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Correlation of matrix metalloproteinase suppressor genes RECK,VEGF,and CD105 with angiogenesis and biological behavior in esophageal squamous cell carcinoma 被引量:30
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作者 Sheng-Lei Li, Zhi-Hua Zhao, Dong-Ling Gao, Zong-Wen Liu, Qiu-Min Zhao, Jin-Xia Yu, Kui-Sheng Chen, Yun-Han Zhang, Department of Pathology, The First Affiliated Hospital Zhengzhou University He’nan Key Laboratory of Tumor Pathology, Zhengzhou 450052, He’nan Province, China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2007年第45期6076-6081,共6页
AIM: To explore the expression of reversion inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs (RECK), vascular endothelial growth factor (VEGF) and endoglin (CD105) protein and its correlation with occurrence, developm... AIM: To explore the expression of reversion inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs (RECK), vascular endothelial growth factor (VEGF) and endoglin (CD105) protein and its correlation with occurrence, development, invasion and metastasis in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). METHODS: Streptavidin-peroxidase (SP) immunohisto- chemistry was used to detect expression of RECK and VEGF in 62 cases of ESCC, 31 cases of adjacent atypical hyperplastic epithelium and 62 cases of normal esophageal epithelium. CD105 Mb was used to assess microvessel density (MVD). RESULTS: The expression of RECK was closely correlated with histological grade, infiltrative depth and lymphatic metastasis in ESCC (P < 0.05). The expression of RECK decreased during cancer development: normal esophageal epithelium (85.5%, 53/62), adjacent atypical hyperplastic epithelium (71.0%, 22/31), and carcinoma (59.7%, 37/62). There was a significant difference among the groups (P < 0.05). The expression of VEGF protein was closely correlated with infiltrative depth and lymphatic metastasis in ESCC (P < 0.05). The expression of VEGF protein increased during cancer development: normal esophageal epithelium (29.0%, 18/62), adjacent atypical hyperplastic epithelium (54.8%, 17/31), and carcinoma (67.7%, 42/62). There was a significant difference among the groups (P < 0.05). MVDCD105 increased in accordance with histological grade, butthere was no significant difference (grade Ⅰ, 36.92 ± 10.85; grade Ⅱ, 37.65 ± 9.50; and grade Ⅲ, 38.06 ± 12.19). The MVDCD105 was closely correlated with infiltration and lymphatic metastasis in ESCC (P < 0.05). The expression of RECK was inversely correlated with the expression of VEGF and CD105. CONCLUSION: RECK, VEGF and CD105 play important roles in the infiltration, metastasis and carcinogenesis in esophageal carcinoma. Angiogenesis in ESCC may be promoted by over-expression of CD105. 展开更多
关键词 半胱氨酸 CD105 抑制基因 生物学行为 食管癌
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微RNA-103a-3p靶向调节Kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白表达对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响
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作者 杨静 陈雨娜 +1 位作者 吕长坤 万雪莲 《新乡医学院学报》 CAS 2023年第1期18-23,共6页
目的探讨胃癌细胞中微RNA(miR)-103a-3p与Kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)表达的关系及其对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法将对数生长期人胃癌细胞系MKN-45细胞随机分为阴性对照(NC)组、miR-103a-3p组、RECK组、miR-103... 目的探讨胃癌细胞中微RNA(miR)-103a-3p与Kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)表达的关系及其对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法将对数生长期人胃癌细胞系MKN-45细胞随机分为阴性对照(NC)组、miR-103a-3p组、RECK组、miR-103a-3p+RECK组。NC组细胞共转染miR-103a-3p-NC(miR-NC)和pCDH空表达载体,miR-103a-3p组细胞共转染miR-103a-3p模拟物(miR-103a-3p mimics)和pCDH空表达载体,RECK组细胞共转染miR-NC和含RECK的pCDH表达载体(pCDH-RECK),miR-103a-3p+RECK组细胞共转染miR-103a-3p mimic和pCDH-RECK。采用划痕试验检测各组细胞的迁移能力,采用Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力,采用Western blot法检测各组细胞中RECK蛋白相对表达量。应用Starbase数据库通过生物信息分析预测miR-103a-3p与RECK的3′非翻译区(3′-UTR)是否存在结合位点,构建含有预测结合位点的野生型(Wt)、突变型(Mt)RECK 3′-UTR片段的荧光素酶报告基因载体Wt-RECK和Mt-RECK,使用脂质体2000将Wt-RECK或Mt-RECK载体与miR-NC或miR-103a-3p mimics共转染入MKN-45细胞,将转染后的细胞设为miR-NC+Wt-RECK组、miR-103a-3p+Wt-RECK组、miR-NC+Mt-RECK组、miR-103a-3p+Mt-RECK组,使用双荧光素酶检测试剂盒检测4组细胞的相对荧光素酶活性。结果4组细胞的划痕愈合率、侵袭细胞数比较差异有统计学意义(F=16.044、60.975,P<0.05);RECK组细胞划痕愈合率显著低于NC组,miR-103a-3p组细胞划痕愈合率显著高于RECK组,miR-103a-3p+RECK组细胞划痕愈合率显著低于miR-103a-3p组(P<0.05);miR-103a-3p组、miR-103a-3p+RECK组与NC组细胞划痕愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05);RECK组与miR-103a-3p+RECK组细胞划痕愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。RECK组侵袭细胞数显著少于NC组,miR-103a-3p组侵袭细胞数显著多于NC组(P<0.05);miR-103a-3p组、miR-103a-3p+RECK组侵袭细胞数显著多于RECK组(P<0.05);miR-103a-3p+RECK组侵袭细胞数显著少于miR-103a-3p组(P<0.05);NC组与miR-103a-3p+RECK组侵袭细胞数比较差异无统计学意义(P>0.05)。4组细胞中RECK蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=33.473,P<0.05);RECK组细胞中RECK蛋白相对表达量显著高于NC组,miR-103a-3p组、miR-103a-3p+RECK组细胞中RECK蛋白相对表达量显著低于RECK组(P<0.05);NC组与miR-103a-3p组、miR-103a-3p+RECK组细胞中RECK蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);miR-103a-3p组与miR-103a-3p+RECK组细胞中RECK蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。Starbase数据库预测显示,miR-103a-3p与RECK的3′UTR存在结合位点。miR-NC+Wt-RECK组、miR-NC+Mt-RECK组、miR-103a-3p+Mt-RECK组细胞的相对荧光素酶活性显著高于miR-103a-3p+Wt-RECK组(P<0.05);miR-NC+Wt-RECK组、miR-NC+Mt-RECK组、miR-103a-3p+Mt-RECK组细胞的相对荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-103a-3p可能通过靶向抑制RECK的表达而促进胃癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 胃癌 微RNA-103a-3p kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白 细胞迁移 细胞侵袭
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巨噬细胞移动抑制因子、伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白及循环肿瘤细胞在骨肉瘤中的表达及临床意义
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作者 郭一帆 李龙 程虎 《癌症进展》 2023年第2期194-196,共3页
目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)及外周血循环肿瘤细胞(CTC)在骨肉瘤中的表达及临床意义。方法 将132例骨肉瘤患者设为观察组,另选取同期的129例软骨瘤患者设为对照组。对比两组患... 目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)及外周血循环肿瘤细胞(CTC)在骨肉瘤中的表达及临床意义。方法 将132例骨肉瘤患者设为观察组,另选取同期的129例软骨瘤患者设为对照组。对比两组患者MIF、RECK、CTC阳性表达情况;对观察组患者随访2年,分析不同预后骨肉瘤患者MIF、RECK、CTC阳性表达情况;采用Cox多元回归分析对骨肉瘤患者预后影响因素进行分析。结果 观察组患者MIF、CTC阳性表达率均明显高于对照组,RECK阳性表达率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。随访2年,132例骨肉瘤患者中,死亡58例,生存74例。死亡患者MIF、CTC阳性表达率均明显高于生存患者,RECK阳性表达率明显低于生存患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。发生肺部转移、低中分化、MIF阳性、RECK阴性、CTC阳性均为骨肉瘤患者预后死亡的危险因素(P﹤0.05)。结论 MIF、CTC、RECK可用于骨肉瘤患者早期诊断及预后评价中,能作为评估骨肉瘤患者预后的标志物。 展开更多
关键词 巨噬细胞移动抑制因子 伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白 循环肿瘤细胞 骨肉瘤 预后
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分泌性中耳炎病灶组织中伴有Kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白的表达及其与细胞外基质重塑、骨破坏及细胞凋亡的相关性 被引量:1
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作者 姚宜 张安莹 韩蓓 《广西医学》 CAS 2019年第21期2738-2742,共5页
目的探讨分泌性中耳炎病灶组织中伴有Kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)的表达及其与细胞外基质重塑、骨破坏及细胞凋亡的相关性。方法选择58例接受开放式乳突改良根治手术或完壁式乳突根治手术的分泌性中耳炎患者,术后留取分... 目的探讨分泌性中耳炎病灶组织中伴有Kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)的表达及其与细胞外基质重塑、骨破坏及细胞凋亡的相关性。方法选择58例接受开放式乳突改良根治手术或完壁式乳突根治手术的分泌性中耳炎患者,术后留取分泌性中耳炎病灶组织;另取同期因外伤接受外耳道成形术的44例患者,术后留取正常外耳道上皮组织。检测两种组织中以下指标的mRNA表达量:RECK、细胞外基质重塑分子[基质金属蛋白酶2(MMP2)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad 2/3、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)1、TIMP2]、骨破坏分子[Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子(RANK)、RANK配体(RANKL)]及细胞凋亡基因[第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、Livin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)]。分析分泌性中耳炎局部组织中RECK mRNA表达量与细胞外基质重塑分子、骨破坏分子、细胞凋亡基因mRNA表达量的相关性。结果分泌性中耳炎病灶组织中RECK、TIMP1、TIMP2、RUNX2、OPG、Livin、Cyclin D1、PCNA的mRNA相对表达量均低于正常外耳道上皮组织,而MMP2、TGF-β1、Smad 2/3、RANK、RANKL、PTEN、Caspase-3的mRNA相对表达量均高于正常外耳道上皮组织(均P<0.05)。分泌性中耳炎病灶组织中RECK的相对mRNA表达量与TIMP1、TIMP2、RUNX2、OPG、Livin、Cyclin D1、PCNA的mRNA相对表达量呈正相关,与MMP2、TGF-β1、Smad 2/3、RANK、RANKL、PTEN、Caspase-3的mRNA相对表达量呈负相关(均P<0.05)。结论分泌性中耳炎病灶组织中RECK呈低表达,这能够促进细胞外基质重塑、骨质破坏及细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 分泌性中耳炎 伴有kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白 细胞外基质重塑 骨破坏 细胞凋亡
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食管鳞癌中RECK和MMP-9蛋白表达的相关性及临床病理意义 被引量:34
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作者 李晟磊 赵秋民 +5 位作者 刘宗文 赵志华 高冬玲 郑湘予 陈奎生 张云汉 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第10期1082-1086,共5页
目的:探讨RECK及基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系.方法:应用免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中RECK及MMP-9蛋白表达.采用x2检验进行统计学分析... 目的:探讨RECK及基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系.方法:应用免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中RECK及MMP-9蛋白表达.采用x2检验进行统计学分析.结果:食管鳞癌组织中RECK和MMP-9蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(x2=10.422,8.550,4.751;x2= 8.447,14.333,5.373;均P<0.05).在食管鳞癌癌变过程中RECK蛋白表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次增高,分别为59.7%,71.0%,85.5%,组间比较有明显差异(P<0.01);而MMP-9蛋白在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低,分别为80.6%,80.6%, 27.4%,组间比较有明显差异(P<0.01).结论:RECK和MMP-9在食管癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中起重要作用,RECK及MMP-9的联合检测可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一. 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶-9 RECK蛋白 食管鳞癌 免疫组化 浸润 转移
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金属蛋白酶抑制基因RECK在食管鳞癌中的表达及生物学意义 被引量:20
6
作者 高冬玲 李晟磊 +4 位作者 陈奎生 赵志华 赵秋民 刘宗文 张云汉 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第15期1634-1638,共5页
目的:研究RECK基因在食管鳞癌组织中的表达情况及其与食管鳞癌发生、发展的关系.方法:2006-02-26/2006-03-16河南省安阳市肿瘤医院食管癌手术切除标本62例,所有病例术前均无化疗、放疗及免疫治疗史.全部病理组织学证实均为鳞状细胞癌.... 目的:研究RECK基因在食管鳞癌组织中的表达情况及其与食管鳞癌发生、发展的关系.方法:2006-02-26/2006-03-16河南省安阳市肿瘤医院食管癌手术切除标本62例,所有病例术前均无化疗、放疗及免疫治疗史.全部病理组织学证实均为鳞状细胞癌.全部样本分别在癌灶、癌旁3cm以内及远端正常黏膜组织分别取材62、31和62例.采用免疫组化SP法和原位杂交方法进行RECK蛋白及mRNA的检测.结果:食管鳞癌组织中RECK蛋白及mRNA表达均与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关;在食管鳞癌癌变过程中RECK蛋白及mRNA表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次增高,组间比较有明显差异(RECK蛋白:χ2=10.331,P<0.01;RECKmRNA:χ2=19.186,P<0.01);RECK蛋白与mRNA的表达呈正相关关系(r=0.416,P<0.01).结论:RECK低表达与食管鳞癌的发生、发展有关,RECK可作为食管鳞癌早期诊断的辅助指标. 展开更多
关键词 RECK 食管鳞癌 免疫组化 原位杂交
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RECK和基质金属蛋白酶与恶性肿瘤预后的研究进展 被引量:7
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作者 胡亚威 施鑫 +1 位作者 吴苏稼 周光新 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第3期330-333,共4页
伴有kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motif,RECK)基因是新近发现的基质金属蛋白酶(matrix matalloproteinase,MMP)抑制剂,能在转录后水平抑制多种MMP的表达而抑制肿瘤的侵... 伴有kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motif,RECK)基因是新近发现的基质金属蛋白酶(matrix matalloproteinase,MMP)抑制剂,能在转录后水平抑制多种MMP的表达而抑制肿瘤的侵袭及转移。RECK与乳腺癌、胰腺癌、骨肉瘤等疾病患者的预后存在正相关关系。文中综述RECK和MMP与各系统肿瘤的关系。 展开更多
关键词 回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基序 基质金属蛋白酶 恶性肿瘤 预后
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地塞米松可增强支气管哮喘小鼠肺组织RECK的表达 被引量:4
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作者 黎振兴 何晟 +5 位作者 魏立平 林琳 熊汉真 李俊红 陈培芬 赖文岩 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期604-608,共5页
目的研究Kazal基序逆向诱导富含半胱氨酸蛋白(RECK)在支气管哮喘小鼠肺组织的表达及地塞米松处理后对其表达的影响。方法 BALB/c小鼠分为哮喘组、对照组、地塞米松组,每组10只。采用鸡卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏及雾化吸入的方法制作哮... 目的研究Kazal基序逆向诱导富含半胱氨酸蛋白(RECK)在支气管哮喘小鼠肺组织的表达及地塞米松处理后对其表达的影响。方法 BALB/c小鼠分为哮喘组、对照组、地塞米松组,每组10只。采用鸡卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏及雾化吸入的方法制作哮喘模型,进行支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)及淋巴细胞(Lym)分类计数;HE染色观察气道炎症细胞浸润及气道重塑情况,实时荧光定量PCR检测RECK mRNA的表达,免疫组织化学法检测RECK蛋白的表达及定位。结果与对照组和地塞米松组相比,哮喘组BALF中细胞总数、EOS明显增多;RECK mRNA在哮喘组表达较对照组、地塞米松组明显降低。免疫组织化学结果显示RECK主要表达于气道上皮细胞、上皮下炎症细胞。哮喘组表达最低,对照组表达最高,地塞米松组表达较哮喘组有所增高。结论 RECK在哮喘小鼠肺组织中表达明显降低,而地塞米松可上调RECK的表达。 展开更多
关键词 支气管哮喘 kazal基序逆向诱导富含半胱氨酸蛋白(RECK) 地塞米松
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RECK和MMP-9在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义 被引量:7
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作者 刘晶晶 顾振鹏 姚丽娟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期298-302,共5页
目的:检测子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)组织中RECK(reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs)mRNA和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA的表达情况,探讨两者在子宫内膜癌中的临床意... 目的:检测子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)组织中RECK(reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs)mRNA和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA的表达情况,探讨两者在子宫内膜癌中的临床意义。方法:选取2009年3月至2010年11月在滨州医学院附属医院妇科接受手术的子宫内膜癌患者组织标本42例,应用定量PCR法检测RECK mRNA及MMP-9 mRNA在子宫内膜癌中的表达情况,分析其相关性和临床意义。结果:在正常增生期子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌组织中RECK mRNA表达水平依次降低[(6.30±0.34)、(4.29±0.36)、(0.24±0.18),F=427.35,P<0.05],MMP-9 mRNA依次升高[(0.08±0.82)、(5.04±0.30)、(6.22±0.32),F=1117.52,P<0.05],RECK和MMP-9 mRNA的表达与子宫内膜癌临床分期、分化程度、淋巴转移关系密切(P<0.05),在子宫内膜癌中,MMP-9mRNA和RECK mRNA之间存在负相关(r=-0.478,P<0.01)。结论:定量PCR检测RECK mRNA和MMP-9 mRNA对子宫内膜癌早期诊断及预测癌前病变风险有一定参考价值。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 RECK 基质金属蛋白酶-9 实时定量PCR
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塞来昔布对胃癌MGC-803细胞RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响 被引量:4
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作者 钟鹰 李国庆 +4 位作者 黄靓 毛振江 王恩湘 钟茹 粟滔 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第5期368-373,共6页
目的:研究非甾体类抗炎药(NSAID)塞来昔布对胃癌细胞MGC-803的抑制作用和对RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响,以探讨塞来昔布的抗肿瘤机制.方法:培养胃癌MGC-803细胞,实验用不同浓度的塞来昔布(25、50、100μg/L)分别处理MGC-803细胞... 目的:研究非甾体类抗炎药(NSAID)塞来昔布对胃癌细胞MGC-803的抑制作用和对RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响,以探讨塞来昔布的抗肿瘤机制.方法:培养胃癌MGC-803细胞,实验用不同浓度的塞来昔布(25、50、100μg/L)分别处理MGC-803细胞不同时间(12、24 h、48 h),无血清培养基饥饿24 h达同步化后,MTT(噻唑蓝比色法)观察MGC-803细胞增殖;RT-PCR法检测细胞周期调控因子MMP-9、MMP-2、RECK mRNA的表达;Western blot法检测MMP-9、MMP-2、RECK mRNA蛋白的表达.结果:M T T法显示塞来昔布能抑制胃癌MGC-803细胞增殖,作用12 h时,随着塞来昔布处理浓度的增高,其抑制作用不明显,组间比较差异不显著(P>0.05),在作用24、48 h时呈浓度依赖性(25-100μg/L),在25、50、100μg/L作用浓度呈时间依赖性(24-48 h).塞来昔布在100μg/L浓度作用细胞48 h时抑制.RT-PCR法检测结果显示,在12 h的作用时间点,随着塞来昔布处理浓度的增高,RECK基因及MMP-2、MMP-9 mRNA变化不是很明显,组间比较无显著差异(P>0.05),在12 h后,塞来昔布能增加胃癌细胞RECK mRNA和蛋白表达,作用呈浓度(25-100μg/L)和时间依赖性(24-48h),MMP-2、MMP-9表达则下降.Western blot法检测结果显示,作用12 h时,随着塞来昔布处理浓度的增高,其RECK蛋白及MMP-2,MMP-9蛋白改变不明显,组间比较差异不显著(P>0.05),在12 h以后,塞来昔布能增加RECKmRNA和蛋白表达并减少MMP-2、MMP-9表达,且作用呈浓度依赖性和时间依赖.结论:塞来昔布可抑制人胃癌MGC-803细胞增殖与转移;其可能是通过上调RECK基因,进而下调MMP-2、MMP-9来抑制胃癌细胞MGC-803的增殖与转移. 展开更多
关键词 塞来昔布 胃癌 细胞增殖 基质金属蛋白酶 RECK基因
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miR-25靶向RECK促进宫颈癌HeLa细胞的增殖 被引量:2
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作者 邱刚 房保栓 +3 位作者 辛国宏 魏强 苑晓烨 吴大勇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期40-43,共4页
目的探讨微小RNA-25(miR-25)对宫颈癌He La细胞增殖活性的影响及其与逆向诱导的带Kazal基序的富含半胱氨酸蛋白(RECK)的靶向关系。方法构建pc DNATM6.2-GW-pre-miR-25、pmir GLO-野生型RECK(RECK-WT)和突变型RECK(RECK-MT)真核表达载体... 目的探讨微小RNA-25(miR-25)对宫颈癌He La细胞增殖活性的影响及其与逆向诱导的带Kazal基序的富含半胱氨酸蛋白(RECK)的靶向关系。方法构建pc DNATM6.2-GW-pre-miR-25、pmir GLO-野生型RECK(RECK-WT)和突变型RECK(RECK-MT)真核表达载体及miR-25抑制剂(anti-miR-25),采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测pre-miR-25和anti-miR-25在He La细胞中的转染效率,并采用MTT法分析miR-25对He La细胞增殖活性的影响,双萤光素酶报告基因、qRT-PCR和Western blot法检测miR-25与RECK靶向关系。结果测序结果显示pc DNATM6.2-GW-pre-miR-25、pmir GLO-RECK-WT和pmir GLO-RECK-MT重组载体构建成功,qRT-PCR提示pre-miR-25与anti-miR-25在He La细胞中具有良好的转染效率。MTT结果显示miR-25能够明显促进He La细胞的增殖。双萤光素酶报告基因检测显示共转染pre-miR-25与RECK-WT的He La细胞其萤光活性显著下降,同时qRT-PCR及Western blot也显示anti-miR-25在转录和转录后水平均能够显著增加He La细胞中RECK的表达。结论miR-25能够靶向RECK,促进宫颈癌He La细胞的增殖。 展开更多
关键词 宫颈癌 HE La细胞 miR-25 RECK 增殖
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转染RECK基因对肝癌细胞生物学行为的影响 被引量:7
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作者 张勇 郑启昌 +1 位作者 卢昕 秦涛 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2006年第2期150-153,共4页
目的探讨RECK基因对HepG2肝癌细胞生物学活性的影响。方法构建真核表达载体pcDNA3-RECK,采用脂质体介导将重组质粒导入体外培养的HepG2细胞,Western blot法检测转染前、后HepG2细胞中RECK蛋白的表达。明胶酶谱试验检测转染前、后MMP-9... 目的探讨RECK基因对HepG2肝癌细胞生物学活性的影响。方法构建真核表达载体pcDNA3-RECK,采用脂质体介导将重组质粒导入体外培养的HepG2细胞,Western blot法检测转染前、后HepG2细胞中RECK蛋白的表达。明胶酶谱试验检测转染前、后MMP-9的表达。观察稳定转染RECK基因对HepG2细胞生物学行为的影响。结果成功构建了RECK基因真核表达载体并建立了稳定表达的细胞株。转染后RECK基因稳定高表达,具有生物活性的MMP-9的表达显著降低。转染前、后HepG2细胞的增殖能力无明显改变,但其侵袭能力明显下降。结论外源性的RECK基因能通过脂质体有效转染肝癌细胞,抑制MMP-9的活性,降低肝癌细胞HepG2的体外侵袭能力。 展开更多
关键词 RECK基因 HEPG2细胞 转染
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姜黄素对鼻咽癌细胞RECK基因甲基化以及MMP-9表达与活性的影响 被引量:5
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作者 王柏琦 陈艳华 +1 位作者 蒋丽琴 程爱兰 《中南医学科学杂志》 CAS 2014年第2期116-119,138,共5页
目的探讨姜黄素对鼻咽癌细胞回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基元( RECK)基因甲基化以及基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用1、10、30μmol/L姜黄素处理后,采用Western blot和实时定量PCR分别检... 目的探讨姜黄素对鼻咽癌细胞回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基元( RECK)基因甲基化以及基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用1、10、30μmol/L姜黄素处理后,采用Western blot和实时定量PCR分别检测RECK、MMP-9蛋白和mRNA表达;高效液相色谱-电喷雾质谱检测RECK甲基化;MTT法检测CNE-1细胞的增殖。同时采用明胶酶谱实验观察姜黄素处理前后MMP-9酶活性变化。结果 CNE-1细胞未刺激时RECK表达水平较低,而经1--30μmol/L姜黄素处理后,能显著增强RECK蛋白和mRNA的表达。高效液相色谱-电喷雾质谱结果显示,30μmol/L姜黄素处理后,RECK启动子、全基因组以及细胞核内甲基化水平分别降低为(69.04±10.62)%、(61.13±7.08)%、2.80±1.32。同时,姜黄素能显著降低CNE-1细胞中MMP-9蛋白和mRNA表达以及MMP-9的酶活性。结论姜黄素可能通过能上调RECK基因表达,降低细胞内甲基化水平,从而抑制MMP-9的表达与活性而发挥对CNE-1细胞生长抑制作用。 展开更多
关键词 鼻咽癌 回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基元 甲基化 姜黄素
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姜黄素对鼻咽癌细胞系CNE-1RECK基因表达及甲基化的影响 被引量:3
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作者 王柏琦 陈艳华 +1 位作者 蒋丽琴 程爱兰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第6期729-733,共5页
目的 探讨姜黄素对鼻咽癌细胞RECK基因表达及甲基化的影响,并探讨可能的机制。方法 体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用1,10和30μmol/L 姜黄素处理后,用Western blot和实时定量PCR分别检测RECK基因以及DNA甲基化酶1(DNMT1)蛋白和mRNA... 目的 探讨姜黄素对鼻咽癌细胞RECK基因表达及甲基化的影响,并探讨可能的机制。方法 体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用1,10和30μmol/L 姜黄素处理后,用Western blot和实时定量PCR分别检测RECK基因以及DNA甲基化酶1(DNMT1)蛋白和mRNA表达;高效液相色谱-电喷雾质谱检测RECK甲基化,同时用MTT检测CNE-1细胞增殖,EMSA法检测核转录因子Sp1的DNA结合活性。结果 CNE-1细胞未刺激时RECK表达水平较低,而经1-30μmol/L 姜黄素处理后,能显著增强RECK蛋白和mRNA的表达(P〈0.05)。30μmol/L 姜黄素处理CNE-1细胞后, RECK启动子甲基化水平降低至31% (P〈0.05),全基因组甲基化水平降低39% (P〈0.05),细胞核的甲基化活性减少了71.6% (P〈0.05)。同时,姜黄素能显著降低CNE-1细胞中DNMT1蛋白和mRNA表达 (P〈0.05),也能减低CNE-1细胞的存活率 (P〈0.05)。此外, EMSA结果显示,姜黄素处理后,CNE-1细胞中Sp1的DNA活性显著降低。结论 姜黄素可能通过能上调RECK基因表达,降低细胞内甲基化水平,从而可能发挥对CNE-1细胞生长。 展开更多
关键词 鼻咽癌 伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK) 甲基化 姜黄素
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线粒体融合素基因-2对乳腺癌细胞RECK基因表达的影响 被引量:1
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作者 张勇 郑启昌 +2 位作者 王尧 胡文君 胡青钢 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期818-820,共3页
目的探讨线粒体融合素基因-2(mfn2)对乳腺癌细胞株MCF-7细胞中RECK表达的影响。方法利用脂质体lipofectamine2000将构建的重组真核表达质粒pEGFP-mfn2转染MCF-7细胞。RT-PCR检测细胞mfn2和RECK基因mRNA的转录水平;Weastern blot法检测m... 目的探讨线粒体融合素基因-2(mfn2)对乳腺癌细胞株MCF-7细胞中RECK表达的影响。方法利用脂质体lipofectamine2000将构建的重组真核表达质粒pEGFP-mfn2转染MCF-7细胞。RT-PCR检测细胞mfn2和RECK基因mRNA的转录水平;Weastern blot法检测mfn2及RECK蛋白的表达。结果转染pEGFP-mfn2质粒的MCF-7细胞可以稳定高表达mfn2,RECK基因在转染空质粒组和未转染组细胞中无表达,转染mfn2基因后RECK基因mRNA转录及蛋白的表达显著升高。结论mfn2基因可激活MCF-7细胞中RECK基因的表达。 展开更多
关键词 线粒体融合素基因-2 MCF-7 RECK
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生物信息学分析miR-221/26a、lncRNA GAS5和RECK mRNA在结直肠癌转移中的作用 被引量:3
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作者 孟涛 刘林 王海江 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第3期322-327,共6页
目的基于生物信息学筛选结直肠癌转移相关的mRNA、miRNA及lncRNA,分析其在结直肠癌转移中的作用。方法通过生物信息学方法筛选出与结直肠癌转移相关的mRNA、miRNA及lncRNA,采用荧光定量PCR(qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测筛选出... 目的基于生物信息学筛选结直肠癌转移相关的mRNA、miRNA及lncRNA,分析其在结直肠癌转移中的作用。方法通过生物信息学方法筛选出与结直肠癌转移相关的mRNA、miRNA及lncRNA,采用荧光定量PCR(qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测筛选出的miR-221/26a、lncRNA GAS5和回复引导半胱氨酸丰富蛋白Kazal基元(RECK)mRNA在结直肠癌组织中的表达;构建lncRNA GAS5过表达和沉默细胞株验证miRNA、lncRNA和RECK相互关系。结果软件预测结果显示miR-221/26a可以跟RECK mRNA结合,lncRNA GAS5可同时结合miR-221/26a;qPCR结果显示miR-221/26a在结直肠癌组织中的表达高于相应的癌旁组织(P<0.001、或0.05),而lncRNA GAS5在结直肠癌中表达水平降低(P<0.001);成功构建GAS5过表达和沉默细胞株后,结果显示过表达GAS5时miR-221/26a含量下降(P<0.011,或<0.05),RECK蛋白含量降低;而沉默GAS5会上调miR-221/26a含量(P<0.05),促进RECK蛋白表达。结论miR-221/26a与lncRNA GAS5在结肠癌肿瘤组织均存在异常表达,并可能影响RECK蛋白表达进而影响结直肠癌肿瘤的转移。 展开更多
关键词 计算生物学 转移性结直肠癌 lncRNA GAS5 miRNA221 miRNA26a 回复引导半胱氨酸丰富蛋白kazal基元
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RECK,MMP-9及TGF-β1在胃癌组织中的表达及其相互关系 被引量:6
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作者 宋国庆 王强 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第15期1731-1737,共7页
目的:研究RECK,MMP-9和TGF-β1在胃癌及正常胃组织中的表达,探讨其在胃癌的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法:选择临床及病理资料齐全的存档胃腺癌蜡块标本54例,另取正常胃黏膜标本15例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-90... 目的:研究RECK,MMP-9和TGF-β1在胃癌及正常胃组织中的表达,探讨其在胃癌的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法:选择临床及病理资料齐全的存档胃腺癌蜡块标本54例,另取正常胃黏膜标本15例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-9000)免疫组化方法检测RECK,MMP-9及TGF-β1在胃癌及正常胃组织中的表达.结果:RECK在胃癌组织中低表达(51.9%),并随肿瘤浸润深度的加深、淋巴转移的产生、远隔转移的发生、临床分期的提高、肿瘤病理分化程度的降低而降低(P<0.05).MMP-9在胃癌组织中高表达(75.9%),并随肿瘤浸润深度的加深、淋巴转移的产生、临床分期的提高、肿瘤病理分化程度的降低而增高(P<0.05).TGF-β1在胃癌组织中高表达(77.8%),并随淋巴转移的产生、临床分期的提高、肿瘤病理分化程度的降低而增高(P<0.05).胃癌组织中RECK与MMP-9、TGF-β1的表达呈负相关(r=-0.618,P<0.001;r=-0.620,P<0.001),MMP-9与TGF-β1的表达呈正相关(r=0.716,P<0.001).结论:胃癌组织中RECK低表达,MMP-9,TGF-β1高表达.RECK,MMP-9及TGF-β1可以作为评估胃癌发生浸润转移的重要指标. 展开更多
关键词 胃癌 RECKS蛋白 基质金属蛋白酶-9 转化生长因子-Β1 免疫组织化学
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RECK及MMP-2在骨肉瘤组织中的表达及意义 被引量:3
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作者 吴翮 杨传民 +3 位作者 董蒨 张虹 姜忠 段于河 《齐鲁医学杂志》 2010年第3期205-207,共3页
目的检测RECK蛋白及明胶类基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在骨肉瘤组织表达,探讨其在骨肉瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用。方法选择临床及病理资料完整的存档骨肉瘤标本30例,另取骨软骨瘤标本10例作为对照。采用PV-6000免疫组化方法检测R... 目的检测RECK蛋白及明胶类基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在骨肉瘤组织表达,探讨其在骨肉瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用。方法选择临床及病理资料完整的存档骨肉瘤标本30例,另取骨软骨瘤标本10例作为对照。采用PV-6000免疫组化方法检测RECK及MMP-2蛋白的表达。结果 RECK在骨肉瘤组织中低表达(30.0%),在骨软骨瘤组织中高表达(80.0%),两者相比差异有显著性(χ2=5.76,P<0.05);MMP-2在骨肉瘤组织中高表达(76.7%),在骨软骨瘤组织中低表达(10.0%),两者相比差异有显著性(χ2=11.25,P<0.05);骨肉瘤组织中RECK与MMP-2的表达呈负相关(r=-0.84,P<0.05)。结论骨肉瘤组织中RECK低表达,而MMP-2高表达。RECK及MMP-2可能作为预测骨肉瘤浸润转移的重要指标。 展开更多
关键词 骨肉瘤 RECK 明胶酶A 免疫组织化学
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微小核糖核酸-21对乳腺癌MCF-7细胞反转录富含半胱氨酸蛋白表达的调节研究 被引量:2
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作者 郑志伟 赵树林 +3 位作者 杨钰贤 朱辉德 朱志伟 陈蕾 《转化医学杂志》 2016年第4期198-201,234,共5页
目的探讨乳腺癌MCF-7细胞中微小核糖核酸-21(microRNA-21,miR-21)对反转录富含半胱氨酸蛋白(reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs,RECK)表达的调控作用。方法将miR-21模拟物、miR-21抑制物及模拟物阴性对照、... 目的探讨乳腺癌MCF-7细胞中微小核糖核酸-21(microRNA-21,miR-21)对反转录富含半胱氨酸蛋白(reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs,RECK)表达的调控作用。方法将miR-21模拟物、miR-21抑制物及模拟物阴性对照、抑制物阴性对照各组瞬时转染到MCF-7细胞中,48 h后通过荧光定量聚合酶链反应检测miR-21在细胞的表达情况,蛋白质印迹法检测转染后RECK表达水平变化。结果细胞转染48 h后,miR-21抑制物组和miR-21模拟物组miR-21的表达分别与转染空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.001),转染miR-21抑制物组miR-21的表达明显下降,转染miR-21模拟物组miR-21的表达明显上调;细胞转染miR-21各组后RECK表达差异有统计学意义(P<0.01),miR-21抑制物组相对其阴性对照组,RECK表达明显上升(P<0.001);miR-21模拟物组相对其阴性对照组,RECK表达明显下降(P<0.001)。结论miR-21可以抑制乳腺癌MCF-7细胞RECK表达,可能成为判断乳腺癌患者预后的评价指标及肿瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 微小核糖核酸-21 反转录富含半胱氨酸蛋白
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RECK、MMP-9在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其意义 被引量:1
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作者 郝斌 张波 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第26期21-22,共2页
目的探讨RECK、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在膀胱移行细胞癌(BTCC)发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测42份BTCC癌组织及13份正常膀胱黏膜组织中RECK及MMP-9的表达情况。结果与正常膀胱黏膜组织比较,BTCC组织中RECK表达明显降低,... 目的探讨RECK、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在膀胱移行细胞癌(BTCC)发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测42份BTCC癌组织及13份正常膀胱黏膜组织中RECK及MMP-9的表达情况。结果与正常膀胱黏膜组织比较,BTCC组织中RECK表达明显降低,与肿瘤病理分期密切相关(P<0.05);MMP-9表达明显升高,与肿瘤组织学分级、病理分期密切相关(P<0.05);二者表达呈负相关(P<0.05)。结论RECK对BTCC的发生、浸润和转移有明显抑制作用,其机制可能与抑制MMP-9表达有关;联合检测RECK、MMP-9可预测BTCC发生、发展和预后。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 移行细胞癌 RECK MMP-9 免疫组织化学
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