Dynamic monitoring of the cytotoxic effects of protoberberine alkaloids from Rhizoma Coptidis on HepG2 cells using the xCELLigence system

AIM: To investigate the cytotoxic effects of the six protoberberine alkaloids(PAs) from Rhizoma Coptidis on HepG2 cells. METHOD: A systematic screening was conducted to investigate the dynamic response of HepG2 cells to the PAs using the impedance-based xCELLigence system. Cisplatin was selected as the positive control. The real time, concentration-response curves and the 50% inhibitory concentrations(IC50) were acquired to evaluate the anticancer activity of the PAs. RESULTS: All of the six PAs inhibited cell growth and induce death in HepG2 cells in a time- and concentration-dependent manner. The IC50 values of cisplatin, berberine, columbamine, coptisine, epiberberine, jatrorrhizine, and palmatine were 5.13, 42.33, 226.54, 36.90, 302.72, 383.54, and 456.96 μg·mL-1, respectively. The results obtained using the xCELLigence system corresponded well with those of the conventional methods. CONCLUSION: The xCELLigence system is a reliable and efficient tool for real-time screening of the cytotoxic effect of compounds in cell-based in vitro assays. Coptisine and berberine, with methylenedioxy group at C2 and C3 on the phenyl ring showed stronger effect.than the other four PAs. However, compared with cisplatin, the six PAs didn't show obvious cytotoxic effect on HepG2 cells.These results provided some useful data for the evaluation of the anticancer compounds, and the clinical application of traditional Chinese medicine.

黄连的化学成分及药理作用研究进展

黄连是毛茛科植物黄连、三叶黄连及云连的干燥根茎,临床广泛使用。近年来国内外研究者对黄连的化学成分及药理作用不断深入探索,黄连的临床应用更加丰富。黄连的化学成分包括生物碱、黄酮、木脂素、有机酸、挥发油等,具有抗动脉粥样硬化、抗心肌缺血、抗脑缺血、抗心律失常、降血压、抗焦虑抗抑郁、降血糖、抗炎、抗肿瘤、抑菌等药理作用。本文对黄连的化学成分及其药理作用研究进展进行综述,以期为未来黄连的研究提供依据。

黄连总生物碱对糖尿病大鼠降血糖作用研究

目的:探讨黄连总生物碱对糖尿病大鼠的降血糖作用。方法:采用链脲佐菌素50 mg/kg诱导SD大鼠形成糖尿病模型,筛选糖尿病大鼠空腹血糖的禁食时间,考察黄连总生物碱给药68d对糖尿病大鼠血糖、糖化血清蛋白、肌酐、尿素氮的影响,并测定其肝、胃、肾脏器指数,评价黄连总生物碱对糖尿病大鼠的降血糖作用。结果:(1)选择白天禁食6 h为糖尿病大鼠的禁食时间。(2)与模型组比较,黄连总生物碱高剂量组(含黄连总生物碱578.7 mg/kg)可明显降低糖尿病大鼠空腹6 h血糖及糖化血清蛋白(P<0.05);黄连总生物碱低剂量组(含黄连总生物碱192.9 mg/kg)可显著降低谷胱甘肽-过氧化物酶(P<0.01)。黄连总生物碱对糖尿病大鼠肌酐、超氧化物歧化酶、总胆固醇、甘油三酯及脏器指数总体上影响不明显(P>0.05)。结论:黄连总生物碱对糖尿病大鼠有降血糖的作用。

黄连干预心肌缺血损伤的体内外实验研究

目的利用体内、体外实验模型研究单味黄连对心肌(细胞)缺血、缺氧的保护作用及机制。方法结扎左冠状动脉复制大鼠心肌缺血模型,灌胃给予黄连粗提物61.27 mg/(kg.d),每日1次,7 d后测定心电图、血清酶学指标;建立缺氧复氧心肌细胞模型,给予黄连粗提物(25μg/mL),测定细胞培养液中乳酸脱氢酶的漏出和细胞活力。结果黄连能对抗心肌缺血引起的Ⅱ导联心电图ST-T段的抬高(P<0.05),降低血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶、丙二醛(P<0.05),升高超氧化物歧化酶(P<0.05);减少缺氧复氧心肌细胞乳酸脱氢酶的漏出(P<0.05),而不影响细胞相对活力。结论黄连具有保护心肌(细胞)作用,其机制是通过改善心肌(细胞)缺血、氧化损伤状态而实现。

复方黄连胶囊降血糖作用的实验研究

目的:研究复方黄连胶囊(CRCC)降血糖作用及部分机制。方法:建立大鼠四氧嘧啶糖尿病模型,观察CRCC对血糖、血清胰岛素、糖化血红蛋白、糖耐量、心肌组织内脂质过氧化水平的影响。结果:CRCC(1．09, 2．18,4．36 g·kg^(-1),ig给药)能降低糖尿病大鼠的血糖和糖化血红蛋白,升高血清胰岛素水平,增强其糖耐量,并能抑制心肌的脂质过氧化反应。结论:CRCC具有降血糖作用,并可通过改善心肌组织内脂质过氧化作用对心肌产生保护作用。

黄连姜制前后对乙醇致小鼠胃黏膜损伤的保护作用及机制研究

目的探讨姜制对黄连保护胃黏膜损伤作用的影响及机制。方法采用乙醇致小鼠胃黏膜损伤造模,观察黄连和姜黄连作用后乙醇所致小鼠胃黏膜的损伤程度,测定其溃疡抑制百分率,并检测小鼠血浆及胃黏膜中丙二醛(MDA)以及超氧化物歧化酶(SOD)的活力。结果姜黄连抗溃疡抑制率显著高于生黄连和阳性对照西咪替丁,与空白组和模型组相比,黄连及姜黄连给药组小鼠的血清及胃黏膜中MDA量明显降低,SOD活力显著增加,且姜黄连各组MDA量均低于生黄连各组,SOD活力值高于生黄连各组。结论黄连及姜黄连均有保护胃黏膜损伤作用,且姜黄连作用更强。

归胃经寒性中药对胃热证大鼠胃粘膜组织学的影响

【目的】观察归胃经寒性中药黄连、蒲公英、枳实对胃热证模型大鼠胃粘膜组织病理学的影响。【方法】SD大鼠150只,随机分为10组,分别为空白对照Ⅰ、Ⅱ组,模型对照Ⅰ、Ⅱ组、黄连高、低剂量组(剂量分别为0.6、0.3 g/kg),蒲公英高、低剂量组(剂量分别为2.0、1.0 g/kg),枳实高、低剂量组(剂量分别为1.0、0.5 g/kg)。除空白对照组外,其他组的大鼠均采用温热药干姜水煎剂连续灌胃15 d,复制胃热证模型。先剖杀空白对照Ⅰ组和模型对照Ⅰ组大鼠,其他组则分别按设计剂量以黄连、蒲公英、枳实水煎剂灌胃治疗10 d,观察胃热证模型大鼠治疗前后胃粘膜组织病理学变化情况。【结果】胃热证大鼠胃粘膜呈现出弥漫性充血、粘膜固有层可见中性粒细胞浸润、粘膜表层粘液细胞分泌减少、主细胞和壁细胞数减少等现象,分别经黄连、蒲公英、枳实治疗后,各组大鼠胃粘膜均呈现不同程度的充血减轻、炎性细胞减少、粘液细胞分泌量增加、主细胞和壁细胞数增加,其中黄连及蒲公英高、低剂量组的胃粘膜组织学表现与空白对照组接近,枳实高、低剂量组有半数以上的大鼠胃粘膜组织学表现接近空白对照组。【结论】归胃经寒性中药黄连、蒲公英、枳实可有效促进胃热证大鼠受损胃粘膜的修复,药物的疗效程度可能与其寒性程度有关。

不同姜汁炮制黄连对小鼠止泻作用及胃肠动力的影响

目的研究生、干姜汁和不同姜汁炮制黄连在胃肠动力和止泻作用方面差异。方法采用番泻叶致小鼠腹泻模型,测定6h内的腹泻指数,来评价生、干姜汁和不同姜汁制黄连的抗腹泻作用;通过灌服营养性半固体糊的方法,测定生、干姜汁和不同姜汁制黄连对小鼠肠推进率和胃残留率的影响。结果与空白组比较,黄连可极显著的降低番泻叶致小鼠的腹泻指数(P<0.01),并显著抑制肠推进率和胃排空率(P<0.05),姜汁制后仍能显著降低小鼠的腹泻指数(P<0.01);与生黄连组比较,姜制黄连可提高小肠推进率和胃排空率(P<0.05),且生姜黄连作用更强。结论黄连姜制后在保留原有的止泻作用的基础上可以缓和生黄连引起的胃肠动力的副作用,且生姜汁效果较干姜汁好。

黄连联合葛根用药对大鼠的降血糖作用

目的:研究黄连联合葛根用药对高血糖大鼠的降血糖作用。方法:选取SD大鼠,采用链脲佐菌素腹腔注射造模,将造模成功的大鼠(血糖≥11. 1 mmol/L)随机分为空白对照组、模型组、二甲双胍组、黄连-葛根大、中、小剂量组,连续给药21 d后,观察黄连-葛根大、中、小剂量组队高血糖大鼠血糖、胰岛素敏感指数、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_x)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。结果:黄连-葛根大、中、小剂量可以明显降低高血糖大鼠的血糖值,提高大鼠的胰岛素敏感指数,升高大鼠体内CAT、GSH-P_x和SOD活力,降低MDA水平。结论:黄连-葛根大、中、小剂量可以明显降低高血糖大鼠的血糖值,提高小鼠的抗氧化能力,提高大鼠的胰岛素敏感指数并降低胰岛素抵抗力。

五种中草药提取物对致龋菌的体外抑菌作用研究

目的探讨黄连、金银花、厚朴、桔梗与大黄五种中药对常见致龋菌的体外抑菌作用。方法按照标准方法分别提取5种中药的主要成分,观察提取物对变形链球菌、粘性放线菌生长的影响,并测量抑菌圈直径,检测最小抑菌浓度(MIC)。结果厚朴、黄连、大黄对变形链球菌与粘性放线菌的抑制作用较强,厚朴提取物对常见致龋菌的抑菌作用较强,其中,对变形链球菌的最小抑菌浓度为1.25 mg/mL,对粘性放线菌的最小抑菌浓度为0.63 mg/mL,抑菌作用强于黄连与大黄。结论厚朴、黄连、大黄对常见致龋菌有较大的抑制作用,具有一定的研究与开发价值。

处理黄连最佳乙醇浓度研究

目的:研究处理黄连最佳乙醇浓度。方法:用不同浓度乙醇处理黄连后,用紫外分光光度法分别测定相应样品总碱含量,用固体琼脂稀释法研究相应样品抗菌作用。结果:70％乙醇处理黄连后,总碱含量最高,抗菌作用最强。结论:70％乙醇为处理黄连最佳乙醇浓度。

精制竹醋与中药提取物的抑菌增效作用分析

采用精制竹醋、黄连、厚朴、连翘等浸提液分别对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌进行抑菌试验。结果表明,精制竹醋、黄连、厚朴等浸提液对4种菌都具有一定的抑制作用,但精制竹醋分别与黄连浸提液、厚朴浸提液辅配后能够产生明显的增效作用,其中黄连浸提液与精制竹醋抑菌效果最佳,并且对人体具有良好的生物相容性。

黄连主要活性成分及药理作用研究进展

黄连为毛茛科植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎。黄连含有生物碱类、木脂素类、黄酮类、酸性成分和挥发油类等多种化学成分,其中最主要的成分是黄连素,又称小檗碱。黄连味苦、性寒,具有清热燥湿、泻火解毒的作用,常用于治疗呕吐吞酸、泻痢、消渴、痈肿疔疮,外治湿疹、湿疮、耳道流脓等。现代药理学研究表明,黄连具有抗心律失常、抗肿瘤、降血糖、抗炎等多种药理作用。本文就黄连的主要活性成分和药理作用进行综述,以期为黄连的开发和临床利用提供参考依据。

衰老病理机制与川产道地药材黄连的抗衰老效应研究进展

黄连作为川产道地药材在中医药历史上有重要地位。现代药理研究证明,黄连及其提取物在抗衰老、抗炎、抗肿瘤、调血脂、降血糖、神经保护等方面具有广泛的药理作用。衰老及其相关疾病在现代医学发展中具有重要意义,黄连及其提取物在抗衰老及衰老相关性疾病方面的效应及机制的研究进展,对发掘川产道地药材黄连的治疗新功效及新靶点,为其抗衰老新用途提供理论依据,为衰老及其相关疾病的临床治疗提供现代的科学依据及临床转化可能。

黄连及黄连须、黄连茎叶体外抗氧化活性的谱效关系研究

测定黄连与黄连须、黄连茎叶主要生物碱含量并建立高效液相(HPLC)指纹图谱,分析其抗氧化活性的谱效关系。采用HPLC分析比较黄连及黄连须、黄连茎叶中小檗碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀含量差异并建立指纹图谱,通过羟自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、2,2-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)自由基体外清除试验与总还原力试验评价其体外抗氧化活性差异,应用Pearson相关系数法分析HPLC指纹图谱与抗氧化活性的谱效关系。结果发现小檗碱、巴马汀含量为黄连>黄连茎叶>黄连须;药根碱、黄连碱和表小檗碱含量为黄连>黄连须>黄连茎叶;总还原力为黄连>黄连茎叶>黄连须,·OH、DPPH、ABTS·+自由基清除力为黄连茎叶>黄连>黄连须;总还原力与各峰均有较强相关性,·OH、DPPH、ABTS·+自由基清除力与4号峰相关性较强。说明黄连茎叶体外抗氧化活性较强,黄连须与黄连茎叶均有一定药用开发价值。

黄连的研究进展及其质量标志物预测分析

黄连Coptidis Rhizoma是我国常用的大宗中药材,资源丰富,具有广阔的开发利用前景。黄连化学成分类型丰富,主要为生物碱、苯丙素、黄酮、挥发油等。在黄连化学成分、药理作用综述的基础上,根据中药质量标志物(Quality marker, Q-Marker)的概念,从化学可测性、植物亲缘学、炮制方法、配伍应用、传统药性、主要功效和网络药理学的方面进行预测分析,大类成分以生物碱、酚性成分、挥发油和木脂素为质量标志物,以小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗红碱、药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、格兰地新、阿魏酸、绿原酸等单一成分为备选物质,为明确黄连Q-Marker和制定科学的质量标准提供一定的参考。

基于“量效关系”探讨不同比例黄连-吴茱萸药对的作用

本文从中药的“量效关系”探讨和阐述不同比例黄连-吴茱萸药对的作用。黄连-吴茱萸药对不同剂量配伍时,具有清热、和中、温阳等不同功效,其主治证候、临床应用和药理作用都不尽相同,甚至截然相反,体现了中医辨证论治的精髓和中药组方药简效宏的特色,值得在临床实践中推广经典药对的应用和临床研究。

基于汉唐方剂考据黄芩、黄连、黄柏之药用

《神农本草经》所记黄芩、黄连、黄柏功用相近,而临证药用有别。本文以《神农本草经》《名医别录》所载黄芩、黄连、黄柏主证为基础,据之以仲景《伤寒论》《金匮要略》,唐《备急千金要方》《外台秘要方》等含有黄芩、黄连、黄柏的方剂,藉以剖析其药用之异同。黄芩、黄连、黄柏俱主肠胃结热,黄芩主除胸中烦,兼主身热;黄连重在止下利肠澼,并除心下痞;黄柏善治黄疸疮疡。黄芩、黄连、黄柏药用的考据可为临床应用提供指导,同时为以方测药、探究药物药用的方法学提供借鉴。

黄连不同方法提取物治疗2型糖尿病大鼠的比较研究

目的比较黄连不同方法提取物中有效成分的含量及其对2型糖尿病大鼠的治疗效果,探讨其主要成分含量与其疗效的相关性。方法①高效液相色谱法(HPLC)测定黄连超临界萃取物及黄连模拟胃液提取物中代表性有效成分的含量;②90只成年雄性Wistar大鼠作为研究对象,随机抽取15只作为正常对照组(N组),予以标准鼠饲料喂养,其余大鼠予以高脂饲料喂养联合尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组(M组)、阳性对照组(D组)、黄连超临界萃取物治疗组(A组)和黄连模拟胃液提取物治疗组(B组);连续治疗9周后,比较各组大鼠的体重、OGTT血糖水平、血清三酰甘油(TG)及白介素-6(IL-6)水平以及肠道组织病理状态。结果①2种提取物在相同剂量时,黄连超临界萃取物中各代表性有效成分的含量均高于黄连模拟胃液提取物;2种提取物在有效剂量时,黄连超临界萃取物中仅小檗碱与巴马丁的含量高于黄连模拟胃液提取物;②以有效剂量治疗9周后,D组、A组、B组大鼠OGTT血糖水平、体重、血清TG及IL-6水平均明显低于M组大鼠(P<0.05);A组与B组比较,差异无统计学意义(P>0.05);光镜下,D组、A组、B组大鼠肠道组织石蜡切片HE染色显示炎性改善均显著优于M组。结论黄连超临界萃取物及黄连模拟胃液提取物对2型糖尿病大鼠均有一定的治疗作用,可显著降低血糖、血脂、体重及血清IL-6水平,改善肠道慢性炎症,其主要成分含量与其疗效无相关性。

响应曲面法优化黄连-干姜药对抗流感病毒作用的配伍比例

目的探讨黄连-干姜药对体外抗流感病毒作用,优选其最佳配伍比例。方法通过细胞病变效应(CPE)与噻唑蓝(MTT)比色法考察不同配比的黄连-干姜药对对流感病毒感染的狗肾细胞(MDCK)活性的影响。采用辐射设计结合响应曲面法,确定9个不同配比黄连-干姜药对的量效曲线参数,建立三维响应曲面模型,分析配伍比例与抗流感作用的关系。结果 9个不同配比的黄连-干姜药对对流感病毒均有抑制作用,且在1∶1时作用最强,抑制率为68.3%。配比在0.91∶1~1.81∶1时,药对表现出明显的协同作用(作用强度:-1.0^-0.8),而其他配比下协同作用较弱,甚至产生拮抗作用。结论该方法可为含黄连-干姜药对复方的临床配伍应用及深入研究该药对抗流感的药效机制提供参考。