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Hepatitis C virus in human B lymphocytes transformed by Epstein-Barr virus in vitro by in situ reverse transcriptase-polymerase chain reaction 被引量:11
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作者 Ji Lin Cheng Bao Ling Liu Yi Zhang Wen Bin Tong Zheng Yan Bai Fang Feng Institute of Hepatology,Peoples Hospital,Medical Center of Beijing University,Beijing 10(X)44,China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2001年第3期370-375,共6页
AIM To study persistence and replication ofheltitis C virus (HCV) in patients' peripheralblood mononuclear cells (PBMC) cultured invitro.METHODS Epstein-Barr virus (EBV) was usedto transform the hepatitis C virus ... AIM To study persistence and replication ofheltitis C virus (HCV) in patients' peripheralblood mononuclear cells (PBMC) cultured invitro.METHODS Epstein-Barr virus (EBV) was usedto transform the hepatitis C virus from a HCVpositive patient to permanent lymphoblastoidcell lines (LCL). Positive and negative HCV RNAstrands of the cultured cells and growth mediawere detected by reverse transcriptase-polymerase chain reaction ( RT-PCR ) eachmonth. Core and NS5 proteins of HCV werefurther tested using immunohistochemical SPmethod and in situ RT-PCR.RESULTS HCV RNA positive strands wereconsistently detected the cultured cells for oneyear. The negative-strand RNA in LCL cells andthe positive-strand RNA in supernatants wereobserved intermittently. Immunohistochemicalresults medicated expression of HCV NS3 and Cproteins in LCL cytoplasm mostly. The positivesignal of PCR product was dark blue and mainlylocalized to the LCL cytoplasm. The RT-PCRsignal was eliminated by overnight RNasedigestion but not DNase digestion.CONCLUSION HCV may exist and remainfunctional in a cultured cell line for a longperiod. 展开更多
关键词 hepatitis C-like viruses HERPES virus 4 HUMAN B-LYMPHOCYTES cellscultured
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SEQUENCE ANALYSIS OF THE NS5 REGION OF GBVC/HGV AND DETECTION OF THE VIRUS BY REVERSE TRANSCRIPTASE PCR
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作者 陶其敏 常锦红 +3 位作者 魏来 杜绍财 王豪 孙焱 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 1998年第4期221-224,共4页
INTRODUCTIONAfterreliableassaysforthedetectionofhepati-tisCvirus(HCV)andEvirusinfectionbecameavail-able,itwa... INTRODUCTIONAfterreliableassaysforthedetectionofhepati-tisCvirus(HCV)andEvirusinfectionbecameavail-able,itwasevidentthatmosto... 展开更多
关键词 GBV-C HGV NS5基因 基因序列分析 RT-PCR 病毒性肝炎
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新型冠状病毒Omicron I1566V突变位点MS2噬菌体病毒样颗粒的构建
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作者 杨静远 李永鑫 +3 位作者 史茜 刘春燕 梁梦洁 张新 《检验医学与临床》 CAS 2024年第8期1030-1034,共5页
目的构建新型冠状病毒Omicron I1566V突变位点MS2噬菌体病毒样颗粒。方法选取并合成带有6×His标签的MS2噬菌体的衣壳蛋白(CP)、成熟蛋白(A蛋白)及Omicron I1566V突变基因序列,插入pACYCDuet-1质粒构建重组载体,通过原核系统诱导表... 目的构建新型冠状病毒Omicron I1566V突变位点MS2噬菌体病毒样颗粒。方法选取并合成带有6×His标签的MS2噬菌体的衣壳蛋白(CP)、成熟蛋白(A蛋白)及Omicron I1566V突变基因序列,插入pACYCDuet-1质粒构建重组载体,通过原核系统诱导表达目的蛋白,纯化重组蛋白后利用透射电镜对蛋白质进行物理表征,最后通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测病毒样颗粒的热稳定性及耐核酸酶水解能力。结果成功构建包含有6×His标签的CP、A蛋白和Omicron I1566V突变基因序列的重组载体,经限制性内切酶BamHⅠ和KpnⅠ酶切鉴定和测序验证,结果均与预期相符。经诱导并纯化后,通过电镜观察到了大小均匀、直径为23~28 nm的病毒样颗粒,该病毒样颗粒经核酸酶消化后可在37℃条件下稳定储存20 d以上。结论该研究成功利用MS2噬菌体的CP和A蛋白构建了Omicron I1566V突变位点病毒样颗粒,为该突变位点的RT-PCR检测体系提供了可靠的质量保障。 展开更多
关键词 新型冠状病毒变异株 Omicron I1566V突变位点 反转录聚合酶链反应 MS2噬菌体 病毒样颗粒
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TT virus and hepatitis G virus infections in Korean blood donors and patients with chronic liver disease 被引量:7
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作者 Mee Juhng Jeon Jong Hee Shin +2 位作者 Soon Pal Suh Young Chai Lim Dong Wook Ryang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2003年第4期741-744,共4页
AIM: To determine the prevalences of TTV and HGV infections among blood donors and patients with chronic liver disease in Korea, to investigate the association of TTV and HGV infections with blood transfusion, and to ... AIM: To determine the prevalences of TTV and HGV infections among blood donors and patients with chronic liver disease in Korea, to investigate the association of TTV and HGV infections with blood transfusion, and to assess the correlation between TTV and HGV viremia and hepatic damage.METHODS: A total of 391 serum samples were examined in this study. Samples were obtained from healthy blood donors (n= 110), hepatitis B surface antigen (HBsAg)-positive donors (n=112), anti-hepatitis C virus (anti-HCV)-positive donors (n=69), patients with type B chronic liver disease (n=81), and patients with type C chronic liver disease (n= 19).TTV DNA was detected using the hemi-nested PCR. HGV RNA was tested using RT-PCR. A history of blood transfusion and serum levels of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) were also determined.RESULTS: TTV DNA was detected in 8.2 % of healthy blood donors, 16.1% of HBsAg-positive donors, 20.3 % of antiHCV-positive donors, 21.0 % of patients with type B chronic liver disease, and 21.1% of patients with type C chronic liver disease. HGV RNA was detected in 1.8 % of healthy blood donors, 1.8 % of HBsAg-positive donors, 17.4 % of anti-HCV-positive donors, 13.6% of patients with type B chronic liver disease, and 10.5% of patients with type C chronic liver disease. The prevalence of TTV and HGV infections in HBV- or HCV-positive donors and patients was significantly higher than in healthy blood donors (P<0.05),except for the detection rate of HGV in HBsAg-positive donors which was the same as for healthy donors. There was a history of transfusion in 66.7% of TTV DNA-positive patients and 76.9% of HGV RNA-positive patients (P<0.05). No significant increase in serum ALT and AST was detected in the TTV- or HGV-positive donors and patients.CONCLUSION: TTV and HGV infections are more frequently found in donors and patients infected with HBV or HCV than in healthy blood donors. However, there is no significant association between TTV or HGV infections and liver injury. 展开更多
关键词 TT病毒 庚型肝炎病毒 慢性肝病 复合感染 献血者 韩国
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Genotyping of hepatitis C virus in patients with hepatocellular carcino Ma
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作者 崔晓红 潘卫 +5 位作者 戚中田 宋燕斌 印凯 张晓华 陈汉 吴孟超 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1995年第4期274-276,共3页
Forty-two patients with hepatocellular carcinoma (HCC) were examined for hepatitis C virus (HCV) RNA in liver tissues by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) with primers deduced from 5'-non-co... Forty-two patients with hepatocellular carcinoma (HCC) were examined for hepatitis C virus (HCV) RNA in liver tissues by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) with primers deduced from 5'-non-coding region (5'-NCR). HCV liver samples of 展开更多
关键词 HEPATOMA hepatitis C virus GENOTYPE reverse transcription-polymerase chain reaction PATIENTS
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肝癌患者血清中lncRNA HOTAIR表达与临床病理特征的相关性及诊断价值 被引量:1
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作者 郭冬萌 吴玉卓 《实用癌症杂志》 2023年第5期737-740,共4页
目的分析血清长链非编码RNA HOX转录反义RNA(IncRNA HOTAIR)在肝癌患者中的表达与临床诊断意义。方法选取100例肝癌患者为研究对象,并将其纳入肝癌组,另选取同期收治的80例肝硬化患者纳入肝硬化组,同时选取同期行体检的75例健康体检者... 目的分析血清长链非编码RNA HOX转录反义RNA(IncRNA HOTAIR)在肝癌患者中的表达与临床诊断意义。方法选取100例肝癌患者为研究对象,并将其纳入肝癌组,另选取同期收治的80例肝硬化患者纳入肝硬化组,同时选取同期行体检的75例健康体检者纳入对照组。采集3组5 ml静脉血,以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测对比3组血清IncRNA HOTAIR相对表达量。同时,收集肝癌患者的年龄、性别等一般资料,分析血清IncRNA HOTAIR与其临床病理特征的关系;另外绘制受试者工作曲线(ROC),分析血清IncRNA HOTAIR在肝癌中的诊断效能。结果肝癌组的IncRNA HOTAIR相对表达量[(2.53±0.58)]高于肝硬化组[(0.81±0.25)]与对照组[(0.20±0.05)],差异有统计学意义(P<0.05)。IncRNA HOTAIR表达与肝癌患者的TNM分期、血管侵犯、肝外转移有关,差异有统计学意义(P<0.05);IncRNA HOTAIR表达与患者的年龄、性别、肿瘤数目无关,差异无统计学意义(P>0.05)。ROC结果显示:血清IncRNA HOTAIR诊断肝癌的AUC为0.901(95%CI:0.852~0.949),具有较高的诊断价值。结论肝癌患者血清内IncRNA HOTAIR呈高表达,其表达水平与患者TNM分期、血管侵犯、肝外转移相关,可能参与肝癌的发生、发展,在肝癌中具有较高的临床诊断意义。 展开更多
关键词 肝癌 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应 相对表达量
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2019—2021年安徽省合肥市某三甲医院住院的严重急性呼吸道感染患者的监测分析 被引量:1
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作者 吴俊 赵科伕 刘芳 《实用临床医药杂志》 CAS 2023年第7期118-123,共6页
目的分析2019—2021年在安徽省合肥市第二人民医院住院的严重急性呼吸道感染(SARI)患者的监测结果。方法筛查2019年1月—2021年12月安徽省合肥市第二人民医院住院部监测科室(呼吸内科、儿内科与重症监护科)SARI患者的资料,并采集患者鼻... 目的分析2019—2021年在安徽省合肥市第二人民医院住院的严重急性呼吸道感染(SARI)患者的监测结果。方法筛查2019年1月—2021年12月安徽省合肥市第二人民医院住院部监测科室(呼吸内科、儿内科与重症监护科)SARI患者的资料,并采集患者鼻咽拭子、呼吸道分泌物,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测甲乙通用性流感病毒。结果2019—2021年,共监测SARI患者934例,占监测科室同期入院病例的12.04%;2019年、2020年和2021年,SARI患者分别占入院患者的10.62%、14.90%和11.40%。2020年,检测出的SARI患者占比较高。2019—2021年,SARI监测病例主要集中于冬春季节,以5岁以下儿童病例占比较大(54.82%),男女比例为1.66∶1。SARI的监测科室分别为儿内科(82.12%)、呼吸内科(17.77%)以及重症监护科(0.11%);2019—2021年采集的934份咽拭子标本经实验室检测,阳性标本39份,阳性率为4.17%,主要感染病毒类型为B型Victoria系[27例(69.23%)]。SARI与流感阳性感染患者中合并症最常见的为肺炎,SARI合并并发症的467例患者中,99.36%的患者转归为治愈或好转,不合并并发症的患者中,99.57%的患者转归为治愈或好转,差异无统计学意义(P=1.000)。SARI病例采样前最常用的药物为抗生素与神经氨酸酶抑制剂类抗病毒药物。SARI病例中,使用抗病毒药物的患者中有98.66%疾病转归为治愈或好转,而不使用抗病毒药物的患者中,99.53%的患者疾病转归为治愈或好转,差异无统计学意义(P=0.343)。结论2019—2021年,在安徽省合肥市第二人民医院住院的SARI病例多为男性、儿童、老人,冬春季为高发季节,流感阳性患者主要感染菌株均为FluB,且所有患者转归情况较好。 展开更多
关键词 严重急性呼吸道感染 监测结果 鼻咽拭子 呼吸道分泌物 反转录聚合酶链反应
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急性胰腺炎病人血清长链非编码RNA核富集转录体1、Toll样受体2表达变化及临床意义研究
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作者 刘会雪 牛立远 +2 位作者 张佩佩 安江科 魏贯南 《安徽医药》 CAS 2023年第9期1814-1818,共5页
目的探讨急性胰腺炎(AP)病人血清长链非编码RNA核富集转录体1(LncRNA NETA1)、Toll样受体2(TLR2)表达及临床意义。方法选取2017年5月至2020年12月石家庄平安医院收治的AP病人125例为研究对象,根据急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHE... 目的探讨急性胰腺炎(AP)病人血清长链非编码RNA核富集转录体1(LncRNA NETA1)、Toll样受体2(TLR2)表达及临床意义。方法选取2017年5月至2020年12月石家庄平安医院收治的AP病人125例为研究对象,根据急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)对AP病人进行评分,并将病人分为轻症组56例,重症组69例;根据住院期间重症组AP病人预后情况,将病人分为预后不良25例,预后良好44例。同期选取该院健康体检者130例为健康组。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清LncRNA NETA1水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清TLR2水平;Pearson相关性分析探索AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2水平相关性及二者与病人APACHEⅡ评分的关系;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清LncRNA NEAT1、TLR2对AP病人重症的评估价值。结果与健康组比较,AP组血清LncRNA NEAT1(2.16±0.31比1.00±0.00)、TLR2水平[(6.43±1.05)µg/L比(0.59±0.24)µg/L]升高(P<0.05);与轻症组比较,重症组AP病人血清LncRNA NEAT1(2.31±0.33比1.98±0.27)、TLR2水平[(6.89±1.16)µg/L比(5.86±0.92)µg/L]升高(P<0.05);与预后良好组比较,预后不良组重症AP病人血清LncRNA NEAT1(2.43±0.36比2.14±0.27)、TLR2水平[(7.12±1.24)µg/L比(6.45±1.02)µg/L]升高(P<0.05);Pearson相关性分析结果表明,AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2呈正相关(r=0.65,P<0.05),二者与病人APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.50、0.52,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清LncRNA NEAT1水平、TLR2单独及联合评估AP病人重症的曲线下面积(AUC)分别为0.73[95%CI:(0.64,0.82)]、0.75[95%CI:(0.67,0.84)]、0.88[95%CI:(0.82,0.94)],血清LncRNA NEAT1联合TLR2水平预测AP病人重症的AUC明显大于二者单独预测(P<0.05)。结论AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2表达水平显著升高,且与病人严重程度和预后有关,临床上检测LncRNA NEAT1、TLR2表达可能有助于AP病人的病情评估。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 长链非编码RNA核富集转录体1 TOLL样受体2 逆转录聚合酶链反应 表达 临床意义
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常见白血病融合基因筛查在白血病诊断与分型中的意义 被引量:11
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作者 祝毓琳 张英 +3 位作者 朱平 杨英 杜金伟 刘静 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期236-239,共4页
目的: 分析病人白血病细胞染色体畸变涉及的86种融合基因和临床白血病类型的相关性,探讨常见融合基因筛查法在临床诊断和分型中的应用价值。方法: 收集161例初发或者复发的白血病患者及8例骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓细胞,提取R... 目的: 分析病人白血病细胞染色体畸变涉及的86种融合基因和临床白血病类型的相关性,探讨常见融合基因筛查法在临床诊断和分型中的应用价值。方法: 收集161例初发或者复发的白血病患者及8例骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓细胞,提取RNA,用32条特异性引物逆转录为cDNA,利用白血病29种染色体畸变形成的融合基因的86种mRNA剪接变异体引物,分8管进行多重RT PCR,筛查白血病融合基因。结合临床状态和形态学观察了解融合基因与白血病类型的关系。结果: 白血病中115例(71% )分别检测出10种白血病常见融合基因,包括AML1 /ETO、PML/RARα、PLZF/RARα、dupMLL、MLL/AF6、MLL/AF10、CBFβ/MYH11、BCR/ABL、Hox11、Evi1。其中52例慢性粒细胞白血病(CML)100%检出BCR/ABL; 25例急性早幼粒细胞白血病(APL)中88%检出融合基因,其中21例APL检测出PML/RARα, 1例APL检测出PLZF/RARα; AML1 /ETO阳性的17例急性白血病(AL)16例为FAB M2亚型, 1例为混合型白血病; CBFβ/MYH11阳性的4例AL3例为FAB分型的M4, 1例为M5,属于向粒单细胞系统分化的白血病。16例AL检测出MLL基因异常,其中MLL/AF6白血病均为FAB分型的M5,具有典型的原始单核细胞白血病的特征。17例急性淋巴细胞白血病(ALL) 5例检测出BCR/ABL。8例MDS病人中2例检测出融? 展开更多
关键词 白血病诊断 骨髓增生异常综合征(MDS) PML/RARΑ BCR/ABL 急性早幼粒细胞白血病 急性淋巴细胞白血病 慢性粒细胞白血病 融合基因 单核细胞白血病 基因筛查法 FAB分型 人白血病细胞 RT-PCR PLZF 染色体畸变 白血病患者
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中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达的调节 被引量:23
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作者 王辉 王莒生 +6 位作者 王萍 陶毅 蔡念宁 郁卫东 杨立新 郭念筠 陈清轩 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期230-231,共2页
目的 探讨中药滋补肝肾方治疗白癜风的分子学作用机制。方法 采用定量逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)方法 ,观察中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞株酪氨酸酶mRNA表达的影响。结果 中药滋补肝肾方能使黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达水... 目的 探讨中药滋补肝肾方治疗白癜风的分子学作用机制。方法 采用定量逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)方法 ,观察中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞株酪氨酸酶mRNA表达的影响。结果 中药滋补肝肾方能使黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达水平增加。结论 中药滋补肝肾方能上调黑素细胞酪氨酸酶mRNA表达水平 ,这是其治疗白癜风的药理作用机制之一。 展开更多
关键词 中医药疗法 滋补肝肾方 B16黑素瘤 酪氨酸酶 MRNA表达 白癜风
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大豆异黄酮对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性及瘦素基因表达的影响 被引量:16
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作者 陈世伟 张立实 +2 位作者 张红敏 冯晓凡 彭晓莉 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期197-200,共4页
目的:观察大豆异黄酮(SIF)对高脂膳食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠血清瘦素水平及白色脂肪组织瘦素mRNA表达的影响,并探讨SIF提高胰岛素敏感性的可能机制。方法:选用高脂饲料诱导的IR雄性SD大鼠,根据其胰岛素抵抗指数(IRI)随机分为模型对照... 目的:观察大豆异黄酮(SIF)对高脂膳食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠血清瘦素水平及白色脂肪组织瘦素mRNA表达的影响,并探讨SIF提高胰岛素敏感性的可能机制。方法:选用高脂饲料诱导的IR雄性SD大鼠,根据其胰岛素抵抗指数(IRI)随机分为模型对照组(水)和3个SIF组(50 mg/kg,150 mg/kg及450 mg/kg)。各组经口灌胃给予相应受试物1个月,空腹过夜后取材,用酶法检测各组动物空腹血糖、用放射免疫法检测空腹血胰岛素、用酶联免疫法检测血清瘦素含量,以实时定量RT-PCR法检测肾周脂肪组织瘦素基因的mRNA水平。结果:与模型对照组比较,SIF 150 mg/kg和450 mg/kg组能显著降低空腹血胰岛素水平及IRI,SIF450 mg/kg组能明显降低大鼠体重及肾周脂肪组织瘦素基因mRNA的表达、提高血清瘦素的含量。结论:SIF可能具有改善瘦素抵抗的作用,并进而提高胰岛素的敏感性。 展开更多
关键词 异黄酮类 胰岛素抗药性 瘦素 逆转录聚合酶链反应
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RT-PCR技术检测猪瘟病毒的应用研究 被引量:34
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作者 罗廷荣 莫扬 +7 位作者 吴文德 黄玉华 黄伟坚 秦爱珍 刘芳 温荣辉 陆芹章 余克伦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期307-309,312,共4页
本试验应用反转录_聚合酶链式反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PC... 本试验应用反转录_聚合酶链式反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PCR检测 ,37份为阳性 ,阳性率为 13 4 %。其中健康猪扁桃体带毒较高 ,2 4 6份扁桃体中有 35份阳性 ,占 14 2 %。采自柳州健康猪的 2 6份淋巴结材料全为阴性 ,只有邕宁县的 1份健猪淋巴结阳性。结果表明 ,RT_PCR技术可应用于猪瘟的临床诊断。 展开更多
关键词 猪瘟 反转录-聚合酶链式反应 诊断
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RT-PCR技术诊断猪瘟的应用研究 被引量:26
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作者 罗廷荣 莫扬 +7 位作者 吴文德 黄玉华 黄伟坚 秦爱珍 刘芳 温荣辉 陆芹章 余克伦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期219-222,共4页
应用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 .2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PCR检测 ,3... 应用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 .2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PCR检测 ,37份为阳性 ,阳性率为 13.4 %。其中健康猪扁桃体带毒较高 ,2 4 6份扁桃体中有 35份阳性 ,占 14 .2%。采自柳州健康猪的 2 6份淋巴结材料全为阴性 ,只有邕宁县的 1份健猪淋巴结阳性。结果表明 。 展开更多
关键词 猪瘟 反转录-聚合酶链式反应 诊断
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大鼠关节软骨酸敏感离子通道的表达 被引量:18
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作者 袁凤来 陈飞虎 +6 位作者 李霞 雄志刚 黄学应 刘永靖 吴繁荣 姚莹 张晓明 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第5期513-516,共4页
目的探讨大鼠关节软骨酸敏感离子通道(ASICs)的表达及其意义。方法利用RT-PCR和Western blot检测ASICs在大鼠关节软骨的表达。结果大鼠关节软骨存在ASIC1a、ASIC2a和ASIC3 mRNA及其蛋白的表达。结论ASICs在大鼠关节软骨组织的表达,其有... 目的探讨大鼠关节软骨酸敏感离子通道(ASICs)的表达及其意义。方法利用RT-PCR和Western blot检测ASICs在大鼠关节软骨的表达。结果大鼠关节软骨存在ASIC1a、ASIC2a和ASIC3 mRNA及其蛋白的表达。结论ASICs在大鼠关节软骨组织的表达,其有望成为关节炎治疗的新靶点。 展开更多
关键词 离子通道 逆转录聚合酶链反应 软骨 关节 印迹法 蛋白质 大鼠
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实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠发病中脑组织血红素氧合酶-1基因和蛋白表达的动态变化 被引量:11
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作者 檀国军 朱一飞 +3 位作者 曹翠芳 赵晓云 马常升 杨天祝 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期579-584,共6页
为探讨脑组织血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentalallergic encephalomyelitis,EAE)的作用, 分别应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化技术测定了豚鼠脊髓生理盐水匀浆+完全福氏佐剂... 为探讨脑组织血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentalallergic encephalomyelitis,EAE)的作用, 分别应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化技术测定了豚鼠脊髓生理盐水匀浆+完全福氏佐剂诱导EAE大鼠1、7、14、21 d 时, 脑组织HO-1 基因和蛋白表达的动态变化, 并观察与症状之间的关系。结果显示: 对照组大鼠脑组织仅有少量HO-1 基因和蛋白表达; 诱导EAE 后, 伴随着大鼠EAE 症状及脑组织病理损伤的出现和进行性加重, 脑组织HO-1 基因和蛋白表达量逐渐增高。在豚鼠脊髓生理盐水匀浆+ 完全福氏佐剂诱导7 d 后, HO-1 mRNA上升至高峰。14 d 时, HO-1 蛋白表达至高峰, HO-1 阳性细胞主要位于脉络丛、穹隆下器、血管“套袖样”病灶的周围, 与 EAE 病变部位一致。此时大鼠的病情最重、体重减轻最显著、脑组织病理改变最明显。21 d 时脑组织HO-1 基因和蛋白表达量逐渐下降, 大鼠EAE 症状也逐渐减轻。应用HO-1 特异性抑制剂锡原卟啉-9 以抑制脑内HO-1 蛋白表达后, 大鼠EAE 症状和脑组织损伤明显减轻, 说明脑组织HO-1 的动态变化与EAE 症状及脑组织损伤密切相关。提示脑组织HO-1 基因和蛋白过表达对EAE 发病起着重要的作用, 应用 HO-1 展开更多
关键词 神经生物学 脑脊髓炎 逆转录聚合酶链反应 血红素氧合酶 穹窿下器
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雌激素受体在原发性肝癌中的表达与变异 被引量:6
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作者 邢宝才 王家宏 +3 位作者 王怡 郝纯毅 黄信孚 王歈 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期620-622,共3页
目的:通过研究原发性肝癌组织中野生型雌激素受体(wild type Estrogen receptor,wER)以及第5外显子缺失而变异的雌激素受体(variant estrogen receptor,vER)的表达情况,期望对原发性肝癌进行内分泌治疗的可能性进行分析。方法:收... 目的:通过研究原发性肝癌组织中野生型雌激素受体(wild type Estrogen receptor,wER)以及第5外显子缺失而变异的雌激素受体(variant estrogen receptor,vER)的表达情况,期望对原发性肝癌进行内分泌治疗的可能性进行分析。方法:收集我院原发性肝癌手术切除的标本28例,应用 RT-PCR 的方法分析 wER 与 vER 在 mRNA 水平的表达,同时通过免疫组织化学分析对 ER 在蛋白水平的表达进行检测。结果:免疫组织化学显示原发性肝癌组织中 ER 的表达率为39.3%(11/28);RT-PCR 显示所有标本中均检测到雌激素受体的表达,89.3%(25/28)的原发性肝癌病人表达 wER,96.4%(27/28)的肝癌表达 vER,其中 wER 和 vER 联合表达的病人为85.7%(24/28),仅表达wER 的病人为3.5%(1/28),而仅表达 vER 的为10.7%(3/28)。结论:在原发性肝癌的形成过程中,96.4%(27/28)的肝癌出现 ER 的变异,提示 ER 的变异与原发性肝癌的形成有密切的关系。 展开更多
关键词 ER 原发性肝癌 表达 雌激素受体 病人 癌组织中 免疫组织化学 MRNA水平 变异 外显子
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MMP-9,2,7及其抑制剂TIMP-1,2,3在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义 被引量:10
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作者 胡晓霞 李力 +4 位作者 黎丹戎 张玮 陈心秋 张洁清 唐步坚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1194-1198,共5页
背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-... 背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA在卵巢肿瘤组织中的表达,探讨其与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法:应用RT-PCR方法检测48例卵巢癌、21例良性肿瘤及22例正常卵巢组织中MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA的表达。结果:MMP-9阳性率和MMP-9、MMP-2半定量值在卵巢癌组织中明显高于正常卵巢组织(P<0.05)。TIMP-2、MMP-7、TIMP-3在卵巢恶性及良性肿瘤组织中的阳性率及半定量值明显高于正常卵巢组织。MMP-9/TIMP-1在卵巢癌组织中的比值(0.91±0.67)明显高于正常卵巢组织(0.15±0.34)。MMP-9表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关,在Ⅲ~Ⅳ期患者中的表达(1.13±0.66)显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者(0.60±0.54)(P<0.05);MMP-9其阳性患者平均生存时间为(43.00±17.12)个月,累积生存率为47.37%,明显低于MMP-9阴性者(100%)。结论:MMP-9、MMP-2、MMP-7、TIMP-2、TIMP-3基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达增加。 展开更多
关键词 MMP-9 卵巢癌 表达水平 MMP-7 TIMP-2 TIMP-1 TIMP-3 RNA 抑制剂 高表达
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逆转录聚合酶链反应检测结直肠癌淋巴结微转移的临床意义 被引量:16
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作者 袁宏银 程伏林 +2 位作者 魏正专 杨国樑 陈家宽 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1069-1073,共5页
背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋... 背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋巴结中细胞角质蛋白CK20mRNA,揭示微转移灶的存在,并与常规病理苏木精伊红(HE)染色和免疫组化染色结果进行比较;分析HE染色和RT-PCR检测结果对判定临床病理分期和统计生存率的影响。结果:共检测432个淋巴结,HE染色、免疫组化染色和RT-PCR法淋巴结转移检出率分别为57.2%、62.3%和73.1%。HE染色和免疫组化的检出率无显著性差异(P>0.05),而HE染色和RT-PCR法检测结果有显著性差异(P<0.05)。56例患者中,按HE染色结果确定的PN0、PN1和PN2期,其5年无复发转移生存率分别为80%、60%和50%;通过RT-PCR技术检测,升级后的PN0、PN1和PN2期5年无复发转移生存率分别为100%、61.9%和55.6%,两种方法分析的结果有显著性差异(P<0.05)。结论:HE染色未确切指出淋巴结微转移癌;RT-PCR法检测CK20mRNA可以推断淋巴结微转移癌的存在,从而有助于确定结直肠癌临床分期和预测预后。 展开更多
关键词 结直肠癌 淋巴结微转移 逆转录聚合酶链反应 CK20
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改良TRIZOL法从矿化骨组织中提取总RNA 被引量:14
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作者 郑纺 王宝利 +1 位作者 张镜宇 郭刚 《天津医药》 CAS 北大核心 2007年第10期753-754,801,共3页
目的:通过对TRIZOL法加以改进,建立一种快速、有效提取矿化骨组织中总RNA的方法。方法:改进TRIZOL法提取骨组织中的总RNA,在异丙醇沉淀RNA时加入高浓度的盐溶液。通过紫外分光光度法和1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳鉴定所提取的RNA。进而以... 目的:通过对TRIZOL法加以改进,建立一种快速、有效提取矿化骨组织中总RNA的方法。方法:改进TRIZOL法提取骨组织中的总RNA,在异丙醇沉淀RNA时加入高浓度的盐溶液。通过紫外分光光度法和1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳鉴定所提取的RNA。进而以其逆转录所得的cDNA为模板经PCR扩增OPG基因予以鉴定。结果:改良TRIZOL法获得的总RNA完整,纯度好,产量高。结论:改良TRIZOL法是一种从矿化骨组织中提取总RNA的高效、便捷、可靠的方法。 展开更多
关键词 RNA 骨和骨组织 逆转录聚合酶链反应 大鼠
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天津市2001年—2004年流感病原学监测分析 被引量:11
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作者 孔梅 郭小华 +5 位作者 段卫平 李颖 解小华 李琳 陈锦英 王撷秀 《天津医药》 CAS 北大核心 2005年第12期770-772,共3页
目的:观察天津市流感病毒流行特点以及发生禽流感疫情时的情况。方法:2001年10月—2004年3月3个冬春季的类流感患者咽拭子标本采用MDCK细胞和鸡胚双腔法分离流感病毒,用鸡红细胞和豚鼠红细胞凝集试验(HA)证实是否存在病毒,再用红细胞凝... 目的:观察天津市流感病毒流行特点以及发生禽流感疫情时的情况。方法:2001年10月—2004年3月3个冬春季的类流感患者咽拭子标本采用MDCK细胞和鸡胚双腔法分离流感病毒,用鸡红细胞和豚鼠红细胞凝集试验(HA)证实是否存在病毒,再用红细胞凝集抑制试验(HI)进行型和亚型的鉴定。2004年用RT-PCR方法检测禽流感疫情区发热患者咽拭子标本。结果:3个监测周期共采集类流感样患者咽拭子标本953份,分离出流感毒株285株,总检出率为29.9%,男女比例为1.06∶1,其中A(H1N1)亚型4.6%(13/285株),A(H3N2)亚型59.6%(170/285株),B型35.8%(102/285株)。285株流感病毒都能适应MDCK细胞,但阳性标本液直接接种鸡胚阳性率极低,仅为2.1%(6/285)。21份禽流感监测咽拭子标本H5亚型RT-PCR结果为阴性。结论:天津地区同时存在A(H1N1)、A(H3N2)和B型流感病毒,12月为发病高峰。天津市2004年发生禽流感时未发现人感染H5亚型禽流感病毒。 展开更多
关键词 流感 正粘病毒科 流感病毒A型 逆转录聚合酶链反应
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