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紫云英根瘤菌结瘤因子的初步研究 被引量:10
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作者 杨国平 朱军 娄无忌 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第5期406-408,共3页
最近的研究结果表明,豆科植物与根瘤菌的共生识别是一种双向的信号物质交换过程.首先是豆科植物的根或种子分泌类黄酮物质,诱导根瘤菌的结瘤基因(nod genes)产生结瘤因子(nod factors),分泌到胞外,为植物所接受,从而引发植物某些基因表... 最近的研究结果表明,豆科植物与根瘤菌的共生识别是一种双向的信号物质交换过程.首先是豆科植物的根或种子分泌类黄酮物质,诱导根瘤菌的结瘤基因(nod genes)产生结瘤因子(nod factors),分泌到胞外,为植物所接受,从而引发植物某些基因表达,细胞分化,细胞壁形成,最终导致根毛变形等一系列变化.已经测定了几种苜蓿根瘤菌(Rhizobium meliloti)和豌豆根瘤菌(R.leguminosarum bv.viciae)结瘤因子的分子结构式,它们均属于寡糖胺类物质,在没有根瘤菌存在的条件下,结瘤因子能独立地促使根毛发生变形,这是检测结瘤因子是否存在的重要手段,即根毛变形试验(Root hairdeformation assay,简称Had试验).高浓度的结瘤因子甚至能诱导植物产生空瘤,其组织结构与典型的根瘤相同. 展开更多
关键词 紫云英 根瘤菌 结瘤因子
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多氯联苯污染土壤的紫云英–根瘤菌联合修复效应 被引量:5
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作者 李秀芬 滕应 +4 位作者 骆永明 李振高 潘澄 张满云 宋静 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期105-110,共6页
选用紫云英(Astragalus sinicus L.)作为宿主植物,通过盆栽试验研究了接种紫云英根瘤菌(Rhizobium huakuii)对多氯联苯污染土壤的修复效应。结果表明,经过100天的修复作用后,单接种根瘤菌、种植紫云英以及紫云英接种根瘤菌处理土壤中多... 选用紫云英(Astragalus sinicus L.)作为宿主植物,通过盆栽试验研究了接种紫云英根瘤菌(Rhizobium huakuii)对多氯联苯污染土壤的修复效应。结果表明,经过100天的修复作用后,单接种根瘤菌、种植紫云英以及紫云英接种根瘤菌处理土壤中多氯联苯的去除率分别为20.5%、23.0%、53.1%,均显著高于对照处理(P<0.01)。而且发现接种根瘤菌显著增加了紫云英根际土壤的微生物生物量碳、氮,明显增强了土壤微生物群落的碳源利用能力,从而改善了微生物群落功能多样性。可见,紫云英–根瘤菌共生体对多氯联苯污染土壤表现出较好的修复潜力。 展开更多
关键词 多氯联苯 紫云英 根瘤菌 植物-微生物联合修复
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紫云英根瘤菌与豌豆根瘤菌共生质粒间的相互作用 被引量:3
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作者 张学贤 周俊初 +2 位作者 张忠明 李阜棣 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期175-181,共7页
将豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌含共生质粒的7653R菌株和消除了共生质粒的7653R+1菌株中。7653R+1接合子获得了在碗豆上结瘤的能力,7653R接合子却不能在豌豆上结瘤。从而揭示出紫云英根瘤菌的共生质粒能抑制导入的豌豆根... 将豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌含共生质粒的7653R菌株和消除了共生质粒的7653R+1菌株中。7653R+1接合子获得了在碗豆上结瘤的能力,7653R接合子却不能在豌豆上结瘤。从而揭示出紫云英根瘤菌的共生质粒能抑制导入的豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI功能的表达。同时pJB5JI的导入使7653R接合子在其正常宿主紫云英上的结瘤固氮能力较亲本7653R显著提高。试验同时考察了pJB5JI导入紫云英根瘤菌后的稳定性。 展开更多
关键词 紫云英 根瘤菌 共生质粒 豌豆
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紫云英根瘤菌共生基因分布及其共生效应的多样性 被引量:2
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作者 邹向宏 李阜棣 +2 位作者 曹燕珍 陈文新 陈华癸 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1997年第1期49-54,共6页
从同一植株不同根瘤分离40株紫云英根瘤菌,所有菌株对10种抗生素的抗药性测定表明,该群体分为22个抗药类群,质粒检测显示所有公离株都含有质粒,质粒数1~4条,用快生型大豆根瘤菌USDA205质粒作参考,估测质粒Mr分布范围为83~226MU... 从同一植株不同根瘤分离40株紫云英根瘤菌,所有菌株对10种抗生素的抗药性测定表明,该群体分为22个抗药类群,质粒检测显示所有公离株都含有质粒,质粒数1~4条,用快生型大豆根瘤菌USDA205质粒作参考,估测质粒Mr分布范围为83~226MU.根据图谱分析表明,该菌群可分为6个不同质粒型.各类型质粒通过与Dig-nodABC和Dig-nifHDK杂交,结果显示带有1条质粒的菌株其共生基因定位在染色体上.带有2条或2条以上质粒的菌株各拥有1条共生质粒,共生质粒Mr范围有差异,大约为117~220MU.研究结果也显示,不同质粒型的菌株其共生效应存在明显差异,其中第6质粒型的菌株共生固氮率最强,第1质粒型菌株共生固氮率较低.共生固氮能力最强的第6质粒型菌株,只占总菌数7.5%. 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 共生基因 共生效应
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紫云英根瘤菌质粒功能研究 被引量:6
5
作者 邹向宏 李阜棣 陈华癸 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期245-251,共7页
紫云英根瘤菌CH203含有3条质粒(pRHa,97MI);pRHb,168MD;pRHc,251MD为共生质粒),用带蔗糖敏感基因Tn5-sacB进行菌株质粒消除和质粒缺失突变株筛选,获得一系列突变株。与野生型菌相比,质粒pRHa的丢失导致菌株结无效根瘤,质粒pRHb的丢失使... 紫云英根瘤菌CH203含有3条质粒(pRHa,97MI);pRHb,168MD;pRHc,251MD为共生质粒),用带蔗糖敏感基因Tn5-sacB进行菌株质粒消除和质粒缺失突变株筛选,获得一系列突变株。与野生型菌相比,质粒pRHa的丢失导致菌株结无效根瘤,质粒pRHb的丢失使菌株失去共生能力,在TY培养基平板上菌落变得粗糙,失去了脂多糖(LPSI)。质粒pRHc(共生质粒)的丢失显然失去其菌株的共生能力,同时使菌株抗酸性明显减弱。质粒回复能恢复突变株的表现特征和共生能力。此外,紫云英根瘤菌CH205含有5条大小不同的质粒(分子量42MD~230MD),该菌株某些质粒的消除能显著增强菌株的结瘤固氮能力。研究结果也表明除共生质粒外,紫云英根瘤菌其它质粒明显影响菌株的共生效应。 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 质粒 共生效应
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紫云英根瘤菌结瘤基因调控片段克隆和分析 被引量:1
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作者 农广 张忠明 +1 位作者 胡福荣 陈华癸 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期73-77,共5页
通过对紫云英根瘤菌7653R及其Nod-突变株7653R-1侵染根毛试验证实,7653R菌株318×103bp大质粒决定早期结瘤功能,分子杂交结果显示,其nodDABC定位于该质粒上.将7653R菌株的大质粒DN... 通过对紫云英根瘤菌7653R及其Nod-突变株7653R-1侵染根毛试验证实,7653R菌株318×103bp大质粒决定早期结瘤功能,分子杂交结果显示,其nodDABC定位于该质粒上.将7653R菌株的大质粒DNA进行酶切并克隆到表达载体pMP220上,构建lacZ重组子文库,将lacZ重组子文库导入7653R菌株,在加有X-gal和种子浸提物的根瘤菌培养基上选择蓝色菌落.通过Miler试验测定它们的β-半乳糖苷酶活性,获得1株种子浸提物对其有诱导效应的菌株HN18,对该菌株所含的重组质粒pHN18进行nodDABC探针杂交,发现有1条1.7×103bp的阳性杂交带。 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 nod基因 分子杂交 结瘤基因 克隆
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紫云英根瘤菌结瘤因子的生物学功能 被引量:1
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作者 张学贤 张忠明 +1 位作者 周俊初 李阜棣 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期41-45,共5页
利用紫云英(AstragalussinicusL.)种子浸提物诱导紫云英根瘤菌(Rhizobiumhuakuii)野生型菌株7653R产生结瘤因子(NodRh)。根毛卷曲试验表明,NodRh能诱导产生各种形式的根毛变... 利用紫云英(AstragalussinicusL.)种子浸提物诱导紫云英根瘤菌(Rhizobiumhuakuii)野生型菌株7653R产生结瘤因子(NodRh)。根毛卷曲试验表明,NodRh能诱导产生各种形式的根毛变形、卷曲和分枝,并且能诱导形成典型的“牧羊拐”状卷曲,与菌体正常侵染所引起的变化相同。同时发现,相对较高浓度的结瘤因子NodRh能抑制根的生长,形成粗短根。在制备紫云英根瘤菌接种剂的过程中,利用种子浸提物诱导产生结瘤因子,能显著提高根瘤菌的侵染结瘤能力。 展开更多
关键词 紫云英 根瘤菌 结瘤因子 寡糖素 生物学功能
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紫云英根瘤菌共同结瘤基因nodA和nodBC的核苷酸序列 被引量:1
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作者 沈思师 宫澜 金润之 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期355-361,共7页
以^(32)p标记的苜蓿根瘤菌(Rhizobium meliloti)2.3kb nod DNA作探针,从紫云英根瘤菌(Rhizobium huakuii即R. astragali)159基因文库中分离到一株能与探针DNA呈阳性反应的克隆pRaN109。同源DNA-DNA杂交及DNA序列分析表明:pRaN109DNA的9k... 以^(32)p标记的苜蓿根瘤菌(Rhizobium meliloti)2.3kb nod DNA作探针,从紫云英根瘤菌(Rhizobium huakuii即R. astragali)159基因文库中分离到一株能与探针DNA呈阳性反应的克隆pRaN109。同源DNA-DNA杂交及DNA序列分析表明:pRaN109DNA的9kb EcoRI片段上携带了nodD_1BC基因,pRaN109 NDA的18kb EcoRI片段上携带了nodD_2A基因。共同结瘤基因nodA与nodBC两者相距6.7kb。在nodA基因和nodBC基因的上游都存在有结瘤盒(nod box)。与来自不同种属的菌株所报告的结果相比较,紫云英根瘤菌159中的共同结瘤基因有着明显不同的组合。 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 共同结瘤基因 核苷酸序列
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紫云英根瘤菌由种子浸提物诱导的基因调控片段的克隆和分析
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作者 农广 张忠明 +1 位作者 胡福荣 陈华癸 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期225-228,共4页
The large plasmids of strain 7653R were digested with restriction enzyme EcoRI. Their DNA fragments were cloned into the expression vector pMP220 to construct a lacZ fusion pool, which were transferred into the recipi... The large plasmids of strain 7653R were digested with restriction enzyme EcoRI. Their DNA fragments were cloned into the expression vector pMP220 to construct a lacZ fusion pool, which were transferred into the recipient strain 7653R Tri-transconjugants were selected onto plates containing X-gal and seed extract Five blue colonies were assayed of their β-galactosidase activity after incubation with or without seed extract. A positive induced strain HN18 was obtained. Hybridization of nodDABC probe on the recombinant plasmid pHN18 showed a 1.7kb positive band.The evidence makes a deduction that the pHN18 containes a promoter of nod operon. 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 种子浸提物 DIG杂交 lacZ融合
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利用Tn5定位诱变筛选紫云英根瘤菌Exo^-变种 被引量:1
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作者 周蓓芸 黄建斌 +1 位作者 粟文英 宋鸿遇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期51-57,共7页
利用Tn5定位诱变方法,对质粒pJBB5进行Tn5插入诱变,得到10个Tn5在59kbB5外源片段上有不同插入位点的质粒TN11,TN112,TN22,TN23,TN31,TN41,TN91,TN1... 利用Tn5定位诱变方法,对质粒pJBB5进行Tn5插入诱变,得到10个Tn5在59kbB5外源片段上有不同插入位点的质粒TN11,TN112,TN22,TN23,TN31,TN41,TN91,TN101,TN131,TN141。将Tn11等分别转移到已经含有不相容质粒pPH1JI的紫云英根瘤菌107菌株中,使之发生同源变换。通过抗性选择及表型鉴别,筛选到3株菌落表型干燥(Muc-)的酸性胞外多糖(EPS)合成缺陷菌株(Exo-)107(TN22),107(TN101),107(TN131)。Southern杂交分析证明这3株变种的Tn5插入确实是同源交换而不是转座产生,表明经过适当改良的Tn5定位诱变法可以应用于紫云英根瘤菌Exo-变种的筛选。 展开更多
关键词 定位诱变 变种筛选 紫云英 根瘤菌
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紫云英根瘤菌糖基转移酶基因exoL的定位突变及序列分析 被引量:1
11
作者 宫锋 李强 +1 位作者 周蓓芸 宋鸿遇 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1998年第4期373-379,共7页
利用转座子Tn5对质粒pJB-B6既定位诱变,经同源交换,筛选获得一株Rhizobiumhuakuii107胞外糖合成缺陷(Exo-)变种RH983。三亲本杂交实验显示,pJB-B6及其亚克隆pJB-B601均可纠正变种RH983的胞外多糖合成缺陷。pJB-B601的2.3kbDNA片... 利用转座子Tn5对质粒pJB-B6既定位诱变,经同源交换,筛选获得一株Rhizobiumhuakuii107胞外糖合成缺陷(Exo-)变种RH983。三亲本杂交实验显示,pJB-B6及其亚克隆pJB-B601均可纠正变种RH983的胞外多糖合成缺陷。pJB-B601的2.3kbDNA片段的核苷酸顺序表明,该片段内存在一个完整的开放阅读框架(ORF)。ORF全长1170bp,编码390个氨基酸的蛋白,该蛋白与Rhi-zobiummeliloti的糖基转移酶ExoL有56.7%.的同源性,称为RhexoL。利用启动子探测质粒,构建了RhexoL-lacZ转录融合子,发现RhexoL基因5’上游有较强的启动子活性。 展开更多
关键词 紫云英 根瘤菌 糖基转移酶基因 DNA序列
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