HPLC法测定骨伤跌打康复凝胶贴膏剂中7种成分含量

目的 建立测定骨伤跌打康复凝胶贴膏剂中7种主要成分质量分数的HPLC法。方法 色谱柱为Agilent ZORBA×SB-C18S tableBond Analytical柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);测定波长为290 nm,流动相为乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;柱温为35℃;进样量为10μL。结果 骨伤跌打康复凝胶贴膏剂中的原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、盐酸小檗碱、大黄酸、大黄素、大黄酚7种主要有效成分在浓度线性范围内与色谱峰面积的标准曲线线性关系良好;原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、盐酸小檗碱、大黄酸、大黄素、大黄酚的平均回收率分别为93.79%、95.86%、96.12%、95.31%、96.58%、107.43%、97.12%,7种成分的平均回收率均在93.79%~107.43%范围内。结论 建立的方法适合作为骨伤跌打康复凝胶贴膏剂质量控制的方法。

大黄酰氨基酰胺类衍生物的合成及其抗菌活性

为改善大黄酸的理化性质及抗菌活性,对大黄酸结构进行改造。以大黄酸为原料,苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)为缩合剂、 N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)为催化剂,分别与L-脯氨酸甲酯盐酸盐、L-色氨酸甲酯盐酸盐和L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐反应,再加入取代苄胺,合成了6个目标化合物4a~4f。利用核磁共振(~1H NMR、^(13)C NMR、^(19)F NMR)及高分辨质谱对目标化合物结构进行确证和表征,并首次探讨了该类化合物对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌的抑菌活性。研究结果表明:部分目标化合物具有较好的抑菌活性,其中化合物4a对金黄色葡萄球菌的最低抑制质量浓度(MIC)值为0.78 mg/L,化合物4e对普通变形杆菌的MIC值为0.39 mg/L,抑菌活性优于大黄酸,甚至优于对照药物氨苄西林。

基于信息熵理论的正交试验优选加味桃核承气汤提取工艺

目的:优化加味桃核承气汤的提取工艺。方法:以阿魏酸、甘草酸、大黄酸的含量,提取液的出膏率及指纹图谱相似度作为评价指标设计正交试验,考察加水量、提取时间、提取次数对提取工艺的影响,运用信息熵赋权法确定各指标的权重系数,实现对加味桃核承气汤提取工艺的优选。结果:最终优选出加味桃核承气汤的提取工艺为提取2次,首次加7.2倍量水,浸泡1 h,提取0.5 h;第2次加6倍量水,提取0.5 h。结论:以正交试验结合信息熵权理论优选出的提取工艺稳定、可行,可为加味桃核承气汤后续的研究提供参考。

果胶和透明质酸层层修饰的β-乳球蛋白包载大黄酸纳米粒的制备及其表征

目的:制备可口服靶向递送的多糖-蛋白质复合大黄酸纳米粒(P-HA/PEI-RHNPs),改善溶解度,提高生物利用度。方法:以β-乳球蛋白(BLG)为纳米载体,负载大黄酸(RH),然后通过静电吸附作用将透明质酸(HA)和果胶(P)逐步包覆于BLG表面,制备P-HA/PEI-RHNPs,并对其进行理化性质表征。结果:激光粒度分析仪,透射电镜和高效液相色谱分析结果表明,P-HA/PEI-RHNPs粒径分布均匀,具有良好的分散性和载药性能;X射线衍射图谱和傅里叶红外光谱表明RH有效包裹在载体内部,P-HA/PEI-RHNPs被成功制备;激光共聚焦显微镜可视化图像表明,HA/PEI-RHNPs具备一定的巨噬细胞靶向性。结论:P-HA/PEI-RHNPs是一种优良的纳米载药粒子,可有效改善RH溶解度和生物利用度,为RH的临床应用提供一定的理论依据。

18β-甘草酸对大黄酸在大鼠体内药物动力学的影响

目的研究18β-甘草酸对大黄酸在大鼠体内药物动力学的影响。方法大鼠分别灌服大黄酸和甘草酸+大黄酸,高效液相色谱法测定大黄酸的血药浓度。色谱柱为Zorbox SB C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(77∶22∶1);检测波长为428nm;流速为1.0mL·min-1;柱温为室温。血药浓度数据采用3P97药物动力学软件进行分析。结果大黄酸血药浓度在0.1～15μg.mL-1范围线性关系良好。大鼠灌服大黄酸和甘草酸+大黄酸后,大黄酸血浆浓度-时间曲线均符合二房室模型。灌服大黄酸组和甘草酸+大黄酸组相比较,两者的AUC、Cmax,均存在显著性差异(P<0.05)。结论 18β-甘草酸可影响大黄酸在大鼠体内的药物动力学过程,使大黄酸在大鼠体内的血药浓度和生物利用度降低。

HPLC法测定大黄虫胶囊中大黄酸的含量

用高效液相色谱法对大黄虫胶囊中大黄酸进行了含量测定，采用ＹＷＧ－Ｃ１８（５μｍ）４６ｍｍ×２５０ｍｍ色谱柱，以甲醇—水—冰醋酸（３３０∶１７０∶５）为流动相，检测波长２５４ｎｍ，柱温４０℃，本方法回收率为９７９５％，ＲＳＤ为２８３％，是一种简便、快速、准确的测定方法。

UPLC-MS/MS法同时测定苦黄注射液中7种成分的含量

目的:建立同时测定苦黄注射液中苦参碱、槐果碱、大黄素、大黄酸、绿原酸、柴胡皂苷a、芦荟大黄素含量的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。色谱柱为Phenomenex Kinetex C_(18),流动相为甲醇-0.1%甲酸(梯度洗脱),流速为0.5 mL/min,柱温为20℃,进样器温度为10℃,平衡时间为4 min,进样量为5μL。离子化模式为电喷雾电离,源喷射电压分别为5 500、-4 500 V,雾化气压力为4.14×10~5Pa,加热气压力为4.48×10~5Pa,帘气压力为1.72×10~5Pa,离子源温度为600℃,工作模式为多反应监测模式。结果:苦参碱、槐果碱、大黄素、大黄酸、绿原酸、柴胡皂苷a、芦荟大黄素检测质量浓度线性范围分别为1.25~80.0 ng/mL(r=0.999 3)、1.10~70.0 ng/mL(r=0.999 5)、0.16~10.5 ng/mL(r=0.999 3)、2.61~168 ng/mL(r=0.999 3)、1.50~96.0 ng/mL(r=0.999 3)、1.48~94.5 ng/mL(r=0.999 6)、6.11~391 ng/mL(r=0.999 1);定量限分别为0.061、0.109、0.041、1.313、0.500、0.492、3.055 ng/mL,检测限分别为0.025、0.054、0.016、0.656、0.150、0.148、1.528 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤3%;加样回收率分别为95.45%~99.45%(RSD=1.43%,n=6)、97.50%~101.00%(RSD=1.50%,n=6)、95.67%~101.73%(RSD=2.85%,n=6)、97.17%~100.57%(RSD=1.16%,n=6)、95.19%~98.90%(RSD=1.71%,n=6)、95.38%~103.85%(RSD=3.39%,n=6)、95.50%~101.17%(RSD=1.20%,n=6)。结论:该方法简便、高效、准确、可靠,适用于同时测定苦黄注射液中7种有效成分的含量。

高效毛细管电泳法测定生发灵酊中阿魏酸和大黄酸的含量

目的:测定生发灵酊(当归、红花、何首乌等)中阿魏酸和大黄酸的含量.方法:高效毛细管电泳法.毛细管(60cm×75μm,有效长度53cm);运行缓冲液30mmol·L-1硼砂(pH 8.2),高压进样5s,分离电压12kV,温度为25℃,检测波长为313nm,咖啡酸为内标.结果:阿魏酸在2.4～12μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为99.06%.大黄酸在1.6～8μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 6),平均回收率为98.94%.结论:本法简单、快捷、灵敏.

高效液相色谱法测定金振口服液中6种成分含量

目的建立测定金振口服液中黄芩苷、芦荟大黄素、大黄酸、甘草酸、大黄素和大黄酚6种成分含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Phenomenex C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温为30℃,波长切换时间序列采样(黄芩苷0~15.0 min、280 nm,芦荟大黄素、大黄酸15.0~35.0 min、254 nm,甘草酸35.0~39.8 min、237 nm,大黄素、大黄酚39.8~50.0 min、254 nm)。结果黄芩苷、芦荟大黄素、大黄酸、甘草酸、大黄素和大黄酚进样量分别在0.043 2~2.162 5μg,0.012 8~0.638 0μg,0.018 5~0.926 0μg,0.035 8~1.792 5μg,0.049 8~2.488 0μg,0.052 9~2.643 5μg范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为98.84%,99.49%,99.89%,100.31%,99.55%,99.54%,RSD分别为1.10%,1.03%,1.49%,1.23%,0.98%,1.19%(n=9)。结论该方法简单快捷,准确可靠,可用于金振口服液的质量控制。

大黄酚和大黄酸的合成

以3-硝基邻苯二甲酸为原料,经脱水、傅克酰基化、还原、重氮化、水解和环合反应合成了大黄酚(6),总收率40.4%。6再经乙酰化、氧化、脱乙酰化反应合成了大黄酸(8),总收率22.3%。6和8的结构经1H NMR表征。

雷公藤红素联合用药对HepG2细胞增殖的抑制作用

研究雷公藤红素分别与甘草次酸、紫杉醇、大黄酸联合用药对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用。采用MTT法,测定并计算雷公藤红素分别与甘草次酸、紫杉醇、大黄酸联用后HepG2细胞的存活率,利用协同指数(CI)、金氏公式判定协同药效。同时检测细胞凋亡情况以及细胞周期阻滞情况。结果表明,单独应用雷公藤红素、甘草次酸、大黄酸、紫杉醇均可抑制HepG2细胞增殖;雷公藤红素分别与甘草次酸、紫杉醇、大黄酸联用,能显著增强雷公藤红素对HepG2细胞增殖抑制效果,联合用药在一定浓度范围内呈现良好协同作用;联合用药使HepG2细胞凋亡率显著提高(P<0.01),并使更多HepG2细胞阻滞于G2/M期。雷公藤红素与甘草次酸、紫杉醇、大黄酸联用对HepG2细胞的增殖具有良好的协同抑制效果,其与共同诱导凋亡及增加细胞G2/M期阻滞相关。

刺人参茎化学成分的研究

目的研究刺人参茎的化学成分。方法采用了各种层析分析分离技术,分得单体,经理化常数和光谱解析确定其结构。结果从刺人参茎中分离得到了6种化合物,分别鉴定为3-O-咖啡酰奎宁酸(A)、1-O-咖啡酰奎宁酸(B)、大黄酸(C)、紫丁香苷(D)、蔗糖(E)、葡萄糖(F)。结论3-O-咖啡酰奎宁酸、1-O-咖啡酰奎宁酸、大黄酸均为同属植物中首次分离。

反相高效液相色谱法测定大黄及其制剂中大黄酸的含量

目的 建立一种大黄及其制剂中大黄酸含量测定方法—反相高效液相色谱法。方法 固定相为Spkerisorb C1 8柱 (4 .6 mm× 2 5 0 mm ,5μm) ,流动相为甲醇 -水 -冰醋酸 (6 8.5∶ 31∶ 0 5 )检测波长为 2 5 4 nm。结果 方法线性范围 0 .1～ 1.0μg (r=0 .9993) ,平均回收率为 96 .8 ,RSD=1.13 (n=5 )。结论 该法简便、准确、灵敏度高、重复性好 ,可作为该制剂的含量测定方法。

大黄酸对马兜铃酸A引起的斑马鱼肾脏损伤的保护作用

目的观察大黄酸在马兜铃酸A引起的斑马鱼肾脏损伤中的作用。方法将肾脏发育完成的斑马鱼仔鱼(4dpf)用马兜铃酸A处理24 h,造成马兜铃酸肾病模型,同时加入大黄酸处理,然后观察仔鱼的表型变化情况,并用肌酐检测试剂盒测定仔鱼组织中的肌酐含量,利用q PCR对仔鱼组织中的炎性相关因子(cox2a)和致纤维化因子(TGFβ-1)进行定量检测。结果马兜铃酸A处理24h后,部分仔鱼出现眼周水肿及血循环系统异常,表现为心跳微弱,心腔缩小,血流缓慢甚至停滞,发生率具有剂量相关性,马兜铃酸处理组仔鱼组织中的肌酐含量比对照组明显升高,cox2a和TGFβ-1表达量也比对照组明显上升,同时加入大黄酸能降低异常仔鱼所占比例,降低组织肌酐含量,并下调cox2a的表达,但对马兜铃酸引起的TGFβ-1的上升无影响。结论大黄酸对马兜铃酸引起的斑马鱼肾脏损伤有一定的保护作用。

小承气汤中肉桂酸和大黄酸的含量测定

目的建立小承气汤中肉桂酸和大黄酸的HPLC含量测定方法。方法采用Apollo C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈和0.011%冰乙酸溶液,梯度洗脱,时间20 min,流速1 ml/min,检测波长为254 nm。结果肉桂酸和大黄酸的线性范围分别为0.07－0.40μg和0.48－1.92μg,精密度为0.22%和0.19%,平均回收率分别为97.3%和96.9%。结论建立的方法简便、灵敏、准确,可用于小承气汤的质量控制。

HPLC法同时测定复方消痔栓中3种成分的含量

目的：建立同时测定复方消痔栓中没食子酸、大黄酸和大黄素含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18,流动相为0.5%磷酸-乙腈（梯度洗脱）,流速为1.0 ml/min,检测波长为273 nm（没食子酸）、254 nm（大黄酸和大黄素）,柱温为28℃,进样量为20μl。结果：没食子酸、大黄酸、大黄素的检测质量浓度线性范围分别为0.296 4-14.82、0.215 0-10.75、0.307 2-15.36μg/ml（r=0.999 6、0.999 9、0.999 9）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈3.0%;加样回收率分别为95.1%-97.2%、95.4%-97.2%、96.5%-99.4%,RSD分别为0.64%、0.42%、1.10%（n=6）。结论：该方法操作简便、结果准确,可用于复方消痔栓中没食子酸、大黄酸和大黄素含量的同时测定。

妇舒保凝胶的质量标准研究

目的建立妇舒保凝胶的质量标准。方法 TLC法用于鉴别黄柏、苦参、大黄;采用HPLC法测定处方中大黄的主要成分大黄酸、大黄素甲醚和黄柏的主要成分盐酸小檗碱的含量。结果黄柏、苦参、大黄的薄层斑点清晰,阴性无干扰;大黄酸、大黄素甲醚、盐酸小檗碱分别在5~30、4.19~25.14、14.58~174.99μg/mL范围内线性关系良好,含量分别为0.0277、0.0249、8.709 mg/g,方法加样回收率分别为98.37%、98.1%、97.9%。结论本试验结果可靠,方法可行,可作为妇舒保凝胶的质量控制方法。

波长切换HPLC法同时测定元和正胃片中5种成分的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定元和正胃片中龙胆苦苷、甘草苷、甘草酸、芦荟大黄素、大黄酸5种成分的含量。方法采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm)进行分离;流动相为乙腈(A)-体积分数0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1;检测波长为0～35 min、276 nm,35～61 min、254 nm;柱温30℃。结果龙胆苦苷、甘草苷、甘草酸、芦荟大黄素、大黄酸质量浓度分别在29.4～294 mg·L-1(r=0.999 5,n=6)、4.35～43.5 mg·L-1(r=0.999 3,n=6)、8.25～82.5 mg·L-1(r=0.999 7,n=6)、1.27～12.7 mg·L-1(r=0.999 3,n=6)、0.68～6.8 mg·L-1(r=0.999 7,n=6)内与峰面积呈良好的线性关系,方法的平均回收率分别为99.5%(RSD=1.6%)、100.1%(RSD=1.4%)、99.4%(RSD=1.5%)、98.9%(RSD=1.1%)和99.4%(RSD=1.5%)。结论该方法简便、准确、重现性好、专属性强,可用于元和正胃片的质量控制。

退黄丸的质量标准研究

目的建立退黄丸(绵茵陈、栀子、葛根、大黄、赤芍、秦皮等)的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC)鉴别成方制剂中大黄、葛根、赤芍、秦皮,以高效液相色谱法同时测定制剂中绿原酸和栀子苷,分别测定葛根素、芍药苷、大黄酸、秦皮甲素和秦皮乙素,流动相分别为甲醇和0.05%磷酸水、甲醇和水、甲醇和0.05mol/L磷酸二氢钾水溶液、甲醇和0.1%磷酸水、乙腈和0.1%磷酸水;检测波长分别为245 nm、250nm、230nm、254nm、334nm;所用色谱柱均为C18。结果 TLC可明显鉴别大黄、葛根、赤芍、秦皮。绿原酸、栀子苷、葛根素、芍药苷、大黄酸、秦皮甲素和秦皮乙素线性范围分别为0.0252～0.126 mg/mL、0.02632～0.1316 mg/mL、0.010 00～0.05000 mg/mL、0.010 68～0.05340mg/mL、0.00344～0.017 20mg/mL、0.00248～0.024 8 mg/mL、0.004 2～0.042 0 mg/mL;r值分别为0.99995、0.999 95、1.000 0、0.9997、1.000 0、1.0000、0.9997,平均回收率分别为98.80%、99.38%、99.12%、98.70%、98.72%、100.71%、98.85%;RSD分别为1.18%、0.95%、1.56%、2.11%、1.65%、0.65%、2.01%(n=6)。结论本试验定量方法操作简便,准确,重复性良好,可用于控制退黄丸的质量。

高效液相色谱法测定常通口服液中大黄酸的含量

目的建立常通口服液中大黄酸的含量测定方法。方法高效相色谱法,十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液64:36,检测波长为230nm。结果方法线性关系良好,平均加样回收率98.84%,RDS为0.71%。结论方法简便可靠,精密度高,分离度好,可用于常通口服液的质量控制。