人类红细胞膜二氧化碳转运相关蛋白AQP-1和RhAG的研究

目的探讨人类红细胞膜上二氧化碳膜转运相关蛋白-水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP-1)和RhAG蛋白(Rh-associated glycoprotein,RhAG)在不同二氧化碳浓度下表达量的变化。方法采集新鲜人血抗凝,离心制备红细胞悬液,采用免疫组织化学、流式细胞仪及Western blot法检测在二氧化碳浓度为5%、10%、15%、20%及25%时人类红细胞膜上AQP-1和RhAG的表达情况。结果 AQP-1和Rh蛋白随不同浓度二氧化碳表达量发生了很大变化,其中,AQP-1在二氧化碳浓度为20%时达到高峰,二氧化碳浓度为10%、15%、20%、25%与5%的AQP-1的表达量相比明显增强(P<0.05)。10%、15%、25%浓度之间AQP-1的表达量无显著性差异(P>0.05)。RhAG的表达量在二氧化碳浓度为10%时达到高峰,且10%、15%、20%、25%与5%的二氧化碳浓度下RhAG的表达量相比显著增强(P<0.05)。二氧化碳浓度为10%、15%、20%、25%RhAG之间浓度相比无显著性差异(P>0.05)。结论 AQP-1和RhAG表达量随不同二氧化碳浓度的变化而变化,表明两者在二氧化碳跨膜转运过程中,可能在不同二氧化碳浓度下发挥转运蛋白质的功能。

新碱基缺失导致的Rh_(null)血型及家系分析

目的从基因学角度研究与探讨1例Rhnull血型的形成机制,同时研究其家族成员的Rh血型基因。方法通过血型血清学检测泰州市人民医院内科就诊的先证者的Rh血型表型,采用荧光PCR法进行RhCE基因分型,采用桑格法进行RhD、RhCE及RhAG外显子测序,然后分析先证者的Rhnull形成机制。作为对比,通过血型血清学检测先证者的姐姐和儿子的Rh血型表型,进行RhCE基因分型和RhD、RhCE、RhAG外显子测序。结果先证者的基因型结果为CcDEe,RhAG外显子测序结果为纯合型移码突变,突变位置在Exon 5,核苷酸改变为c.732delC,氨基酸改变为p.Phe245Serfs*16。先证者姐姐的血清学结果、基因分型和RhAG外显子测序结果及突变位置与先证者相同。其子的血清学结果为CCDee,基因型结果为CCDee,RhAG外显子测序结果为杂合型移码突变,与先证者一致。结论分析发现RhAG基因新的变异位点;此位点使得患者RhAG蛋白表达不完整,进而影响其他Rh抗原在细胞膜上的表达,致血清学结果为Rhnull。