REG增强的脱细胞猪角膜/聚甲基丙烯酸羟乙酯原位一体式全层复合人工角膜

背景:目前用于全层移植的人工角膜缺乏生物活性及力学适配性,组合式人工角膜存在镜柱和周围组分间的界面问题。目的:在脱细胞猪角膜原位固化制备具有多肽增强、匹配自然角膜机械强度、良好透光性的一体式全层人工角膜。方法:使用非离子型脱细胞试剂Triton X-100与超声冻融及超级核酸酶相结合的方法制备脱细胞猪角膜,将聚甲基丙烯酸羟乙酯单体与光引发剂同时引入脱细胞猪角膜中,通过紫外滤光片遮住除中心区域以外的部分,使用275 nm紫外光引发中央区域聚合,除去未反应的单体及引发剂后得到中央光学区,同理在后板层固化隔水区,最后引入REG活性多肽,得到原位一体式全层人工角膜,表征人工角膜的物理性能、力学性能、透光性、降解性能及体内外生物相容性。结果与结论:①实验在脱细胞猪角膜的中央区域采用聚甲基丙烯酸羟乙酯原位构建了一个具有聚合物和胶原纤维共存的光学区,扫描电镜下可见人工角膜的上表面较为粗糙且轮廓不规则,具有明显的凹陷和突起结构,下表面相对光滑;该人工角膜具有接近于天然角膜的力学性能,光学区透光率达到自然角膜的80%,浸泡于含胶原酶的PBS无菌溶液中可较好地保留固化光学区和隔水区,维持角膜的基本结构;该人工角膜具有良好的细胞相容性,能够为细胞提供适宜的黏附生长环境,有利于角膜上皮细胞的迁移和黏附,促进血管内皮细胞的生长和新生血管的形成,促进上皮化过程;人工角膜植入SD大鼠皮下12周后具有良好的生物相容性和安全性,可降低植入初期的急性炎症反应;②结果表明,实验制备的一体式全层人工角膜具有作为全层人工角膜支架材料的潜力。

考虑REGS和可调热电比的综合能源系统优化调度

在“双碳”目标背景下,针对热电联产机组“以热定电”模式导致的弃风问题,文章提出了一种考虑可再生增强型地热系统(Regenerative Enhanced Geothermal System,REGS)和可调热电比的综合能源系统(Integrated Energy System,IES)优化调度模型。首先,构建干热岩提取循环等模型,分析了能量分配系数对于REGS作为源端的热电可调节机理;其次,研究了REGS配合光热电站和热电联产机组耦合运行机制,分析了耦合运行改善热电比的机理,并引入广义机组热电比控制模型;再次,以购能成本、运行成本、运维成本、弃风成本及碳税成本之和最小构建目标函数进行优化求解;最后,利用西北某地区实际数据进行算例分析,验证了所提模型能够提高系统经济性和风电消纳率,减少碳排放。

外周血PD-1、CTLA-4、T-reg、pDC与鼻咽癌患者临床特征及疗效的相关性

目的:探讨初治鼻咽癌患者治疗前外周血PD-1/CTL(%)、CTLA-4/CTL(%)、T-reg(%)、pDC与患者临床特征及即刻疗效的关系,以及以上指标在鼻咽癌患者及健康人群中的表达差异。方法:收集112例初治鼻咽癌患者治疗前临床资料及淋巴细胞亚群和树突细胞亚群数据,进行外周血PD-1/CTL(%)、CTLA-4/CTL(%)、T-reg(%)、pDC与鼻咽癌患者临床特征及即刻疗效的相关性分析,从112例鼻咽癌患者中随机选取30例患者作为病例组,年龄、性别匹配的30例同期体检健康者作为对照组,分析两组外周血PD-1/CTL(%)、CTLA-4/CTL(%)、T-reg(%)、pDC表达差异。结果:112例初治鼻咽癌患者中,年龄≥50岁组与年龄<50岁组相比,外周血PD-1/CTL(%)更高。CTLA-4/CTL(%)与T分期、N分期、TNM分期呈负相关,CTLA-4/CT(%)越高,疗效越好。T-reg(%)与N分期呈正相关,T-reg(%)与M分期存在“S”型曲线关系。pDC与N分期、TNM分期呈负相关。病例组与对照组外周血PD-1/CTL(%)、T-reg(%)差异存在统计学意义,病例组与对照组外周血CTLA-4/CTL(%)差异不存在统计学意义。结论:外周血CTLA-4/CT(%)越高,鼻咽癌T分期、N分期、TNM分期越早,外周血CTLA-4/CT(%)越高,疗效越好。外周血T-reg(%)越高,N分期越晚。当外周血T-reg(%)<20%时,鼻咽癌可能未发生远处转移,当外周血T-reg(%)为20%~50%时,外周血T-reg(%)表达越高,发生远处转移的可能越大,当外周血T-reg(%)>50%时,鼻咽癌已经远处转移的可能性大。外周血pDC越高,N分期、TNM分期越早。外周血以上指标可动态观察,有望成为预测鼻咽癌患者疗效及预后的生物标志物。

哎呀你终于来了!Rega AYA落地音箱

不要以为建厂半个世纪的英国Rega(君子),只会制作黑胶唱盘和放大器。其音箱的知音人同样遍布世界各地。新玻璃纤维增强混凝土铸模箱体由Rega创始人Roy Gandy先生亲自领班,经过十年时间研发的AYA(艾雅),属于厂方最新推出的中小型落地音箱.

不同浓度罗英化浊解毒方对胃癌大鼠病理改变、细胞凋亡及RegⅠ蛋白的影响

目的研究不同浓度罗英化浊解毒方对胃癌大鼠病理改变、细胞凋亡及RegⅠ蛋白的影响。方法选取健康ACL雄性大鼠80只,分为正常组、模型组、低剂量组(20.0 mg/kg)、高剂量组(40.0 mg/kg)、对照组(0.6 g/kg),每组16只。苏木素-伊红(HE)染色光镜法观察胃黏膜组织。TUNEL检测胃癌细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中胃动素、胃泌素水平;RT-PCR检测胃黏膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)、自噬蛋白(Beclin)1 mRNA水平;Western印迹检测RegⅠ、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组与低剂量组胃黏膜组织有炎性细胞浸润产生,排列杂乱无章、胃壁增厚,高剂量组与对照组胃黏膜组织炎性细胞浸润减少,排列较为有序。与正常组相比,模型组胃黏膜组织中Beclin1、Bax水平明显降低,VEGF、胃动素、胃泌素、RegⅠ、Bcl-2水平明显提升(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组凋亡率、Beclin1、Bax水平明显升高,VEGF、胃动素、胃泌素、RegⅠ、Bcl-2水平明显降低(P<0.05)。与低剂量组相比,高剂量组与对照组凋亡率、Beclin1、Bax水平明显升高,VEGF、胃动素、胃泌素、RegⅠ、Bcl-2水平明显降低(P<0.05)。与高剂量组对比,对照组凋亡率、Bax水平明显降低,RegⅠ、Bcl-2水平明显提升(P<0.05),Beclin1、VEGF、胃动素、胃泌素水平比较无差异(P>0.05)。结论罗英化浊解毒方改善了胃癌大鼠病理组织形态,促进了癌细胞的凋亡,且呈现明显的药物剂量依赖性,其作用机制可能与降低RegⅠ蛋白表达及改善凋亡信号通路水平有关。

ST2联合Reg3α的ROC曲线预测儿童急性移植物抗宿主病的预后

目的探索异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后患儿血浆生物标记物水平对急性移植物抗宿主病(aGVHD)预后的影响,为aGVHD的早期干预提供依据。方法收集2020年1月—2021年6月在苏州大学附属儿童医院进行首次造血干细胞移植的98例患儿资料,采集移植后100d内的外周血,检测血清中的生物标记物的浓度。结果98例患者中,有47例在移植后+10d到+98d之间发生aGVHD,中位发生时间为+53d,截止至随访时间,共有11例(11.2%)病人死亡。与对照组比较,发生aGVHD的病例组其sST2、Reg3α、TNFR1均较高,且存在统计学差异。logistics回归分析发现联合sST2及Reg3α的诊断模型更优。根据cut-off值分别将sST2和Reg3α分为高低水平组,再将两指标联合分为双高(高)、一高一低(中)和双低(低)水平组。在累积发生率中,单一指标分组及两指标联合分组均存在组间统计学差异,但联合分组差异更为显著;在总体生存率中,单一指标分组无组间差异;但两指标联合分组存在统计学差异(P=0.045)。结论sST2联合Reg3α可以作为aGVHD预后的预测指标。

LncRNA Reg1cp基因rs3819316位点多态性与新疆人群骨密度及骨代谢指标的相关性分析

目的探讨LncRNA Reg1cp基因rs3819316位点多态性与新疆人群骨密度及骨代谢指标的相关的相关性分析。方法选择2019年1月-2020年12月于新疆维吾尔自治区人民医院就诊的649例患者,提取研究对象全血基因组DNA,采用Sequenom-质谱分析平台确定LncRNA Reg1cp基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs3819316的基因分型,按照年龄/绝经状态分组,比较不同基因型骨密度(前臂1/3、腰椎整体、股骨颈、全髋)及骨代谢指标[I型前胶原氨基末端肽(PINP)、I型胶原交联C末端肽(β-CTX)、甲状旁腺激素(PTH)、25羟维生素D(25OHD)]的差异。结果(1)该人群LncRNA Reg1cp基因rs3819316位点基因型频率为:AA 0.92%,AG 14.33%,GG 84.75%,A和G等位基因频率分别为8.09%和91.91%;(2)按年龄及绝经状态分组后,发现仅在20岁-50岁组男性中发现携带突变基因的人群股骨颈骨密度高于未携带突变基因组(GG vs.AA/AG:0.83±0.11 vs.0.91±0.16,P=0.037)。骨代谢指标男性及女性各组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论LncRNA Reg1cp rs3819316位点为骨量调节的基因,在20岁-50岁携带LncRNA Reg1cp基因突变的男性股骨颈骨密度更高。

猪RegⅢγ蛋白的重组表达及功能研究

【目的】探究重组猪RegⅢγ蛋白的生物功能及相应分子机理,为该蛋白的开发应用提供参考。【方法】利用PCR扩增RegⅢγ基因片段,并连接至pDCP载体,以构建RegⅢγ蛋白重组表达系统。加入IPTG低温诱导促使重组蛋白高效表达,利用镍柱亲和层析纯化蛋白并进行透析后研究其对不同细菌的抑制作用,以及对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)的促增殖与损伤修复及抗氧化与凋亡的功能,进一步探究其分子机理。【结果】纯化后重组蛋白Western blotting鉴定结果显示,17 ku处存在特征条带,确定重组猪RegⅢγ蛋白成功表达。重组猪RegⅢγ蛋白对金黄色葡萄球菌和化脓性链球菌2种革兰阳性菌有明显的抑菌效果,MIC 90均为39.1μg/mL,对大肠杆菌和肠炎沙门氏菌2种革兰阴性菌未产生抑菌圈;可促进IPEC-J2细胞的增殖及损伤修复,且浓度为10μg/mL时增殖与修复效果最佳。与对照组相比,表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外调节蛋白激酶1(ERK1)、ERK 2、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、CDK 4、细胞周期蛋白E(Cyclin E)和Cyclin D基因mRNA表达水平显著升高(P<0.05),而丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)基因mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。将重组蛋白作用于氧化损伤IPEC-J2细胞时,与对照组相比,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著增强(P<0.01),丙二醛(MDA)含量(P<0.05)、乳酸脱氢酶(LDH)(P<0.01)活性均降低,并发现其通过降低促凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9及Bax基因的mRNA表达水平,提高抗凋亡基因Bcl-2的mRNA表达水平,发挥对氧化损伤IPEC-J2细胞的抗氧化与凋亡作用。【结论】重组猪RegⅢγ蛋白对革兰阳性菌有选择性抑制作用,对IPEC-J2细胞增殖与损伤修复均有促进作用,且具有一定抗氧化与凋亡作用。

脑创伤后Reg3g的表达及对早期癫痫发作的作用研究

目的探讨Reg3g信号激活在创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)脑组织中的时空表达规律和对TBI早期癫痫发作敏感性的影响。方法采用控制性皮质撞击(controlled cortical impact,CCI)制备TBI模型,在分子与形态学实验中,60只C57BL/6N野生型(wild type,WT)小鼠按照随机数字表法分为4组:sham组、CCI 24 h组、CCI 72 h组、CCI 1周组。通过RT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法检测Reg3g的时空表达规律。采用海人酸(kainic acid,KA)诱导癫痫,在脑创伤癫痫发作实验中,WT小鼠和Reg3g KO小鼠各30只,按照随机数字表法分组,每组15只,分别为WT(CCI)+NS组、Reg3g KO(CCI)+NS组、WT(CCI)+KA组、Reg3g KO(CCI)+KA组。在CCI基础上进行癫痫诱导发作,并记录在体脑电结果。结果①与sham组相比,CCI损伤侧皮层24 h、72 h、1周后,Reg3g基因和蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);②免疫荧光结果显示,在CCI小鼠皮层组织,Reg3g与NeuN-阳性神经元完全共表达;③在生理盐水注射的WT和Reg3g基因敲除小鼠,并没有观察到明显的癫痫波。而在KA注射的WT小鼠和Reg3g基因敲除小鼠,可观察到明显的癫痫波。与WT小鼠相比,KA注射的Reg3g基因敲除小鼠潜伏期明显缩短,总发作时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Reg3g对TBI后早期癫痫发作起着明显的保护作用,Reg3g可能是抑制TBI早期癫痫发作的重要调控靶点。

REGγ通过Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的研究蛋白酶体激活因子(REG)γ对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法Western印迹和实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测MGC-803细胞和GES-1细胞中REGγ蛋白和mRNA水平。将MGC-803细胞分为空白对照(BC)组、阴性对照(NC)组、XAV939组、siR-REGγ组和siR-REGγ+XAV939组,分别做不同处理。CCK8测定细胞增殖能力,Transwell实验测定细胞迁移和侵袭能力。Western印迹检测细胞N-钙黏蛋白(cadherin)、E-cad-herin、Snail、β-catenin、C-myc、细胞周期蛋白(Cyclin)D1蛋白表达水平。结果胃癌细胞MGC-803中mRNA和蛋白水平均明显高于正常胃黏膜细胞GES-1(P<0.01)。与BC和NC组相比,siR-REGγ组和siR-REGγ+XAV939组细胞REGγmRNA和蛋白水平均显著降低,细胞增殖能力显著降低,细胞迁移和侵袭数目显著降低,N-cadherin、Snail、β-catenin、C-myc和CyclinD1蛋白水平显著降低,E-cadherin蛋白表达显著增加(均P<0.01)。BC组和NC组各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论REGγ通过Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌细胞增殖、迁移和侵袭。

治疗瘦素缺乏症的瘦素受体激动剂抗体REGN4461的临床前、随机1期和同情用药评估

脂肪衍生的激素瘦素或瘦素受体信号传导的缺乏,会导致携带有瘦素或其受体LEPR基因功能缺失突变的个体出现3级肥胖,并导致脂肪萎缩继发的低瘦素血症个体(如全身性脂肪营养不良个体)出现代谢性疾病和肝病。恢复瘦素-LEPR信号的治疗可能会解决这些代谢后遗症。研究人员开发了一种全人源单克隆抗体—REGN4461(mibavademab),它在缺乏或存在瘦素的情况下均能激活人类LEPR。在肥胖的瘦素基因敲除小鼠中,REGN4461使体重、食物摄入、血糖和胰岛素敏感性均正常化。在全身性脂肪营养不良的小鼠模型中,REGN4461减轻了小鼠高食欲、高血糖、胰岛素抵抗、血脂异常和肝脂肪变性等症状。在一项1期、随机、双盲、安慰剂对照的两部分研究中,REGN4461耐受性良好,安全性可接受。

可溶性CD83促进耐受性DCs和T_(reg)细胞增殖和免疫耐受的分子机制

目的 探索可溶性CD83(sCD83)发挥免疫抑制活性的分子机制。方法 分离6~8周龄C57B/6小鼠骨髓祖细胞培养骨髓衍生树突细胞(DCs)和脾脏内CD4^(+)T细胞。分别向细胞培养物中加入10μl PBS处理(Control组)或10μl 10μg/ml的可溶性CD83处理(sCD83组)。流式细胞术测定DCs中的非成熟DCs(imDCs)和CD4^(+)T细胞中的CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)T细胞,即调节性T(T_(reg))细胞的细胞计数所占百分比。Western blot测定imDCs胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达水平及T_(reg)细胞内磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、细胞核和细胞质核因子-κB亚基RelB和程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)的表达水平。ELISA测定DCs培养上清液中犬尿酸的水平以及imDCs和CD4^(+)T细胞共培养系统中白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(TGF-β)和IL-12的水平。结果 与Control组相比,sCD83组表达表面标志物CD40、CD83、CD86、Ⅱ类主要组织相容性复合物(MHCⅡ)的DCs细胞计数所占百分比降低(P<0.05);DCs培养上清液中犬尿酸的水平上升(P<0.05)。与Control组相比,sCD83组Treg细胞计数所占百分比升高(P<0.05);胞内PTEN和细胞质RelB的表达增强(P<0.05),而p-Akt、细胞核RelB和PD-1的表达降低(P<0.05);Akt的表达水平差异无统计学意义。在imDCs与CD4^(+)T细胞共培养物上清液中,与Control组相比,sCD83组IL-10和TGF-β的水平升高(P<0.05),IL-12的水平降低(P<0.05)。结论 sCD83能够抑制CD4^(+)T细胞核内RelB的水平调节相关细胞因子的分泌,影响DCs和T_(reg)细胞的细胞间通讯,促进耐受性imDCs和T_(reg)细胞的增殖。

晚期胃癌腹膜转移转化治疗最新进展

腹膜转移是晚期胃癌患者常见的转移和复发方式,约10%~20%的胃癌患者被发现存在腹膜转移[1]。一旦发生腹膜转移,可能会出现难治性腹腔积液、恶病质、肠梗阻等症状,这是晚期胃癌患者死亡的主要原因[2]。目前,伴有腹膜转移的晚期胃癌患者,其中位生存时间约3~10个月[3]。一项Ⅲ期临床研究REGATTA[4]显示,存在不可治愈因素的晚期胃癌患者并不会从化疗前手术治疗+术后化疗中获益。

RegⅣ在胃癌中的表达及其临床意义

目的检测RegⅣ蛋白在人胃癌组织中的表达与分布,探讨其作为胃癌检测标志物的可能性。方法免疫组织化学染色检测26例临床胃癌组织及10例正常胃组织中RegⅣ蛋白的表达。结果RegⅣ蛋白在正常胃组织表达阴性(0/10),在胃癌组织表达阳性率为42.31%(11/26),具有显著的统计学意义(P<0.05);RegⅣ蛋白在Ⅰ/Ⅱ期胃癌中表达阴性(0/3),而在Ⅰ/Ⅱ期胃癌中表达阳性率为47.83%(11/23),二者差异有显著统计学意义(P<0.05)。但RegⅣ蛋白的表达与胃癌分化程度及有无淋巴结转移等无明显的差异(P>0.05)。结论RegⅣ蛋白在胃癌中表达较高,约50%左右,主要为Ⅰ/Ⅱ期胃癌,提示RegⅣ蛋白可能与胃癌的生长侵袭等有关,作为浸润癌的病理诊断具有一定的实际意义。

RegⅠ在胃泌素促胃癌细胞体外增殖通路中的作用

目的探讨再生蛋白I(RegⅠ)在胃泌素刺激胃癌细胞增殖通路中的作用。方法根据RegⅠcDNA已知序列,在线设计3个小干扰RNA,并经基因库同源性比较,构建其RegⅠ-shRNA表达载体(pSUPER-EGFP-REG/1、pSUPER-EGFP-REG/2和pSUPER-EGFP-REG/3),利用脂质体2000转染试剂分别转染胃癌细胞BGC823细胞株、SGC7901细胞株,同时设转染空质粒的实验对照组和无质粒转染的空白细胞组。后经G418筛选建立稳定转染细胞株。RT-PCR检测RegⅠ基因mRNA的转录水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胃泌素孵育对胃癌细胞增殖的效应。结果酶切及测序鉴定,插入片段正确,3个RegⅠ-shRNA表达载体构建成功;RT-PCR显示,pSUPER-EGFP-REG/1可有效抑制RegⅠmRNA在胃癌细胞BGC823、SGC7901的转录。Western boltting结果显示,BGC823和SGC7901细胞的RegⅠ蛋白表达率分别下调到空载体对照组的(45±4)%和(53±4)%;MTT结果显示,RegⅠ基因表达抑制胃癌细胞系的增殖效率均降低(P<0.05)。胃泌素孵育后,胃癌细胞BGC823、SGC7901的增殖效率均增加(P<0.05),而RegⅠ基因表达抑制的胃癌细胞系增殖效率则无明显改变(P>0.05)。结论实验成功建立了RegⅠ基因表达抑制的胃癌细胞系;RegⅠ基因可能对胃泌素促胃癌细胞的增殖有促进的作用。

结直肠癌中REG4与survivin的表达及临床意义

目的:检测REG4与survivin在结直肠癌组织内的表达,并分析二者与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化结合组织芯片的方法,检测92例结直肠癌患者癌组织及相应正常黏膜组织内REG4与survivin的表达情况。结果:结直肠癌患者组织中REG4与survivin表达阳性率为53.3%(49/92)与64.1%(59/92),正常黏膜组织内REG4与survivin的阳性率为8.7%(8/92)与3.3%(3/92),差异有统计学意义(P<0.05);REG4与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关,survivin与淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05);结直肠癌患者组织内REG4与survivin的表达呈正相关(r=0.208,P<0.05)。结论 :REG4与survivin在结直肠癌组织内过表达,提示两者共同参与了结直肠癌的发生与发展,检测REG4和survivin可为结直肠癌的治疗及预后提供理论支持。

血清Reg Ⅳ蛋白在胃癌患者血清中的表达

目的检测RegⅣ蛋白在胃癌患者血清中的表达,探讨其作为浸润性胃癌检测标志物的可能性。方法酶联免疫分析法定量检测64例胃癌患者血清中RegⅣ蛋白的表达水平。结果肿瘤浸润至肌层(T_2)和浆膜层(T_3)的胃癌患者血清RegⅣ蛋白水平要显著高于肿瘤局限在黏膜层和黏膜下层(T_1)者(P<0.01);有淋巴结转移者血清RegⅣ蛋白水平要高于无淋巴结转移者(P<0.05);病理Ⅲ期患者血清RegⅣ蛋白水平高于病理Ⅰ期患者(P<0.05)。结论 RegⅣ蛋白可能与胃癌的生长侵袭有关。

急性坏死性胰腺炎肺损伤时RegⅠ基因表达

目的研究RegⅠ在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺组织中的表达及其与ANP肺损伤的关系。方法健康成年SD大鼠随机分为假手术对照(C)组(30只)和ANP组(60只)。C组开腹后只翻动胰腺,ANP组大鼠胰胆管恒速逆行注射3%牛磺胆酸钠,制成ANP大鼠模型。观察胰腺和肺组织的病理改变及肺组织湿/干重比的改变,应用RT-PCR检测胰腺、肺组织中RegⅠmRNA的表达水平,并研究所观察指标与RegⅠ基因表达的相关性。结果与C组相比,ANP组肺组织中RegⅠ的mRNA水平过度表达。RegⅠ的表达水平分别与肺组织的病理学评分(r=0.5212,P<0.01)和肺组织湿/干重比(r=0.4797,P<0.01)呈正相关。结论ANP时大鼠肺组织中RegⅠmRNA的表达水平明显上调;RegⅠmRNA的表达与ANP所致的急性肺损伤的严重程度相关。

Reg Ⅳ基因缺失CRD结构域片段获得及其表达载体的构建与转染

目的:探讨应用基因重叠延伸拼接PCR(SOE-PCR)技术构建Reg Ⅳ基因缺失CRD结构域表达载体,并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌细胞系。方法:应用SOE-PCR法获得Reg Ⅳ缺失CRD结构域片段,构建真核表达载体并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌LoVo细胞,G418筛选,RT-PCR检测鉴定。结果:经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功,经pcDNA3.1-Reg Ⅳ-dom ain△转染的LoVo细胞Reg Ⅳ-dom ain△呈阳性表达。结论:利用SOE-PCR技术可成功构建Reg Ⅳ基因缺失CRD结构域的表达载体。

RegⅣ在结肠癌中的表达及其与结肠癌发生发展的关系

目的研究正常组织和结肠癌组织中RegⅣ蛋白的表达,探讨其与结肠癌的发生发展关系。方法采用SABC免疫组织化学法分析102例结肠癌组织及50例正常结肠黏膜中RegⅣ表达,结合临床病理资料采用检验进行统计学分析,并做RegⅣ表达与结肠癌临床分期的回归分析,探讨RegⅣ与结肠癌的表达及发生发展的关系。结果正常结肠粘膜中RegⅣ无表达,结肠癌组织中RegⅣ阳性表达率为34.31%。其中,G1、G2和G3期结肠癌阳性率分别为0.00%、22.22%和68.66%,病理分级间比较差异具有统计学意义(P<0.05);临床分期的阳性率分别为T0(0.00%)、T1(33.33%)、T2(44.44%)、T3(52.38%)、T4(71.42%),各期间比较差异有统计学意义(P<0.05),两者回归方程为Y=5.955+15.83x,相关系数r=0.973。结论 RegⅣ在结肠癌的高表达与其病理分级及临床分期有密切的关系,可作为判断结肠癌分化程度的一个指标。