Mechanisms of Cytochrome C Extraction by Reverse Micelles

The extraction of cytochrome C was carried out by means of phase transfer technique with three different reverse micellar systems, i.e. , a CTAB micellar solution in n butyl alcohol chloroform(volume ratio 4∶1), an AOT micellar solution in isooctane and a SDSS D 2EHPA micellar solution in isooctane. The extraction mechanisms were studied. The results show that the extraction mechanisms for the same proteins with different types of reverse micellar systems can be distinct. The extraction of cytochrome C with CTAB and SDSS D 2EHPA reverse micellar systems are carried out according to the mechanism of electrostatic interaction. However, in the extraction of cytochrome C with the AOT reverse micellar system, the electrostatic interaction between the protein and the surfactant is not important.

不同类型反胶团萃取细胞色素C的研究

以细胞色素 C为研究对象 ,研究了水相 p H值、离子强度、相体积比、表面活性剂浓度和类型及萃取时间对反胶团法萃取细胞色素 C的影响 ;讨论了不同类型反胶团体系的萃取机理。结果表明 ,反胶团法的提取率高 ,且高效、快速、简便。选择合适的体系和条件 ,可以实现细胞色素

新型阴离子表面活性剂的合成及其反胶束体系对cyt-C的提取

合成了未见报道的阴离子型表面活性剂二 ( 2 -乙基己基 )羟基丁二酸酯磺酸钠 (AHOT) ,并对其结构进行了表征 .考察了AHOT/异辛烷反胶束体系提取细胞色素C(cyt-C)的性能 ,并与目前公认的优良的表面活性剂AOT进行了比较 .结果表明 ,AHOT与AOT具有相似的表面活性 ,AHOT反胶束体系的综合性能优于AOT反胶束体系 .

AOT/异辛烷反胶团体系提取细胞色素C

用 AOT/异辛烷反胶团溶液提取水溶液中的细胞色素 C。研究了 p H值、离子强度、相体积比、搅拌速度、AOT浓度等因素对提取率的影响。结果表明 ,通过调节 p H值、离子强度等工艺条件 ,可以使细胞色素 C的提取率达到 97% ,且不需加助提取剂。

TOMAC/正辛醇/异辛烷反胶团体系萃取细胞色素C

研究了用三辛基甲基氯化铵 (TOMAC) /正辛醇 /异辛烷反胶团相转移法萃取细胞色素C时 ,水相 pH值、离子强度、正辛醇含量、相体积比、搅拌时间等因素的影响 .结果表明 ,正辛醇的量、水相 pH值是萃取过程的关键因素 ,在低离子强度 (CKCl=0 .0 5mol/L)、高 pH值(pH =13 6 6 )、含正辛醇体积分数为 0 85 %的情况下 ,萃取率接近 10 0 % .

反胶团法提取细胞色素－C

以细胞色素ｃ（ｃｙｔ－Ｃ）为对象，研究了水相ｐＨ值和离子强度对反胶团法萃取和反萃取ｃｙｔ－Ｃ的影响；讨论了不同种类的表面活性剂的萃取机理。研究结果表明，选择合适的体系及条件，反胶团提取是实现蛋白质分离提纯的有效方法。

SDSS-D_2EHPA/异辛烷混合反胶团体系萃取细胞色素C

用 SDSS- D2 EHPA/异辛烷混合反胶团体系提取蛋白酶细胞色素 C,研究了水相 p H值、离子强度、SDSS浓度、提取时间等对提取率的影响。结果表明 ,提取率可达 1 0 0 % ,并且提取条件温和、简便 ,可在中性介质和室温下进行 ,提取量大 ,提取时间短 ,5 min即可完成。

SEDSS/异辛烷/水反胶束体系对Cyt-C的提取

报道了在SEDSS/异辛烷 /水反胶束体系中相转移提取细胞色素C的最佳条件 .结果表明 ,在室温下 ,pH值为 2～ 6,离子强度为 0 0 7～ 0 .2 5mol·L- 1及表面活性剂的浓度大于 60mmol·L- 1的条件下 ,提取率可达 99%以上 ;pH =1 2 .2、离子强度为 0 5mol·L- 1及乙醇体积分数为 50 %的条件下 ,反提取率可达 57% ,正提和反提时都无界面膜状物产生 .

细胞色素-C的亲和反胶团萃取研究

以阴离子表面和性剂丁二酸-2-乙基己基酯磺酸钠(AOT)和异辛烷构成反胶团系统,以咪唑化合物作为细胞色素C的亲和配基,并在水相形成亲和配合物,通过静电相互作用进入反胶团而被萃取。就咪唑化合物浓度、pH值和离子强度对细胞色素C萃取的影响进行了研究。结果表明,通过调节pH值和离子强度即可以对细胞色素C进行萃取与反萃取。在水相中添加少量的咪唑化合物可以提高细胞色素C的萃取率。

SDSS-D_2EHPA/异辛烷混合反胶团体系提取细胞色素C的研究

用 SDSS- D2 EHPA/异辛烷混合反胶团体系提取蛋白质细胞色素 C。研究了提取时间、温度、相体积比以及助提取剂用量对提取率的影响。结果表明 ,提取率接近 1 0 0 % ,并且提取时间短 ,为 5min;

AOT／异辛烷萃取猪心细胞色素C的方法研究初探

用５０ｍｍｏｌ／ＬＡＯＴ反胶团系统在添加０．１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ，ｐＨ７．５条件下萃取了猪心糜粗提液（Ⅰ）、ｐＨ７．５沉淀杂质蛋白后的提取液的滤液（Ⅱ）、硫酸铵（５００ｇ／Ｌ）盐析除杂蛋白的清液透析液（Ⅲ）、硫酸矮（５０ｇ／Ｌ）除杂蛋白的滤液并透析除盐的溶液（Ⅳ）、细胞色素Ｃ的三氯乙酸的沉淀物的饱和硫酸铵溶液透析除盐细胞色素Ｃ溶液（Ⅴ）中的细胞色素Ｃ。用１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ、ｐＨ１３．０的水溶液对萃取有机相中的细胞色素Ｃ进行反萃取获得细胞色素Ｃ溶液。结果显示，ＡＯＴ反胶团系统能够将细胞色素Ｃ从猪心提取液中萃取到有机相中，并经调节离子强度和ｐＨ值又能将细胞色素Ｃ从有机相中反萃取到水溶液中。其萃取效率（％）分别为８６．９、７８．１、６３．１、４３．１和６。

阳离子对猪心细胞色素C的反胶团萃取的影响

在猪心提取液中添加阳离子的情况下，观察了ＡＯＴ／异辛烷反胶团对蛋白质和细胞色素Ｃ的萃取效果。结果表明：萃取分相以添加Ｍｇ（２＋）最好，其次分别为Ｎａ＋．Ｋ＋、Ｃａ（２＋）。在添加Ｍｇ（２＋）、Ｎａ＋，Ｃａ（２＋），Ｋ＋离子后，对蛋白质的萃取率分别为：５０．４％、３１．５％、２９．２％、２７．８％。在添加Ｍｇ（２＋），Ｎａ＋Ｋ＋离子时，对细胞色素的萃取率（以反萃取率表示）分别为４０．６％、３７．４％、＋３０．４％。

反胶团相转移提取细胞色素C的研究

报导了在ＡＯＴ／正辛烷－正丁醇（４∶１，Ｖ／Ｖ）反胶团体系中相转移提取细胞色素Ｃ的最佳条件．结果表明，在室温、ＰＨ值为５～６及离子强度为０．０５的条件下，提取率在９０％以上，且保持细胞色素Ｃ的稳定性．

镁离子浓度对猪心细胞色素C的反胶团萃取的影响

用ＡＯＴ／异辛烷反胶团系统萃取了添加不同浓度镁离子的猪心提取液中的细胞包素Ｃ．其结果为：添加０．０２５ｍｏｌ／ＬＭｇ２＋的萃取率Ｅ．Ｒ，（ＥｘｔｒａｃｔＲａｔｉｏ）为９６．５％（氧化型和还原型平均值）．添加０．３ｍｏｌ／ＬＭｇ２＋的萃取率为２８．３％。萃取后水相的吸收光谱中，还原型细胞色素Ｃ在５２０ｎｍ、５５０ｎｍ的吸收峰值消失。１２０ｎｍ的吸收峰值显著降低。萃取有机相的吸收光谱中，还原型细胞包素Ｃ在４２０ｎｍ、５２０ｎｍ和５５０ｎｍ处的特征吸收峰值显著。经反萃取后水相的吸收光谱与提取液以及萃取有机相的吸收光谱相同。说明添ＷＭｇ２＋后，经ＡＯＴ／异辛烷萃取和反萃取过程能将细胞包素Ｃ从猪心提取液中萃取分离出来。

pH值对细胞色素C的反胶团萃取的影响

以ＡＯＴ／异辛烷反胶团萃取不同ｐＨ值的猪心提取液中的ｃｙｔＣ。结果表明：ｐＨ４～１０范围内有不同的萃取效果，其中ｐＨ８～９的萃取率达到６０％～７５％。萃取水相中细胞色素Ｃ的特征吸收峰值下降或消失，萃取有机相的吸收光谱与提取原液的吸收光谱相似，并具有相同的吸收峰。说明在ｐＨ４～１０之间均能用ＡＯＴ／异辛烷萃取分离细胞色素Ｃ。

不同浓度AOT对猪心提取液中细胞色素C的萃取研究

用浓度（ｍｍｏｌ／Ｌ）１０、２５、５０、１００、１５０的ＡＯＴ（气溶胶ＯＴ）组成的反胶团对猪心肉糜提取液中的细胞色素Ｃ进行了萃取。结果为１０ｍｍｏｌ／Ｌ组几乎没有萃取效果，在２５～１５０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度下的反胶团均有明显的萃取效果，萃取率（反萃取水相中的含量与原液中的含量的比值）还原型细胞色素Ｃ为２５％～３２％，氧化型细胞色素Ｃ为２８％～４２％．

TRPO-AOT/异辛烷反胶团体系萃取细胞色素C和牛血红蛋白

将中性磷氧萃取剂与阴离子型表面活性剂混合溶解在异辛烷中，形成混合反胶团，萃取蛋白质结果表明，该体系对分子量较小的细胞色素Ｃ及分子量较大的牛血红蛋白的萃取性能均比单一反胶团体系更好，萃取曲线均呈“钟”形与单一反胶团相比，混合反胶团中的牛血红蛋白更易被反萃，而细胞色素Ｃ难被反萃，所以，混合反胶团体系更适合于分离纯化牛血红蛋白有机相乳化及温度对混合体系萃取蛋白质性能有较大的影响此外，混合反胶团比单一反胶团大。

SEDSS-异辛烷反胶束体系的建立及其对蛋白质的提取

首次报道了一种新型表面活性剂丁二酸二 (油酸乙二醇单酯 )酯磺酸钠 (SEDSS)的合成 ,考察了它与异辛烷形成的反胶束体系在提取小分子的细胞色素C(cyt-C)和相对分子质量较大的血红蛋白的行为 .结果表明 ,该表面活性剂与异辛烷形成的体系具有反胶束的性质 ,与AOT/异辛烷体系相比 ,血红蛋白的提取率更高 。

AEOT/异辛烷/水反胶团体系对血红蛋白的提取

自Ｒｉｅｔ等［１，２］报道以反胶团技术提取蛋白质以来，有关反胶团技术提取生物活性物质的报道较多，但研究对象多为分子量较小的蛋白质及酶．由表面活性剂丁二酸二（２－乙基己基）酯磺酸钠（ＡＯＴ）形成的反胶团体系水含量（Ｗ０，有机相中水的摩尔浓度与表面活性剂...

反胶团萃取分离螺旋藻藻蓝蛋白

研究了CTAB/正戊醇-正辛烷反胶团溶液萃取分离螺旋藻藻蓝蛋白的性能.考察了水相离子强度和种类,有机相中表面活性剂浓度和助溶剂浓度等因素对萃取行为的影响,并从反胶团的微观结构予以解释.结果表明:0.04 mol/L CTAB/正戊醇-正辛烷(体积比1∶4)的反胶团体系用于萃取pH7.0,包含0.1 mol/L KCl的螺旋藻细胞破碎液,藻蓝蛋白萃取率可达96.3%,分配系数达到26.0;采用pH5.0,包含2 mol/L KBr的反萃液反萃藻蓝蛋白,反萃取率可达90.6%.