Rho亚家族与消化系统恶性肿瘤侵袭及转移的关系

Rho亚家族是一类小分子G蛋白,在细胞信号转导及细胞运动中起重要作用,参与恶性肿瘤细胞侵袭转移各个过程中。Rho蛋白在许多消化系统恶性肿瘤中表达增高,可能成为一种新的肿瘤标志物,可以用来判断肿瘤侵袭转移能力,并可能成为肿瘤治疗新的靶点。本文就Rho亚家族与消化系统恶性肿瘤侵袭、转移的关系研究进展进行综述。

Rho亚家族与乳腺癌的研究进展

Rho亚家族属于ras超基因家族,Rho蛋白最重要的作用是调节肌动蛋白骨架系统,在细胞生长、黏附变形和游走调控中起开关作用。Rho亚家族与乳腺癌的侵袭、转移密切相关,以Rho/ROCK为靶点的治疗有望成为新的抗乳腺癌转移的方法。现就Rho亚家族与乳腺癌关系的研究进展予以综述。

Ras超家族亚群A/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1在无机磷酸盐中诱导大鼠瓣膜间质细胞成骨分化的作用机制

目的探讨Ras超家族亚群A(RhoA)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(Rock-1)在无机磷酸盐中诱导大鼠瓣膜间质细胞(VICs)成骨分化的作用机制。方法取8只雄性大鼠(购自上海西普尔必凯动物实验有限公司)的主动脉瓣膜消化培养至第3代后免疫荧光鉴定。小干扰RNA(siRNA)-RhoA转染VICs后用无机磷酸盐成骨培养基(IP-OIM)分别诱导转染组(RNAi),阴性对照组(NC)及空白对照组(CON)的成骨分化,并通过蛋白质印迹法(Western blot)与聚合酶链反应(PCR)评估转染后RhoA、Rock-1、Runt相关转录因子2(Runx-2)及骨钙素(OST)的变化;7 d行碱性磷酸酶(ALP)活性相关检测,14 d行钙含量相关检测评估其早期与晚期成骨分化趋势。用IP-OIM刺激转染后的VICs 60 min,并通过Western blot检测SMAD1/5/9的磷酸化变化。采用单因素方差分析。结果鉴定后的VICs转染siRNA-RhoA并用IP-OIM培养,经过Western blot及PCR检测后可知RNAi的RhoA(Western blot:0.330±0.020;PCR:0.357±0.060)及Rock-1(Western blot:0.366±0.020;PCR:0.383±0.040)比CON均出现表达下调(RhoA Western blot:t=36.680,P<0.05 PCR:t=10.610,P<0.05;Rock-1 Western blot:t=31.240,P<0.05 PCR:t=13.210,P<0.05),差异有统计学意义,RNAi的OST(Western blot:0.520±0.030;PCR:0.510±0.070)和Runx-2(Western blot:0.573±0.020;PCR:0.57±0.060)比CON也出现了下降(OST Western blot:t=16.630,P<0.05;PCR:t=6.970,P<0.05;Runx-2 Western blot:t=21.040,P<0.05;PCR:t=6.710,P<0.05),差异有统计学意义。在7 d的ALP染色中RNAi的颜色最浅,ALP活性检测中RNAi[(1.005±0.101)U/mg]活性比较NC[(2.042±0.116)U/mg]和CON[(1.931±0.136)U/mg]明显下降(t=10.570,P<0.05;t=9.400,P<0.05),差异有统计学意义。在14 d的相对钙含量测定中RNAi[(22.290±1.981)ng/L]钙含量比较NC[(41.100±2.440)ng/L]和CON[(41.760±1.215)ng/L]明显下降(t=10.530,P<0.05;t=14.510,P<0.05),差异有统计学意义;同样茜素红钙沉积染色中,也是RNAi颜色最浅。经IP-OIM分别刺激60 min,RNAi的SMAD1/5/9的磷酸化水平(0.337±0.030)比CON明显下降(t=25.480,P<0.05),差异有统计学意义。结论无机磷酸盐可通过RhoA/Rock-1引起瓣膜间质细胞的成骨分化,SMAD1/5/9的磷酸化在此过程中起重要作用。

阿司匹林对大鼠急性心肌缺血损伤的影响

目的研究阿司匹林对大鼠急性心肌缺血损伤的影响以及对Rho亚家族蛋白A/Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶2(RhoA/ROCK2)信号通路的调控作用。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组和实验组,每组15只。实验组大鼠灌胃阿司匹林溶液25 mg·kg^-1,对照组和模型组灌胃等量0.9%NaCl溶液,每天1次,连续灌胃15 d。各组大鼠分别于灌胃给药第13,14,15天时,模型组和实验组大鼠皮下注射异丙肾上腺素(ISO)构建急性心肌缺血损伤模型,对照组皮下注射等量0.9%NaCl溶液,每天1次。用酶联免疫吸附法检测干预后各组大鼠血清炎性因子及心肌损伤标志物水平;以苏木精-伊红染色检测心肌组织病理变化;以蛋白质印迹法检测心肌组织RhoA、ROCK2蛋白表达。结果对照组、模型组和实验组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平分别为(78.56±4.52),(125.46±21.58)和(89.46±13.52)pg·mL^-1;转化生长因子-β1(TGF-β1)水平分别为(29.56±3.47),(68.49±3.55)和(44.26±2.86)pg·mL^-1;内皮素-1(ET-1)水平分别为(24.63±5.61),(59.48±4.62)和(35.46±2.69)pg·mL^-1。实验组和对照组分别与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);与对照组相比,模型组大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同功酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)水平明显升高,且实验组低于模型组(均P<0.05)。结论阿司匹林可降低急性心肌缺血损伤大鼠炎性反应,减轻心肌损伤程度,抑制心肌组织RhoA/ROCK信号通路活化。