Preparation and analysis of active rat model of rheumatoid arthritis with features of TCM toxic heat-stasis painful obstruction

Objective:To establish a collagen type II-induced rat model of rheumatoid arthritis(RA)presenting characteristics of the human form of the traditional Chinese syndrome pattern of toxic heat-stasis painful obstruction(bi zheng;arthromyodynia)as well as pathologic features of active RA.The Chinese herbal medicine Tengmei decoction was used to validate the animal model.Methods:Ninety specific pathogen free Sprague-Dawley rats were randomly divided into a normal group of 6 rats and a model group of 84 rats.To establish the rat model of collageninduced arthritis(CIA),bovine type II collagen in complete Freund’s adjuvant was injected into the model group rats as a priming dose(Day 0)and boosting dose(Day 9).Changes in arthritic index(AI)scores,including limb swelling,were monitored.Thereafter,24 successfullyestablished CIA rats were randomly assigned to 4 groups with 6 animals each:model,positive control drug,high-dose traditional Chinese herbal medicine,and traditional Chinese herbal medicine.A blank control group of 6 rats was included.After 12 weeks of intervention with Tengmei decoction,articular synovial tissue and serum specimens were collected to detect interleukin-2(IL-2)and IL-17 transcription and protein expression levels.

补骨脂-淫羊藿对类风湿关节炎抗炎机制的分子对接分析:动物实验验证

背景:临床上补骨脂-淫羊藿治疗类风湿关节炎疗效明显,但两者所含有效成分复杂,在分子水平上治疗类风湿关节炎的作用机制仍不明确。目的:基于网络药理学和分子对接技术建立胶原诱导型关节炎模型,验证补骨脂-淫羊藿治疗类风湿关节炎可能的作用靶点及通路,为以补骨脂-淫羊藿为主的临床方剂使用提供可靠的实验依据。方法:借助中医药研究平台、中医百科全书和上海有机所的中药与化学成分数据库等检索并筛选有效成分,从PubChem平台获取3D分子式,通过PharmMapper和SwissTargetPrediction平台进行靶标预测;结合DrugBank、GeneCards、OMIM等基因数据库完成类风湿关节炎的疾病靶点获取,经Uniport数据库校准靶标,借助VENNY 2.1获取补骨脂-淫羊藿与疾病交集靶点并绘制韦恩图;采用STRING平台构建蛋白质互作网络图;使用Metascape平台进行基因本体论功能分析及京都基因与基因组百科全书分析,进行数据可视化,利用Cytoscape 3.9.0构建中药-成分-靶点-疾病-通路四重网络模型;运用AutoDock-Vina软件将主要有效成分与核心靶点进行分子对接验证,探索最佳结合靶点。建立Ⅱ型胶原+佐剂诱导型关节大鼠模型,用补骨脂-淫羊藿干预21 d后,观察其对相关通路靶点及炎性细胞因子的影响。结果与结论:①筛选补骨脂与淫羊藿活性成分28个,与类风湿关节炎交集靶点共288个,主要成分有异补骨脂素、补骨脂定、淫羊藿苷等;交集靶点主要有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、肿瘤坏死因子、血管内皮生长因子A等;②基因本体论分析获得生物过程2232条,主要与丝氨酸蛋白磷酸化、AKT正调控、活性氧代谢过程等功能有关;③京都基因与基因组百科全书富集分析结果202条,主要有PI3K/AKT信号通路和表皮生长因子受体信号通路等,可能通过调节滑膜细胞凋亡与增殖、抑制炎性因子等发挥治疗作用;④分子对接结果表明补骨脂-淫羊藿主要与AKT1及雌激素受体转录因子1结合活性最强,并形成稳定结构,与PI3K/AKT等凋亡增殖、炎性介导等调控信号通路密切相关;⑤补骨脂-淫羊藿可降低胶原诱导型关节炎大鼠模型血清中白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α的表达;⑥补骨脂-淫羊藿可调低胶原诱导型关节炎大鼠模型关节滑膜中p-PI3K、p-AKT、p-FOXO1蛋白的表达;⑦结果证明,补骨脂-淫羊藿可能经PI3K/AKT/FOXO1信号通路抑制关节滑膜细胞增殖和抑制炎性因子表达等发挥治疗作用,这可能与类风湿关节炎关节炎症和骨破坏的发生密切相关,同时为临床的合理使用及新药开发提供了参考依据。

Ⅱ型胶原蛋白与弗氏完全佐剂大鼠关节炎模型的建立和比较

目的对Ⅱ型胶原蛋白（ＣⅡ－Ａ）和弗氏完全佐剂（Ａ－Ａ）大鼠关节炎模型在大体外观和足部组织病理学切片等方面进行观察比较。方法分别采用Ⅱ型胶原蛋白和弗氏完全佐剂诱导建立大鼠关节炎模型，利用排水法对大鼠足部体积进行测定，并将大鼠后足进行组织病理学切片观察。结果从大体外观和足部病理切片上两种大鼠模型均显示出有明显的病变，但ＣⅡ－Ａ大鼠与Ａ－Ａ大鼠比较，滑膜增生及软骨破坏等继发性病变特征更为明显，关节炎持续时间也较长，更接近于人的类风湿性关节炎。结论ＣⅡ－Ａ大鼠模型与Ａ－Ａ相比是研究ＲＡ较为理想的动物模型。

猪软骨Ⅱ型胶原蛋白的提取纯化与鉴定

目的:从猪关节软骨中提取纯化Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行鉴定。方法:选择猪关节软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖、胃蛋白酶消化、氯化钠盐析、DE22纤维树脂处理等步骤,提取纯化Ⅱ型胶原蛋白。采用SDS-PAGE、吸收光谱分析、氨基酸成分分析等方法对Ⅱ型胶原蛋白进行鉴定。结果:4 mol/L盐酸胍能有效去除蛋白多糖;分步加入胃蛋白酶的限制性酶解结果满意;氯化钠盐析浓度为2.4 mol/L时最佳。SDS-PAGE电泳结果显示提取纯化的Ⅱ型胶原蛋白与S igm a公司的产品一致。Ⅱ型胶原最大吸收峰为230 nm,氨基酸成分分析显示甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸含量最高。结论:实验结果提示从猪关节软骨提取的Ⅱ型胶原蛋白纯度高,符合II型胶原的特征。提取材料广泛、实验条件简便,结果可靠。

成纤维细胞生长因子受体1 抑制剂对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响

背景:课题组前期的研究表明靶向成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)可能是治疗类风湿性关节炎的有效靶点。目的:探讨FGFR1抑制剂(PD173074)对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响。方法:将25只雌性SD大鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、甲氨蝶呤组、PD173074低剂量组、PD173074高剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠建立Ⅱ型胶原诱导关节炎模型。造模成功后正常组及模型组大鼠腹腔注射无菌PBS,甲氨蝶呤组药物注射剂量为1.04 mg/kg,PD173074低剂量组和高剂量组药物注射剂量分别为5,20 mg/kg,1次/周。给药4周后取材,观察大鼠临床症状以及关节肿胀情况,踝关节Micro-CT三维重建及分析,观察踝关节病理变化,检测关节周围血管生成情况及核因子κB受体活化因子配体的表达,检测关节滑膜中p-FGFR1、血管内皮生长因子A、抗酒石酸酸性磷酸酶的表达,观察肝、脾、肾病理变化并计算肝、脾、肾指数。结果与结论:①PD173074能够减轻模型大鼠踝关节临床症状及关节肿胀,延缓骨质丢失,改善骨结构,减轻关节滑膜侵袭以及软骨骨侵蚀,降低关节周围破骨细胞数量,抑制关节滑膜组织中的血管生成,降低核因子κB受体活化因子配体的表达,抑制FGFR1磷酸化蛋白、抗酒石酸酸性磷酸酶和血管内皮生长因子A的蛋白表达。②大鼠肝、脾、肾病理观察表明经过PD173074治疗后无明显的毒副作用。③研究证明了FGFR1抑制剂能够延缓Ⅱ型胶原诱导关节炎模型大鼠关节炎症及骨破坏的进展,并抑制血管的生成。初步验证了PD173074在Ⅱ型胶原诱导关节炎模型中的治疗作用,其可能是通过抑制FGFR1磷酸化发挥作用,为寻找类风湿性关节炎新的治疗靶点提供了方向。

鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎大鼠关节滑膜组织MMP_3和TIMP-1mRNA表达的影响

目的 :探讨鹿瓜多肽注射液治疗类风湿性关节炎 (RA)的机理。方法 :以Ⅱ型胶原 (CⅡ )诱导的免疫性关节炎 (CIA)大鼠为RA动物模型 ,通过测量其关节肿胀程度及制作病理切片并在光镜下计分 ,观察鹿瓜多肽注射液对其的治疗效果 ,并取膝关节滑膜切片进行原位杂交 ,用图像分析系统检测MMP3 和TIMP 1mRNA表达水平。结果 :与模型组比较 ,鹿瓜多肽组大鼠踝关节肿胀程度和病理损伤计分均明显减轻。模型组大鼠滑膜组织MMP3 mRNA表达阳性密度明显高于正常对照组 ,而TIMP 1mRNA表达阳性密度明显低于正常对照组。鹿瓜多肽组大鼠滑膜组织MMP3 表达降低 ,TIMP 1表达增高。结论 :鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎有治疗作用 ,其机理可能与抑制滑膜组织MMP3 mRNA表达并促进TIMP 1mRNA表达有关。

乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白的鉴定及其对胶原诱导性关节炎小鼠的干预研究

目的：分析乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白（Zaocys type Ⅱ collagen，ZC Ⅱ）与其他物种Ⅱ型胶原蛋白（C Ⅱ collagen）的同源性，探讨其对胶原诱导性关节炎（Collagen—induced arthritis，CIA）小鼠关节炎症的影响。方法：采用限制性胃蛋白酶消化法提取ZCⅡ；SDS—PAGE凝胶电泳及紫外分光光度计法对其鉴定，质谱分析其同源性。鸡CⅡ小鼠尾根部皮下注射诱导CIA模型；口服ZCII高、中、低剂量干预，视觉评分法对关节炎评分，HE染色评价小鼠膝关节病理变化。结果：提取的ZCU分子量约为110～140kD，紫外吸收峰为230nm左右；质谱分析所得肽质量指纹图谱与其他物种有4个以上肽段匹配，蛋白评分大于95％。在关节炎症方面，与正常对照组比较，CIA小鼠关节炎及组织病理学评分升高（P〈0．05）；与CIA模型组比较，不同剂量ZCU干预组关节炎及组织病理学评分显著降低（P〈0．05）。结论：质谱分析结果提示ZCⅡ与其他物种CⅡ具有较高同源性；ZCII能显著抑制CIA小鼠的关节肿胀，改善关节组织病理变化。

鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎大鼠血清TNF-α、IL-6以及CⅡ抗体活性的影响

目的 :观察鹿瓜多肽注射液对类风湿性关节炎 (RA)的治疗作用 ,并探讨其作用机理。方法 :以Ⅱ型胶原 (CⅡ )诱导的免疫性关节炎 (CIA)大鼠为RA动物模型 ,通过测量其关节肿胀程度及制作病理切片并在光镜下计分 ,观察鹿瓜多肽注射液对其的治疗效果 ;采用ELISA法测定大鼠血清中TNF α、IL 6以及CⅡ抗体活性 ,以探讨其作用机理。结果 :与模型组比较 ,鹿瓜多肽组大鼠踝关节肿胀程度和病理损伤计分均明显减轻。鹿瓜多肽组血清TNF α、IL 6的活性明显降低。结论 :鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎有治疗作用 ,其机理可能与抑制血清TNF α、IL 6的活性有关。

蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白对CIA大鼠的治疗作用

目的:研究蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型大鼠的治疗作用,观察其治疗效果并探讨其作用机制。方法:90只Wistar大鼠除空白组外均采用牛CⅡ建立CIA模型并进行随机性分组,分为模型组、牛CⅡ组、蕲蛇水提液高、中、低剂量组、蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组,每组10只。造模后第11 d开始给药,期间采用容积法测量关节肿胀程度,连续给药20 d后观察大鼠踝关节病理改变并采用流式细胞术检测大鼠外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞亚群水平。结果:与模型组相比,蕲蛇高、中剂量组、蕲蛇CⅡ高、中剂量组和牛CⅡ组均能显著降低CIA大鼠右后足跖肿胀程度、CD4+T细胞水平,改善大鼠踝关节病理形态,其中蕲蛇CⅡ中剂量组和牛CⅡ组还能显著降低CD4+/CD8+比值(P<0.05)。结论:蕲蛇水提液及蕲蛇CⅡ提取物对CIA大鼠关节炎症均有一定的治疗作用,其治疗机理可能是通过主动免疫抑制降低机体亢进的免疫应答实现的。

类风湿性关节炎患者血清抗Ⅱ型胶原抗体的检测及意义

目的 探讨类风湿性关节炎 (RA)患者血清抗Ⅱ型胶原 (CⅡ )抗体阳性的意义。方法 分别以人Ⅱ型胶原蛋白(HCⅡ )及牛Ⅱ型胶原蛋白CⅡ (BCⅡ )作为包被抗原进行间接ELISA法 ,检测 30例RA患者 ,对照组 (30例非RA的风湿病患者和 34例健康人 )血清抗CⅡ抗体。结果 以HCⅡ及BCⅡ作为包被抗原检测RA患者血清抗CⅡ抗体的阳性率分别约为 30 .0 %和 33.3% ;对照组血清中抗体阳性率均约为 1.6 % ;二者差异极其显著 (P <0 .0 1)。抗CⅡ抗体阳性的RA患者RF的阳性率高于抗CⅡ抗体阴性的RA患者。与HCⅡ和BCⅡ均发生阳性反应的血清 8例 ,均为早期RA患者。结论 抗CⅡ抗体可作为判断RA患者病情的辅助手段之一 。

重组人Ⅱ型胶原250-270多肽对特异性体液免疫的抑制作用

目的:研究口服重组人Ⅱ型胶原250-270多肽(CⅡ250-270)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠特异性体液免疫反应的抑制作用,为应用口服CⅡ250-270治疗类风湿关节炎提供理论依据。方法:ELISA测定加强免疫后小鼠血清中抗原特异性抗体的表达,ELISPOT检测小鼠脾脏淋巴细胞中抗原特异性抗体形成细胞。结果:口服重组人CⅡ250-270小鼠血清中抗CⅡ和抗CⅡ250-270的IgG抗体水平[A值分别为(0.82±0.02)、(0.84±0.04)]比CⅡ免疫对照组[抗CⅡ的IgG抗体水平,A值为(1.01±0.06)]显著降低,而且特异性抗CⅡ250-270的IgG抗体反应在口服多肽组被明显抑制(P<0.01);口服重组人CⅡ250-270小鼠的CⅡ和CⅡ250-270特异性抗体形成脾细胞的增殖频率分别为(158±9计数/孔)、(181±10计数/孔),比CⅡ免疫对照组[CⅡ特异性抗体形成脾细胞的增殖频率为(247±16计数/孔)]也显著减少(P<0.05)。结论:口服重组人CⅡ250-270多肽具有抑制CIA小鼠的特异性体液免疫的作用,可能是此疗法治疗CIA多发性关节炎的重要机制。

牛Ⅱ型胶原诱导SD大鼠类风湿关节炎模型的建立

【目的】探讨牛II型胶原诱导SD大鼠构建类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)模型的可行性,为今后深入研究RA提供理想的动物模型。【方法】选择60只4周龄的SD大鼠,依据体重相近的原则随机分组(模型组50只,对照组10只),模型组通过注射牛Ⅱ型胶原建模,并通过体征观察、病理组织切片评价、钼靶影像学检测等判定建模是否成功。【结果】通过尾静脉注射牛Ⅱ型胶原免疫SD大鼠的建模成功率高达90.0%。与对照组SD大鼠相比,模型组SD大鼠体重减轻,活动减少,精神萎靡,先是后足小趾或踝关节红肿,之后炎症漫延至前肢,最终发展成慢性、多发性、对称性关节炎;模型组SD大鼠关节滑膜层次增多,且有大量炎性细胞浸润,软骨及骨组织受损,关节腔结构紊乱;模型组SD组大鼠从初次免疫第10周开始,其关节间隙狭窄、模糊,骨质疏松,关节软骨及骨组织受损。【结论】SD大鼠是研究RA发病机制及研发抗风湿药物的理想动物模型,可丰富该疾病动物模型的选择。

2种品系大鼠Ⅱ型胶原诱导关节炎模型的比较

【目的】构建SD大鼠和Wistar大鼠Ⅱ型胶原诱导关节炎模型(CIA),比较和评价2种品系大鼠的建模效果。【方法】将SD大鼠和Wistar大鼠(各12只)分别于第1、8天给予尾根部皮下注射Ⅱ型胶原蛋白+弗氏完全佐剂(CFA)乳剂、Ⅱ型胶原蛋白+弗式不完全佐剂(IFA)乳剂建立CIA模型。造模结束后,比较SD大鼠与Wistar大鼠的一般形态、关节炎指数、关节病理变化。【结果】(1)SD大鼠和Wistar大鼠造模后14 d均可见关节炎症,造模后21、28 d关节炎症加重且存在相应病理改变。(2)造模后14、21、28 d,SD大鼠关节炎指数评分显著高于Wistar大鼠(P <0.01),病理改变也是前者比后者严重。【结论】采用尾根部皮下注射适量Ⅱ型胶原蛋白法均能成功建立SD大鼠和Wistar大鼠CIA模型,且SD大鼠的关节炎症重于Wistar大鼠。

Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型制备

目的:研究建立较为理想的寒湿痹型实验性类风湿关节炎模型。方法:采用不同浓度Ⅱ型胶原和弗氏佐剂联合应用于大鼠足部注射,诱导关节炎;测量大鼠足肿胀度,并计算肿胀率;检测血清唾液酸水平;观察滑膜组织病理学及超微结构变化。结果:低浓度Ⅱ型胶原和完全佐剂组大鼠关节肿势迅猛,近似于佐剂关节炎大鼠模型,高浓度Ⅱ型胶原和不完全佐剂组大鼠关节肿势和缓;各模型组大鼠血清唾液酸水平均高于正常对照组;滑膜组织的病理学变化与类风湿关节炎相符。结论:高浓度的Ⅱ型胶原加不完全佐剂给药组是较为理想类风湿关节炎大鼠模型,中医辩证属寒湿痹症,与之相比较,佐剂关节炎模型接近于湿热痹症。

口服Ⅱ型胶原治疗类风湿关节炎的临床研究

目的 研究和比较不同剂量Ⅱ型胶原治疗类风湿关节炎的疗效和安全性。方法 为随机比较的临床试验。共完成病例 6 6例 ,口服Ⅱ型胶原 2 0 μg、6 0 μg、10 0 μg和 15 0μg ,每天一次 ,疗程 8周。 结果 总有效率 :4周 2 0 μg、6 0μg、10 0 μg和 15 0 μg组分别为 2 8 5 7%、5 0 0 0 %、46 6 2 %和46 6 7% ;8周 6 0 μg、10 0 μg和 15 0 μg组分别为 6 2 5 0 %、6 0 0 0 %和 5 7 14%。不同剂量组之间疗效总有效率无明显差异 (P >0 0 5 )。但 2 0 μg组仅能改善患者的关节压痛和手握力 ,对晨僵、关节肿胀、关节功能等不能改善 ;而 6 0 μg、10 0μg和 15 0 μg能明显改善患者以上的症状和体征 ,降低血沉。安全性评价 :3例患者有轻度腹胀 ,1例患者偶有少量鼻出血 ,不良反应发生率 :6 0 6 % (4 / 6 6例 )。结论 Ⅱ型胶原可以改善类风关患者的关节症状且无毒副作用 ,值得推荐的剂量为 6 0 μg、10 0

鸡Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎大鼠模型的建立

目的以鸡Ⅱ型胶原皮内免疫Wistar大鼠,建立类风湿关节炎的大鼠模型。方法用鸡Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂于大鼠皮内注射免疫,自大鼠发病起,观察大鼠的踝关节部位的肿胀,毛色及运动状态;用ELISA法检测大鼠血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平;采用X线摄片、病理组织学等方法进行大鼠病理学特征分析。结果ELISA结果提示实验组大鼠血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平较正常对照组明显高(P<0.001);与正常对照组相比,实验组大鼠脚踝与脚趾有明显的肿胀;X线摄片结果和病理学分析结果显示,实验组大鼠的关节组织呈现典型的关节病变的特征。结论本实验成功建立了鸡Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎大鼠模型。Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎大鼠模型的病理学特征与人类RA极为相似,为更好的研究人类RA的发病机制及其治疗研究提供了一个良好的动物模型。

鸡Ⅱ型胶原双盲随机对照治疗类风湿关节炎的研究

目的观察口服鸡Ⅱ型(CCⅡ)胶原胶囊治疗我国活动性类风湿关节炎(RA)患者的疗效和安全性。方法采用随机、双盲双模拟、平行对照临床研究。共入选病例60例,口服鸡Ⅱ型胶原胶囊90μg/d,或甲氨蝶呤(MTX)10mg/周,疗程24周。其中5例患者被剔除,最后纳入统计共55例,MTX组29例,CⅡ组26例。结果口服CCⅡ能明显改善RA患者的休息痛、晨僵、压痛关节指数、肿胀关节指数、患者评价、日常生活能力、血沉和C反应蛋白(P<0.05),但对压痛关节指数、肿胀关节指数、关节功能、日常生活能力、血沉的改善不及MTX(P<0.05)。按国内抗风湿药疗效评价标准,两组在治疗12周时疗效差异无统计学意义,治疗18、24周时CⅡ疗效不及MTX(P<0.05)。ACR20%在12、18和24周时MTX组疗效较CⅡ组好(P<0.05);ACR50%在18周时MTX组疗效较CⅡ组好(P<0.05),但12和24周时两组差异无统计学意义。CⅡ组无因不良反应停药者,对肝、肾功能、血常规未见影响,胃肠道等不适反应明显低于MTX组(P<0.05),MTX组有1例患者因服药后转氨酶升高3倍以上而停药。结论口服CCⅡ治疗RA具有一定的疗效且不良反应较少,但总体疗效不及MTX。

宣痹汤对Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠Th1/Th2细胞漂移的影响

目的:观察宣痹汤对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠Th1/Th2细胞漂移的影响。方法:将大鼠随机分为正常组(N组)和模型复制组,模型复制组经成功复制CIA大鼠模型后,随机分为模型组(M组)和宣痹汤组(X组)。X组灌胃给予宣痹汤3周,同时M组和N组给予9.0 g/L氯化钠注射液3周。其间测量非致炎足踝关节直径,并进行关节炎指数评分。灌胃结束后,经股动脉取全血,使用ELISA法测定血清INFγ和IL-4水平;使用流式细胞术,以外周血CD4+INFγ+和CD4+IL-4+T细胞分别代表Th1和Th2细胞,测定各自在淋巴细胞所占比例,计算Th1/Th2比值,并将CIA大鼠踝关节直径与Th1/Th2比值进行相关性分析。结果:与M组相比,CIA大鼠关节直径、关节炎指数评分均有改善(P<0.05);血清INFγ和IL-4水平,Th1所占比例以及Th1/Th2比值均显著下降(P<0.01),Th2所占比率显著上升(P<0.01),且CIA大鼠临床症状的改善与Th1/Th2比值降低具有相关性(r=0.846,P<0.01)。结论:宣痹汤能有效缓解CIA大鼠临床症状,恢复Th1/Th2漂移,这可能是其临床治疗类风湿关节炎的机制之一。

血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体检测法的建立与应用

目的建立血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的ELISA法,探讨其在类风湿关节炎(RA)患者中的应用价值。方法以自提可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(soluble chicken collagen type Ⅱ,SCCⅡ)作为包被抗原,优化实验条件,建立抗Ⅱ型胶原蛋白抗体间接ELISA法。对124例RA病人和54例健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体进行检测。结果血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的检测条件为:SCCⅡ包被浓度为20μg/ml;以含10%羊血清的缓冲液进行封闭、稀释血清和酶标抗体;采用双波长(450nm/630nm)进行测定。RA患者和健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体阳性率分别为19.35%(24/124)和1.85%(1/54),两组有明显的统计学差异(P<0.01)。结论以SCCⅡ为包被抗原检测抗Ⅱ型胶原蛋白抗体可作为判断RA患者病情的一个辅助诊断指标。

类风湿性关节炎患者抗天然Ⅱ型胶原抗体的测定及临床意义

以本科提纯的天然Ⅱ型胶原（ＮａｔⅡ）为抗原，以新鲜羊血清平衡液为封闭液，用酶联免疫方法检测８８例类风湿性关节炎（ＲＡ）病人和８２例健康对照者血清中抗ＮａｔⅡ抗体水平。结果：ＲＡ病人血清抗ＮａｔⅡ抗体阳性率为：ＩｇＧ３６．３６％、ＩｇＭ１９．３２％；健康对照者分别为：４．８８％及１．２％。抗ＮａｔⅡ抗体ＩｇＧ阳性的ＲＡ患者血小板升高，类风湿因子阳性及关节Ｘ线分期较高者均多于阴性的ＲＡ患者（Ｐ＜０．０５）。在抗ＮａｔⅡ抗体ＩｇＭ阳性组仅血小板升高者多于阴性组（Ｐ＜０．０１）。ＲＡ病人的抗ＮａｔⅡ抗体阳性率高于健康对照者，提示对ＮａｔⅡ的自身免疫在ＲＡ的发病机制中可能起一定作用。