“莱茵模式”发展现状研究

莱茵模式"是当今世界资本主义主要发展模式之一。本文重点研究莱茵模式(主要以德国为例)的产生背景及其发展变化过程,阐述在全球化、信息化背景下莱茵模式国家所面临的挑战和问题,分析在当前全球经济危机下莱茵模式所做的相应的调整和改革,并总结莱茵模式的经验及其启示。

大黄酸与大黄建立大鼠“泻剂结肠”模型的比较

目的:应用大黄酸及大黄建立大鼠泻剂结肠模型,二者进行比较,寻找一种简单、稳定的建立泻剂结肠动物模型的药物.方法:健康3-4周龄Wistar大鼠33只,均分为对照组、大黄组、大黄酸.对照组给予生理盐水灌胃;大黄组给予大黄粉悬液灌胃;大黄酸组给予大黄酸粉悬液灌胃.造模完成后采用活性炭悬液推进法测定大鼠肠道传输功能.结果:大黄组、大黄酸组造模时间分别为136d和114 d;大黄组及大黄酸组大鼠活性炭末推进长度及推进率较对照组明显缩短.大黄酸组造模过程中大鼠稀便稳定,且给药剂量及造模周期同参考文献报道一致.结论:大黄及大黄酸均可成功建立大鼠泻剂结肠模型,但作为单体大黄酸药效更稳定,浓度易于控制,且造模时间相对较短,故作为造模药物,效果优于大黄.

赖氨大黄酸对D-半乳糖致衰老模型小鼠的肾脏保护作用及其作用机制

目的:研究赖氨大黄酸(RHL)对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老和肾脏保护作用,阐明其作用机制,为RHL预防衰老的研究提供依据。方法:通过腹腔注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型,将小鼠随机分为对照组、衰老模型组和低、高剂量RHL组。除对照组外,其余各组小鼠每天腹部皮下注射D-半乳糖100mg·kg-1,持续8周,对照组小鼠每天皮下注射等量生理盐水,低和高剂量RHL组小鼠分别每天1次灌胃25和50mg·kg-1的RHL。观察各组小鼠一般状况,计算肾脏指数;检测血清和肾脏组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性;HE染色行肾脏组织病理学检查;Western blotting法检测肾脏衰老相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,衰老模型组小鼠肾脏指数降低(P<0.05),血清和肾脏组织中SOD和GSH-Px活性降低(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05);与模型组比较,RHL组小鼠肾脏指数升高(P<0.05),血清和肾脏组织中SOD和GSH-Px活性升高(P<0.05),MDA含量下降(P<0.05)。肾脏病理组织学检查,与衰老模型组小鼠比较,低和高剂量RHL组小鼠肾脏组织中肾小管上皮细胞水肿减轻,且存在剂量依赖性。Western blotting法检测,与对照组比较,衰老模型组小鼠肾脏组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白表达水平降低(P<0.05),P16和P21蛋白表达水平升高(P<0.05);与衰老模型组比较,低和高剂量RHL组小鼠肾脏组织中SIRT1蛋白表达水平升高(P<0.05),P16和P21蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:RHL通过抑制氧化应激、肾小管上皮细胞水肿和调控衰老相关基因的表达来发挥对衰老小鼠肾脏的保护作用。

大黄酸对便秘小鼠胃肠蠕动功能的影响

目的评价大黄酸对便秘模型小鼠胃肠蠕动功能的影响。方法用复方地芬诺脂制造小鼠便秘模型,大黄酸组给予大黄酸,记录6 h内的首次排红便时间,排便粒数和大便性状,并采用小肠曙红推进实验分别观察对照组、便秘组、大黄酸组的小鼠小肠曙红推进率,记录结果进行统计学分析。结果便秘组首次排便时间较对照组显著延长(P<0.01),6 h内排便粒数显著减少(P<0.01),小鼠小肠推进率显著降低(P<0.01);大黄酸组首次排便时间较便秘组显著缩短(P<0.01),6 h内排便粒数显著增加(P<0.01),小鼠小肠推进率显著提高(P<0.01)。结论大黄酸能增强便秘小鼠的胃肠蠕动功能。

萤光素酶报告基因细胞模型在筛选靶向调控RAC1的大黄酸衍生物中的应用

目的 构建含RAC1启动子萤光素酶报告基因CNE1-RAC1-Luc2稳转细胞模型,探讨其在转录水平筛选靶向调控RAC1抗肿瘤活性的大黄酸衍生物中的应用。方法 利用RAC1启动子序列,设计合成萤光素酶报告基因-慢病毒重组载体,感染鼻咽癌CNE1细胞,获得稳定表达萤光素酶的细胞;采用萤光素酶报告基因检测试剂盒,检测RAC1激活剂PMA和抑制剂NSC23766刺激该细胞后的萤光素酶发光值,并观察系列大黄酸衍生物对RAC1启动子萤光素酶活性的影响,Western blot验证细胞RAC1蛋白表达的变化。结果 双酶切实验显示,含RAC1启动子萤光素酶报告基因的慢病毒表达载体构建成功;经嘌呤霉素筛选,获稳定表达萤光素酶的CNE1-RAC1-Luc2细胞,转染效率达90%以上;RAC1萤光素酶报告基因检测系统对RAC1激活剂和抑制剂反应灵敏,萤光素酶活性与Western blot实验中RAC1蛋白表达结果一致;系列大黄酸衍生物对CNE1-RAC1-Luc2细胞萤光素酶活性的调控作用与Western blot结果基本一致。结论 成功构建了含RAC1启动子的萤光素酶报告系统的细胞模型,为高通量进行靶向RAC1药物的筛选提供一个实用的平台。

nr1h4调控转基因斑马鱼模型建立及相关研究

目的建立法尼醇X受体(FXR,基因名称nr1h4)组织特异性荧光标记转基因斑马鱼模型,为胆汁酸代谢相关药物筛选及安全预警提供可视化检测动物模型。方法在UCSC网站查找斑马鱼nr1h4基因调控序列,并利用Promoter 2.0软件对其进行优化,设计引物,利用PCR方法调取斑马鱼nr1h4调控序列,构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点,将pTol2-nr1h4-EGFP质粒与pCS-TP转座酶mRNA共同注入斑马鱼受精卵单细胞,筛选出在肝脏和肠道中特异性表达的荧光个体,通过遗传学筛选,建立Tg(-1.6nr1h4-EGFP)斑马鱼品系。将受精后第4天的Tg(-1.6nr1h4-EGFP)斑马鱼幼鱼随机分为空白对照组、溶媒对照组、甘氨酸-β-鼠胆酸组、奥贝胆酸组以及低、中、高浓度(10、20、40μg·mL)熊去氧胆酸组、胆宁片组、大黄酸组和芦荟大黄素组,连续给药4 d,观察各组转基因斑马鱼不同时间的荧光强度及发育情况,并对荧光强度进行分析。结果成功建立了Tg(-1.6nr1h4-EGFP)荧光标记转基因斑马鱼品系,绿色荧光于体节期开始在斑马鱼腹部表达,受精后第4天(4dpf)主要集中在肝脏和肠道表达。与空白对照组相比,甘氨酸-β-鼠胆酸组转基因斑马鱼在各给药时间的荧光表达水平均显著降低(4dpf:P<0.01;5~7dpf:P<0.0001),奥贝胆酸组在各给药时间荧光均显著增强(P<0.0001),溶媒组荧光表达水平与对照组无显著差异,表明了该模型的有效建立。与空白对照组相比,低浓度的熊去氧胆酸组和芦荟大黄素组转基因斑马鱼在给药第2~4天荧光表达水平逐渐增强(P<0.0001),中浓度的熊去氧胆酸组和芦荟大黄素组在各给药时间荧光均显著增强(P<0.0001),高浓度的芦荟大黄素组在给药第2~4天荧光逐渐增强(5~6dpf:P<0.001;7dpf:P<0.05),高浓度的熊去氧胆酸组荧光表达水平与空白组无显著差异;低浓度的胆宁片组和大黄酸组转基因斑马鱼在各给药时间的荧光表达水平与空白组无显著差异,中浓度的胆宁片组在各给药时间荧光均显著增强(4dpf和7dpf:P<0.0001;5dpf和6dpf:P<0.001),高浓度的胆宁片组在各给药时间荧光依旧显著增强(P<0.0001),中浓度的大黄酸组在给药第2~4天荧光逐渐增强(5dpf:P<0.0001;6dpf:P<0.001;7dpf:P<0.01),而高浓度的大黄酸组在给药第2~4天荧光开始减弱(P<0.0001)。结论Tg(-1.6nr1h4-EGFP)斑马鱼模型为胆汁酸药物机制研究、药物筛选和安全性评价提供了新的动物模型;低、中浓度的熊去氧胆酸,中、高浓度的胆宁片,中浓度的大黄酸和各浓度的芦荟大黄素均能够通过上调斑马鱼肝脏和肠道FXR促进胆汁酸转运,而高浓度的熊去氧胆酸对FXR无明显作用,高浓度的大黄酸抑制FXR表达。

大黄解热作用与降低血浆一氧化氮作用的PK-PD研究

药动学与药效学模型的结合是现代药物研究方法的一个热点,也是评价中药作用的一个重要手段。该文以内毒素复制大鼠发热炎症模型,灌胃大黄水煎液(1.54 g·kg-1)后不同时间点采血,测量体温及血浆NO浓度,同时采用高效液相色谱-荧光法(HPLC-FLD)进行大黄酸血药浓度测定。以Kinetica 5.0.11软件,分别对治疗组大黄酸平均血药浓度与治疗组体温及NO降低值进行PK-PD模型拟合,评价大黄作用特点及可能机制。实验结果表明大黄能够抑制LPS大鼠体温及血浆NO浓度的升高;最终PK-PD模型均以效应室联结的无滞后时间二房室-Sigmod Emax拟合较优;大黄酸在LPS大鼠体内的t1/2,Cmax,AUC与正常大鼠比较显著增大;大黄解热及降低血浆NO浓度的EC50分别为114.1,90.80μg·L-1,两者较为接近;解热作用Emax约为造模后体温升高最大值的111.0%,对NO影响的Emax约为造模后血浆NO升高最大值的8.399%,两者有显著差异;两药效指标的药效动力学曲线均较为陡峭。大黄在正常及LPS大鼠体内的药物动力学过程存在差异;解热及降低血浆NO浓度的作用靶点可能处于同一部位;大黄解热作用机制除通过降低血浆NO浓度外,应具有其他微观作用机制;大黄解热和降低血浆NO浓度作用的量效关系范围较窄,效能较低。

试论莱茵模式的困境

莱茵模式是社会市场经济的最新称呼 ,它的基本内涵是强调效率与公平的有机统一、竞争与秩序的有机结合以及互助合作理念。全球化背景下 ,莱茵模式遭到了一定程度的挑战。

大黄水煎液中大黄酸在急性肝损伤大鼠体内的药动学研究

目的比较大黄水煎液中大黄酸在正常与急性肝损伤大鼠体内的药动学差异。方法采用一次性ip D-氨基半乳糖制备大鼠急性肝损伤模型,单次ig大黄水煎液1.54 g·kg-1后,于不同时间点取血,分离血浆,用HPLC-荧光法测定大黄酸的血药浓度,以Kinetica软件计算药动学参数。结果药动学过程均符合二室模型。正常组雌鼠体内大黄酸Cmax和AUC均显著高于雄鼠。急性肝损伤组雄鼠的Kel显著增加,MRT显著缩短,AUC显著降低。结论大黄酸在雌性大鼠体内的生物利用度高于雄性;大黄酸在肝损伤大鼠体内消除较快,吸收量较小,其动力学改变可能是由于肝脏对大黄游离蒽醌存在明显代谢或转化作用。

大黄酸灌胃复制慢传输型便秘动物模型的实验研究

探讨大黄酸灌胃复制慢传输型便秘动物模型的可行性，采用大黄酸粉悬浊液进行递增灌胃，观察大便性状、首粒排便时间和碳末推进试验，判断模型的复制情况及实验动物死亡率。结果显示，与对照组动物比较，实验组动物首粒黑便排出时间明显延长（P〈0．05），碳末推进试验缩短（P〈0．05），雄鼠死亡率50％，存活的模型成功率100％；雌鼠模型成功率60％，死亡率17％。大鼠总存活率68％，总模型的成功率为47％。结果表明，大黄酸灌胃可用于制作慢传输型便秘动物模型，但是存在性别差异，影响造模成功率。