王济华运用角药治疗类风湿关节炎经验

王济华教授认为,类风湿关节炎早期多因外感风、寒、湿三邪,三者之间相互促进、互相转化,风寒表邪入里日久或郁而化热;病程日久多虚实夹杂,肝肾亏虚、气血不足,同时兼有寒湿痹阻、痰瘀互结。故王教授治疗痹证早期以祛邪散寒为主,兼顾清热利湿、化痰散结,中晚期则偏于滋养气血、补益肝肾。王济华教授运用角药治疗痹证颇有心得,组方精妙、配伍严谨,常用角药川芎-延胡索-白芍行气活血、柔筋止痛;忍冬藤-络石藤-青风藤清热通络、祛风除湿;半夏-陈皮-竹茹燥湿化痰、理气和中;白术-薏苡仁-茯苓益气健脾、利湿消肿;桑寄生-续断-杜仲滋补肝肾、强筋壮骨;酸枣仁-合欢皮-首乌藤宁心安神、解郁除烦。王教授临证时,追求阴阳调和平衡、气机升降有度,临床用药有药简力专、增效减负之功。

基于网络药理学和实验验证探究金银花-黄连治疗咽炎的作用机制

目的通过网络药理学方法对金银花-黄连治疗咽炎的作用机制进行预测,并进行初步动物实验验证。方法通过TCMSP数据库筛选金银花与黄连的有效成分;输入Pharm Mapper数据库获得相应基因;检索GeneCards数据库获得咽炎的靶点基因;利用R语言3.6.1截取交集网络获得候选靶点;借助Cytoscape3.7.1将“药物-化合物-靶点-疾病”网络可视化处理;在STRING平台构建PPI网络;利用DAVID数据库对候选靶点进行GO富集分析和KEGG通路注释;使用AutoDock Vina 4.2.6,将关键靶点与关键成分进行分子对接,并使用PyMol进行可视化处理。最后通过急性咽炎大鼠实验模型验证金银花-黄连对两种靶点基质金属蛋白酶2(MMP-2)、白介素2(IL-2)的影响。结果共获得33个有效化合物,183个不重复的靶标信息,46个疾病治疗靶点;GO与KEGG富集分析分别得到48条目和48条信号通路,主要涉及雌激素信号通路、促性腺激素释放信号通路、Ras信号通路、T细胞受体信号通路。分子对接结果显示金银花-黄连中有效成分黄柏酮、掌叶二蒽酮A与关键靶点MMP-2、表皮生长因子受体(EGFR)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)具有自发亲和力。动物实验证实金银花-黄连高、中、低剂量能降低急性咽炎大鼠血清中的MMP-2、IL-2水平。结论通过网络药理学和实验验证,初步预测了金银花-黄连治疗咽炎可能的药效物质基础及其分子机制,可为今后的研究提供依据和方向。

基于生物信息技术探究骨碎补-金银花治疗糖尿病足的作用机制

目的:通过网络药理学及动物实验研究骨碎补-金银花治疗糖尿病足的作用机制。方法:通过TCMSP网站获取骨碎补-金银花的药物成分及作用靶点,将靶点通过uniprot统一基因名称;通过GeneCards查询糖尿病足的疾病靶点,利用venny 2.1获取交集靶点。将交集靶点导入STRING进行分析并使用Cytoscape构建PPI网络图。将交集靶点导入Metascape分析GO富集和KEGG富集。并通过Cytoscape软件构建"成分-靶点-通路"网络图。依据Degree分别筛选PPI中前4位基因靶点,并通过动物实验验证骨碎补-金银花干预糖尿病足大鼠动物模型后血清中靶蛋白表达差异。结果:骨碎补-金银花32个有效成分调节148个疾病靶点治疗糖尿病足,其中甾醇、豆甾醇、木樨草素、山奈酚等是核心成分,JUN、TP53、蛋白激酶B(Akt1)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)3是至关重要的靶点。基因功能注释分析结果显示,与氧化应激、膜筏、膜微区、质膜筏、激酶结合、蛋白激酶结合等相关。KEGG分析结果提示骨碎补-金银花主要参与MAPK、PI3K/Akt等信号通路。动物实验证实糖尿病足大鼠血清JUN、TP53、Akt1、MAPK3表达增加。结论:骨碎补-金银花主要通过调节MAPK、PI3K/Akt等信号通路的JUN、TP53、Akt1、MAPK3等疾病靶点,干预酶的活性、炎症反应等生物学过程进而治疗糖尿病足。

三种中药的醇提液对嗜水气单胞菌的抑制作用（英文）

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是引起水产动物细菌性疾病常见的病原菌,不仅严重威胁着海产品的安全,还带来了巨大的经济损失.而中药(traditional Chinese medicines,TCM)具有天然性、多功能性、毒副作用小和抗药性低等特点.本文研究了大黄醇提液(RRR)、甘草醇提液(GRR)和金银花醇提液(LJF)对嗜水气单胞菌的作用.实验结果表明,它们对嗜水气单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)分别是1.0 mg/mL,7.8 mg/mL和3.9 mg/mL;最小杀菌浓度分别是4.0 mg/mL,31.2 mg/mL和7.8 mg/mL.经SDS-PAGE,2-DE和蛋白质质谱(MALDI-TOF-TOF-MS)分析,发现中药醇提液抑制嗜水气单胞菌体内4种蛋白质的表达,分别是30S核糖体蛋白(S1),F0F1ATP合酶β亚基(ATPase-β),异柠檬酸裂解酶(isocitrate lyase)和烯醇酶(NSE).另外,实时荧光定量PCR结果表明,中药醇提液影响4种蛋白质的mRNA表达.实验揭示,中药醇提液通过调节S1,ATPase-β,isocitrate lyase和NSE这4种代谢酶表达而抑制嗜水气单胞菌的生长,为中药作为饲料添加剂在水产养殖中应用提供理论依据.

白土茯苓的化学成分研究

从白土茯苓中分离得到6个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、胡萝卜苷(Ⅱ)、3,3′,5,5′-tetrahydroxy-4′-methoxystilbene(Ⅲ)、柚皮素(Ⅳ)、α-L-正丁基山梨糖苷(Ⅴ)和甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷(大泽米苷,Ⅵ)。其中化合物Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ为首次从该属植物中分离得到。本文还首次对化合物Ⅵ的NMR谱数据进行了归属。

近红外漫反射光谱法快速测定苦参和白土苓药材中多指标成分的含量

建立近红外光谱(near infrared spectroscopy,NIRS)法快速测定复方苦参注射液原料药材苦参和白土苓中多指标成分含量的方法,探讨其在中成药原料质量保障系统中的应用可行性。以HPLC法测定苦参中氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱以及白土苓中大泽米苷的含量为对照值;采用近红外漫反射模式采集样品光谱,比较不同建模波段及光谱预处理方法的建模效果,优选出最佳建模参数;采用偏最小二乘法分别建立白土苓中大泽米苷和苦参中氧化苦参碱与苦参碱总量、槐果碱与氧化槐果碱总量的近红外定量分析模型,并对模型进行评价。结果显示,HPLC测定的88批白土苓中大泽米苷和75批苦参中氧化苦参碱与苦参碱总量、槐果碱与氧化槐果碱总量分别0.36~12.88,8.87~66.31和2.30~15.11mg·g-1。所建立的三组指标成分的NIRS定量校正模型性能良好,各模型校正集内部交叉验证R2为0.902 5,0.949 1,0.913 7,RMSECV为0.961,2.45,0.724mg·g-1;验证集外部验证R2 0.981 7,0.982 6,0.960 9,RMSEP为0.693,2.27,0.658mg·g-1。建立了快速定量苦参和白土苓中多指标成分的含量的近红外分析方法,所建立的定量分析模型能够满足复方苦参注射液大生产对大批量原料样品化学信息快速获取的需求。

竹节参总皂苷对中动脉栓塞模型大鼠血液流变学的影响

目的研究竹节参总皂苷对中动脉栓塞模型大鼠血液流变学的影响,进一步明确其阻抑脑缺血损伤的作用机理。方法建立大鼠永久性中动脉栓塞模型(MCAO),观察竹节参总皂苷对模型大鼠红细胞变形性、聚集性、血液粘度的影响。结果竹节参总皂苷(200、100、50mg/kg)能显著降低中动脉栓塞模型大鼠全血粘度、红细胞聚集性,增加红细胞变形性。结论竹节参总皂苷对脑缺血损伤的保护作用可能与其改善中动脉栓塞模型大鼠血液流变学指标有关。

竹节参总皂苷对大鼠局灶性脑缺血损伤及抗氧化酶活性的影响

目的研究竹节参总皂苷(total rhizoma panacis japonica saponins,tRPJS)对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用及机制。方法插线法阻塞大鼠右侧大脑中动脉24h后,观察tRPJS对模型大鼠病理形态学及缺血脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)含量的影响。结果竹节参总皂苷(200,100,50mg·kg-1)组大鼠脑组织的病理改变较模型组有不同程度的减轻,缺血侧脑组织抗氧化酶GSH-PX、SOD、CAT活性显著升高,MDA的含量明显降低。结论竹节参总皂苷抗脑缺血损伤作用机制可能与其改善机体自由基代谢有关。

毛细管气相色谱质谱法测定关苍术中的挥发性成分

采用正己烷萃取关苍术中挥发性成分 ,以GC -MS分离 ,经计算机检索系统处理与质谱标准谱图核对 ,检出香橙烯 ([+]-Aromadendrene)、反式石竹烯 (trans -Caryophyllene)、γ -榄香烯 (gamma -Elemene)、α -草烯(alpha -Humulene)、β -桉叶烯 (beta-Selinene)、2 -甲基苯酚 (Phenol,2 -methyl- )、石竹二烯酮 (Caryophylla - 2 [12 ],6 [13]-dien - 5 -one)、1-甲氧基 - 2 (1-甲基 - 2 -亚甲基 -环戊基 ) -苯 (Benzene,1-methoxy - 2 [1-methyl- 2 -methylenecyclopentyl]- )、呋喃 - 2 -亚甲基 - (1H -嘌呤 - 6基 ) -胺 (1H -Purin - 6 -ammine,N - [2 -furanylmethyl]- )、白术内酯 (Butenolide)、1-溴 - 8十七炔 (8-Heptadecyne ,1-beome)等

RP-HPLC测定白土茯苓中甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量

目的:建立白土茯苓中甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的RP-HPLC定量分析方法。方法:采用Century C_(18)AQ色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇.水(4:96)为流动相,流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为215nm,柱温35℃。结果:甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷在19.12～382.4μg·mL^(-1)线性关系良好(r=0.9998),方法回收率为99.5%,RSD为2.1%(n=9)。结论:该方法可用于白土茯苓的质量控制。

竹节参总皂苷对慢性脑缺血大鼠海马GFAP、GAP-43表达的影响

目的:观察竹节参总皂苷(TRPJS)对慢性脑缺血大鼠海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经生长相关蛋白(GAP-43)表达的影响。方法:双侧颈总动脉结扎制备慢性脑缺血大鼠模型,竹节参总皂苷灌胃给药30天后,免疫印迹方法测定海马GFAP和GAP-43的表达。结果:慢性脑缺血大鼠海马GFAP表达增强,GAP-43表达有降低趋势;tRPJS可明显降低GFAP表达和增加GAP-43表达(P<0.01)。结论:tRPJS可降低慢性脑缺血引起大鼠海马星形胶质细胞过度反应,上调生长相关蛋白GAP-43,这可能是其提高学习记忆的作用机制。

解毒泄浊Ι号颗粒的薄层色谱鉴别研究

目的建立解毒泄浊Ι号颗粒的薄层色谱鉴别方法。方法采用薄层色谱法对本制剂中的土茯苓、六月雪、大黄、槐花进行定性鉴别。结果薄层色谱可鉴别出土茯苓、六月雪、大黄、槐花,且阴性无干扰。结论薄层色谱专属性强,方法简便可靠,重现性好,可用于解毒泄浊Ι号颗粒的鉴别。

3种不同炮制方法对白土茯苓中β-谷甾醇含量的影响

目的探讨3种不同炮制方法对白土茯苓中β-谷甾醇含量的影响。方法以白土茯苓为对象,测定了不同炮制方法的白土茯苓中β-谷甾醇的含量。结果β-谷甾醇RSD在5%以下,10h内样品稳定;β-谷甾醇平均回收率为99.15%,RSD为1.65%;白土茯苓生切品中β-谷甾醇最高,其次为传统蒸制品和高压蒸制品。结论白土茯苓生切品对β-谷甾醇含量最为有利,本研究可为白土茯苓饮片的规范化加工和质量控制提供参考。

金翘感冒口服液的质量标准研究

目的研究金翘感冒口服液的质量标准。方法对金翘感冒口服液中主要药物金银花、连翘、甘草进行薄层色谱鉴别；采用RP-HPLC法测定绿原酸的含量。结果薄层色谱检出绿原酸、连翘药材、甘草次酸特征斑点，绿原酸进样量在0．224—1．120μg线性关系良好，平均加样回收率99．81％，RSD为0．89％。结论方法简便易行，灵敏，结果准确，重现性好，可有效控制金翘感冒口服液的质量。

鬼针草无糖口含片的研制

以三叶鬼针草为原料,采用湿颗粒法研制了新型鬼针草无糖口含片,并对其质量进行评价。结果表明:以20%的鬼针草浸膏粉、15%的微晶纤维素(MCC),65%的辅料(甘露醇︰乳糖︰糊精添加量=2︰1︰1),润湿剂的浓度为70%配比,所压制产品口感适宜、含服方便,具备良好的药用价值及保健功能,可为鬼针草的综合利用提供参考。

口炎清颗粒质量标准的改进

目的改进口炎清颗粒（天冬、玄参、山银花等）的质量标准。方法 TLC法对天冬、玄参、山银花和甘草进行定性鉴别。HPLC法定量测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷、川续断皂苷乙含有量。结果 TLC斑点清晰,专属性强。绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙均呈良好的线性关系（r〉0.999 9）,平均加样回收率（n=6）95%-102%。结论增加对山银花指标性成分灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含有量的测定,可完善口炎清颗粒的质量标准。

壮药蝴蝶花的生药学研究

目的：对蝴蝶花根茎的药材性状、组织结构、粉末特征、理化性质等进行生药学方面的研究，为蝴蝶花的进一步开发利用提供鉴别依据。方法：用传统的性状鉴别方法观察蝴蝶花根茎的药材性状特征。用滑走切片法对根茎叶进行切片，用常规的显微技术观察组织构造和显微特征。对根茎提取物进行理化实验。结果：发现根茎药材呈略扁的不规则条状，常弯曲，不分枝，具不规则纵皱纹，节明显，环状且突起，其上常残留有干枯的叶柄或叶柄残基。根茎横切面皮层宽广，具大量叶迹维管束、纤维束；叶迹维管束双韧性；中柱鞘由众多维管束围绕组成；维管束周木型；维管束外有1-2列纤维组成的纤维束鞘。粉末中发现柱晶多见。导管为网纹导管、螺纹导管；纤维常成束，胞腔大；薄壁细胞壁呈波状加厚。理化实验发现其含有黄酮、甾醇或三萜。结论：以上鉴别特征可作为蝴蝶花的生药学鉴别依据。

益胆片质量标准完善研究

目的 建立鉴别和含量测定方法完善益胆片质量标准,以更好地控制该药品的质量.方法 建立了郁金、玄参、甘草、金银花、滑石粉等显微鉴别方法;建立了玄参、甘草薄层色谱鉴别法;建立高效液相色谱法对金银花中主要成分绿原酸进行了含量测定.结果 显微鉴别易于观察,专属性强;薄层鉴别斑点清晰,分离度好,阴性无干扰;绿原酸在0.02654～2.654 μg范围内呈良好的线性关系,加样回收率为100.5％,RSD为1.3％.结论新建立的标准可更有效地控制药品质量.

3对中药对大肠杆菌O_2的联合抑制作用研究

为了研究黄连-紫花地丁、黄连-芦荟、黄连-双花连翘3对中药对大肠杆菌的联合抑制作用,采用微量棋盘法对已知血清型大肠杆菌进行了单独与联合抑菌对比试验。结果表明,黄连、紫花地丁、芦荟、双花连翘单用时,MIC分别为1/8原液、1/4原液、原液和1/4原液;当黄连-紫花地丁、黄连-芦荟、黄连-双花连翘相配伍时,黄连的MIC分别降为单用时的1/8、1/16和1/8,紫花地丁、芦荟和双花连翘的MIC分别降为单用时的1/12、1/8和1/4。结论:黄连与紫花地丁、芦荟、双花连翘分别联合应用时,FIC值分别为0.625、0.562 5和0.375,相互作用分别为相加作用、相加作用和协同作用。

红芎灌肠液的薄层色谱鉴别

目的建立红芎灌肠液的薄层色谱鉴别方法。方法采用薄层色谱(TLC)法对处方中的金银花、制元胡进行定性鉴别。结果在TLC图谱中可检测出金银花、制元胡的特征斑点。结论所建方法可行,重现性好,专属性强,对所选药物金银花、制元胡的分析方法可靠、阴性对照无干扰,可用于红芎灌肠液的质量控制。