类风湿性关节炎患者外周血IL-1RI水平的变化

目的探讨外周血白细胞介素-1受体I型(IL-1RI)水平与类风湿性关节炎的相关性。方法应用酶联免疫吸附技术检测类风湿性关节炎(RA)患者94例,其中活动期和非活动期各47例;系统性红斑狼疮(SLE)患者40例,其中活动期和非活动期各20例;急性上呼吸道感染(AURTI)患者20例;健康体检者20名的外周血血清IL-1RI水平。结果各组间差异均有统计学意义(P<0.001)。RA组、SLE组、AURTI组和健康对照组均数间两两比较,RA组与各组间均有统计学意义(P<0.01),其余各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。RA和SLE按临床症状分活动期和非活动期后各组均数间两两比较,RA活动期组与各组间差异均有统计学意义(P<0.05),RA非活动期与各组间差异均有统计学意义(P<0.05),其余各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论外周血IL-1RI与类风湿性关节炎免疫炎症相关,可以作为RA的诊断和疗效判断指标之一。

重组人白细胞介素-1受体拮抗剂对大鼠胶原性关节炎的治疗作用

目的 研究重组人白细胞介素 1受体拮抗剂 (recom binanthumaninterleukin1receptorantagonist, rhIL 1ra)对大鼠胶原性关节炎 (collagen inducedarthritis,CIA)的治疗作用。方法 SD大鼠随机分为 6组:正常对照组、模型组、rhIL 1ra3个剂量组和进口IL 1ra组;采用Ⅱ型胶原(CⅡ)乳剂皮内注射诱导大鼠CIA模型;每周测体重观察体重变化;足爪容积法测量大鼠足爪肿胀度;测定CⅡ的迟发性变态反应(DTH);ELISA法检测血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平;同时进行病理组织学的检查。结果 CIA大鼠在致炎d10,出现关节红、肿,体重减轻,血清抗CⅡ抗体水平升高,关节病理可见滑膜增生,炎性细胞浸润,血管翳形成,软骨和骨的破坏等。rhIL 1ra(7 5, 30, 120mg·kg-1 )和阳性对照组anakinra(120mg·kg-1 )皮下注射,连续 7d,能明显抑制CIA大鼠足肿胀;rhIL 1ra(30, 120mg·kg-1 )皮下注射,连续 7d,可以明显减轻CⅡ诱发的迟发性变态反应 (DTH);另外,rhIL 1ra也可明显降低CIA大鼠血清中抗CⅡ抗体的水平;病理学检查表明,rhIL 1ra大剂量能明显减轻CIA大鼠关节滑膜炎症和滑膜增生,减轻血管翳和软骨破坏。结论 rhIL 1ra对CIA具有治疗作用。

类风湿关节炎患者血清可溶性髓样细胞触发受体-1、白介素-17水平研究

目的:对类风湿关节炎(RA)患者血清可溶性髓样细胞触发受体-1、白介素-17水平进行研究。方法:选取本院2010年1月-2012年12月住院部和门诊收治的类风湿关节炎患者50例(观察组),将50例患者按照DSA28的评分大小分为活动组和非活动组,并另选取同一时间在本院进行体检的健康者50例为对照组,应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)对所有患者的TREM-1和IL-17进行检验,并同时检测观察组患者的RHF、CRP、CCP以及C3水平。结果:观察组的TREM-1和IL-17水平明显大于对照组(P<0.05);活动组的TREM-1水平明显大于非活动组(P<0.05),活动组和非活动组IL-17水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。对RA患者活动组和非活动组各项血清指标的比较:CCP和RHF指标组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);而CRP、C3指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:TREM-1指标在RA患者中呈高表达,TREM-1可以作为反映RA患者病情活动的重要指标,且IL-17和TREM-1之间可协同作用。

四妙勇安汤合白虎汤加味辨治类风湿关节炎湿热痹阻证疗效及对血清sTREM-1、IL-32、GPI水平的影响

目的:观察四妙勇安汤合白虎汤加味辨治类风湿关节炎湿热痹阻证的临床效果及其对血清中可溶性髓样细胞触发受体-1 (sTREM-1)、白细胞介素-32 (IL-32)、葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)水平的影响。方法:选取120例类风湿关节炎患者,按照随机数字表法分为对照组和观察组各60例。对照组给予常规西药口服,观察组在对照组的基础上加用四妙勇安汤合白虎汤加味口服。通过中医证候积分变化比较2组治疗后的临床效果,进行疾病活动度(DAS28)、视觉模拟评分法(VAS)评分,并监测血清中相关因子水平。结果:治疗后,观察组的中医有效率为94.64%,高于对照组的78.57%(P<0.05)。与同组治疗前比较,2组治疗8周、12周后中医证候积分均降低(P<0.05),2组治疗后DAS28评分、VAS评分及血清类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)、sTREM-1、IL-32、GPI水平均降低(P<0.05)。与对照组治疗8周、12周后比较,观察组治疗8周、12周后中医证候积分均较低(P<0.05)。与对照组治疗后比较,观察组治疗后DAS28评分、VAS评分及血清RF、ESR、sTREM-1、IL-32、GPI水平均较低(P<0.05)。结论:四妙勇安汤合白虎汤加味在减轻类风湿关节炎患者临床症状、控制病情进展方面有更好的效果,初步推断这可能与其能调控血清中sTREM-1、IL-32、GPI水平以减轻软骨炎症损伤有关。

^(99)Tc-MDP对类风湿性关节炎患者外周血单核细胞产生细胞因子的影响

目的 :探讨“云克”(99Tc MDP)治疗类风湿性关节炎 (RA)的免疫机制。方法 :采用ELISA双抗体夹心法 ,观察“云克”体外对RA患者外周血单核细胞 (PBMC)产生白介素 1(IL 1)和可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)的影响。结果 :“云克”有抑制RA患者IL 1的分泌及细菌脂多糖 (LPS)的促分泌作用 ,并对可溶性白介素 2受体的自发分泌及植物血素 (PHA)诱导分泌均有抑制作用。结论 :“云克”对RA的治疗机制可能与其降低IL 1和sIL

特异性白介素1受体拮抗蛋白放射免疫分析的建立及初步应用

用人工重组的白介素 1受体拮抗蛋白 (I 1ra)免疫新西兰兔 ,获取高效价特异的IL 1ra抗体。用氯氨T氧化法制备12 5I标记IL 1ra ,经SephadexG 2 5纯化 ,竞争性抗原抗体反应采用非平衡法 ,标准品和待测样品同抗体反应 37℃ 6小时后加入12 5I 标记抗原继续反应 4℃ 2 4小时。经PR试剂分离结合和分离的标记抗原。该法标准曲线范围 3～ 96ng ml,最低检出量为 ( 9 0± 1 4ng ml,n =89) ,类风湿因子阳性的病人血清含量为 ( 39 0 6± 15 2 3ng ml,n =14)。肠缺血再灌损伤后 6小时大鼠血清中IL 1ra较伤前自身对照明显增加 (P <0 0 0 1,n =82 )。肺灌洗液中损伤前后没有明显差异。该法特异、灵敏、简便 ,可用于人血清和大鼠血清及肺灌注液中IL

复方芪芎颗粒对关节炎模型大鼠的保护作用

目的观察复方芪芎颗粒对关节炎模型大鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法Wistar大鼠70只,随机分为正常对照组,模型对照组,复方芪芎颗粒小、中、大剂量组,甲氨蝶呤组和雷公藤多苷组(n=10)。除正常对照组外,其他大鼠制备关节炎大鼠模型。正常对照组与模型对照组灌胃0.9%氯化钠溶液,其他组灌胃相应药物。比较造模前、造模后及给药3周后大鼠足趾厚度变化;免疫组化法检测大鼠滑膜组织Toll样受体7(TLR7)、白细胞介素-1受体相关激酶2(IRAK2)平均吸光度;蛋白免疫印迹法检测大鼠滑膜组织TLR7、IRAK2表达情况。结果与正常对照组比较,其他组大鼠造模完成后足跖均明显肿胀(P<0.05);给药3周后,与模型对照组比较,复方芪芎颗粒大剂量组足跖肿胀改善情况与甲氨蝶呤组相当,均优于复方芪芎颗粒小、中剂量组及雷公藤多苷组(P<0.05);复方芪芎颗粒大剂量组TLR7、IRAK2平均吸光度降低程度较复方芪芎颗粒小、中剂量组及雷公藤多苷组显著(P<0.05);复方芪芎颗粒大剂量组TLR7、IRAK2蛋白表达降低程度较复方芪芎颗粒小、中剂量组及雷公藤多苷组显著(P<0.05)。结论复方芪芎颗粒可能通过抑制TLR7及IRAK2发挥缓解类风湿关节炎作用。

人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞培养及生物学特性研究

目的探讨人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)的分离及生物学特性。方法分别取4例RA患者膝关节滑膜组织、1例软骨瘤患者膝关节滑膜组织和1名健康人膝关节滑膜组织,采用组织块培养法培养FLS,使用相差显微镜观察细胞形态,流式细胞术(FCM)检测培养细胞的表面标志,酶联免疫吸附法定量检测RA第4代FLS细胞培养液上清液白细胞介素-1受体I型(IL-1RI)和白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果组织块培养法成功培养出FLS。RA患者FLS细胞4～7d细胞数量明显增加,8～12d细胞可以长满瓶底。第3代以后细胞均质性最好,3～7代细胞稳定且增殖活跃,8代以后增长缓慢并逐渐老化。软骨瘤患者和健康人滑膜组织培养7d后才有散在单个FLS细胞爬出,大约16d后FLS细胞可以长满瓶底。FCM分析RA第4代FLSCD90+细胞的百分率为99.04%,CD3+为2.73%,CD3-CD19+为0.29%,CD3-CD16+CD56+为2.81%,CD14+为5.89%,CD55+为54.17%。RA第4代FLS细胞培养上清液IL-1RI浓度为(158.63±20.32)pg/ml,IL-1β为(4.67±0.82)pg/ml。结论组织块培养法能有效分离RA患者FLS,FLS具有高水平表达CD90、IL-1RI和IL-1β的特性。

类风湿性关节炎两种不同证型与三种可溶性细胞因子受体之间关系的探讨

目的:探讨痹证中类风湿性关节炎(RA)的两种证型(寒湿阻络证和湿热阻络证)与3种可溶性细胞因子受体(sCKR),即可溶性白细胞介素2、6受体(sIL2R、sIL6R)、可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR1)之间的关系。方法:用ELISA法测定两证型患者血清中3种sCKR。结果:RA患者中3种sCKR均显著高于健康人,经治疗后均显著下降;寒湿阻络证sIL2R显著高于湿热阻络证,而sTNFR1显著低于湿热阻络证,sIL6R则两证型患者未见明显差异。结论:RA寒湿阻络证患者可能以sIL2R的显著升高和sTNFR1的明显降低为特征,湿热阻络证患者可能以sTNFR1的显著升高和sIL2R的显著降低为主。

血管紧张素Ⅱ及其受体与类风湿关节炎

血管紧张素Ⅱ及其受体是心血管疾病的重要治疗靶点,血管紧张素Ⅱ以自分泌或旁分泌的形式与1型受体(AT1R)作用,通过刺激单核细胞趋化移行、促进T淋巴细胞活化增殖、增强Th1和Th17免疫功能、抑制关节滑膜细胞凋亡,促进了类风湿关节炎(RA)患者体内的炎症免疫损伤。血管紧张素转化酶抑制剂(ACEIs)和AT1R阻断剂分别通过限制血管紧张素Ⅱ的产生和阻断血管紧张素Ⅱ与AT1R的相互作用,进而缓解RA体内的炎症免疫反应。另外,RA及其实验动物模型体内血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)表达增高,激动AT2R可以发挥缓解佐剂性关节炎(AIA)大鼠炎症免疫反应的作用。该文就近年来血管紧张素Ⅱ及其受体在RA中致病机制和治疗作用的研究进展进行综述。

胶原诱导关节炎小鼠体内Tfh细胞及其相关免疫分子的表达

目的检测鸡Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠中滤泡辅助性T(Tfh)细胞及其细胞因子表达水平,探讨Tfh细胞与类风湿性关节炎之间的关系。方法利用鸡Ⅱ型胶原蛋白造模小鼠制备人类类风湿关节炎动物模型CIA小鼠,造模后进行病情观察并利用关节炎指数(AI)进行评分,正常野生型(wide type,WT)小鼠按照CIA小鼠相同方法和时间注入等量生理盐水为对照组,流式检测CIA小鼠和对照组小鼠脾脏和淋巴结中Tfh细胞数量和比例差异,实时荧光定量PCR检测两组小鼠脾脏细胞中Bcl-6和IL-21 mRNA水平,ELISA比较血浆中细胞因子IL-21表达差异。结果 (1)流式细胞术结果显示:CIA小鼠脾脏中CXCR5^+ICOS^+Tfh细胞占CD4^+T细胞比例明显高于WT小鼠(2.684±0.116 8 vs 1.928±0.162 4,P<0.05);CIA小鼠淋巴结中CXCR5^+ICOS^+Tfh细胞占CD4^+T细胞比例明显高于WT小鼠(1.960±0.169 5 vs1.211±0.093 9,P<0.05)。(2)实时荧光定量PCR检测结果提示:CIA小鼠脾脏中Bcl-6 mRNA表达高于WT小鼠(1.000±0.050 69 vs 0.600±0.050 54,P<0.05);CIA小鼠脾脏中IL-21 mRNA表达高于WT小鼠(1.000±0.060 75 vs 0.530±0.050 54,P<0.05)。(3)ELISA结果显示:CIA小鼠血浆中IL-21水平明显高于WT小鼠(104.3±3.541 vs 60.2±10.170,P<0.05)。结论 CIA小鼠外周免疫器官中Tfh细胞比例及其相关免疫分子表达明显升高,血浆中Tfh细胞分泌的特异性细胞因子IL-21显著升高,Tfh细胞与RA的发生和病情进展有密切关系。

人重组白细胞介素-1受体拮抗剂在类风湿关节炎治疗中的继发性失效

目的观察人重组白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-IRa）联合甲氨蝶呤治疗活动期类风湿关节炎（RA）患者的疗效。方法54例经甲氨蝶呤治疗至少12周以上的活动期RA患者，随机接受每日皮下注射IL-1Ra80mg或安慰剂，每4周进行随访，按照美国风湿病学会制订的疗效标准评估临床疗效，共24周。应用矿检验比较2治疗组间疗效达到ACR20、ACR50和ACR70的患者比例的差异。应用t检验（参数分析）或者秩和检验（非参数分析）比较2治疗组间基线值变量和28个关节的疾病活动指数（DAS28）的差异。结果在治疗第24周，IL-1Ra联合甲氨蝶呤治疗组中27例（64％）的患者疗效改善达到ACR20，显著高于安慰剂组2例（17％）（P=0．004）。IL-1Ra治疗组中，38％的患者疗效改善达到ACR50，17％达到ACR70；而安慰剂组中无一例达到ACR50或ACR70改善。然而，接受IL．1Ra治疗的42例患者中有9例在初始治疗时病情显著改善，但之后却出现疗效下降。结论IL，1Ra通过阻断IL-1，可有效改善活动期RA患者的临床表现。然而，大约1／5接受IL-1Ra治疗的患者发生继发性失效。

低浓度硫化氢对类风湿性关节病变的软骨保护

背景:类风湿性关节炎是一种常见的慢性系统性自身免疫疾病,以关节滑膜病变、骨质侵蚀为主要特征,临床上的治疗仍然比较棘手。目的:探讨外源性硫化氢对类风湿性关节炎大鼠关节病变的影响。方法:将SD大鼠分为4组:空白组、模型组、高浓度硫化氢干预组、低浓度硫化氢干预组。干预2,4周时,测量关节炎指数,血清炎症因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β水平,滑膜组织病理学变化,膝关节标本Ⅱ型胶原染色的平均吸光度值。结果与结论:从关节炎指数,血清炎症因子水平以及滑膜染色炎性浸润方面看,模型组以及硫化氢干预组均高于空白组,高浓度硫化氢干预组明显高于模型组(P<0.05),低浓度硫化氢干预组低于模型组(P<0.05)。在膝关节软骨Ⅱ型胶原染色的平均吸光度值方面,模型组以及2个硫化氢干预组均低于空白组,高浓度硫化氢干预组明显低于模型组(P<0.05),低浓度硫化氢干预组高于模型组(P<0.05)。结果可见硫化氢对类风湿关节炎症有调节作用,高浓度的硫化氢加重关节炎症及软骨降解,低浓度的硫化氢减轻关节炎症并对软骨有保护作用。

重组人白细胞介素-1受体拮抗剂联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎病情、影像学影响的临床评价

目的评价重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(rhIL-1Ra)治疗活动性类风湿关节炎(RA)的24周疗效及对RA影像学的影响。方法采用多中心、随机、双盲、平行对照的临床试验研究,南方医院试验中心确诊的活动期RA受试者40例,依照方案以3:1比例,随机分为rhIL-1Ra组(治疗组)和MTX组(对照组),治疗组30例予rhIL-1Ra联合MTX治疗,对照组10例予MTX治疗,并进行随访观察,疗程均为24周。主要评价指标为12周和24周时较基线期达到RA疗效评价标准20(ACR20)的患者比例;次要评价指标包括随访12周及24周时较基线期达到RA疗效评价标准50、70(ACR50、ACR70)的患者比例、晨僵持续时间、关节肿胀和关节触痛计数、VAS评分、健康评估问卷(HAQ)、急性期反应物水平(ESR、CRP),并对患者治疗前后的双腕关节进行影像学Sharp评分。结果第12周时治疗组ACR20为73%、ACR50为37%、ACR70为13%,对照组ACR20为10%、ACR50为10%、ACR70为0%(P=0.000);第24周时治疗组ACR20为87%、ACR50为50%、ACR70为37%,对照组ACR20为50%、ACR50为10%、ACR70为0%(P=0.000);其他各项疗效指标也反映出相似的改善程度及趋势(P=0.000)。双腕关节Sharp评分:治疗组0周关节侵蚀评分平均值为2.33,治疗24周为2.23(P=0.795),0周关节狭窄评分的平均值为1.70,治疗24周为1.43(P=0.343);对照组0周关节侵蚀评分平均值为2.60,治疗24周为3.60(P=0.024),0周关节狭窄评分的平均值为1.70,治疗24周为2.50(P=0.019)。结论rhIL-1Ra联合MTX治疗RA24周的疗效明显优于单用MTX,能明显控制RA病程并提示rhIL-1Ra有可能阻止RA患者影像学的进展。

伸筋草总生物碱改善大鼠类风湿性关节炎的机制研究

目的通过白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨伸筋草总生物碱治疗类风湿性关节炎(RA)的机制。方法注射弗氏佐剂建立RA模型。将实验大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和伸筋草高、低剂量组,每组10只。给药21 d后,采用容积排水法测定各组大鼠右踝关节肿胀程度;Western Blot法测定大鼠踝关节滑膜组织IRAK1、TRAF6、NF-κB p65蛋白表达;Elisa法测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果与模型组比较,伸筋草高、低剂量组大鼠踝关节肿胀程度明显降低(P<0.05),滑膜组织IRAK1、TRAF6和NF-κB p65蛋白表达显著下调(P<0.05);伸筋草高剂量组大鼠血清中IL-1β和IFN-γ水平显著下降(P<0.05),伸筋草低剂量组IL-1β水平明显降低(P<0.05),IFN-γ水平可见下降趋势。结论伸筋草总生物碱可降低RA大鼠踝关节的肿胀,其作用机制与抑制IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路及其下游炎性因子的分泌密切相关。

氨甲喋呤治疗类风湿性关节炎免疫机制的研究

采用ELISA双抗夹心法，观察了氨甲喋呤（MTX）体外对类风湿性关节炎（RA）患者外周血单个核细胞（PBMC）产生IL－1和sIL－2R的影响，结果发现，MTX（10mg／L）有抑制RA患者IL－1的分泌及LPS的促分泌作用，并对sIL－2R的自发分泌及PHA诱导分泌均有抑制作用，本文结果表明MTX对RA的治疗机制可能与其降低IL－1和SIL－2R的作用有关。

复方芪芎颗粒对佐剂型关节炎大鼠滑膜组织MyD88、TRAF-6、IRAK-1的影响

目的探究复方芪芎颗粒对佐剂型关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠滑膜组织中骨髓分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor associated factor 6,TRAF-6)及白细胞介素1受体相关激酶(interleukin 1 receptor associated kinase,IRAK-1)蛋白表达及信号传导机制的影响。方法随机将60只大鼠分为正常组、模型组、复方芪芎颗粒小剂量组、复方芪芎颗粒中剂量组、复方芪芎颗粒大剂量组、雷公藤组,每组各10只。除正常组外,其余5组按弗氏完全佐剂标准注射,将实验大鼠进行造模。造模成功后,复方芪芎颗粒大、中、小剂量组和雷公藤组分别给予不同剂量复方芪芎颗粒或雷公藤灌胃给药。对比大鼠造模前、给药前、药物干预2周后、4周后大鼠致炎侧后足直径变化,评价各关节炎大鼠的炎症指数(arthritis index,AI)。采用蛋白印迹(westem blot)法检测大鼠滑膜组织中MyD88、TRAF-6及IRAK-1蛋白的表达水平。结果给药前各造模大鼠致炎侧后足的直径及其肿胀度均大于正常组(F=68.090,P=0.000),表明造模成功。与模型组比较,给药2、4周后复方芪芎颗粒小、中、大剂量组和雷公藤组大鼠致炎侧后足直径均有下降(P均<0.01);复方芪芎颗粒大、中剂量组大鼠后足直径较雷公藤组下降明显(P均<0.01)。给药4周后,复方芪芎颗粒小、中、大剂量组、雷公藤组AI均低于模型组(P均<0.01);复方芪芎颗粒大、中剂量组AI均低于复方芪芎颗粒小剂量组与雷公藤组(P<0.01或0.05)。复方芪芎颗粒小、中、大剂量组,雷公藤组MyD88、TRAF-6及IRAK-1蛋白的表达均低于模型组(P<0.01或0.05)。与雷公藤组比较,复方芪芎颗粒大、中剂量组MyD88、TRAF-6及IRAK-1蛋白表达均降低(P均<0.01)。结论复方芪芎颗粒对AA有较好的治疗作用,其机制可能与抑制异常激活的MyD88、TRAF-6及IRAK-1蛋白表达密切相关。

二藤蠲痹汤联合西药治疗类风湿性关节炎临床观察

目的:分析二藤蠲痹汤联合西药治疗类风湿性关节炎的临床疗效。方法:选取我院于2017年2月~2018年8月收治的140例类风湿性关节炎患者的临床资料进行分析,分为两组。对照组采用西医常规治疗,观察组采用二藤蠲痹汤治疗,分析两组患者治疗后的临床疗效。结果:两组患者治疗前中医症候评分组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后关节疼痛、关节肿胀、屈伸不利、晨僵评分较治疗前下降,且观察组患者治疗后关节疼痛、关节肿胀、屈伸不利、晨僵评分低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗前巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、白细胞介素-17(IL-17)、核转录因子-κB受体活化因子(RNAKL)、金属蛋白酶-3(MMP-3)、骨保护素(OPG)、金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后MIP-1α、IL-17、RNAKL、MMP-3、TNF-α水平较治疗前下降,OPG、TIMP-1水平较治疗前上升,且观察组患者治疗后MIP-1α、IL-17、RNAKL、MMP-3、TNF-α水平低于对照组,OPG、TIMP-1水平高于对照组(P<0.05)。两组患者治疗前生活质量(SF-36)评分组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后生理健康、心理健康总评分较治疗前上升,且观察组患者治疗后SF-36评分高于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应情况比较,差异不具有统计学意义(χ~2=0.207;P=0.649)。结论:二藤蠲痹汤治疗类风湿性关节炎,能有效缓解患者症状体征,降低患者MIP-1α、RNAKL、IL-17水平,提高患者生活质量。

类风湿关节炎患者外周血白细胞介素1受体相关激酶1与疾病活动及CD4^(+)T细胞亚群分析

目的:探索RA患者外周血白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK1)的表达,并分析其与疾病活动及CD4+T细胞亚群的相关性。方法:①采用ELISA检测77例RA组患者和24名健康对照组外周血中IRAK1的活性表达量;②收集RA患者的一般资料及临床观察指标(包括DAS28评分、ESR、CRP、外周血CD4+T细胞亚群等);③采用独立样本t检验或Mann-whitney U检验进行两组间的比较;采用Spearman秩相关及多元线性回归分析IRAK1的表达水平与各临床观察指标的相关性。结果:①RA组外周血IRAK1的表达相比于健康对照组显著升高(P<0.001)。②RA组外周血CD4+T细胞亚群,较健康对照组相比,调节性T细胞(Treg)绝对值、Treg%均降低(P<0.001),辅助性T细胞17(Th17)绝对值、Th17%、Th17/Treg比值均升高(P<0.001),且Th1/Th2比值明显升高(P<0.05)。③随着RA患者疾病活动度的增加,IRAK1的活性表达量也增加,RA组外周血IRAK1的表达与ESR、受累关节的个数、DAS28评分呈正相关(r=0.23,P<0.05;r=0.24,P<0.05;r=0.27,P<0.05);同时,又与Treg%呈负相关(r=-0.27,P<0.05),与Th17/Treg比值呈正相关(r=0.23,P<0.05);而与Th1/Th2比值无明显相关性(P>0.05)。多元逐步回归分析进一步显示,RA组的IRAK1与ESR、受累关节个数均呈正相关(β=0.34,P=0.019;β=0.27,P=0.004;),与Treg%呈负相关(β=-0.23,P=0.057,R2=0.219)。结论:RA患者外周血IRAK1表达上调,且与疾病活动度相关;IRAK1高表达所致Treg减少、Th17/Treg失衡可能是RA疾病发生、发展的主要因素之一。

白介素I受体拮抗剂基因治疗小鼠Ⅱ型胶原关节炎的疗效观察

目的 探讨白细胞介素I受体拮抗剂 (IL 1ra)基因治疗小鼠Ⅱ型胶原关节炎效果 ,为临床开展类风湿关节炎基因治疗奠定基础。方法 通过基因工程方法将人IL 1racDNA插入真核表达载体pcDI中 ,构建成在真核细胞内表达IL 1ra的质粒pcDI IL 1ra。经酶切、PCR和DNA测序鉴定均证实了插入片段的正确性。体外和体内转染真核细胞后 ,分别用ELISA和免疫组织化学方法检测到了IL 1ra的高效表达。将小鼠分成 4组 ,每组 8只 ,1组、2组用基因枪给药法 (2 0 μg 只小鼠 ) ,3组、4组用肌肉注射法 (2 0 0 μg 只小鼠 ) ,一次性将这一构建质粒注射于Ⅱ型胶原诱导的DBA 1小鼠关节炎模型肌肉组织中。结果 用两种方式IL 1ra基因给药后第 4天 ,小鼠肌肉组织中IL 1ra表达结果经计算机图像分析 ,吸光度 (A) 4 90值 :基因枪组为 0 5 2± 0 0 3,肌注组为 0 4 8± 0 0 2 ,对照组 0 4 1± 0 0 2。基因枪组与于对照组比较P <0 0 1,肌注组与对照组比较P <0 0 5。给药后第 6天和第 12天 ,小鼠血清IL 1ra水平 ,与对照组比较基因枪组于第 6天和第 12天均显著升高 (P <0 0 1)。肌注组小鼠血清IL 1ra水平在第 6天和第 12天也显著高于对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。两种治疗组的小鼠病情从第 6天开始缓解 ,关节红肿较对照组减轻。