Box-Behnken Design-响应面法优化碱水解人参茎叶三醇皂苷制备人参皂苷Rg_(2)工艺研究

目的:利用Box-Behnken Design-响应面法优选制备人参皂苷Rg_(2)的最佳工艺参数。方法:以碱解反应的碱度、温度、时间作为考察因素,人参茎叶三醇皂苷中人参皂苷Rg_(2)含量作为评价指标,运用Design-Expert 8.0.5b软件对工艺参数进行优化并获得最佳工艺参数。结果:经优化得到碱水解人参茎叶三醇皂苷制备人参皂苷Rg_(2)的最佳工艺参数:反应碱度7.4%、反应温度187℃、反应时间5 h。验证试验表明,在此工艺参数下可将人参皂苷Rg_(2)含量提高至9.84%,且工艺稳定。结论:经过优化的工艺可有效提高人参茎叶三醇皂苷中人参皂苷Rg_(2)含量。

人参皂苷生物合成相关基因PgRg_(2)BBE克隆及生物信息学分析

克隆与人参皂苷Rg_(2)合成相关的重要酶基因PgRg_(2)BBE全长cDNA序列,并利用在线软件对该基因编码的蛋白质进行理化性质、结构域、亚细胞定位和系统进化等分析。结果表明:PgRg_(2)BBE基因cDNA序列长为1638 bp,编码545个氨基酸。PgRg_(2)BBE蛋白分子量为60967.10 u,等电点为8.88,不稳定性指数为34.04,预测该蛋白为一种稳定的亲水性跨膜蛋白,主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。PgRg_(2)BBE蛋白含有FAD_binding_4和BBE功能结构域,定位于叶绿体中,含有24个氨基酸序列信号肽。系统发育树分析发现,其与智利茄的亲缘关系最近,氨基酸序列多重比对发现,RgRg_(2)BBE中含有4个保守基序,进一步与拟南芥AtBBE家族蛋白进行同源序列比对,发现它们同时具有4个保守基序(RKYGL、MGED、FWAIRGG、FPEI)。

朝鲜红参中人参皂苷类成分含量测定及指纹图谱研究

目的：建立可同时测定朝鲜红参中人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Re、Rg15种成分含量和指纹图谱的HPLC方法。方法：采用DiscoveryC18（4.6×250mm,5μm）柱,流动相为水（A）-乙腈（B）梯度洗脱;流速1.0ml min-1,柱温为25℃,检测波长为203nm,并用计算机辅助相似性评价系统对指纹图谱进行了相似度分析。结果：朝鲜红参中人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Re、Rg1的线性范围分别为1.077~5.385μg,1.046~5.230μg,0.0953~0.4765μg,1.018~5.090μg,0.973~4.865μg,相关系数分别为0.9999,0.9999,0.9995,0.9995,0.9996。人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Re、Rg1平均回收率分别为96.55%、101.4%、99.08%、99.92%、96.00%;RSD分别为1.6%、1.2%、1.5%、1.2%、1.3%。不同规格的朝鲜红参之间及朝鲜红参与国产红参都具有较好的相关性。结论：该方法重复性好,可以用来同时测定朝鲜红参中人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Re、Rg1五种成分的含量,14批不同规格的朝鲜红参中人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Re和Rg15种成分含量存在差异,但总体而言,朝鲜红参与国产红参在人参皂苷含量和指纹图谱上无明显差异。

西洋参果皂苷成分的研究

从加拿大产西洋参果中分得一种达玛烷型新三萜皂苷 ,利用理化性质和波谱数据鉴定为 3β,12 β,2 0 (S) ,2 4ξ,2 5 -五羟基达玛 - 3- O- β- D-吡喃葡萄糖基 - (1→ 2 ) - β- D-吡喃葡萄糖苷 ,命名为西洋参皂苷 - F1 ( )。同时鉴定了 4种已知达玛烷型三萜皂苷 ,即人参皂苷 - Rh1 ( )、人参皂苷 - Rh2 ( )、人参皂苷 - Rg1 ( )及人参皂苷 - Rg2 ( ) ,均为首次从该植物果实中分离得到。

不同干燥方式对人参果浆中稀有皂苷生成的影响

目的 研究采不同干燥方法对人参Panax ginseng果浆中原型皂苷降解和稀有皂苷生成的影响。方法 采用HPLC建立了同步检测11种人参皂苷含量的分析方法,对采用冷冻、电热、汽热3种方法干燥的人参果浆样品中原型皂苷和稀有皂苷的含量进行了测定。结果 与未干燥处理的人参果浆进行对比,冷冻干燥样品中11种人参皂苷含量变化较小;人参果浆电热干燥和汽热干燥样品中原型皂苷发生降解,稀有皂苷生成出现不同程度增加。结论 人参果浆经电热干燥和汽热干燥后原型人参皂苷Re、Rg_(1)、Rb_(1)、Rc、Rb_(2)、Rb_(3)发生降解,稀有人参皂苷F_(1)、Rh_(1)、Rg_(3)、Rk_(1)、Rh_(2)含量增加。