市售大黄、半夏、红花、茯苓掺伪的快速鉴别方法

目的:针对大黄、半夏、红花、茯苓等4种市售中药材和中药饮片容易出现假冒伪劣的现象,运用简单实用的真伪鉴定方法进行快速鉴别,准备应用于本科教学实验中,将极大地调动学生的学习兴趣,提高学生对常用中药材的真伪鉴别能力,又可以通过简单有效的真伪鉴定方法打击市场的掺伪品,保证临床使用安全有效。方法:采用性状、显微、理化、薄层鉴别等简单实用的真伪鉴定方法进行快速鉴别。结果:4种中药材和中药饮片及其伪品或掺伪品在显微特征、色谱行为、理化反应结果上有明显差别。结论:4种中药材和中药饮片掺伪严重,仅凭肉眼进行性状鉴定难以辨别,而用水试、显微鉴别、薄层鉴别等方法则较容易快速有效的区别。

指纹图谱、多成分定量与模式识别相结合的大黄质量评价

目的:建立指纹图谱、多成分定量与模式识别相结合的大黄质量评价方法。方法:高效液相色谱法测定9批饮片、2批药材共计11批大黄样品指纹图谱,建立指纹图谱共有模式,并对11批样品指纹图谱进行相似度评价,通过对照品比对指认部分成分,并测定样品中量,分别对指纹图谱及含量测定数据进行聚类分析和主成分分析。结果:11批样品指纹图谱标定了35个共有峰,指认了其中11个成分分别为2个鞣质单体(没食子酸和儿茶素)、4个结合型蒽醌(芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄酚-1-O-葡萄糖苷和大黄素-8-O-葡萄糖苷)和5个游离型蒽醌(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚);饮片中游离型蒽醌量占总蒽醌量的比例明显高于药材,指纹图谱相似度和聚类分析均可区分大黄饮片和药材;35个共有峰可分为两类,其中5个游离型蒽醌及没食子酸等8个成分为一类,4个结合型蒽醌及儿茶素等27个成分为另一类;9批饮片主成分综合得分与含量测定结果明显相关。结论:所建立的方法直观、简便、准确、可行,可用于全面评价大黄质量。

茵陈蒿汤HPLC指纹图谱研究及共有峰归属分析

目的建立茵陈蒿汤HPLC指纹图谱,并对其共有峰进行归属分析和指认。方法 Symmetry C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长238nm和440nm。测定10批茵陈蒿汤样品指纹图谱,建立共有模式,并进行相似度评价,通过与各组方药味及对照品保留时间和紫外光谱图比对,对共有峰进行归属分析和指认。结果 238nm和440nm下10批样品指纹图谱与共有模式的相似度分别≥0.931和0.951;238nm下标定共有峰56个,其中24个来源于大黄、27个来源于栀子、4个来源于茵陈、1个为栀子和茵陈共有。来源于大黄的10个成分被指认,另有8个和2个成分分别具有蒽醌类和儿茶素类化合物的紫外吸收特征;来源于栀子中的4个成分被指认,另外10个、1个和3个成分分别具有环烯醚萜类化合物、西红花酸类化合物和绿原酸类似物的紫外吸收特征;来源于茵陈和栀子共有成分被指认为绿原酸;来源于茵陈的2个成分具有绿原酸类似物的紫外吸收特征;440nm下标定共有峰32个,其中16个与238nm下为同一成分,另外16个新成分均来源于栀子,且均具有西红花酸类化合物的紫外吸收特征。结论该法建立的指纹图谱可较全面地对茵陈蒿汤进行成分分析,为该方剂质量控制提供了依据。

黑膏药疮疡膏工艺及质量标准研究

目的研究黑膏药疮疡膏的生产工艺及质量标准。方法采用薄层色谱对疮疡膏中大黄、白芷、川芎、当归、血竭进行定性鉴别，用软化点测定仪对软化点进行测定。结果改进疮疡膏的生产工艺，薄层色谱均检出大黄、白芷、川芎、当归、血竭特征斑点；软化点为60—70℃。结论实验对疮疡膏的质量分析提供了较全面的研究。工艺研究对血竭投料作了改进，建立的薄层色谱方法专属性强，重复性良好，可作为疮疡膏质量控制的质量标准。

附子大黄配伍减毒存效实验研究

目的观察附子配伍不同比例大黄对附子毒性和药效的影响。方法 ICR小鼠,40 mL·kg-1体质量灌胃给药,平行比较附子和附子配伍大黄的急性毒性,测定其半数致死量(LD50);SD大鼠10 mL·kg-1体质量灌胃给药,平行比较附子和附子配伍大黄的心脏毒性;采用高效液相色谱法测定附子与大黄配伍前后乌头类生物碱成分的含量;通过小鼠耳肿胀试验、醋酸扭体试验和回阳救逆试验考察附子配伍大黄对附子药效的影响。结果随着大黄配伍比例的增高,附子急性毒性LD50有增加趋势,大黄对附子心脏心律失常抑制率逐渐增大,附子配伍大黄后主要乌头类生物碱成分含量降低,但附子配伍大黄后对附子抗炎、镇痛和回阳救逆药效无明显影响。结论大黄对附子毒性具有剂量依赖性拮抗作用,大黄配伍附子在减轻附子毒性的同时不影响附子的药效,附子配伍大黄减毒时应该考虑大黄的配伍比例。

茵陈蒿汤不同方剂配伍对黄疸模型大鼠肝功能的影响比较

目的:比较茵陈蒿汤不同方剂配伍对黄疸模型大鼠肝功能的影响。方法:α-萘异硫氰酸酯(alphanaphthylisothiocyanate,ANIT)诱导大鼠黄疸模型,分别采用茵陈蒿汤及其各缺味方和单味药给大鼠灌胃治疗,胆总管插管收集胆汁,颈动脉取血并分离血清,检测胆汁中直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)和总胆红素(total bilirubin,TBIL)以及血清中TBIL、DBIL、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)含量。结果:全方组、单味大黄组、全方缺栀子组(大黄与茵陈配伍)各项指标均较模型组明显改善(P<0.01或P<0.05)。结论:茵陈蒿汤全方组方配伍合理,大黄在方中发挥主要作用,茵陈对大黄有协同作用。

活血祛瘀片中三七、大黄的薄层色谱鉴别

目的建立活血祛瘀片中主要成分的薄层色谱鉴别方法,为研究该复方制剂的质量标准提供依据。方法采用薄层色谱分析方法对该制剂中的三七、大黄等药材进行定性鉴别。结果各供试品色谱中,在与各自对照品色谱相同的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。结论该鉴别方法专属性强、重现性好、灵敏度高,可作为该制剂的质量控制方法之一。

黑顺片-大黄对药顺势给药和逆势给药对健康大鼠生理指标的影响

目的依据中医药的阴阳药性,探讨黑顺片-大黄对药顺势给药和逆势给药对健康大鼠生理指标的影响。方法选取无特定病原体级SD大鼠48只,随机分为顺势饲喂组、逆势饲喂组、混合饲喂组、对照组,每组12只,雌雄各半。对顺势饲喂组早上给予大黄中药配方颗粒溶液灌胃,下午给予黑顺片中药配方颗粒溶液灌胃;逆势饲喂组给药顺序与顺势饲喂组相反;给予混合饲喂组黑顺片中药配方颗粒和大黄中药配方颗粒混合溶液灌胃,分早晚两次给药;给予对照组早晚灌胃等量超纯水。4组均每周给药5 d,共给药6周。分别于饲喂第1天、第10天、第20天、第30天、第45天(给药6周后再观察3 d)时观察各组大鼠的皮肤毛发、行为状态、兴奋程度、激怒反应、睡眠状态、大便状态。分别于开始饲喂后第2周、第4周、第6周的周一、周三、周五测定大鼠的采食量和体重,饲喂第45天检测大鼠血液常规和血生化指标,计算脏器系数。结果实验期间,各组大鼠的皮肤毛发、行为状态、兴奋程度、激怒反应、睡眠状态、大便状态均未见明显改变。4组大鼠在各个阶段的日均采食量差异均无统计学意义,饲喂第2周、第4周,4组大鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。饲喂第6周,顺势饲喂组、混合饲喂组雌性大鼠的体重低于逆势饲喂组,而混合饲喂组、逆势饲喂组和顺势饲喂组雄性大鼠体重高于对照组(P<0.05)。饲喂第45天,4组雌性、雄性大鼠心、肝、肺、肾、胃脏器系数,白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、红细胞计数,以及血红蛋白、碱性磷酸酶、三酰甘油、尿素、空腹血糖、白蛋白、AST水平差异无统计学意义(P>0.05);逆势饲喂组雌性大鼠脾脏脏器系数高于对照组,顺势饲喂组和混合饲喂组雌性大鼠的单核细胞计数和嗜酸性粒细胞计数高于对照组,顺势饲喂组和混合饲喂组雄性大鼠的嗜酸性粒细胞计数低于对照组,混合饲喂组雄性大鼠血清总胆固醇水平高于对照组(P<0.05)。结论逆势给药可引起大鼠脾脏淤血,混合给药可引起大鼠血清总胆固醇水平升高,两者均可影响大鼠的体重,存在一定弊端,而顺势给药可以提高大鼠免疫系统的活力。

HPLC法测定复方珍珠暗疮片中大黄所含5种蒽醌苷元

建立复方珍珠暗疮片中大黄所含5种蒽醌苷元的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件为XBP-C18柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为226nm。结果:在一定质量范围内,5种蒽醌苷元的进样量与峰面积积分值线性关系良好;5种蒽醌苷元的平均回收率(n=6)分别为95.89%、96.11%、99.21%、98.38%、96.12%,RSD分别为1.92%、1.59%、1.02%、1.13%、2.18%。结论:该法简便、快速、准确可靠、专属性强,可用于复方珍珠暗疮片的质量控制。

基于网络药理学层面诠释大黄赤芍治疗肝性脑病的作用机制

目的基于网络药理学方法分析大黄-赤芍治疗肝性脑病(hepatic encephalopathy,HE)的分子生物学作用机制。方法利用TCMSP、BATMAN数据库筛选出大黄赤芍的作用靶点,利用Genecard和DisGenet数据库筛选出HE的疾病作用相关靶点。利用STRING数据库进行蛋白互作网络分析,利用Cytoscape构建蛋白相互作用网络,利用David数据库进行GO分析,利用KEGG进行信号通路富集分析,利用iGEMDOCK软件进行分子对接来预测大黄赤芍对HE作用靶点的结合性。结果研究共筛选出大黄赤芍的潜在靶点119个,肝性脑病的相关潜在靶点1345个,大黄赤芍-肝性脑病的交集靶基因45个,信号通路23条,涉及15个生物学过程、9种分子功能、10个细胞组分。结论大黄赤芍治疗HE具有"多靶点-多通路-多作用"的特性,其作用机制可能是通过促进肝细胞增殖分化、降低肝细胞凋亡、抑制炎症反应、调控氧化应激等过程发挥对HE的治疗作用。

妇阴康洗剂质量标准研究

目的测定本院医院制剂妇阴康洗剂中绿原酸、盐酸小檗碱、丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量,建立其质量标准。方法应用显微镜对处方中金银花、大黄的主要显微特征进行鉴别;采用TLC法对方内主药大黄、黄柏、丹参和连翘进行鉴别;同时借助HPLC法对妇阴康洗剂中绿原酸、盐酸小檗碱、丹参酮ⅡA和丹酚酸B成分进行含量测定。结果方中金银花、大黄的主要显微特征明显;TLC图谱中呈现出大黄、黄柏、丹参和连翘的特征性斑点;绿原酸在0.068~0.680μg与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999,平均加样回收率为101.5%,RSD=0.35%(n=6)。盐酸小檗碱在0.104~0.626μg与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9998,平均加样回收率为100.4%,RSD=0.43%(n=6)。丹参酮ⅡA在0.069~0.756μg与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9994,平均加样回收率为99.9%,RSD=0.51%(n=6)。丹酚酸B在0.042~0.459μg与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999,平均加样回收率为100.2%,RSD=0.64%(n=6)。结论本方法可行,重复性好,可以作为妇阴康洗剂质量控制的标准,为本院制剂定性定量方法研究提供了科学依据。

生大黄联合芒硝外敷治疗急性胰腺炎腹胀护理研究

目的:观察生大黄联合芒硝外敷治疗急性胰腺炎腹胀的护理效果。方法:将89例急性胰腺炎患者,依据随机数字表法将其分为2组,对照组44例予以常规对症治疗,观察组45例在对照组的基础上予以生大黄联合芒硝外敷治疗。对比2组干预前后腹胀积分、腹内压变化情况以及干预后腹痛缓解时间,肠鸣音、排气恢复时间,肛门首次排便和平均住院时间。结果:观察组治疗1 d、7 d及14 d,腹胀积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗1 d、7 d及14 d,腹内压低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组干预后,腹痛缓解时间、肠鸣音恢复时间、排气恢复时间、肛门首次排便时间及平均住院时间低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:生大黄联合芒硝外敷及护理可以有效改善急性胰腺炎患者腹胀、腹痛症状,降低腹内压,缩短肠鸣音和排气恢复时间、肛门首次排便时间和平均住院时间。

基于高效液相色谱法同步测定药对大黄-黄芪胶囊主要蒽醌类成分的含量

目的建立同步测定药对大黄-黄芪胶囊主要蒽醌类成分含量的高效液相色谱法(HPLC)。方法采用HPLC检测药对大黄-黄芪胶囊中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚的含量。色谱条件:Supersil ODS2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温35℃,流动相为甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B),流速1.0 mL/min,梯度洗脱方式为0~70 min(50%~75%A)、70~90 min(75%A),流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm。在上述色谱条件下进行专属性试验、线性关系考察、仪器精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收试验及样品含量测定。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚的浓度分别为0.25~36.25 mg/mL(R=0.9908),0.50~53.50 mg/mL(R=0.9942)、0.25~45.00 mg/mL(R=0.9912)、0.50~62.00 mg/mL(R=0.9937),浓度与峰面积呈良好的线性关系。仪器精密度试验、稳定性试验、重复性试验的相对标准偏差(RSD)均<3%。4种蒽醌类成分的平均回收率为98.97%~102.45%,RSD为0.26%~3.92%。芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚的含量分别为(0.821±0.062)mg/g、(1.753±0.159)mg/g、(1.303±0.109)mg/g、(2.909±0.251)mg/g。结论采用HPLC同步检测药对大黄-黄芪胶囊中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚的含量,结果准确可靠、操作简便、重复性好,可用于大黄药材及其复方制剂药对大黄-黄芪胶囊主要蒽醌类成分的含量测定。

正交设计试验法优化“金圣香”中药复方的提取工艺研究

目的:优化"金圣香"中药复方的提取工艺条件。方法:采用正交设计试验法。结果:影响浸提效果的因素主次为混合溶剂(种类)(A)(回流温度(C)(回流时间(B),混合溶剂(种类)(A)因素有极显著影响,回流温度(C)因素有显著影响,最佳提取条件为A3C3B1,即采用20倍量混合溶剂AⅢ,65℃回流提取2次,每次4h。结论:按正交设计试验法优化的工艺条件提取"金圣香"中药复方,工艺可行,浸膏质量稳定。

指纹图谱与一测多评法相结合的大黄质量控制方法

目的 建立指纹图谱及一测多评法同时测定8个成分含量的大黄质量控制方法。方法 高效液相色谱法,采用Symmetry C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱;流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱,流速1 m L·min-1;柱温30℃;检测波长254nm。测定11批大黄样品的指纹图谱,建立指纹图谱共有模式。以大黄酸为内参物,建立没食子酸、儿茶素、大黄素-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚与内参物的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评。同时采用外标法测定11批大黄中8个成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证一测多评法的准确性。结果 11批样品指纹图谱标定了共有峰35个,指认了其中8个成分分别为没食子酸、儿茶素、大黄素-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚,这8个成分分别在0.062 4~1.56μg（r=0.999 5）、0.18~4.5μg（r=0.999 8）、0.028 8~0.72μg（r=0.999 9）、0.019 8~0.495μg（r=0.999 9）、0.050 5~1.262 5μg（r=0.999 9）、0.063 7~1.592 5μg（r=0.999 9）、0.098~2.45μg（r=0.999 9）和0.163~4.075μg（r=0.999 9）内线性关系良好。建立的相对校正因子重现性良好,采用校正因子计算的含量值与实测值之间无显著差异。结论 所建立的方法准确、可行,可用于大黄质量控制。

HPLC法同时测定大黄中芦荟大黄素等11种成分的量

目的建立HPLC法同时测定大黄中5种游离型蒽醌（芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚）、4种结合型蒽醌（芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄酚-1-O-葡萄糖苷和大黄素-8-O-葡萄糖苷）及没食子酸、儿茶素共计11种成分的定量方法。方法采用Symmetry C18色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长254 nm。结果没食子酸、儿茶素、芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄酚-1-O-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚分别在0.062 4～1.560 0、0.180 0～4.500 0、0.041 2～1.030 0、0.030 6～0.765 0、0.051 0～1.275 0、0.028 8～0.720 0、0.019 8～0.495 0、0.050 5～1.262 5、0.063 7～1.592 5、0.098 0～2.450 0和0.163 0～4.075 0μg进样量与峰面积积分值线性关系良好（r≥0.999 5）,平均加样回收率为95.37%～98.93%,RSD〈2.36%。结论该法简便、准确、专属性强,可用于大黄中11种成分的测定。

肝郁脾虚型大鼠肠易激综合征模型的建立及评价

目的:采用大黄结合夹尾应激法、番泻叶结合束缚应激法建立肝郁脾虚型大鼠肠易激综合征模型以及对模型进行评价。方法:将大鼠随机分为3组:空白对照组(K),大黄结合夹尾组(D+J),番泻叶结合束缚组(F+S),连续造模7 d,造模前禁食12 h,K组每只大鼠灌胃生理盐水2 mL,D+J组ig 20 g.kg-1(1 g.mL-1)大黄煎煮液,F+S组ig番泻叶煎煮液5.76g.kg-1(0.36 g.mL-1)。观察其一般行为活动、体重变化及排便情况等,造模结束后,评价其一定时间的粪点数及给药后开始排便的时间。结果:D+J,F+S组均有不成形的稀便而空白对照组无稀便;K,D+J,F+S组体重增长率分别为30.24%,11.59%,11.32%;给药后开始排稀便所经历的时间分别为222.91,182.61,162.36 min;造模结束后10 d 5 h的粪点数分别为4.5,7.68,8.71;24 h粪点数分别为37.14,43.49,45.54。与空白对照组比,模型组体重增长率、开始排便时间以及5,24 h内粪点数均有显著性差异(P<0.05),尤其以F+S组最为明显结论:大黄结合夹尾、番泻叶结合束缚均能成功造成腹泻型肠易激综合征模型。

基于方剂配伍含药血清“谱-效关系”的茵陈蒿汤保肝作用药效物质研究

目的：初步阐明茵陈蒿汤保肝作用的药效物质。方法：SD大鼠灌胃制备茵陈蒿汤及其各单味药、各缺味方含药血清,一方面采用已建立的方法测定不同方剂配伍含药血清HPLC指纹图谱;另一方面建立H2O2诱导的HL-7702肝细胞损伤模型,并对不同方剂配伍含药血清进行保肝作用药效评价,最后分别采用双变量相关性分析和多元回归分析,指认含药血清指纹图谱中与药效相关的色谱峰。结果：茵陈蒿汤含药血清指纹图谱中6号峰与肝细胞保护作用明显相关,1~6,8,9,11,20号峰与肝细胞保护作用有一定关系。结论：茵陈蒿汤保肝作用的药效物质主要包括来源于大黄的蒽醌类成分及体内代谢产物、来源于栀子的环烯醚萜类成分及体内代谢产物和西红花酸类成分体内代谢产物,其中1个蒽醌类成分体内代谢产物活性较强。

茵陈蒿汤含药血清指纹图谱研究

目的建立茵陈蒿汤(Yinchenhao Decoction,YCHD)含药血清指纹图谱,并对含药血清中药源性成分进行分析。方法高效液相色谱法,采用Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,Security Guard Cartridges C18(4.0 mm×3.0 mm)保护柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,流速1 m L·min-1,柱温30℃,检测波长238和440 nm;以SD大鼠为供体,灌胃给药制备10批茵陈蒿汤含药血清,测定含药血清指纹图谱,建立指纹图谱共有模式,并进行相似度评价;与空白血清指纹图谱比对,指认含药血清中的药源性成分;与各单味药含药血清指纹图谱比对,分析各药源性成分来源;与体外指纹图谱、对照品指纹图谱色谱峰保留时间及紫外光谱图比对,对各药源性成分进行鉴别。结果 238 nm和440 nm下10批茵陈蒿汤含药血清指纹图谱与共有模式的相似度分别≥0.904和0.903;两个波长下茵陈蒿汤含药血清指纹图谱标定药源性成分共有峰20个,其中6个为体外原形成分,14个为体内代谢产物;6个原形成分中的3个分别为来源于栀子的环烯醚萜类成分京尼平苷酸、栀子苷和来源于大黄的蒽醌类成分大黄酸,另外3个中的1个为来源于大黄的蒽醌类成分,2个为来源于栀子的西红花酸类成分;14个代谢产物中的1个为环烯醚萜类成分代谢产物,4个为蒽醌类成分代谢产物,9个为西红花酸类成分代谢产物。结论本实验建立的方法准确、可靠,可用于茵陈蒿汤含药血清中药源性成分分析。

抗菌消炎胶囊质量标准研究

目的:建立抗菌消炎胶囊质量标准。方法:采用薄层色谱法对处方中的百部、大黄进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定该制剂中黄芩苷含量。结果:TLC鉴别分离度好,阴性对照无干扰。黄芩苷与样品中其他组分分离效果较好,Y=43 887 599.5X-4 893.8,线性范围0.01～0.16 g.L-1(r=0.999 9),平均回收率为98.56%,RSD为1.01%(n=6)。结论:建立的质量标准,简便易行,可用于抗菌消炎胶囊的质量控制。