阻断剂(DAPT)组(200 ng/kg),Notch通路激活剂(Jagged1)组(50 ng/kg),每组10只。皮下注射甲状腺球蛋白(mTg)+弗氏佐剂(CFA)建立AIT模型。连续给药3周,1次/周后,ELISA法测血清抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平;计算甲状腺指数;HE法观察组织形态学变化;TUNEL法测细胞凋亡率;免疫组化法测Notch1与ROR-γt阳性表达水平;Western blot法测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)、叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)蛋白表达水平。结果桥本氏甲状腺炎组织中Notch1、ROR-γt蛋白表达高于正常甲状腺组织(P<0.05)。模型组小鼠甲状腺结构破坏严重,甲状腺指数、血清TGAb、TPOAb水平、滤泡上皮细胞凋亡率、Notch1、ROR-γt、TNF-α、IL-6、TRAIL表达升高(P<0.05),Foxp3表达降低(P<0.05)。激活Notch1/ROR-γt通路小鼠甲状腺结构损伤进一步加重,阻断Notch1/ROR-γt通路小鼠甲状腺结构损伤缓解,且上述相关指标变化差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Notch1/ROR-γt通路激活参与AIT炎症损伤及滤泡上皮细胞凋亡过程,抑制Notch1/ROR-γt通路激活,可缓解AIT小鼠甲状腺结构损伤。

Th17/Treg相关因子在哮喘小鼠中的表达变化及其意义

目的检测哮喘模型小鼠辅助性T17细胞（Th17）和调节性T细胞（Treg）相关细胞因子及受体的表达变化,探讨Th17/Treg在哮喘发病机制中的作用。方法 20只清洁级BALB/C雌鼠,鼠龄6周,体质量18~20 g。随机分为对照组和哮喘组,每组10只。哮喘组小鼠腹腔注射卵白蛋白（OVA）与氢氧化铝的氯化钠混悬液3次后,给予雾化的OVA激发,建立哮喘小鼠模型。对照组给予等量的0.9%氯化钠溶液。末次激发后24 h处死小鼠,检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数和细胞分类计数;酶联免疫吸附分析（ELISA）、实时定量聚合酶链反应（Q-PCR）和Western blot法测定小鼠外周血和肺组织中的Th17/Treg细胞相关因子及受体的表达水平。结果哮喘组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性细胞比例、中性粒细胞比例、淋巴细胞比例显著高于对照组。哮喘组外周血和肺组织中白细胞介素（IL）-17和IL-18高于对照组[IL-17（124.36±2.14）pg/mL、（21.70±1.02）pg/mL vs（25.98±5.23）pg/mL、（19.95±3.21）pg/mL;IL-18（227.06±24.14）pg/mL、（413.97±32.01）pg/mL vs（120.38±10.32）pg/mL、（238.21±15.33）pg/mL],IL-10和转化生长因子β（TGF-β）低于对照组[IL-10（60.42±24.12）pg/mL、（65.14±15.11）pg/mL vs（61.07±14.36）pg/mL、（104.36±28.16）pg/mL;TGF-β（38.72±12.12）pg/mL、（58.65±24.21）pg/mL vs（30.19±10.16）pg/mL、（121.06±39.12）pg/mL];哮喘组维甲酸相关孤儿素受体γt（RORγt）水平高于对照组[（8.77±2.35）、（4.46±1.05）vs（3.03±1.02）、（3.45±1.25）],肺叉头蛋白3（FoxP3）水平低于对照组[（5.15±1.84）vs（12.35±3.21）];并且外周血和肺组织中相关细胞因子及受体的表达差异具有显著统计学意义（P〈0.01）。结论 Th17/Treg及其主要相关因子在哮喘的发病中具有重要作用。

核受体家族在炎症性肠病中的作用机制

炎症性肠病(IBD)是一组主要累及结直肠的慢性特发性疾病,具体发病机制尚不明确,可能涉及肠道微生物群失调、上皮细胞破坏、异常黏膜免疫反应和基因易感性等多种因素。核受体在消化系统稳态中发挥着至关重要的作用,如调节肠道微生物群、参与胆汁酸肠-肝循环过程、吸收或分泌溶质和水分以及营养物质运输等过程,部分核受体成员还参与调控肠道免疫反应、维持肠道上皮细胞及黏膜屏障完整性,并与IBD的病理生理过程关系密切。

γ促分泌酶抑制剂MW167对毛细支气管炎患儿外周血单个核细胞中Th17细胞比例的影响

目的观察γ促分泌酶抑制剂MW167对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞比例、视黄酸受体相关孤核受体γt(RORγt)mRNA表达及细胞上清液中IL-17水平的影响。方法选择RSV毛细支气管炎30例患儿作为观察组,25例健康体检儿作为对照组,抽取患儿外周静脉血,分离PBMC。将对照组儿童外周血分离所得的PBMC作为正常组,观察组患儿外周血分离所得的PBMC作为RSV组、MW167组,MW167组加入MW167,培养48 h。采用流式细胞术检测三组Th17细胞比例,ELISA检测细胞培养上清液中IL-17水平,实时荧光定量PCR检测细胞中的RORγt mRNA表达。结果正常组、RSV组、MW167组PBMC中Th17细胞比例分别为0.49%±0.09%、1.56%±0.77%、0.84%±0.23%,RSV组与正常组相比P<0.01,MW167组与RSV组相比P<0.05。正常组、RSV组、MW167组PBMC细胞培养上清液中IL-17水平分别为(12.18±2.97)、(20.88±4.10)、(12.91±4.28)pg/mL,RSV组与正常组相比,MW167组与RSV组相比,P均<0.05。正常组、RSV组、MW167组PBMC中RORγt mRNA相对表达量分别为1.0、5.72±0.53、1.82±0.21,RSV组与正常组相比,MW167组与RSV组相比,P均<0.05。结论γ促分泌酶抑制剂MW167可降低RSV毛细支气管炎患儿PBMC中RORγt mRNA表达、Th17细胞比例及细胞培养上清液中IL-17水平。

维甲酸相关孤儿核受体C可通过抑制糖酵解来调节宫颈癌细胞增殖

目的:探讨维甲酸相关孤儿核受体C(RORC/RORγ)对宫颈癌细胞Siha和HeLa的增殖抑制作用及相关机制。方法:采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测RORC对宫颈癌细胞增殖的抑制作用;采用葡萄糖检测分析试剂盒进行细胞内糖代谢检测分析;采用蛋白质印迹法(Western印迹)检测RORC、葡萄糖转运因子1(GLUT1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的变化。结果: CCK-8检测结果显示,RORC能明显抑制宫颈癌细胞Siha和HeLa细胞增殖( P<0.05)。糖代谢检测结果显示,RORC能使宫颈癌细胞葡萄糖摄取水平降低(P<0.05)。Western印迹检测结果显示,RORC可使宫颈癌细胞内GLUT1、LDHA和HIF-1α蛋白表达水平下调(P<0.05)。结论: RORC可通过降低宫颈癌细胞Siha和HeLa糖代谢水平来抑制细胞增殖。

辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病大鼠的抗炎作用及其机制研究

目的探讨辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠的抗炎作用及其机制。方法选择雄性SD大鼠50只,适应性饲养7 d,随机选择其中10只作为空白对照组,其余40只建立COPD模型,建模成功后随机分为4组[模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组(使用辛伐他汀)],每组10只。采集大鼠支气管肺泡灌洗液,检测炎性因子水平,检测维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt)mRNA表达,并评估肺功能。结果空白对照组大鼠肺功能指标水平最高,其余4组由高至低依次为高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组,其中低剂量组与中剂量组各肺功能指标水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),其他组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组大鼠炎性因子各指标水平和ROR-γt相对表达最低,其余4组由低至高依次为高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组,其中低剂量与中剂量组炎性因子各指标水平、ROR-γt mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),其他组间炎性因子各指标水平、ROR-γt mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论辛伐他汀对COPD大鼠有较理想的抗炎作用,其可能与药物抑制ROR-γt的表达有关,其机制可能为通过抑制炎症反应改善大鼠肺功能。