HPLC同时测定山楂叶提取物中的5种主要成分

目的同时测定山楂叶提取物中2″-O-牡荆素葡萄糖苷（Glv）、2″-O-牡荆素鼠李糖苷（Rhv）、芦丁（Rut）、牡荆素（Vit）和金丝桃苷（Hps）的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为DiamonsilTMC18柱（200 mm×4.6 mm,5μm）,流动相A为甲醇,B为乙腈-四氢呋喃（1：19）,C为0.5%冰醋酸,梯度洗脱。0-15 min,流动相A由1%-21%,B由19%-21%;15-17 min,A由21%-65%,B保持5%;17-20 min,A由65%-1%,B由5%-19%;流速1.0 ml·min^-1;检测波长360 nm;柱温30℃。结果Glv、Rhv、Rut、Vit、Hps的平均加样回收率分别为99.72%、100.27%、99.48%、99.31%和100.83%,其RSD分别为1.26%、1.69%、1.61%、1.70%和1.31%（n=6）。结论所建方法简便、快速、准确、可靠,可用于山楂叶提取物的质量控制。

山楂叶总黄酮的在体肠吸收研究

目的:研究山楂叶总黄酮中牡荆素鼠李糖苷的肠吸收机制。方法:运用大鼠在体肠单向灌流模型并采用高效液相色谱法测定灌流液中山楂叶总黄酮中的牡荆素鼠李糖苷浓度,计算其有效渗透系数。结果:牡荆素鼠李糖苷在大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠的有效渗透系数没有显著性差异(P>0.05);山楂叶总黄酮的浓度为0.05～0.5mg/mL时,牡荆素鼠李糖苷的有效渗透系数均大于0.2×10-4cm/s,并且均无显著性差异(P>0.05),而加入P-糖蛋白抑制剂维拉帕米和地高辛后,都能显著提高牡荆素鼠李糖苷的有效渗透系数。结论:山楂叶总黄酮中的牡荆素鼠李糖苷属于高渗透性药物,其在大鼠小肠的转运机制为被动扩散,无特殊的吸收窗,P-糖蛋白介导了牡荆素鼠李糖苷的小肠吸收。

山楂叶总黄酮在大鼠体内的药动学研究

目的建立HPLC同时测定大鼠血浆中山楂叶总黄酮(HLF)的两个主要有效成分4″-O-牡荆素葡萄糖苷(GLV)和2″-O-牡荆素鼠李糖苷(RHV)的浓度,并用此方法对HLF在大鼠体内的药动学进行研究。方法大鼠尾静脉注射HLF,于不同时间点断尾取血,甲醇直接沉淀蛋白,HPLC测定GLV和RHV的血药浓度。色谱柱为DiamonsilTMC18(4.6mm×200mm,5μm),流动相为四氢呋喃-甲醇-乙腈-0.5%冰醋酸(19.4∶1∶1∶78.6),检测波长为330nm。结果样品中GLV和RHV被成功分离,线性范围分别为0.23~138.42mg.L-1(r=0.9990)和0.36~218.49mg.L-1(r=0.9995)。在测定浓度范围内,GLV和RHV的日内精密度(n=5)分别为0.69%~3.91%和0.51%~3.89%;日间精密度(n=5)分别为1.09%~5.03%和1.45%~2.16%;平均方法回收率(n=5)分别为(96.70±5.29)%^(102.20±1.15)%和(96.39±1.44)%^(103.64±2.23)%;平均提取回收率(n=5)分别为(92.68±2.19)%^(95.74±1.19)%和(93.45±1.85)%^(99.26±2.85)%。结论该分析方法简便快速,专属灵敏,精密度和回收率高,可满足药动学研究需要。静注HLF10~40mg.kg-1,GLV和RHV在大鼠体内药动学特征相似,均符合三室开放药动学模型。

鸡毛松化学成分的研究(Ⅱ)

从鸡毛松枝叶中分得５个化合物，２″Ｏ鼠李糖牡荆黄甙（Ⅰ），扁柏双黄酮（Ⅱ），蜕皮甾酮（Ⅲ），β谷甾醇十七碳酸酯（Ⅳ）和胡萝卜甙（ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ，Ⅴ）。其中Ⅰ～Ⅳ为首次从该种植物中得到。

HPLC测定益心酮滴丸中的黄酮苷

目的 :建立益心酮滴丸的含量测定方法。方法 :色谱柱AgilentZORBAXExtend -C18(4.6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,流动相四氢呋喃 甲醇 乙腈 水 醋酸 (30∶3∶4∶12 0∶3) ,检测波长 330nm。 结果 :牡荆素鼠李糖苷 (SZ 1)在0 .0 4 4～ 1.78μg(r=0 .9999) ,牡荆素葡萄糖苷 (SZ 2 )在 0 .0 4 2～ 0 .85 μg(r=0 .9999)线性关系良好 ,加样回收率分别为 10 0 .0 %和 99.2 % ,RSD分别为 0 .92 %和 1.8%。结论 :本方法可有效地控制益心酮滴丸的质量。

牡荆素鼠李糖苷的大鼠在体肠吸收动力学

目的研究牡荆素鼠李糖苷（RHV）的大鼠在体肠吸收动力学特征。方法采用HPLC法测定RHV在肠循环液中的药物浓度；采用UV法测定肠循环液中酚红浓度；以大鼠原位灌注模型考查RHV的肠吸收动力学情况。结果RHV浓度为20、10、5μg·ml^-1的吸收速率常数（Ka）分别为0．0416、0．0478、0．0312h^-1；肠循环液pH4、6、8时RHV的‰分别为0．0253、0．0478、0．0588h^-1；RHV在十二指肠、空肠、回肠和结肠时的Ka分别为0．0479、0．0308、0．0322、0．0305h^-1。结论RHV浓度对RHV的Ka无显著性影响；在pH4—8时，随肠循环液pH的增大，RHV的肠增加；RHV在大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收无显著性差异（P〉0．05）；RHV在大鼠肠道的吸收呈一级动力学过程，吸收机制为被动扩散。

牡荆素与牡荆素鼠李糖苷大鼠在体肠吸收对比研究

目的通过在体单向肠灌流实验比较牡荆素及牡荆素鼠李糖苷的肠吸收机制。方法运用大鼠在体单向肠灌流模型并采用HPLC测定肠灌流液中牡荆素及牡荆素鼠李糖苷的含量,计算其有效渗透系数。结果牡荆素及牡荆素鼠李糖苷浓度为80 mg·L-1时,同一时间点同一肠段牡荆素和牡荆素鼠李糖苷之间的有效渗透系数差异无显著性(P>0.05),同一时间点不同肠段(十二指肠、空肠、回肠、结肠)牡荆素和牡荆素鼠李糖苷的有效渗透系数均差异无显著性(P>0.05);牡荆素及牡荆素鼠李糖苷浓度为20、40、80、160 mg·L-1时,同一时间点同一浓度牡荆素和牡荆素鼠李糖苷之间的有效渗透系数差异无显著性(P>0.05),同一时间点不同浓度牡荆素和牡荆素鼠李糖苷的有效渗透系数均差异无显著性(P>0.05)。结论牡荆素及牡荆素鼠李糖苷在肠吸收方面两者不存在明显的差异,且在十二指肠、空肠、回肠和结肠段的吸收均较差,无特殊的吸收窗;不同浓度对牡荆素和牡荆素鼠李糖苷的吸收无明显的影响。

脉叶罗汉松化学成分的研究

从脉叶罗汉松(Podocarpus neriifolius D.Don)的枝叶中分离到11种化合物,根据光谱数据和物理常数测定,分别鉴定为正三十四烷醇(1)、β-谷甾醇硬脂酸酯(2)、β-谷甾醇(3)、金松双黄酮(sciadopitysin,3)、罗汉松双黄酮 B(podocarpusflavone B,12)、罗波斯塔黄酮-7″-甲醚(robustaflavone-7″-methyl ether,13)罗汉松双黄酮 A(podocarpusflaveone A,14)、罗波斯塔黄酮(robustaflavone,15)、对羟基苯甲酸(p-hydroxyl-benzoic acid,16)、2″-O-鼠李糖扫帚黄甙(2″-O-rhamnosylscoparin,23)和2″-O-鼠李糖牡荆黄甙(2″-O-rhamnosylvitexin,24)。其中,化合物23和24为首次从罗汉松科分得的化合物,化合物8、13和15首次从该植物分离到。

山楂叶总黄酮中不同极性成分磷脂复合物的表观油水分配系数研究

目的:探讨山楂叶总黄酮磷脂复合物提高总黄酮有效部位中不同极性成分的油水分配系数,从而改善口服生物利用度。方法:采用摇瓶法,运用HPLC测定山楂叶总黄酮中牡荆素鼠李糖苷、芦丁、槲皮素的含量,并计算山楂叶总黄酮、山楂叶总黄酮与磷脂的物理混合物以及山楂叶总黄酮磷脂复合物中此3种成分在正辛醇/水系统的表观油水分配系数。结果:山楂叶总黄酮磷脂复合物中牡荆素鼠李糖苷、芦丁、槲皮素3种成分的表观油水分配系数均高于山楂叶总黄酮、山楂叶总黄酮与磷脂的物理混合物中相应的成分。结论:对于含有不同极性成分的中药总黄酮有效部位,制备磷脂复合物可能是提高口服生物利用度的有效方法。

HPLC法同时测定山楂叶提取物中的7种主要成分

目的同时测定山楂叶提取物中牡荆素葡萄糖苷（I）、牡荆素鼠李糖苷（Ⅱ）、芦丁（Ⅲ）、牡荆素（IV）、金丝桃苷（V）、熊果酸（Ⅵ）和槲皮素（Ⅶ）的含量。方法采用HPLC法，色谱柱为Agilent ZORBAXSB—C18柱（5μm，4．6×250mm，柱号：880975—902）流动相A为1％冰醋酸水溶液，B为乙腈。梯度洗脱。0～5min，流动相A由95％～90％，B由5％～10％；5～15rain，A由90％～80％，B由10％～20％；15～35min，A由80％～0％，B由20％～100％；35～45rain，A0％，B100％，流速1．0mL·min^-1；检测波长0～20min，检测波长为360nm；20～30min，检测波长为220nm；30～45min，检测波长为360nm，参比波长均为385nm，柱温40℃。结果I～Ⅶ的平均加样回收率分别为99．87％、99．86％、101．23％、100．65％、101．58％、101．45％和98．37％，其RSD分别为1．26％、1．28％、1．35％、1．49％、1.32％、1．51％和1．44％（n=6）。结论该方法简便、快速、准确、可靠，可用于山楂叶提取物的质量控制。

HPLC法测定山楂叶提取物固体自乳化颗粒中牡荆素鼠李糖苷的含量

目的建立山楂叶提取物固体自乳化颗粒中牡荆素鼠李糖苷含量的测定方法。方法采用Diamonsil-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);四氢呋喃-甲醇-乙腈-2.8%冰醋酸(114:9:9:748)为流动相,检测波长为330 nm,流速为0.8 mL/min。结果牡荆素鼠李糖苷在19.8～198.0μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9994),平均回收率为100.98%,RSD为1.21%。结论该方法简便、准确、重复性好,为山楂叶提取物固体自乳化颗粒的质量控制提供参考。

一测多评法测定山楂叶提取物中4种成分的含量

目的:建立同时测定山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷、金丝桃苷、牡荆素含量的一测多评法。方法:以牡荆素葡萄糖苷为内标物,计算牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、牡荆素3个成分的相对校正因子,并将该方法的测量结果与传统外标曲线法的测定结果进行比较。结果:牡荆素葡萄糖苷与牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、牡荆素的相对校正因子分别为0.963、1.116、1.034;一测多评法与传统方法测定结果比较,牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、牡荆素的含量无明显差异。结论:经方法学验证,本研究建立的一测多评法可用于山楂叶提取物中4种成分含量的同时测定。

山楂叶总黄酮缓释胶囊稳定性研究

采用HPLC法,测定缓释胶囊中金丝桃苷与牡荆素鼠李糖苷的含量,释放度试验采用UV-Vis法测定溶出介质中总黄酮的含量。结果表明:高温和高湿条件下,放置10 d后胶囊体外释放度无明显变化,但胶囊壳变软,微丸有结块现象,且金丝桃苷与牡荆素鼠李糖苷含量均有明显下降;强光照射条件下,胶囊外观及释放度均无明显变化,但金丝桃苷与牡荆素鼠李糖苷含量均有明显下降。因此,建议选用避光、防潮包装材料,置干燥阴凉处保存。

不同厂家益心酮分散片中牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷含量测定

目的:测定不同企业益心酮分散片中荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷含量。方法:采用HPLC法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(5μm,4.6×250mm),流动相四氢呋喃-甲醇-乙腈-乙酸-水(38∶3∶3∶4∶152);检测波长为330nm。结果:荆素鼠李糖苷在41.57~623.55ng(r=0.9998),牡荆素葡萄糖苷118.74~1781.1ng(0.9999)线性关系良好,加样回收率分别为98.22%和100.18%,RSD分别为0.83%和0.86%。结论:不同厂家益心酮分散片中牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷的含量差异较大(RSD:25.30%、19.15%),本方法可为益心酮分散片的质量控制提供依据。

溶剂、内标物对牡荆素鼠李糖苷1H—NMR波谱图变化的影响

目的:考察氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)和氘代甲醇(CD3OD)为测试溶剂对牡荆素鼠李糖苷核磁共振氢谱(1H-NMR)的影响,为利用1H-NMR波谱法对山楂叶总黄酮中牡荆素鼠李糖苷进行定量分析方法的建立提供基础研究数据。方法:HPLC法测定牡荆素鼠李糖苷对照品纯度;1H-NMR波谱法测定牡荆素鼠李糖苷对照品在不同溶剂中,以及在含有牡荆素鼠李糖苷的山楂叶总黄酮中加入不同内标物的波谱图。结果:牡荆素鼠李糖苷在DMSO-d6和CD3OD中的1H-NMR波谱峰形完全不同。以DMSO-d6为溶剂时,与HPLC得到的结论一样,即牡荆素鼠李糖苷几乎为纯品;而以CD3OD为溶剂时,牡荆素鼠李糖苷由2个化合物组成。含有牡荆素鼠李糖苷的山楂叶总黄酮加入二氯甲烷、3-三甲基甲硅烷基-2,2,3,3-四氘代丙酸钠(TSP)作内标时,2个化合物相对含量比不同。结论:1H-NMR波谱法对不太复杂混合物的定量分析,尤其对于利用HPLC法难以分离的同分异构体混合物的定量分析具有突出优势;由于1H-NMR波谱法对成分进行定量时不需要对照品,所以该法适用于没有对照品或难以获得对照品的药物定量分析;但该法的分析结果受溶剂、内标物的影响较大。

牡荆素鼠李糖苷在Caco-2细胞模型中的跨膜转运研究

目的研究牡荆素鼠李糖苷(RHV)在Caco-2细胞模型中的跨膜转运机理。方法采用Caco-2细胞模型,考察不同浓度、不同吸收促进剂(十二烷基硫酸钠、牛胆盐)对RHV跨膜转运的影响。结果 RHV从肠腔侧到基底侧的转运与从基底侧到肠腔侧的转运相似,前者表观渗透系数随浓度的增大逐渐降低,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,加入吸收促进剂后,其表观渗透系数增大。结论 RHV在Caco-2细胞模型中主要表现为被动转运,十二烷基硫酸钠和牛胆盐都能增大RHV从肠腔侧到基底膜侧的转运量。

高效液相色谱法测定益心酮软胶囊中牡荆素鼠李糖苷的含量

目的:建立益心酮软胶囊中牡荆素鼠李糖苷的含量测定方法。方法:采用Shimadzu C18(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为四氢呋喃-甲醇-乙腈-水-乙酸(30∶3∶2∶120∶3),检测波长330 nm。结果:牡荆素鼠李糖苷在0.05～0.5 mg.mL-1之间线性良好,r=0.999 9;加样回收率为100.2%,RSD为1.70%(n=9)。结论:该方法重现性良好,结果准确可靠,可作为检测益心酮软胶囊质量的方法。

HPLC法测定山楂叶总黄酮磷脂复合物中牡荆素鼠李糖苷

目的建立山楂叶总黄酮磷脂复合物中牡荆素鼠李糖苷的HPLC测定方法。方法色谱柱为Zorbax SB C18柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱:0～5 min,5%～10%A;5～10 min,10%～18%A;10～30 min,18%A;体积流量1.0 mL/min,检测波长334 nm,柱温30℃。结果牡荆素鼠李糖苷在4.296～64.440μg/mL与峰面积值线性关系良好(r=1.000 0),平均回收率为100.83%,RSD为2.12%。结论建立的测定方法简便、准确、灵敏,可用于山楂叶总黄酮磷脂复合物中牡荆素鼠李糖苷的测定。