2例罕见RhD变异型RHD*DEL37的分子生物学分析

Rh血型系统是输血医学中重要的常规检测血型系统,因RhD血型不合引起的溶血性输血反应及新生儿溶血病一直以来倍受临床重视。本研究报道了2例罕见的RHD基因变异型RHD*DEL37个体的血清学和基因特征,这2例个体的血液样本经血清学方法(试管法和微柱凝胶法)鉴定为RhD阴性。采用聚合酶链反应-序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific prime,PCR-SSP)对样本进行RHD基因分型和合子型分析,基因分型结果为RHD基因阳性,并排除了常见的几种RHD基因变异体的可能。RHD基因合子型检测阳性,证明其中一条RHD等位基因1~10外显子全部缺失。进一步对样本RHD基因1~10外显子基因进行Sanger法测序,测序结果显示在另一条等位基因第8内含子上的第1154-31号碱基发生了T>C突变,国际输血协会(International Society of Blood Transfusion,ISBT)将该突变等位基因命名为RHD*DEL37,表型为RhD放散型(D-elute,Del)。本研究中,2例血清学初筛RhD阴性的样本通过分子生物学检测,其基因型为RHD*DEL37/RHD-(RHD*01N.01)。由于这2例个体无血缘关系,提示我国可能存在携带该基因突变的人群。本研究提示分子生物学方法可辅助鉴别血清学初筛为阴性的RhD变异体样本,联用分子生物学方法和血清学方法在准确鉴定血型、保障患者输血安全方面有重要意义。

重庆地区献血者RhD阴性血型抗原分布调查

在我国汉族人群中RhD阴性血型所占比例仅为0．2％～0．5％，属于稀有血型，RhD阴性血型的分布因种族、地区的不同而有差异，了解本地区RhD阴性血型分布，掌握分布规律，有利于及时为临床提供合适的RhD阴性血液，重庆市血液中心自1998年以来对志愿无偿献血者开展了RhD抗原的筛查及鉴定工作，

孕产妇Rh血型系统抗体检测和临床意义分析

目的探讨产妇Rh血型系统抗体的检出特点,分析其与新生儿溶血病之间的关系并制定临床输血应对策略。方法选取2016年10月至2018年6月中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)孕产妇红细胞不规则抗体筛选试验阳性的血标本,根据抗体的Ig类型应用抗球蛋白法或微柱凝胶抗球蛋白法,鉴定受检血清(血浆)与谱细胞及自身红细胞的反应结果;检测Rh血型抗体的效价、免疫球蛋白类型及37℃反应性以明确其临床意义;孕产妇受检红细胞D、C、E、c、e抗原采用单克隆抗-D、抗-C、抗-E、抗-c、抗-e试剂鉴定其Rh血清学分型;新生儿标本进行溶血病三项试验,鉴定新生儿放散液的抗体与其母亲血清(血浆)中是否有相同,分析妊娠史、输血史与抗体产生的相关性。结果从4 680例住院孕产妇备血标本中共检出Rh血型抗体56例,检出率为1.20%,其中有妊娠史者48例,输血史者6例;Rh血型抗体的特异性为:抗-E 33例(58.92%)、抗-D 10例(17.86%)、抗-c 7例(12.50%)、抗-cE 5例(8.93%)、抗-C 1例(1.79%);血型抗体的免疫球蛋白类型主要为IgG或IgG+IgM类,间接抗球蛋白试验37℃下均可与相应抗原的红细胞凝集反应,抗体效价介于1~512;10例新生儿溶血病血清中抗体与其母亲相同。结论女性因妊娠或输血等免疫刺激是Rh血型抗体产生的主要原因,来自母体的Rh血型抗体可导致Rh-HDN,应增加孕产夫妇RhCE抗原常规检测并同型输血,可有效降低意外抗体的产生概率。

Rh(D)阴性血型剖宫产术产妇输血方案探讨

目的探讨Rh(D)阴性血型剖宫产术产妇的输血方案。方法 Rh(D)阴性血型孕足月剖宫术产妇57名,分为5组:Ⅰ组(n=30)产妇术前Hb≥110 g/L,Hct≥33%,麻醉前实施稀释式自体输血。Ⅱ组(n=17)产妇术前Hb(100～110)g/L,Hct 30%～33%,麻醉前实施成分式自体输血。Ⅲ组(n=5)产妇术前Hb(80～100)g/L,Hct24%～30%,放弃常规备异体血。Ⅳ组(n=3)产妇术前Hb<80 g/L,Hct<24%,输血科保存备用红细胞制品2 U。Ⅴ组(n=2)为急诊手术,麻醉前无法实施自体输血且存在产科出血的高危因素(胎盘早剥和前置胎盘出血),术中发生大出血无法短时间内获得异体红细胞者,紧急情况下实施回收式自体输血。结果Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组均未输注异体红细胞,Ⅳ组有2例输注2 U融化洗涤冰冻红细胞,Ⅴ组2例出血量在4 000 ml以上,分别回收自体浓缩红细胞270 ml和350 ml,同时输注了异体红细胞及其他血液成分。结论针对Rh(D)阴性血型剖宫产术产妇的不同情况,术前制定合理的输血方案,可以提高围术期安全性,并可有效节约血源。

Rh血型系统阴性血型筛查及其临床意义

目的筛查Rh血型系统Rh(D)、Rh(E)、Rh(C)阴性血型,为临床预防溶血性输血反应及新生儿溶血性疾病的发生提供实验依据。方法用微柱凝胶法对11 035例作ABO血型鉴定标本同时进行Rh血型系统Rh(D)、Rh(E)、Rh(C)阴性血型筛查。结果 Rh(D)抗原阴性23例,检出率为0.21%;Rh(E)抗原阴性5 275例,检出率为47.8%;Rh(C)抗原阴性839例,检出率为7.6%。结论将Rh血型系统Rh(D)、Rh(E)、Rh(C)纳入到血型的常规检验项目,对预防溶血性输血反应的发生、提高输血治疗的安全性,以及预防新生儿溶血性疾病的发生具有十分重要的临床意义。

探讨ABO、RhD血型调查与建立Rh表型库在安全输血中的临床意义

目的调查河北省邯郸市峰峰矿区ABO、RhD血型在人群中的分布情况,分析患者不规则抗体筛查结果,探讨ABO、Rh血型调查与建立Rh表型库在安全输血中的临床意义。方法收集我院8000例住院患者ABO血型及RhD血型的检测结果,对需输血的患者5000例进行不规则抗体检测,阳性结果标本进一步行抗体特异性鉴定。随机选取3000袋RhD阳性滤白红细胞悬液样本检测Rh表型,通过电脑建立献血者Rh表型数据库,探讨其在输血中的重要意义及价值。结果8000例患者中ABO血型分布情况从多到少依次为B型血(32.02%)、O型血(28.98%)、A型血(27.01%)、AB型血(11.99%)。不同年龄组间ABO血型分布情况差异有统计学意义(P<0.05),不同性别组中ABO血型分布情况差异无统计学意义(P>0.05)。8000例患者中RhD阴性48例(0.60%)。男性和女性Rh血型分布差异无统计学意义(P>0.05)。5000例需输血患者的血样标本中不规则抗体阳性者30例(0.60%),Rh血型系统抗体阳性19例(63.33%),抗-E检出率最高。不规则抗体的检出率女性显著高于男性,差异有统计学意义(P<0.05)。3000例RhD阳性献血者血样标本Rh血型表型共8种,其中CCDee检出率最多,其次为CcDEe,DcDEE和ccDee检出率较少。结论ABO血型的分布与地域及年龄有关;临床上除在患者输血前进行不规则抗体筛查,应进一步检测其抗体特异性;建立献血者Rh表型数据库有利于预防因Rh表型不符输血引起的溶血性输血反应,对于临床安全输血工作具有重大意义。

OLYMPUS-PK7300全自动血型分析仪在血型筛查工作中的应用

目的了解OLYMPUS-PK7300全自动血型分析仪用于ABO和Rh(D)血型检测的效果。方法凝集法采用O-LYMPUS-PK7300全自动血型分析仪对血型进行检测。结果用仪器法和试管法同时做600例样本对比试验,两种检测方法结果符合率为100%;对本站2010年度58700例血样进行检测,共检测出Rh(D)阴性315例,经血型室确诊303例仍为阴性;正反定型不符29例,频率为0.05%;共筛查出41例血型错误。结论 OLYMPUS-PK7300全自动血型分析仪实现了血型检测真正意义上的自动化,降低了人为因素造成的影响;判读结果更标准,对于血站大批量的血型筛查具有较大的使用价值。

邯郸住院患者ABO和Rh血型分布概况

ABO血型和Rh血型系统是红细胞的两大抗原抗体系统,Rh抗原中D的抗原性最强,习惯上将有D抗原者称Rh阳性,无D抗原者为Rh阴性。两大系统在临床输血、血液遗传、器官移植和新生儿溶血病的诊断有重要意义。邯郸地处晋、冀、鲁3省交界处,我院是本地区最大的医院,用血量在本地占有很大的比例,统计我院住院患者的ABO和Rh血型情况,

烟台市ABO、RhD(+)、RhD(-)血型患者的发病调查

目的:观察研究烟台市ABO、RhD(+)、RhD(-)血型住院患者发病率和发病规律,为中心血站提供采血数据。方法:ABO血型亚型用吸收放散试验,唾液或血清中和抑制试验。结果:统计2004/2005 22 550例住院患者的血型,A型占27.34%,B型占33.25%,O型占28.58%,AB型占10.83%。检出稀有A亚B型3例。RhD(+)患者22 457例,占99.59%;RhD(-)患者93例,占0.412%,抗体筛选均阴性。结论:ABO、RhD(+)血型患者发病规律与血型人群分布情况有一定差异,RhD(-)血型结果与相关文献基本一致;2 a来统计显示,不同季度血型患病率没有显著性差异。故需合理调配血源为临床服务,快速提高我市输血技术水平。

宫内输血治疗母胎Rh血型不合胎儿贫血2例

宫内输血是治疗母胎Rh血型不合导致胎儿贫血的安全有效的治疗方法。本文对两例母胎Rh血型不合导致胎儿贫血、经宫内输血治疗预后良好的病例进行报道,并对相关诊疗经验进行总结分析。合理的治疗时机、恰当的供体血浓度、充分的麻醉镇静、合适的穿刺点选择、均匀的输血速度、准确的输血量计算以及获得输血后胎儿血红蛋白浓度的实测值是宫内输血的关键技术要点。对于输血后的胎儿,应个体化决定其分娩时机。

江阴市无偿献血者RhD阴性血型调查

目的了解江苏省江阴市Rh D阴性无偿献血者ABO血型、血清学表型和不规则抗体分布情况,建立并完善Rh D阴性献血者电子数据库。方法应用血清学方法对无偿献血者血标本进行Rh D阴性筛查和确认、血清学表型鉴定、不规则抗体筛选。结果江阴市无偿献血者18 059份标本中共确认Rh D阴性82份,阴性率为0.45%,在ABO血型中的分布为A>O>B>AB,其中检出不规则抗体1份(1.22%);Rh D阴性表型以ccdee和Ccdee为主,依次为ccdee[51(62.20%)]、Ccdee[22(26.83%)]、CCdee[4(4.88%)]、ccd Ee[3(3.66%)]、Ccd Ee[2(2.44%)]。结论掌握Rh D阴性献血者的ABO血型、血清学表型、不规则抗体分布规律,对稀有血型患者的紧急用血及降低免疫性输血反应,提高输血安全具有重要意义。

Rh(D)血型不合的同种异体肝移植的可行性探讨

目的:探讨Rh(D)血型不合[Rh(D)blood type incompatibility]的同种异体肝移植的安全性及其效果。方法:回顾性分析我中心自2003年6月至今的5例Rh(D)血型不合的肝移植患者资料,分析总结Rh(D)阴性患者接受Rh(D)阳性供体后,近期可能发生的一系列副反应以及对移植物存活的影响。结果:5例患者均接受了同型Rh(D)阳性供体,4例患者术中输注了Rh(D)阳性浓缩红细胞,1例未输血,术中、术后均没有发生严重的输血反应和排斥反应,4例患者至今存活。结论:通过对Rh(D)相关抗体术前术后的严格检测,以及术后的免疫抑制治疗,Rh(D)血型不合的肝移植是安全、可行的。

血型基因检测在ABO和RhD血型鉴定困难患者输血中的应用价值

目的探讨血型基因检测在ABO和RhD血型鉴定困难患者输血中的应用价值。方法收集2015年7月—2017年10月于我院行ABO和RhD血型血清学鉴定困难的临床样本80例,其中ABO血型正反不符37例,RhD血型鉴定困难43例。采用聚合酶链反应-特异性序列引物(PCR-SSP)技术和Sanger测序方法进行基因检测。结果37例ABO血型正反定型不符的样本经Sanger测序确定抗体减弱样本13例,A亚型8例,B亚型5例,AB亚型4例,Cis AB型4例,B(A)型3例,检测出A102、Ael05、A311、B301、O02、CisAB01、B(A)04等位基因。在43例RhD血型鉴定困难样本中,通过PCR-SSP技术检测出RhD阳性、弱D15型、RhD-CE-(2-9)-D型和RhDⅥⅢ型。根据基因检测确定的血型为受血者选择ABO和RhD血型相合的血液,经抗人球蛋白卡式法进行交叉配血试验,实现临床精准化输血。结论采用血型基因测序分析的方法,可以鉴定血清学实验无法判定的ABO血型、RhD血型,从而提升解决疑难配血的能力,提高输血治疗的安全性,为精准输血提供保障。

Rh血型D、C、E抗原的分布及其在临床输血中的应用

目的通过研究输血前检查RhC、E抗原的必要性,分析其在人群中的分布情况,对比输注RhC、E相同表型和不同表型血液制品的治疗效果,为安全合理的临床输血提供理论依据。方法收集8600例峰峰煤矿工人的Rh血型检测D、C、E抗原,并收集同期欲配血患者的血样标本进行不规则抗体筛查检测。另选择输血患者100例,明确ABO血型和Rh血型,将患者随机分为对照组和研究组各50例,对照组输注RhC、E不同表型红细胞悬液2 U,研究组输注RhC、E相同表型红细胞悬液2 U,严密监测患者生命体征,比较2组患者输血前后血红蛋白(haemoglobin,Hb)和血细胞比容(hematocrit,HCT)的变化及不良反应发生情况。结果8600例峰峰煤矿工人中RhD、C、E抗原阳性率分别是99.640%(8569/8600)、86.570%(7445/8600)、43.547%(3745/8600)。欲配血患者中不规则抗体阳性7例,主要为Rh血型中抗-E及抗-c阳性。输血后,2组Hb和HCT均高于术前,研究组Hb和HCT均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。输血后,研究组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论对于已经检测出Rh血型中有抗-E和抗-c的患者,输血前应对供血者进行RhC、E血型检测,尽可能选择没有相应抗原的红细胞且配血试验均无溶血、无凝集时输血,以保证输血的安全性。