SYBR-14/PI双染法流式细胞术检测精子质膜完整性的研究

目的:探讨应用荧光染料SYBR-14/碘化丙啶(SYBR-14/PI)双色标记法进行流式细胞术检测精子质膜完整性的可行性及其临床意义。方法:收集208例男性精液标本,按WHO精液分析标准分为正常组(n=31)与异常组(n=177)。通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析。精液标本洗涤处理后经SYBR-14/PI双染后上流式细胞仪(FCM)分析,用发绿色荧光精子百分率(SYBR-14+/PI-%)表示质膜完整精子(PMI)的比例。结果:正常组与异常组SYBR-14+/PI-与SYBR-14-/PI+精子百分率均存在统计学差异(P均<0.05)。正常组精子SYBR-14+/PI-%为(55.66±20.64)%,显著高于异常组[(39.71±19.21)%,P=0.000]。208例标本中,SYBR-14+/PI-%与精子活动率呈显著正相关(r=0.408,P=0.000),与(a+b)级精子百分率呈显著正相关(r=0.398,P=0.000),与d级精子百分率呈显著负相关(r=-0.413,P=0.000);SYBR-14-/PI+%与精子活动率呈显著负相关(r=-0.380,P=0.000),与(a+b)级精子百分率呈显著负相关(r=-0.397,P=0.000),与d级精子百分率呈显著正相关(r=0.385,P=0.000);SYBR-14+/PI+%与精子活动率呈正相关(r=0.172,P=0.013),与(a+b)级精子百分率呈正相关(r=0.177,P=0.011),与d级精子百分率呈负相关(r=-0.164,P=0.018)。结论:应用流式细胞术SYBR-14/PI双染法检测精子质膜完整性具有可行性,可用于评估男性生育力。

罗丹明/碘化吡啶双染法检测精子线粒体膜功能的研究

目的:探讨罗丹明/碘化吡啶(Rh123/PI)双染法检测精子线粒体膜功能的可行性及临床意义。方法:收集63例精液标本,按WHO精液分析标准分成正常组(n=31)与异常组(n=32)。精子用Rh123/PI染色,流式细胞仪(FCM)分析。结果:正常组与异常组精子Rh123+PI-、Rh123-/PI+、Rh123-/PI-百分率均存在统计学差异(P均<0.05);Rh123+PI-与精子活动率呈正相关(r=0.549,P=0.000),与(a+b)级精子百分率呈正相关(r=0.531,P=0.000),与d级精子百分率呈负相关(r=-0.586,P=0.000);Rh123-/PI+与精子活率负相关(r=-0.586,P=0.000),与(a+b)级精子百分率负相关(r=-0.594,P=0.000),与d级百分率精子正相关(r=0.585,P=0.000),Rh123-/PI-仅与异常组的密度有相关性(r=-0.563,P=0.001)。结论:运用Rh123/PI双染法鉴定精子的线粒体膜功能具有可行性,可用于评估男性生育力。