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水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1 IA)原生质体的制备和再生 被引量:1
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作者 秦蔚 李成云 +1 位作者 杨根华 董文汉 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期270-273,共4页
由于立枯丝核菌不产生无性孢子,为研究纹枯菌的致病机制带来了障碍,但可以通过制备纹枯菌的原生质体,利用根癌农杆菌介导转化的方法,建立突变体库,为后续研究打下基础。试验利用Lysing enzyme(from Trichoderma harzianum)裂解水稻纹枯... 由于立枯丝核菌不产生无性孢子,为研究纹枯菌的致病机制带来了障碍,但可以通过制备纹枯菌的原生质体,利用根癌农杆菌介导转化的方法,建立突变体库,为后续研究打下基础。试验利用Lysing enzyme(from Trichoderma harzianum)裂解水稻纹枯病菌获得原生质体,通过摸索纹枯病菌的菌龄、裂解时间、裂解液的pH值3个重要因素,得到水稻纹枯病菌原生质体的最佳制备和再生条件,并且在细胞壁再生实验中,改进细胞壁再生的培养方式,最终制得原生质体,并成功使其再生。 展开更多
关键词 水稻纹枯病菌 原生质体 制备 再生
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Three Genes Related to Trehalose Metabolism Affect Sclerotial Development of Rhizoctonia solani AG-1 IA,Causal Agent of Rice Sheath Blight
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作者 WANG Chenjiaozi ZHAO Mei +1 位作者 SHU Canwei ZHOU Erxun 《Rice science》 SCIE CSCD 2022年第3期268-276,共9页
Trehalose metabolism is related to the sclerotial development of Rhizoctonia solani AG-1 IA,the causal agent of rice sheath blight(RSB).Here,we further elucidated the functions of three genes Rstre,Rstps1 and Rstpp th... Trehalose metabolism is related to the sclerotial development of Rhizoctonia solani AG-1 IA,the causal agent of rice sheath blight(RSB).Here,we further elucidated the functions of three genes Rstre,Rstps1 and Rstpp that encode three key enzymes trehalase(TRE),alpha,alpha-trehalosephosphate synthase(TPS1)and trehalose 6-phosphate phosphatase(TPP)in the sclerotial development of R.solani AG-1 IA.Due to the lack of a stable genetic transformation system for R.solani,the heterologous expression of these three genes in Pichia pastoris GS115 was performed.The results showed that reactive oxygen species(ROS)contents and enzyme activities in R.solani decreased significantly in the treatments of the fermentation broths of Rstps1 and Rstpp transformants,and that in the treatment of the fermentation broth of Rstre transformant visibly increased.Furthermore,the fermentation broths of the transformants of all the three genes were added to potato dextrose agar(PDA)medium for the cultivation of R.solani,as a result,the dry weight of sclerotia in each PDA plate containing the fermentation broths of Rstps1 and Rstpp transformants significantly increased compared with the control,and that of Rstre transformant obviously decreased.Finally,178 proteins were found to interact with RSTPS1,and 16 of them were associated with ROS.Taken together,the findings suggest that all these three genes related to trehalose metabolism play important roles in the sclerotial development of R.solani AG-1 IA,and can be used as new targets for the development of novel high-efficiency fungicides for the controlling of RSB. 展开更多
关键词 rhizoctonia solani ag-1 ia rice sheath blight reactive oxygen species trehalose metabolism gene functional analysis sclerotial development
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水稻纹枯病菌原生质体制备与再生条件的优化 被引量:17
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作者 杨迎青 李明海 +2 位作者 杨媚 李勇 周而勋 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期546-551,共6页
为获得进行水稻纹枯病菌遗传转化所需的高质量原生质体,选用该病菌强致病力菌株GD-118,分别从酶种类、菌龄、酶解时间、酶解温度、酶液pH值和渗透压稳定剂及其浓度6个方面优化了原生质体的制备条件,从酶解时间和渗透压稳定剂及其浓度2... 为获得进行水稻纹枯病菌遗传转化所需的高质量原生质体,选用该病菌强致病力菌株GD-118,分别从酶种类、菌龄、酶解时间、酶解温度、酶液pH值和渗透压稳定剂及其浓度6个方面优化了原生质体的制备条件,从酶解时间和渗透压稳定剂及其浓度2个方面优化了原生质体的再生条件。结果表明:优化后的水稻纹枯病菌原生质体制备的最佳条件组合是"纤维素酶+溶菌酶+崩溃酶"组合酶、总酶终质量浓度10mg/mL、菌丝菌龄15h、酶解时间3h、酶解温度35℃、酶液pH5.6、以0.6mol/LMgSO4.7H2O为渗透压稳定剂,此最佳条件组合所制备的原生质体产率高达4.00×107/g;原生质体最佳的再生条件是酶解3h的原生质体在含1.0mol/L甘露醇的再生培养基上26℃时进行培养,在此条件下可获得最佳的再生效果,再生率为39%。 展开更多
关键词 水稻纹枯病菌 原生质体 制备 再生
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水稻纹枯病菌RsCat基因的克隆及其表达分析 被引量:2
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作者 江绍锋 王陈骄子 +1 位作者 舒灿伟 周而勋 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期25-31,共7页
为阐明水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1IA)过氧化氢酶基因(RsCat)的功能,采用常规PCR和RT-PCR技术克隆得到RsCat基因。生物信息学分析表明,RsCat基因DNA和cDNA的全长序列分别为1814bp和1 395bp,开放阅读框(ORF)编码464个氨基酸。... 为阐明水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1IA)过氧化氢酶基因(RsCat)的功能,采用常规PCR和RT-PCR技术克隆得到RsCat基因。生物信息学分析表明,RsCat基因DNA和cDNA的全长序列分别为1814bp和1 395bp,开放阅读框(ORF)编码464个氨基酸。保守结构域分析显示,RsCat蛋白具有过氧化氢酶超家族结构域和过氧化氢酶相关免疫反应结构域。系统进化分析显示:水稻纹枯病菌不同融合群的RsCat基因具有较高的序列同源性。荧光定量PCR(qRT-PCR)分析表明:RsCat基因的表达受儿茶酚的诱导,随着儿茶酚质量浓度增大,表达量上调,而随着儿茶酚质量浓度增大,CAT活性降低。说明RsCat基因的转录表达和CAT酶活不存在对应性。推测RsCat基因可能存在转录后或表达产物翻译后修饰。 展开更多
关键词 水稻纹枯病菌 过氧化氢酶 儿茶酚 RT-PCR
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