牛皮杜鹃的组培快繁及种质试管保存技术

以牛皮杜鹃休眠芽为外植体,筛选最适合萌发、再分化、生根和种质试管保存的培养基。结果表明最适合休眠芽萌发的培养基为:1/4MS+GA31.5mg·L-1+维生素C20mg·L-1;基部直接再分化培养基为:1/4MS+6-BA4.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1;生根培养基为:MS+IBA0.46mg·L-1+活性炭450mg·L-1;种质试管保存培养基为:1/6MS(大量元素)+1/4MS(微量元素)+1/2MS(铁盐)+1/4MS(有机物质)+B93.5mg·L-1。牛皮杜鹃组织培养的不同阶段需要不同的培养基,常温条件下,利用低营养矮化常温的方法在试管内保存种质资源。

TDZ对牛皮杜鹃叶片分化及继代增殖的影响

以牛皮杜鹃组培苗为试材,研究以改良MS为基本培养基,不同质量浓度TDZ、ZT与IBA组合,对叶片愈伤组织诱导及分化、继代增殖的影响。结果表明:TDZ对组培苗叶片愈伤组织诱导及分化的效果显著优于ZT,但在继代培养时增殖效果不如ZT;TDZ 0.3mg/L+IBA 0.5mg/L处理的叶片分化效果最好,分化率高达97.44%;不定芽在改良MS+ZT 0.2mg/L+IBA 0.5mg/L中继代培养后,每瓶分化的不定芽数最多(30.2个)。

长白山杜鹃花属种间杂交亲和性的研究

为了探索长白山杜鹃花属种间杂交的亲和性及种间杂交在种质创新中的可行性,以5种长白山杜鹃花属植物为试材,进行种间正反杂交,并对杂种胚进行离体培养.结果表明,杜鹃花属种间正反杂交亲和力有显著差异,以牛皮杜鹃为母本,与迎红杜鹃、白花迎红杜鹃、亚布力杜鹃杂交有较高的亲和性,与母本的自然授粉坐果率无显著差异,分别为92.55％、94.14％、92.42％,杂种胚的萌发率分别为13.60％、11.59％、4.12％;杂种苗生长势微弱,呈白化状态,有败育迹象,经继代培养2～3次后,生长势得到一定的恢复,且分化率明显高于牛皮杜鹃种胚苗,但植株的颜色仍是黄绿色.而反交时,坐果率明显降低,坐果率最高的组合为亚布力杜鹃×牛皮杜鹃,为36.51％;与迎红杜鹃的杂交坐果率为6.52％;而与大字杜鹃的杂交坐果率为0,但反交时亚布力×牛皮杜鹃的种胚萌发率极显著地高于正交,为39.81％,而且种胚苗生长健壮,无需继代,可直接进行炼苗移栽.

基于均匀设计优化牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗及植株再生体系(英文)

[Objective] The experimental was aimed to screen the optimum regeneration shoot induction media and rooting media for tender leaves of Rhododendron chrysanthum Pall.[Method] The tender leaves of Rhododendron chrysanthum Pall were taken as explants to select the optimum bud induction media and rooting media through uniform design and the screening results were verified.[Result] The optimum media for regeneration shoot of Rhododendron chrysanthum Pall contained 1/4 MS,3.70 mg/L ZT, 0.02 mg/L IAA and 1.00 mg/L KT and its induction rate was 95.5% and the rooting media contained modified MS, 0.10 mg/L IAA and 0.07 mg/L NAA and its rooting rate was 98%. [Conclusion] Through this experiment, regeneration systems for regeneration shoot and regenerated plant from tender leaves of Rhododendron chrysanthum Pall were created successfully.

长白山牛皮杜鹃组培苗与野生苗药用成分含量分析

采用HPLC法与紫外分光光度法分别测定了长白山牛皮杜鹃组培苗与野生苗中主要药用成分芦丁与单宁酸的含量。结果表明,芦丁在野生苗两年生老叶中含量最高,为2.54mg/g,野生苗嫩叶含量为1.68mg/g,愈伤组织含量为0.16mg/g,组培苗含量为0.08mg/g,组培叶含量为0.03mg/g,根中未检测到芦丁成分。单宁酸在野生苗老叶中含量最高,为91.54mg/g,野生苗嫩叶含量为45.87mg/g,野生苗根中为24.58mg/g,愈伤组织中含量为13.51mg/g,组培苗中含量为10.32mg/g,组培叶中含量为17.46mg/g。野生苗中芦丁与单宁酸含量均高于组培苗。

不同海拔长白山牛皮杜鹃叶片适应性结构的对比分析

以长白山牛皮杜鹃为试材,研究比较了1 500、1 800、2 100、2 400m4个不同海拔高度牛皮杜鹃种群的叶片表面形态结构特征和叶片功能性状。结果表明:不同海拔高度的牛皮杜鹃叶片上表皮细胞随海拔高度的升高而排列比较疏松,叶片下表皮细胞排列比较有规则。叶干物质含量随海拔增加而增加,低海拔与高海拔的叶干物质含量差异显著;比叶面积随着海拔增加而减少,海拔1 800m叶片比叶面积低于其它3个海拔高度;叶厚随海拔增加而增加,海拔1 800m叶片厚度高于其它3个海拔。

牛皮杜鹃RAPD反应体系的优化

[目的]建立牛皮杜鹃RAPD反应体系。[方法]以野生牛皮杜鹃的叶片为材料,采用改进CTAB法提取基因组DNA,并对影响RAPD扩增反应的各因素进行优化。[结果]适合牛皮杜鹃的RAPD反应体系为:在20μlPCR反应体积中加模板DNA10ng,Mg2+浓度1.5mmol/L,引物OPC0515pmol/μl,dNTP0.15mmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U。[结论]该研究为牛皮杜鹃的遗传多样性分析提供了有益的参考。

基于均匀设计优化牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗及植株再生体系

[目的]筛选最适合的牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗诱导培养基和生根培养基。[方法]以牛皮杜鹃嫩叶为外植体,应用均匀设计对牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗诱导培养基和生根培养基进行筛选,并对筛选结果进行了验证。[结果]最适合牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗的诱导培养基为:1/4 MS+3.70 mg/L ZT+0.02 mg/L IAA+1.00 mg/L KT,诱导率达95.5%;最适生根培养基为:MS(改良)+0.10mg/L IAA+0.07 mg/L NAA,生根率达98%。[结论]通过验证试验证明,成功建立了牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗及植株再生体系。

长白山牛皮杜鹃种苗速生调控技术

本研究以牛皮杜鹃组培苗为供试植物,通过多因子交叉重复试验对影响牛皮杜鹃组培苗快速生长的各主要因素及其水平的作用进行了探讨,旨在探索并建立一种牛皮杜鹃种苗快速生长的调控方法。结果表明：最适合牛皮杜鹃组培苗快速生长的主要因素及其水平是光照时间为13 h·d-1、营养液追施间隔时间为21~22 d、光照强度为700~800 lx和温度为26℃。经过25 d的调控处理,牛皮杜鹃组培苗纵向生长高度和横向直径分别达到17.6 cm和6.0 mm,对照组仅分别达到8.8 cm和2.0 mm;50 d后纵向生长高度和横向直径分别达到26.0 cm和7.4mm,而对照组仅分别达到10.2 cm和2.9 mm。初步得到牛皮杜鹃种苗速生的优化组合,该组合将有利于牛皮杜鹃种苗的快速生长。

延缓生长法在试管内保存牛皮杜鹃种质初探

以牛皮杜鹃嫩茎基部直接再生形成的丛生芽团为试材,应用均匀设计法探讨了影响牛皮杜鹃丛生芽团试管保存的主要因子和水平,同时筛选最适于牛皮杜鹃丛生芽团试管保存的培养基,结果表明:最适宜的丛生芽团试管保存培养基为:DR+根皮苷2.70 mg/L+KT0.70 mg/L,保存46个月生长率仅为1.12%。对保存前后的芽苗分化的结果进行对比可知,分化率达99.5%以上,较未保存前的分化率89.0%高,且保存后的生根速度快。本试验结果证明,在试管内采取"延缓生长"法保存牛皮杜鹃丛生芽团是切实可行的新方法。

牛皮杜鹃植株解剖结构的研究

在前人对杜鹃花研究的基础上,以长白山野生牛皮杜鹃(Rhododendron Chrysanthum Pall)为材料,采用常规石蜡切片法对根、茎、叶、花、果实及种子的解剖结构进行观察研究.

不同地区牛皮杜鹃叶片解剖结构比较分析

利用光学显微镜对生长在长白山小天池和敦化老白山的牛皮杜鹃叶片横切面进行观察.结果表明,生长在老白山的牛皮杜鹃叶片长度、宽度和叶柄长度都大于生长在小天池的牛皮杜鹃;内部结构上,生长在老白山的牛皮杜鹃叶片主脉直径、叶片厚度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度的测量值均高于小天池的牛皮杜鹃,上、下表皮的厚度和细胞层数没有显著差异.

乌苏里鼠李的名实问题

在野外观察和查阅大量标本的基础上 ,认为RhamnusussuriensisJ.Vass.应作为Rh .davuricaPall.

均匀设计法优化牛皮杜鹃腋芽丛生芽苗及高频植株再生体系研究

以牛皮杜鹃嫩茎段为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基。结果表明,最适合嫩茎段腋芽丛生芽苗的诱导培养基为1/2 MS+2-ip 3.50mg/L+IAA 0.02mg/L+GA3 1.00mg/L,诱导率可达96%;生根培养基为MS(改良)+IAA 0.10mg/L+NAA 0.07mg/L,生根率可达98%。以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在30d的一个培养周期内,增殖倍数平均达60以上。通过试验,建立了牛皮杜鹃腋芽丛生芽苗及高频植株的再生体系。

不同海拔牛皮杜鹃种群遗传多样性的RAPD分析

利用RAPD标记技术对采自老白山和长白山不同海拔的牛皮杜鹃进行遗传多样性分析。结果表明:产地不同(长白山和老白山)的牛皮杜鹃种群间的遗传多样性水平较高,遗传距离较大;而产地相同(长白山不同海拔)的牛皮杜鹃种群间遗传多样性水平较低,具有较小的遗传距离,即遗传背景相对相似;长白山不同海拔的4个牛皮杜鹃种群还可分为两类。

牛皮杜鹃组培苗的增殖、生根培养及炼苗移栽研究（英文）

[目的]该研究旨在缩短长白山牛皮杜鹃增殖、生根培养周期。[方法]以长白山牛皮杜鹃组培苗为试材,研究了不同激素组合以及椰乳对牛皮杜鹃组培苗增殖分化的影响,探究了牛皮杜鹃组培苗生根培养基、驯化移栽基质。[结果]改良MS+IBA 3 mg/L+ZT 1.5mg/L是牛皮杜鹃组培苗继代增殖的最佳培养基,且在培养基中加入150 ml/L椰乳可明显促进其增值倍数和植株平均高度。牛皮杜鹃组培苗最佳生根培养基为1/4改良MS+IBA5.0 mg/L,接种后8 d即开始生根。沙培15 d进行催根处理,适宜基质为草炭土∶腐殖土∶珍珠岩=2∶1∶1,成活率为95.66%。

牛皮杜鹃嫩茎段试管内高效再生方法

本研究以牛皮杜鹃嫩茎段为外植体,通过均匀设计法对影响牛皮杜鹃腋芽萌发生长同时生根的各主要因素及其水平的作用进行了实验探讨,旨在探索一种试管内牛皮杜鹃高效植株的再生方法。结果表明,最适合牛皮杜鹃嫩茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基为：基本培养基＋KT 0.13-0.14 mg·L-1＋IBA 0.05-0.08 mg·L-1＋NAA 0.02-0.05 mg·L-1＋GA3 2.70-2.90 mg·L-1,植株再生率为99.2%。以再生植株茎节为材料进行快繁的结果表明,在28 d的培养周期内,每段平均增殖6倍以上。再生植株的移栽成活率达96.0%以上。成功建立了高效植株再生体系,所建立的高效植株再生体系适合于牛皮杜鹃种苗工厂化生产。

HPLC法测定长白山牛皮杜鹃中绿原酸的含量

采用色谱柱为Aglient ZORBAX SB-C18（250mm×4．σmm，5μm）．流动相为乙腈-0．4％瞵酸溶液（15：85），检测波长327nm，流速为1．0ml·min^-1，柱温为25℃的色谱条件，建立一种测定长由山牛皮杜鹃中绿原酸含量的HPLC方法．结果表明：绿原酸在0．513～10．26μg范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率为98．9％．该测定方法，简便快捷、结果准确、重现性好．

长白山杜鹃花属种间杂交亲和性的研究（英文）

为了探索长白山杜鹃花属种间杂交的亲和性及种间杂交在种质创新中的可行性。以5种长白山杜鹃花属植物为试材，进行种闯正厦杂交，并对杂种胚进行离体培养。结果表明，杜鹃花属种间正反杂交亲和力有显著差异，以牛皮杜鹃为母本，与迎红杜鹃、白花迎红杜鹃、亚布力杜鹃杂交有较高的亲和健。与母本的自然授粉坐果率无显著差异。分别为92．55锈、94．14％、92．42％，杂种胚的萌发率分别为13．60％、11．59％、4．12％：杂种苗生长势微弱，呈白化状态，有败育迹象，经继代堵养2～3次后，生长势得到一定的恢复，且分化率明显高于牛皮杜鹃种胚苗，但植株的颜色仍是黄绿色。而反交时，坐果率明显降低，坐果率最高的组合为亚布力杜鹃x牛皮杜鹃。为36.151％：与迎红杜鹃的杂交坐果率为6．52％；而与大字杜鹃的杂交坐果率为O，但反交时亚布力×牛皮杜鹃的种胚萌发率极显著地高于正交。为39．81％，而且种胚蒴生长健壮，无需继代，可直接进行炼茁移裁。

牛皮杜鹃组织培养初步研究

以牛皮杜鹃无菌苗为材料,分别对愈伤组织诱导培养基、生根壮苗培养基和移栽基质进行了筛选。结果表明:愈伤组织诱导效果最好的培养基为WPM+3mg/L IBA+8mg/L ZT(pH值5.2),白糖20g/L;最佳生根壮苗培养基为WPM+0.1mg/L NAA+1g/L AC+0.4 mg/L IBA;筛选出的最好移栽基质为苔藓土,成活率达94%。