Rh缺失型D--临床及家系调查分析2例

目的探讨Rh缺失型D--患者临床特点,并评价家系调查及血清学检查在Rh缺失型D--诊断中的作用。方法对近期收治的2名疑似Rh缺失型D--患者的临床表现与血型血清学检查结果进行分析,并作家系调查。结果2名患者分别来自近亲和非近亲婚配的家系,2家系调查发现亲代成员血清学表型均为纯合子,分别是D+C+c-E-e+和D+C-c+E+e-。2名患者均发生了严重的母儿Rh血型不合溶血病,血清学检查证实为RhD--表型。结论Rh缺失型D--可发生在近亲和非近亲婚配的家系中,并可导致严重的新生儿溶血病;血清学检查结合家系调查对Rh缺失型D--的诊断具有重要意义。

Rh缺失型D--个体及其家系成员基因分型与序列分析

目的初步探讨Rh缺失型D--个体发生的分子机制。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP),对两例Rh缺失型D--个体及其家系成员RHD与RHCE基因多个外显子与内含子进行扩增。根据PCR-SSP结果,对所有与血清学表型不符的异常扩增片段进行克隆测序。结果两例Rh缺失型D--个体PCR-SSP扩增后获得D、e的基因相关片段。经测序发现,RhD--个体1第5外显子第22位核苷酸出现缺失,48与90位发生点突变。RhD--个体2第5外显子第89位发生突变。结论Rh基因外显子的缺失以及单个核苷酸的缺失与突变可能是导致Rh缺失型DD--形成的重要原因之一。

Rh缺失型D--个体及家庭成员的血型鉴定与遗传分析

目的:分析Rh缺失型D--个体及其家庭成员的血型鉴定结果和遗传背景.方法:采集产妇及其家庭成员血液标本鉴定ABO血型、Rh血型,并对产妇及其子进行抗体释放试验(DAT)及抗人球蛋白试验,采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)法扩增产妇及其家庭成员的RHD、RHCE基因特异性序列,分析扩增产物.结果:产妇、其丈夫、患儿、其女、其母、其姐、其兄ABO血型鉴定结果显示均为A型,其妹为AB型.产妇Rh血型为D--,存在C、c、E、e抗原缺失现象;其夫及两子女Rh血型均为D+C+c-E-e+,均有C、e抗原.产妇DAT试验阴性,患儿DAT实验阳性(++);抗体鉴定阴性;产妇抗人球蛋白试验强阳性,与所有细胞均发生强凝集(+++),产妇自身对照无凝集.产妇及其家庭成员PCR结果证实,产妇RHD基因未见异常,亦未检出RHCE基因的特异性序列;其他家庭成员均有正常表型及RHCE基因产物,且产妇及其家庭成员PCR结果与血型学表型基因相符.结论:RHCE基因缺失可能是引起Rh缺失型D--的重要分子基础.

Rh缺失型D(D--)血型的免疫学检测及稀有血型库分析

目的探讨Rh缺失型D(D--)的基因型和血清学特点。方法采用血型血清学对1例表型为D--患者血清进行检测并通过基因测序对其进行基因分型。结果被检者血清抗筛、主侧配血在微柱凝胶法中均为4+凝集,而在盐水法中不凝集;自身对照及次侧配血在盐水法及微柱凝胶法中均不凝集。经血清学方法检测,该被检者血型表现为D--表型;基因分型证实,RHD基因未见突变,其相应抗原正常表达,而RHCE基因第1外显子第48碱基发生了48G>C的纯合突变,同时缺失了第2至第9外显子,导致RHCE基因相应抗原无法正常表达。结论D--与RHCE基因异常有关,怀孕或者输血均可能诱发机体血清中产生抗Hr0抗体。因此,亟需完善我国D--稀有血型库。

孕产妇Rh表型分布特征及相容性输血的可行性探讨

目的:分析重庆地区孕产妇Rh表型分布特征,探讨Rh表型在孕产妇中的临床意义及实行Rh表型相容性输血的可行性。方法:采用微柱凝胶法对65161例孕产妇进行ABO血型和Rh表型检测,以同期48122例男性为对照,通过χ^(2)检验对数据进行比较分析。结果:113283例样本中,RhD+112870例(99.64%),以CCDee(48.39%)和Cc DEe(32.88%)为主要表型,并检出重庆地区首例Rh缺失型D--表型;Rh D-413例(0.36%),以ccdee(52.78%)和Ccdee(33.41%)为主要表型;RhD+组与Rh D-组的Rh表型分布差异有统计学意义(P<0.01)。在65161例孕产妇中,Rh5种抗原的阳性率由高到低为D>e>C>c>E,与男性相比差异无统计学意义(P>0.05);孕产妇Rh表型分布与男性相比差异无统计学意义(P>0.05);不同ABO血型的孕产妇间Rh表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。在孕产妇中,正常妊娠人群、有不良流产史人群、采用人类辅助生殖技术人群和不孕症患者人群间Rh表型分布无明显差异(P>0.05),4个孕产妇人群与本地区综合性三甲医院住院患者和献血者相比,Rh表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。RhD阳性孕产妇中,CcDEe表型找到相容性血液的概率为100%,CCDee、CcDee和CCDEe表型找到相容血液的概率为45%-60%,ccDEE、ccDEe、CcDEE表型找到相容血液的概率为5%-10%,其余表型的相容概率均低于0.5%;提供CCDee和ccDEE两个表型的血液即可满足99%以上患者7种Rh表型相容性输血需求。结论:应对孕产妇进行Rh表型检测,对需要输血的孕产妇推行Rh表型相同或相容性输血是切实可行的输血举措。

Rh缺失型D--个体及家系成员Rh膜复合物蛋白的定量分析

目的考察罕见血型Rh缺失型D--个体及家系成员Rh膜复合物蛋白的变化情况。方法采用流式细胞仪测定红细胞膜上D、Band3、CD47、GPA、LW、RhAG蛋白的表达量。结果先证者、父亲、母亲、女儿、丈夫D、Band3、CD47、GPA、LW、RhAG蛋白的表达量与对照的比值为:2.38、1.61、1.83、2.00、0.62;1.03、0.72、1.12、0.85、0.99;0.35、0.79、0.66、0.88、0.91;0.86、0.80、0.91、0.81、0.87;2.46、未做、2.36、2.30、1.12;0.70、0.78、0.93、0.86、0.97。结论 D--个体及家系成员LW的表达与D抗原的表达量呈正相关,D--个体CD47的表达减少,其他蛋白变化不大。

Rh缺失型D-基因检测及家系成员D抗原、Rh17抗原定量分析

目的分析Rh缺失型D-个体基因序列及家系成员D抗原、Rh17抗原数量，探讨Rh缺失型D-遗传机制和鉴定。方法采用PCR-SSP技术进行RHCE基因检测，用流式细胞仪检测红细胞表面D抗原、P＆17抗原数量。结果Rh缺失型D-个体1和10外显子为RttCE基因序列，2、3、6、7、8、9外显子变为RttD基因序列，4、5外显子未检测到。先证者及父母、女儿D抗原表达量超出正常1～2倍，其弟、妹、丈夫表达正常；先证者不表达Rh17抗原，其他家系成员RM7抗原表达量有差异。结论Rh缺失型D-个体由父母各携带的1条D-染色体遗传而呈现的表型，D抗原的定量测定有利于杂合子的判定，Rh17抗原的测定可用于D-和D-血型的鉴别。

1例Rh缺失型D--导致新生儿溶血病临床及家系的调查分析

目的分析1例受检产妇交叉配血不合及患儿新生儿溶血病(HDN)发生的原因,初步探讨产妇Rh缺失型D--形成的遗传背景。方法对产妇、其夫及患儿标本进行ABO及Rh血型鉴定,对产妇及患儿标本进行血型抗体检测,并对产妇家系作血型调查。结果产妇为Rh缺失型D--,产生IgG的多凝集抗体。结论产妇为Rh缺失型D--,产生IgG的多凝集抗体,是造成其交叉配血不合及患儿HDN发生的原因;产妇Rh缺失型D--形成,有一定遗传因素的影响。

Rh缺失型D--个体及其家系成员基因分型及遗传背景分析

目的分析Rh缺失型D--个体及其家系成员的基因分型及遗传背景。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP),对Rh缺失型D--个体及其家系成员的RHD和RHCE基因的特异性序列进行扩增,并对扩增产物进行分析。结果先证者家系成员PCR结果与血清学表型基本相符,先证者RHD基因未见异常,未检出RHCE基因的特异性序列,其他家系成员均有正常表型及RHCE基因PCR产物。结论先证者RHCE基因大部分或全部缺失是造成其Rh缺失型D--的重要分子基础。先证者RHCE基因缺失,很可能其父母双方分别携带一条D--单倍型,在遗传时均将其遗传给先证者,从而形成Rh缺失型D--。

Rh缺失型D--导致新生儿溶血病的血液免疫学分析及家系调查

目的:分析1例新生儿溶血病产生的原因,初步探讨产妇Rh缺失型D--形成的遗传背景。方法:通过血型血清学方法对产妇、患儿标本进行ABO、Rh血型鉴定,直接抗人球蛋白试验,抗体筛查与鉴定试验,抗体释放试验、游离抗体检查及抗体效价测定,并做家系血型调查。通过分子生物学方法对RHD基因和RHCE基因第1～10外显子进行测序。结果:患儿血型为A型、DCCee,直接抗人球蛋白试验、游离抗体检查、抗体释放试验均为阳性。产妇血型为A型、D--,产生了IgG性质的抗-Hr_0抗体,效价是512,家系中只有先证者为D--。产妇RHD基因完整,RHCE基因缺失2～8外显子,基因表型为D(1～10)CE(1,9,10)。结论:产妇Rh缺失型D--由RHCE基因缺失产生,多次妊娠产生抗-Hr_0抗体导致新生儿溶血病。

Rh缺失型D（-）（-）血清免疫学和基因分析及在输血中的应用

目的 通过对1例Rh缺失型D--血型进行检测分析,探讨该血型的临床输血应用价值.方法 选择2010年3月送滨州市中心血站检测血型的1例Rh缺失型D-患者为研究对象.采用血型血清学、流式细胞术分析其血型血清学特点及红细胞膜D抗原变化.采用序列特异性引物-PCR技术检测RHCE基因外显子,并分析其基因变化情况.在本例患者之后,临床急需这一稀有血液时,自体内采集的400 mL Rh缺失型D-成功救治1例同型危重患者.结果 本例患者血型为A型、D-,RhD抗原表达量超出正常个体1倍以上;基因检测定型为D-SH表型,为国内首次报道基因型.采用其血液成功抢救1例同型危重患者,该同型危重患者接受输血后,血红蛋白水平由24 g/L上升至38 g/L.结论 Rh缺失型D--血型血清学较易鉴定,但易漏检.从先证者家系中筛查及动员先证者健康时献血是解决这一罕见血型供血的有效方法.