RA患者血清FFA、hs-CRP及TNF-α的水平变化与胰岛素抵抗的关系

目的:研究类风湿性关节炎(RA)患者血清游离脂肪酸(FFA)、高敏C-反应蛋白(hs-CRP)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平的变化及其与胰岛素抵抗的关系。方法:测定92例RA患者(稳定期53例,活动期39例)及50例正常人血清FFA、空腹胰岛素(fINS)、空腹血糖(fPS),同时检测hs-CRP、TNF-α、血脂等指标,并计算胰岛素敏感指数(ISI)、稳态模型胰岛素抵抗指数(Homa-IR),分析FFA水平的变化与胰岛素抵抗的关系。结果:非活动期和活动期RA患者,FFA、hs-CRP、TNF-α、Homa-IR、TG和LP(α)水平均较正常对照组显著升高(P<0.05或P<0.01),且活动期RA组FFA、hs-CRP、TNF-α、fINS、Homa-IR、TG和LP(α)水平较非活动期RA患者明显升高(P<0.05或P<0.01);直线相关分析显示,血清FFA水平与hs-CRP、TNF-α、fINS、Homa-IR、TG和LP(α)呈正相关(P<0.01),与ISI呈负相关(P<0.01)。结论:RA患者血清FFA水平明显升高,且与hs-CRP、TNF-α及胰岛素抵抗密切相关。

靶向于TNF-α和RANKL的人源化抗体对DBA/1小鼠单关节炎的保护作用

目的制备同时拮抗肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和核因子κB受体活化因子配体(re-ceptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的人源化单克隆抗体(h8G12),通过单关节炎小鼠模型,评估h8G12在抑制TNF-α引起的炎症反应和拮抗RANKL引起的骨破坏中的保护作用。方法培养稳定表达h8G12的CHO细胞株,观察细胞生长状态,用间接ELISA检测细胞培养上清中h8G12的表达水平。纯化的h8G12经SDS-PAGE、West-ern blot分析及鉴定,用间接ELISA观察其亲和力。通过向DBA/1小鼠膝关节腔注射人TNF-α重组蛋白和人RANKL重组蛋白,建立单关节炎小鼠模型。用组织学评估观察不同给药方案[阴性对照组、阳性对照组、阿达木单抗(adalimumab,ADA)组和h8G12组]对小鼠单关节炎引起的炎症浸润、软骨侵蚀、膝关节腔内破骨细胞分化的保护作用。结果 CHO细胞株培养96 h时细胞生长状态良好,可稳定分泌h8G12;纯化的h8G12纯度可达90%,Western blot可见特异性条带,且可与rh TNF-α和rh RANKL结合。在单关节炎小鼠模型中,苏木精-伊红染色显示,h8G12组关节腔、周围软组织及骨髓腔内炎性细胞浸润明显少于阳性对照组,炎症评分降低了50%,治疗效果与ADA相似。甲苯胺蓝染色显示,h8G12组病理评分出现显著下降,h8G12治疗后小鼠关节结构相对完好,关节软骨厚度接近正常水平。抗酒石酸酸性磷酸酶染色显示,h8G12组关节腔内破骨细胞明显减少。结论 h8G12可有效抑制TNF-α引起的炎症反应和拮抗RANKL引起的骨破坏,为类风湿关节炎的治疗提供了新方法。

类叶牡丹提取物对TNF-α诱导的人类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞因子的影响

目的利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞(MH7A)对细胞因子分泌的影响来探讨类叶牡丹提取物(Caulophyllum robustum Maxim Extract,CRME)抗类风湿性关节炎(RA)的分子机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测CRME对MH7A细胞活力的影响,选取半数抑制浓度(IC_(50))以下的药物浓度作为干预剂量;ELISA法检测CRME(50,100,500μg·mL^(-1))剂量对TNF-α(20 ng·mL^(-1))诱导MH7A细胞释放白介素-6(IL-6)、白介素-4(IL-4)、血管内皮生长因子(VEGF)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、促凋亡因子Bax、Fas L和抗凋亡因子Bcl-2的影响。结果 CRME在质量浓度为50μg·mL^(-1)~500μg·mL^(-1)对细胞活力均无影响,IC_(50)值为645.32μg·mL^(-1)。与空白组比较,模型组细胞上清中IL-4、IL-6、VEGF、RANKL、Bax、Bcl-2和Fas L含量均显著提高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,CRME各剂量组均能降低IL-6水平及升高IL-4水平(P<0.01);CRME 100,500μg·mL^(-1)剂量组能明显降低VEGF的表达(P<0.05),且具有浓度依赖性;CRME 500μg·mL^(-1)剂量组能明显降低RANKL含量(P<0.01);CRME 100μg·mL^(-1)剂量组可促进Fas L的表达(P<0.01);CRME 50μg·mL^(-1)剂量组可降低Bcl-2的表达(P<0.05);CRME各剂量组均可促进Bax的表达(P<0.01)。结论减轻炎症、降低血管翳形成、增加骨保护,促进异常增生的滑膜细胞的凋亡可能是CRME抗类风湿性疾病的机理之一。

白芍总苷对佐剂性关节炎模型大鼠外周血中TNF-α及sICAM-1的影响

目的:观察白芍总苷(TGP)对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠外周血中细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及免疫细胞间粘附分子(sICAM-1)的影响。方法:建立AA模型大鼠,观察白芍总苷对AA大鼠足肿胀、踝关节组织病理变化及血清中促炎细胞因子TNF-α及sICAM-1水平的影响。结果:白芍总苷能有效抑制AA大鼠的关节肿胀及减轻炎症的发展,降低AA大鼠血清中促炎细胞因子TNF-α及sICAM-1的水平。结论:白芍总苷抗RA作用与抑制促炎细胞因子TNF-α及sICAM-1的水平有关。

雷公藤多甙联合丹参酮ⅡA对大鼠佐剂性关节炎外周血TNF-α、vWF表达的影响

目的研究雷公藤多甙联合丹参酮ⅡA(TG+TanⅡA)对佐剂性关节炎(AA)大鼠外周血肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管假性血友病因子(vWF)表达的影响。方法建立AA大鼠模型并随机分组,各组连续给药3周后处死大鼠。酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血TNF-α、vWF含量。结果模型组、TanⅡA组TNF-α水平明显高于空白对照组,TG+TanⅡA组水平最低,MTX组、TG组与空白对照组无差异;模型组vWF水平最高,与空白对照组、MTX组、TG组、TanⅡA组差异具有显著性,TG+TanⅡA组水平最低。结论TG+TanⅡA可能通过抑制炎症因子的表达,改善RA心血管损伤。

中西医结合治疗类风湿关节炎的临床疗效及对IL-1和TNF-α的影响

目的观察99锝-亚甲基二膦酸盐注射液(99Tcm-MDP)联合四妙勇安汤治疗类风湿关节炎(RA)的临床疗效及对外周血清中IL-1和TNF-α的影响。方法 80例活动期RA患者随机分为两组,每组40例,对照组单纯使用甲氨蝶呤治疗,治疗组在对照组的基础上联合99Tcm-MDP及四妙勇安汤治疗。观察两组治疗前后的临床疗效及IL-1和TNF-α的变化。结果治疗组的总体疗效明显优于对照组,且IL-1和TNF-α的改善也明显好于对照组(P<0.05)。结论 99Tcm-MDP联合四妙勇安汤治疗类风湿关节炎具有较好疗效,不良反应较少,且能明显降低外周血清中IL-1和TNF-α的表达水平,值得临床进一步推广。

类风湿性关节炎患者应用益赛普治疗前后血清TNF的变化及其意义

目的:检测类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)患者在应用益赛普治疗前后血清TNF的变化,并初步探讨其临床意义。方法:应用ELISA法检测45例RA患者接受益赛普治疗前后血清TNF的变化,并与35例正常健康人做比较。结果:RA患者接受益赛普治疗前血清TNF浓度明显高于正常人(P<0.05),治疗后TNF的表达水平明显下降,与治疗前相比有显著性差异(P<0.05)。结论:益赛普可明显下调RA患者体内TNF水平,缓解患者的临床症状,具有良好的临床疗效。

类风湿性关节炎患者血清NO、NOS、TNF-α水平的变化及意义

目的:探讨了类风湿性关节炎患者血清NO、NOS和TNF-α含量的变化及意义。方法:分别应用放免法和化学法对36例类风湿性关节炎患者进行了血清NO、NOS和TNF-α含量测定,并以35名正常健康人作比较。结果:类风湿性关节炎患者在急性发作期血清NO、NOS、TNF-α水平非常显著地高于正常人组(P<0.01)。经抗炎等治疗后1周其水平有所下降,但与正常人组比较,仍有显著性差异(P<0.05)。结论:检测类风湿性关节炎患者血清NO、NOS和TNF-α含量的变化对了解病情、观察疗效和预后判断均具有十分重要的临床价值。

hTRAIL对CIA大鼠滑膜增殖作用的影响

目的观察人肿瘤坏死因子凋亡相关蛋白(hTRAIL)对大鼠胶原诱导的类风湿关节炎模型(CIA)滑膜增殖作用的影响。方法 Wistar雄性大鼠随机分成6组:空白对照组、空白给药(hTRAIL 1μg)组、模型组、hTRAIL 1μg组、hTRAIL 1.5μg组、hTRAIL 2μg组。建立大鼠CIA模型,计量方法测定大鼠踝关节周径及其肿胀率,HE染色法观察关节病理形态学变化,Tunel法检测滑膜成纤维细胞凋亡情况,免疫组化法检测DR5表达情况。结果 hTRAIL干预模型组踝关节周径肿胀率较模型组低,关节破坏较模型组轻,滑膜细胞凋亡较模型组明显,DR5表达情况较模型组高(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论 hTRAIL可促进CIA大鼠滑膜细胞的凋亡,减轻CIA大鼠的关节肿胀及诱导DR5表达水平升高。

红霉素对佐剂性关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6表达的影响

目的:研究红霉素对佐剂性关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6表达的影响,以探讨红霉素对佐剂性关节炎的治疗作用。方法:通过给大鼠右后足跖部皮下注射完全弗氏佐剂(CFA)建立类风湿性关节炎的动物模型(AA)。在致炎后第14d,大鼠继发性关节炎出现。开始在治疗组AA大鼠腹腔注射红霉素注射液50mg/kg,连续7d,直至第28d处死全部大鼠,断头取血后用放免法测大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6的表达水平。结果:治疗组大鼠血清中的TNF-α、IL-1、IL-6水平均低于模型组,红霉素对佐剂性关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6表达均成抑制作用。结论:红霉素可降低佐剂性关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6的表达,对类风湿性关节炎的治疗具有一定的作用。

TNF-α-308G/A基因多态性与TNF-α抑制药治疗类风湿关节炎疗效相关性的Meta分析

目的:系统评价类风湿关节炎(RA)患者肿瘤坏死因子(TNF)-α基因启动子区域-308 G/A单核苷酸多态性与TNF-α抑制药治疗有效性的关系。方法:计算机检索Pub Med、Embase、The Cochrane Library、Web of Science、CNKI、Wan Fang Data、VIP数据库,搜集对比TNF-α-308 G/A基因多态性与TNF-α抑制药疗效相关性的队列研究或随机对照试验,检索时限均为建库至2018年6月。由两名研究员独立筛选文献、提取资料和评价纳入研究的偏倚风险后,采用Rev Man 5. 3软件进行Meta分析。结果:共纳入20项研究,包括3 280例病例。Meta分析结果显示,(1)TNF-α-308 GG基因携带者使用TNF-α抑制药(包括英夫利昔单抗、依那西普、阿达木单抗)治疗RA的疗效显著优于TNF-α-308 GA/AA基因携带者[OR=1. 44,95%CI(1. 05,1. 97),P=0. 02];(2)在亚洲人群中,TNF-α-308 G/A基因多态性与TNF-α抑制药治疗RA疗效的关联性有统计学意义[OR=3. 13,95%CI(1. 50,6. 54),P=0. 002];(3)依那西普治疗携带TNF-α-308 GG基因型的RA患者疗效显著优于携带TNF-α-308 GA/AA基因的患者[OR=1. 71,95%CI(1. 10,2. 65),P=0. 02]。结论:TNF-α-308 G/A基因多态性与TNF-α抑制药治疗RA的疗效有相关性,TNF-α-308 G/A影响亚洲人群的TNF-α抑制药疗效,依那西普治疗RA的疗效与该基因的关联有显著性,分析结果稳健性差,可能存在发表偏倚。

类风湿性关节炎患者治疗前后血清IL-2、SIL-2R和TNF-α的变化

目的:探讨了类风湿性关节炎患者治疗前后血清IL-2、SIL-2R和TNF-α水平的变化。方法:应用放免法测定39例类风湿性关节炎患者血清IL-2和TNF-α含量,酶联法测定SIL-2R含量,并与35例正常健康人作比较。结果:治疗前血清IL-2水平明显低于正常人(P<0.01),而SIL-2R和TNF-α水平明显高于正常人(P<0.01),经中西医结合疗法1年后复发者血清IL-2、SIL-2R和TNF-α水平持续异常,未复发者血清IL-2、SIL-2R和TNF-α水平恢复正常。结论:观察类风湿性关节炎患者血清IL-2、SIL-2R和TNF-α水平的变化与患者的病情及预后密切相关。

健脾活血补肾汤治疗脾肾亏虚、痰瘀阻络型老年类风湿关节炎临床观察

目的:观察健脾活血补肾汤对脾肾亏虚、痰瘀阻络型老年类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者白细胞介素(interleukin,IL)-6、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的影响。方法:选取2021年12月至2023年12月在新余市中医院就诊的脾肾亏虚、痰瘀阻络型RA患者80例,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组各40例。对照组给予氨甲蝶呤片、叶酸片、塞来昔布胶囊口服治疗,观察组在对照组治疗的基础上加用健脾活血补肾汤。观察两组患者治疗前后中医证候积分、生活质量评分、RA相关指标[类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(anti cyclic citrullinated peptide antibody,CCP-AB)、血浆红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)]、炎症细胞因子(IL-6、SAA及TNF-α)变化情况。结果:观察组治疗后关节痛、关节肿胀、关节屈伸不利、晨僵时间等中医证候积分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后生活质量评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后RF、CCP-AB、ESR低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后IL-6、SAA及TNF-α低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:健脾活血补肾汤能减轻脾肾亏虚、痰瘀阻络型老年RA患者的临床症状,降低IL-6、SAA及TNF-α,提高患者生活质量。

择时艾灸对实验性RA大鼠足肿胀度、血清TNF-α含量及其昼夜节律的影响

目的:研究不同时辰艾灸治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)对其主要炎性细胞因子——肿瘤坏死因子-α(TNF-α)血清浓度的影响及其昼夜节律的调控机制。方法:将96只Sprague-Dawley(SD)成年大鼠随机分为空白对照组(空白组)、RA模型组(模型组)、卯时艾灸治疗组(卯时组)、酉时艾灸治疗组(酉时组),每组24只,雌雄各半。各组又按4个取材时间点分为0AM组、6AM组、12N组、6PM组,每组6只大鼠。各组大鼠全程予以12 h/12 h的光暗授予。除空白组外,各组大鼠予以右后足垫部皮下注射弗氏完全佐剂(FCA)塑造RA模型。卯时组、酉时组大鼠分别在对应的时辰(卯时组5:00–7:00,酉时组17:00–19:00)接受"肾俞""足三里"穴麦粒灸治疗,双侧交替,每日1次,6次为一疗程,疗程之间休息1 d,共治疗3个疗程;其余组大鼠同法固定,但不治疗。造模前、造模后以及治疗结束后分别测量右足足容积,治疗结束后分别在各组相应时间点活体取血,采用ELISA法检测血清TNF-α含量。采用SPSS 21.0统计软件包以及Halberg余弦法统计分析实验数据。结果:干预后,与空白组相比,模型组、卯时组、酉时组足肿胀度显著升高(均P<0.01);与模型组相比,卯时组、酉时组足肿胀度显著降低(均P<0.01)。与空白组相比,模型组、卯时组血清TNF-α平均含量显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,卯时组、酉时组血清TNF-α平均含量显著降低(均P<0.05)。各组血清TNF-α均存在昼夜节律性(均P<0.05),且峰值出现在暗置时相;与空白组相比,模型组中值明显升高(P<0.05),峰相位后移,振幅增高(P<0.05);与模型组相比,卯时组和酉时组中值显著下降(均P<0.05),峰相位前移,振幅降低(均P<0.05)。结论:艾灸可显著降低实验性RA大鼠血清TNF-α含量从而缓解实验性RA大鼠的足肿胀度。艾灸可良性调整RA大鼠TNF-α的昼夜节律从而节律性发挥其抑制TNF-α分泌合成的效应,卯时与酉时艾灸未见疗效差异。

肿瘤坏死因子及其受体在类风湿性关节炎中的研究进展

肿瘤坏死因子α(TNF-α)信号通路是治疗自身免疫性疾病的重要靶点。TNF-α能够结合到2个不同的受体上,通过与受体的结合发挥抗炎、抗风湿的作用。抗TNF-α的药物被广泛应用于类风湿性关节炎(RA)的治疗,如英夫利昔单抗、阿达木单抗等。其在抑制炎症引起的损伤及受损组织的恢复等方面具有重要作用,但是也会引起一定的副作用,如增加感染和恶性肿瘤的风险、引起新的自身免疫性疾病等。这些副作用可能是由于封闭了TNF-α的有益信号引起的,而选择性拮抗肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor,TNFR)可能是解决TNF-α抗体副作用的一个重要途径,特异性地作用于TNFR的药物具有更加广阔的实用性和安全性。针对TNF-α及其受体的药物在RA中的研究进展进行综述。

槌果藤对佐剂性关节炎大鼠模型外周血中细胞因子影响的研究

目的观察槌果藤对佐剂性关节炎大鼠模型外周血中细胞因子TNF-α及sICAM-1的影响。方法建立佐剂性关节炎大鼠模型,观察槌果藤对AA大鼠足肿胀、踝关节组织病理变化及血清中促炎细胞因子TNF-α及sICAM-1水平的影响。结果槌果藤能有效抑制关节肿胀及减轻炎症的发展,降低佐剂性关节炎大鼠血清中促炎细胞因子TNF-α及sI-CAM-1的水平。结论槌果藤抗RA作用与抑制促炎细胞因子TNF-α及sICAM-1的水平有关。

雷藤舒对TNF-α诱导的人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞促凋亡、抗炎及对Ras-MAPKs信号通路的调节作用

目的:观察雷藤舒(LLDT-8)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-HFLS)的促凋亡、抗炎作用,以及可能的作用机制。方法:在体外培养的RA-HFLS体系中,实验组加入终浓度为50 nmol/L的LLDT-8与终浓度为20 ng/ml TNF-α共孵育,同时设置细胞空白对照组和TNF-α刺激组。采用TUNEL法检测RA-HFLS细胞的凋亡;RT-PCR检测Bcl-2 mRNA表达水平;ELISA和RTPCR分别检测IL-6、MMP-3的表达;Western-blot检测Ras-MAPKs信号通路的磷酸化水平和蛋白表达。结果:与空白对照组比较,LLDT-8组细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。LLDT-8能显著抑制TNF-α诱导的RA-HFLS分泌IL-6、MMP-3的表达(P<0.01);能明显抑制Ras蛋白和p-P38磷酸化水平,而各组之间pERK、p-JNK、c-Fos、c-Jun和c-Myc的磷酸化水平和蛋白表达差异无统计学意义。结论:LLDT-8能够抑制Ras-p38 MAPK信号转导通路的异常活化,从而抑制RA滑膜的增殖,减轻滑膜细胞的炎症。

伸筋草总生物碱改善大鼠类风湿性关节炎的机制研究

目的通过白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨伸筋草总生物碱治疗类风湿性关节炎(RA)的机制。方法注射弗氏佐剂建立RA模型。将实验大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和伸筋草高、低剂量组,每组10只。给药21 d后,采用容积排水法测定各组大鼠右踝关节肿胀程度;Western Blot法测定大鼠踝关节滑膜组织IRAK1、TRAF6、NF-κB p65蛋白表达;Elisa法测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果与模型组比较,伸筋草高、低剂量组大鼠踝关节肿胀程度明显降低(P<0.05),滑膜组织IRAK1、TRAF6和NF-κB p65蛋白表达显著下调(P<0.05);伸筋草高剂量组大鼠血清中IL-1β和IFN-γ水平显著下降(P<0.05),伸筋草低剂量组IL-1β水平明显降低(P<0.05),IFN-γ水平可见下降趋势。结论伸筋草总生物碱可降低RA大鼠踝关节的肿胀,其作用机制与抑制IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路及其下游炎性因子的分泌密切相关。

类风湿关节炎患者血清TL1A和IL-17的测定及相关因素分析

目的通过检测类风湿关节炎(RA)患者和健康志愿者血清肿瘤坏死因子样配体1A(TL1A)和白细胞介素-17(IL-17)水平,分析其与实验室和临床指标之间的相关性,探讨其临床意义。方法采用双抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)检测50例RA患者和50例健康志愿者血清TL1A和IL-17水平,分析RA患者血清TL1A及IL-17水平与炎症和临床症状之间的关系。结果 RA患者血清TL1A和IL-17浓度分别为(1031.8±634)pg/ml和(257.07±84.88)pg/ml,明显高于健康志愿者(309.46±59.64)pg/ml和(116.12±35.31)pg/ml(P<0.05),TL1A和IL-17与患者的血沉、C反应蛋白、疾病活动度、肿胀关节数、压痛关节数和疾病疼痛评分均呈正相关(P<0.05),与类风湿因子RF无相关性(P>0.05)。结论 RA患者血清TL1A和IL-17水平明显升高,且与炎症指标及病情严重程度密切相关。

TL-1A和IL-17在类风湿关节炎中的作用及其临床意义

肿瘤坏死因子样配体1A(TL-1A)和白细胞介素17(IL-17)与类风湿关节炎(RA)发病和病情进展密切相关,还可能与生物制剂治疗RA的疗效差异有关。本文就TL1A和IL-17在RA发病机制中的作用及其临床意义的相关研究作一综述。