芜湖地区初筛RhD阴性献血人群RHD基因分型特征

目的:了解芜湖地区献血者初筛RhD^(-)汉族人群的RHD基因分型的分子机制及分布特征。方法:收集2021年8月-2022年8月芜湖市中心血站无偿献血人群初筛RhD^(-)样本共210例,对样本的RHD基因第1、10号外显子进行PCR扩增,确定样本是否存在RHD基因。对含有D基因的82例样本RHD基因1-10号外显子进行PCR扩增及合子型分析,对55例含全部RHD外显子样本进行Sanger测序以确定基因型。结果:在210例RhD^(-)标本中,128例(60.38%)为RHD基因缺失;27例存在部分RHD外显子,包括2例RHD*DVI.3/RHD*01N.01,24例RHD*01N.04/RHD*01N.01和1例RHD-CE(2-10)/RHD*01N.01;55例含有全部RHD外显子,包括4例RHD*01/RHD*01N.01,6例RHD*15/RHD*01N.01,1例RHD*01 W.72/RHD*01N.01,1例RHD*15/RHD*01EL.01,39例RHD*01EL.01/RHD*01N.01,余下4例样本根据合子型分析确定不存在RHD基因缺失、测序显示存在1227G>A突变。结论:芜湖地区献血人群RhD^(-)D基因的分子机制存在多态性,其中RHD*01EL.01和RHD*15为本地区主要D变异型,本研究结果为本地区RhD血型鉴定和临床输血提供理论基础。

The Popularization and Application of Cold Storage Red Blood Cells or Whole Blood at -80 ℃ of the Rh(D) Negative Patients in Surgical Operation

Summary: The efficiency of cold storage red blood cells (CSRBC) or whole blood at -80 ℃ used in 27 Rh(D) negative patients during surgical operation was reported. The Rh(D) negative patients received the transfusion of CSRBC or whole blood stored at -80 ℃ for 180 to 360 days. The changes in the indexes, such as blood TB, DB, K +, Na +, BUN, Cr, urine protein (URPO), UOB, Hb, HCT, serum total protein, relative to hemolytic reaction and blood volume before and after transfusion were observed. The results showed that after transfusion of CSRBC or whole blood 27 cases were negative for urine protein and UOB, and the levels of BUN and Cr were normal (P>0.05). Blood TB, DB, Hb, and HCT were increased, while pH, blood K + and blood Na + was normal with the difference being not significant before and after operation (P>0.05). Plasma protein was decreased, but there was no significant difference before and after operation (P>0.05). It was suggested that CSRBC or whole blood at -80 ℃ could be safely infused to the Rh(D) negative patients without side effects during the surgical operation.

RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL型红细胞短期内引起高效价抗-D的同种免疫研究

目的通过对1例RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL红细胞后诱发同种抗-D免疫的研究分析,探讨RhD阴性患者输注DEL型策略。方法采用血清学方法进行ABO及Rh系统血型抗原检测、不规则抗体筛查及鉴定,高分辨熔解曲线和基因测序分析检测DEL型的RHD基因分型。结果受血者为O型,RhD阴性。供血者为RHD 1227G>A突变的“亚洲型”DEL,Rh表型为Ccee。受血者输血后抗体筛查阳性,并鉴定为抗D和抗C,抗D效价512,抗C效价128。结论RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL红细胞会引起抗-D同种免疫。因此对于RhD阴性献血者应加强DEL型的筛查,必要时可以增加RHD基因检测以保障输血安全。

2493例RhD阴性献血者的基因分析及4个新RHD等位基因的鉴定

目的研究中国汉族人群RHD等位基因多态性和分子机制。方法2008年1月-2011年9月，对2493例初筛为RH阴性的无偿献血者，采用单克隆抗体鉴定RhD／C／c／E／＇e抗原，D抗原鉴定同时采用间接抗球蛋白法；采用PCR·SSP方法测出d／d、D／d、DEL／d型，再用商用RHD基因检测试剂盒鉴定D／d型的样本中的弱D—15、RHD．CE（2-9）-D、DVI-Ⅲ和Dva型；对于排除前述基因型的样本，对其RHD基因10个外显子序列进行测序比对分析。结果2493例中，有1686名为R／／D基因完全缺失（0／O），占67．6％，其它808名检出有RHD基因：其中20．7％（516／2493）为DEL型（RHD1227G〉A／a），RHD—CE（2-9）-D／d为最常见的融合基因型，占6．5％（163／2493），其次为DⅥ·nl（RHD—CE（3-6）-D／d），占1．2％（31／2493），弱D15型为常见的弱D型，共检出62例（2．5％）；发现的4个新等位基因，分别是RHO78delC／d、RHD520G〉A＋1080dellO／dRHD、438G〉C／d和RHD101A〉G／d。结论汉族人群RHD等位基因多态性与高加索人群存在差异，有丰富的类型和不同分子机制。

RHD1227A型弱D的D抗原表位分析

目的分析携带RHD1227A等位基因的Rh血型弱D型个体的红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,并检测RHD杂合型。对确认的弱D型,使用12种抗-D抗原不同表位的单克隆抗体,分析红细胞D抗原表位。结果血清学筛选和PCR-SSP检测鉴定出3例携带RHD1227A等位基因的弱D型样本,Rh小因子均为C+c+E-e+,RHD合子型鉴定均为RHD+/RHD-杂合型,提示3例个体基因型为CDe/cde。3例个体红细胞D抗原表位分析显示均具有基本完整D抗原表位,与Rh(D)阳性对照样本相同。结论发现3例RHD1227A型弱D型;不管RHD1227A等位基因表达DEL型或弱D型,其D抗原表位近似,均表达基本完整D抗原,提示该等位基因不同量的表达可能与其它调节因素有关。

一例RHD960A/1227A基因型的D变异型患者的血型鉴定及其家系分析

目的准确鉴定携带D变异型合并亚洲型DEL个体的血型。方法采用常规血清学方法对1名临床常规血型检测为RhD阴性、其父母皆为RhD阳性的先证者及家系成员做RhD血型鉴定,使用D-Screen试剂盒检测该例D变异型标本的RhD抗原表位;提取基因组DNA,采用MLPA基因分型方法和Sanger测序法对该例D变异型标本做RHD基因型分型。结果先证者血清学鉴定:D变异型,基因分型:RHD*960A/RHD*1227A(RHD*960A/01EL.01);其父亲携带RHD*1227A等位基因、其母亲携带RHD*960A等位基因。结论携带RHD*1227A等位基因(亚洲型DEL)个体不会在免疫刺激下产生同种抗-D,表现为D变异型;基因型鉴定及分析可为这种患者输血安全及这种孕妇产前检测提供准确的依据。

卵巢肿瘤患者ABO和Rh(D)血型分布情况分析

目的卵巢肿瘤手术患者的ABO和Rh(D)血型构成。方法回顾性分析2002年1月至2013年7月3 134例接受手术治疗的卵巢肿瘤患者(良性344例、恶性2 790例)的ABO和Rh(D)血型构成及良、恶性卵巢肿瘤患者术中输血情况分析。结果良、恶性卵巢肿瘤患者的ABO血型表型构成比的差异有统计学意义(P<0.05),恶性卵巢肿瘤患者O型血的构成比低于良性患者(25.4%vs.31.1%,P<0.05);良恶性卵巢肿瘤Rh(D)血型构成比的差异无统计学意义(P>0.05)。恶性卵巢肿瘤患者术中用血率(67.5%vs.8.1%,P<0.0001)、用血量[8(8,12)U vs.4(2,6)U,P<0.0001]均高于良性肿瘤患者。结论良、恶性卵巢肿瘤的发生与ABO血型可能存在一定的关系,非O型血可能会增加罹患卵巢癌的风险;恶性卵巢肿瘤患者,在手术中接受输血的概率更高,输血量更多。

Rh阴性孕妇产前免疫血液学检查及抗D免疫球蛋白应用对母婴结局影响

目的:探讨Rh阴性孕妇产前免疫血液学检查结果及应用抗-D免疫球蛋白对母婴结局的影响。方法:选取2016年5月-2020年6月本院Rh阴性孕妇临床资料98例进行回顾性分析,均在产前行免疫血液学检查,根据有无应用抗-D免疫球蛋白分为应用组52例与未应用组46例,对比产后出血量、新生儿Apgar评分、妊娠结局(新生儿感染、新生儿贫血、新生儿高胆红素血症、早产、死胎、新生儿RhD阴性血型)及新生儿溶血病(HDN)发生率。结果:98例Rh阴性孕妇中检出D阴性93例(94.9%)、变异性D阴性5例(5.1%);D阴性中ccee表现型50例(53.8%)、Ccee表现型33例(35.5%)、CCee表现型6例(6.5%)、ccEe表现型3例(3.2%)、CcEe表现型1例(1.1%)。93例Rh(D)阴性孕妇中检出抗-D抗体阳性18例(19.4%),检出率应用组(2例,3.9%)低于未应用组(16例,34.8%)(χ2=15.580,P<0.05)。应用组产后出血量小于未应用组,新生儿Apgar评分高于未应用组,新生儿贫血、新生儿高胆红素血症及早产发生率、HDN总发生率低于未应用组(均P<0.05)。两组新生儿感染、死胎及新生儿RhD阴性血型发生率无差异(P>0.05)。结论:Rh阴性孕妇的Rh抗原以ccee表现型多见,其次为Ccee表现型,可通过注射抗-D免疫球蛋白避免同种免疫产生抗-D抗体,改善母婴结局。

Rh血型变异体弱D15型的鉴定

目的分析2例血清学表现不同的Rh D抗原变异体基因突变情况,为D抗原突变者的临床安全输血提供依据。方法选取Ig M抗-D初筛为阴性的患者,经3种不同来源抗血清鉴定的Rh D变异体,采用分子生物学方法分析其基因突变位点。结果 2例患者的血清学表现不一致,但是基因突变位点分析结果均显示为弱D15型。结论本文报道的2例Rh D抗原变异体均为汉族人群中最常见的弱D15型,提示应对D变异体进行基因突变研究,进而采用安全的输血策略。

孕期RH血型不合孕妇应用抗D免疫球蛋白治疗20例临床研究

目的观察20例RH血型不合的孕妇孕期应用抗D免疫球蛋白治疗的疗效以及不良反应。方法选择2014年2月至2015年10月我院就诊的RH血型不合的孕妇20例,应用抗D免疫球蛋白治疗作为观察组,另18例RH血型不合的孕妇拒绝采用预防措施作为对照组,分别对比两组孕妇及胎儿的死亡率、新生儿溶血的发生率,并对结果进行分析。结果观察组孕妇无死亡病例发生、有1例胎儿出现不明原因死产计入统计;对照组孕妇死亡3例、胎儿死亡5例;(P<0.05);观察组胎儿或新生儿中发生贫血2例、水肿3例、核黄疸1例(死亡1例);对照组胎儿或新生儿中发生贫血5例(死亡1例)、水肿6例(死亡2例)、核黄疸3例(死亡2例),两组比较具有显著差异(P<0.05)。结论通过应用抗D免疫球蛋白治疗针对RH血型不合孕妇来说,具有预防死产及孕妇死亡的价值;并且可以有力的减轻及减少新生儿溶血病的发生,可以作为预防措施进行推广。

急性等容稀释联合血液回收自体输血在RH(D)阴性稀有血型患者外科手术的应用

目的探讨急性等容稀释(ANH)联合术中血液回收自体输血在RH(D)阴性稀有血型患者行外科手术的安全性和可行性。方法选择行外科手术RH(D)阴性稀有血型患者20例,全身麻醉后行急性等容稀释联合术中血液回收。观察患者术前(T0)、血液稀释后(T1)、输自体血前(T2)、输回收血后(T3)、输术前采集的全血后(T4)5个时点的HBG、HCT、PLT、APTT、PT和FIB的变化并进行比较。记录ANH时采血量、回收洗涤红细胞量。结果全部手术患者ANH时采血量平均为(590.00±137.27)ml,术中回收洗涤红细胞量平均(562.50±179.09)ml,输异体血0ml;不同时点的HBG、HCT、PLT、APTT、PT、FIB比较差异有统计学意义(P<0.01)。APTT、PT在T1与T0比较差异无统计学意义(P>0.05),而T2与T0、T3与T2、T4与T3之间比较差异有统计学意义(P<0.01),但仍在正常对照值范围内。HBG、HCT、PLT和FIB在T1与T0、T2与T0、T3与T2、T4与T3之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论采用急性等容稀释联合血液回收自体输血可节约血液资源,避免输异体血,解决RH(D)阴性血源稀缺难题,可安全用于RH(D)阴性稀有血型外科手术患者。

RhD DBT-1基因及临床分析1例

目的分析1例D变异体DBT-1表型引起输血后产生抗D抗体的原因及分子机制。方法用常规血清学方法确认样本Rh D、C、c、E、e血型及抗体鉴定;采用序列特异性引物-聚合酶链反应（PCR-SSP）方法扩增RHD基因特异性的外显子1—10;结果该例Rh D血清学检测为阳性,Rh分型为CCee,部分D表型为DBT-1类型,输入Rh DE阳性血产生抗-D及抗-E,效价分别为128和4;PCR-SSP方法扩增RHD基因特异性的外显子1—10,外显子5—7缺失,其余RHD基因外显子序列与标准序列相同。结论证实DBT-1部分D表型个体可被正常D抗原致同种免疫反应,在输血及新生儿溶血病方面有重要意义,应提高检测水平,若需要可选择Rh D阴性红细胞制品配合性输注。

RhD阴性患者输注RhD阳性同型红细胞血液抗-D检测及其效价测定

目的了解患者Rh D抗原阴性患者在抢救时,输注与患者血型相同的Rh D阳性的血液。患者抗-D产生情况及效价水平。方法 Rh D抗原阴性患者输注Rh D抗原阳性血液后,5、10、20 d连续追踪3次,。使用微柱凝胶抗人球蛋白试剂卡检测患者红细胞不规则抗体及效价[1]。结果 15例Rh D抗原阴性的患者输注同型Rh D抗原阳性红细胞后,共有4例患者血清红细胞不规则抗体筛查阳性[2]。1例女性患者5 d血清红细胞不规则抗体筛查阳性,10 d后又有2例女性患者和1例男性患者血清红细胞不规则抗体筛查阳性。5 d后阳性标本抗体效价为4,20 d后抗体效价结果为16,3例10 d抗体效价为4,20 d后效价为16。结论 Rh D阴性患者输注同型Rh D阳性血液后,机体被所缺失的抗原免疫刺激,产生免疫性抗-D。抗体产生的几率与抗体效价的增高和输注次数及抗原量的多少呈正相关系数上升[3]。

治未病思想在Rh(D)阴性血型孕妇自体输血中的应用价值

目的探索治未病思想在Rh(D)阴性血型孕妇自体输血中的应用价值。方法选取32例Rh(D)阴性血型孕妇在临产前1～3周实施自体输血的血液采集,血液置于2～6℃贮血冰箱内保存备用。其中14例Rh(D)阴性血型孕妇产后回输自体血液。比较采血前、后及回输前、后血液指标水平、妊娠结局情况。结果 32例Rh(D)阴性血型孕妇采血前、后的RBC、Hb、PLT、Hct、NST比较,差异均无统计学意义(P>0.05);14例孕妇血液回输前、后的RBC、Hb、PLT、Hct比较,差异均无统计学意义(P>0.05);阴道分娩20例,剖宫产12例;新生儿Apgar评分均为8～10分。结论"未病先防""既病防变"的治未病思想应用于临床Rh(D)阴性血型孕妇妊娠晚期贮存式自体输血中,不仅可避免输血相关疾病风险,又可缓解稀缺的血型资源,保证分娩安全,值得临床推广应用。

预存式自体输血在Rh(D)阴性患者心外手术中的应用

目的:观察预存式自体输血在Rh(D)阴性血型患者心外手术中的临床效果及其临床应用。方法:对13例Rh(D)阴性行心外手术患者进行预存式自体输血,准备自体储血之日起嘱患者每8小时口服多糖铁150mg,同时加强饮食营养,采血同时按采血量的3倍输注晶、胶体液体(晶、胶体液体量比例为2∶1),术前分次采集自体血400～800ml,检查患者采血前后及输血前后各项血液指标。结果:所有手术均顺利结束,患者术中仅有2例分别输异体血浆580ml、300ml,其余病例均未输注异体血。采血前后及输血前后红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、血小板计数(PLT)、凝血酶原时间(PT)值,经统计分析差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:预存式自体输血在提高安全的同时,可有效解决心外手术Rh(D)阴性患者血源不足的问题,有明显临床推广价值。

母儿Rh血型不合新生儿围产期抗-D抗体效价、血红蛋白、胆红素检测及临床意义

目的检测母儿Rh血型不合新生儿围产期抗-D抗体效价、血红蛋白(Hb)、胆红素水平,并探讨其临床意义。方法回顾性分析2015年6月至2020年6月宝鸡市中心医院收治的65例母儿Rh血型不合新生儿的诊疗资料。根据新生儿出生后Rh血型不合溶血病的发生情况,将其分为溶血病组37例和未发生溶血病组28例。检测并比较两组新生儿围产期抗-D抗体效价、Hb及胆红素水平,并采用多因素Logistic回归模型分析影响新生儿发生溶血病的危险因素。结果溶血病组新生儿抗-D抗体效价、直接胆红素、间接胆红素分别为1∶(788.55±80.22)、(40.24±4.03)μmol/L、(126.90±13.54)μmol/L,明显高于未发生溶血病组的1∶(13.62±1.23)、(12.13±1.32)μmol/L、(63.93±6.56)μmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);溶血病组新生儿Hb水平为(122.44±12.06)g/L,明显低于未发生溶血病组的(162.05±16.42)g/L,差异有统计学意义(P<0.05);单因素分析结果显示,出生时间、体质量指数(BMI)、抗-D抗体效价、Hb、直接胆红素及间接胆红素与新生儿发生溶血病密切相关(P<0.05);多因素Logistic分析结果显示,抗-D抗体效价、Hb、直接胆红素及间接胆红素是影响新生儿发生溶血病的独立危险因素(P<0.05)。结论抗-D抗体效价、Hb、直接胆红素及间接胆红素是影响母儿Rh血型不合新生儿发生溶血病的独立危险因素,临床检测新生儿围产期抗-D抗体效价、Hb、胆红素水平对诊断、评估其溶血病的发生有重要意义。

储存式自体输血在Rh(D)阴性血型孕妇中的应用与评价

目的：评价储存式自体输血在Rh(D)阴性血型孕妇中的应用价值。方法：存在产后出血风险的Rh(D)阴性血型孕妇18例在知情同意下接受储存式自体输血，并检测采血前后各项血液指标。结果：采血过程中孕妇与胎儿的生命体征均未见任何异常状况，采血前后孕妇的RBC、Hb、Hct、PTL等指标以及胎心音改变差异无统计学意义(P＞0.05)。新生儿结局良好，Apgar评分均8～10分。结论：Rh(D)阴性血型血源紧张，而储存式自体输血则为该类产妇产后大出血得到及时的输血机会提供了重要的途径，且安全、有效。

2008～2012年余姚市孕产妇RhD血型调查与干预

目的调查余姚市孕产妇血型分布情况，为制定RhD阴性孕产妇血液管理干预模式提供参考。方法采用微板快速检测法对2008—2012年余姚市55226名孕产妇RhD抗原初筛，初筛阴性者采用间接抗球蛋白法确认。结果经初筛和确认试验，余姚市孕产妇RhD阴性率为2．91‰（161／55226），在161例RhD阴性中，O型占40．99％（66／161）、A型占22．98％（37／161）、B型占27．95％（45／161）、AB型占8．07（13／161），本地孕产妇占39．13（63／161）、流动人口孕产妇占60．87％（98／161）。自体血备血率：本地Rh阴性孕产妇与流动孕产妇分别为96．1％傩98．5％；自体血输率：本地孕产妇与流动孕产妇分别为34．4％船82．6％（P〈0．01）。结论开展孕产妇RhD血型产前检查有助于有针对性进行宣传教育和心理干预，对母婴安全具有有积极意义。

贮存式自体输血在Rh(D)阴性孕妇分娩中的效果评价

目的评价贮存式自体输血在Rh(D)阴性孕妇分娩中的效果。方法对垫江县人民医院2010年1月至2012年6月Rh(D)阴性孕妇符合自身贮血条件者,采用贮存式自体输血。以最后一次采血后3d所测的血液指标作为统计数据,同时记录分娩或手术中出血量及各血液指标的变化,并记录出生的新生儿的体质量,进行Ap-gar评分。结果 38例孕妇采血后,血液指标均较采血前下降,但差异无统计学意义(P>0.05);回输后,孕妇网织红细胞(Ret)为(37.23±8.52)×109/L,较回输前明显升高(P<0.05),其余血液指标变化差异无统计学意义(P>0.05);阴道分娩16例,剖宫产22例,产后母婴情况良好,新生儿出生体质量平均(3.2±0.8)kg,Apgar评分为9～10分。结论贮存式自体输血不会对母婴造成很大影响,相对于异体输血更科学、安全、有效,特别是对于RhD阴性血的孕妇,开展贮存式自体输血尤其有重要的意义。

柳州地区5个民族人群ABO及Rh(D)血型基因频率调查

目的了解柳州地区5个民族人群中ABO及Rh(D)血型分布及基因频率特征,为临床输血提供依据。方法回顾性分析2019-2021年在柳州市妇幼保健院就诊的侗族、壮族、苗族、瑶族和汉族64323例患者的ABO、Rh(D)血型结果及其临床资料,对患者血型的分布频率和基因频率进行统计分析。结果5个民族的ABO血型分布规律为O>B>A>AB,基因频率r>q>p,对5个民族的ABO血型观察值和期望值经吻合度检验,符合Hardy-Weinberg平衡定律;各少数民族血型分布间的两两比较差异均无统计学意义(P>0.05),而汉族分别与侗族、苗族、瑶族、壮族的血型分布两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);5个民族Rh(D)阴性抗原表现频率分布较低(均小于0.5%)。结论本地区5个民族人群的ABO血型分布规律如下,O基因频率较高而A基因频率较低;汉族与少数民族之间ABO血型分布可能存在一定差异;本地区少数民族的Rh(D)阴性频率较低,符合南方地区少数民族血型分布特征。