Rho激酶抑制剂法舒地尔在缺氧性肺动脉高压中的作用研究进展

肺动脉高压(PH)是一组由不同病因和发病机制引起的以肺血管阻力持续增加为特征的临床综合征。PH病理特征是肺血管收缩、肺血管壁重塑和原位血栓形成,导致右心负荷增大或功能不全、肺血流减少,严重影响患者生活质量和预后。根据2009欧洲心脏病学会PH诊断和治疗指南提出的最新分类标准,3类为低氧性PH即肺部疾病和(或)低氧所致的PH,发病率最高,对人类健康影响最大。传统的治疗方法包括抗凝、

Rho激酶抑制剂法舒地尔治疗COPD合并肺动脉高压的疗效观察

目的探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺动脉高压的疗效。方法 60例COPD合并肺动脉高压患者随机分为对照组和治疗组每组30例,对照组给予抗炎、解痉、平喘、化痰、吸氧等常规治疗;治疗组在常规治疗的基础上加用法舒地尔注射液。结果治疗组治疗后PaO2为(74±8)mmHg,高于对照组的(63±8)mmHg(P<0.05);治疗组PaCO2为(48±4)mmHg低于对照组的(56±4)mmHg(P<0.05);心脏超声肺动脉收缩压评估治疗组为(36±12)mmHg,低于对照组的(42±12)mmHg(P<0.05)。治疗组总有效率96.7%,高于对照组的80.0%(P<0.05)。结论 Rho激酶抑制剂法舒地尔注射液治疗COPD合并肺动脉高压的疗效显著。

Rho激酶抑制剂法舒地尔对肺动脉高压大鼠内皮素-1水平的干预研究

目的探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对肺动脉高压(PH)大鼠内皮素-1水平的干预作用。方法 32只成年Wistar大鼠均分为对照3周组(C3)、PH模型3周组(P3)、6周组(P6)及干预组(F组)。予野百合碱建模,第22日始F组予法舒地尔腹腔内注射干预。C3、P3、P6、F组大鼠分别于造模后3、6周末测定大鼠右心室收缩压(RVSP)、血浆内皮素-1(ET-1)水平,观察肺小动脉病理。结果①C3、P3、P6、F组大鼠RVSP分别为(31.2±7.6)、(43.3±8.3)、(56.9±6.9)、(47.3±6.3)mmHg。血浆ET-1分别为(1.09±0.39)、(1.83±0.29)、(2.34±0.65)、(1.90±0.33)ng.mL-1;②造模后大鼠RVSP、ET-1随时间延长而升高,法舒地尔干预后上述指标明显下降。③造模后肺小动脉平滑肌增殖,管腔狭窄,F组较P6组管腔明显增大,增殖减轻;④RVSP与ET-1存在明显正相关(r=0.721,P<0.01)。结论 Rho激酶抑制剂法舒地尔能显著降低PH大鼠血浆ET-1水平,有效降低肺动脉压力。

Rho激酶抑制剂法舒地尔作用BTBD7-ROCK2信号通路抑制肝细胞癌侵袭运动

目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fasudil)对人高侵袭潜能HCC细胞株3(human high metastatic liver cancer cells 3,HCCLM3)侵袭转移的影响,并且探讨其作用的机制。方法:应用100 mol/L Fasudil作用于HCCLM3细胞,采用肌动蛋白微丝荧光染色和侵袭小室实验观察HCCLM3细胞的运动侵袭能力。HCCLM3细胞经过处理后分为阴性对照组、Fasudil作用组、BTBD7干扰组,通过Western印迹检测BTB/POZ结构域蛋白7(BR-C,ttk and bab/pox virus domain containing 7,BTBD7)、Ras同系物家族成员C(ras homolog family member C,Rho C)、Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(Rhoassociated,coiled-coil containing protein kinase 2,ROCK2)、MMP2和MMP9蛋白表达水平,酶谱分析法检测MMP2和MMP9活性水平。BTBD7干扰组作为阳性对照。结果:Fasudil处理后HCCLM3侵袭运动能力下降,BTBD7,Rho C,ROCK2蛋白表达下调,MMP2和MMP9活性降低,与阴性对照组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:Fasudil具有干预BTBD7-ROCK2信号通路、抑制HCC侵袭转移的重要作用。

Rho激酶抑制剂法舒地尔在肺动脉高压治疗中的应用

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一类以肺动脉渐进性闭塞导致肺血管阻力逐渐升高继而诱发右心室衰竭的恶性肺血管疾病,病因复杂,致死率高,病理机制尚未明确。目前临床上PAH治疗药物有限,治疗效果差,不良反应多。据最新研究发现新型靶向药物如血管活性肽、氨基酸激酶抑制剂、免疫抑制剂等对PAH的病情进展有一定抑制作用,其中Rho/Rho激酶信号通路的激活与PAH的发病机制密切相关。Rho激酶可能与内皮细胞功能障碍有关,引起血管收缩、重塑,致使PAH患者的肺动脉平滑肌细胞中Rho激酶活性增加。Rho激酶抑制剂目前已经作为靶向药物治疗PAH,其疗效及前景备受瞩目。法舒地尔是目前唯一用于临床的Rho激酶抑制剂,可改善平均肺动脉压力、BNP水平和肺血管重构,进而改善患者的生存。本研究拟就法舒地尔在PAH治疗中的药理特点和应用进展做一综述,以期为今后PAH治疗药物的研究和临床应用提供借鉴和参考。

Rho激酶抑制剂法舒地尔在冠心病中的应用进展

Rho/Rho激酶广泛分布于哺乳类动物的组织细胞中,是具有信息传导和分子开关功能的信号多肽[1].近年来的研究表明,Rho激酶通过与AT-11、ET-1和血小板衍生生长因子（PDGF）等多种血管活性物质的相互调控,影响平滑肌细胞（SMC）的功能和结构,直接参与心血管疾病的病理过程,与动脉粥样硬化（arteriosclerosis,AS）、高血压、冠脉痉挛、心肌缺血等主要心血管疾病的发生发展关系密切.用Rho激酶抑制剂防治冠心病的研究已取得令人瞩目的临床效果,有望成为防治冠心病的新方法.本文主要介绍Rho激酶抑制剂法舒地尔在冠心病治疗中的应用.

Rho激酶抑制剂法舒地尔在冠心病治疗中的应用进展

Rho激酶参与了冠心病发病的病理生理机制,Rho激酶抑制剂具有抗血管痉挛和抗动脉硬化等作用。因此,Rho激酶抑制剂有望成为治疗冠心病的新药物。本文就Rho激酶抑制剂法舒地尔在冠心病治疗中的应用进展作一综述。

Rho激酶抑制剂在眼部疾病中的作用研究进展

Rho激酶(ROCK)是Rho家族的关键效应器蛋白,通过Rho/ROCK信号通路在多种细胞生物学过程中发挥关键作用,包括细胞形态改变、细胞骨架重组、细胞运动以及细胞-细胞和细胞-基质相互作用等。Rho/ROCK信号通路的异常激活可介导多种疾病的发生、发展,并与这些疾病的病理过程相关。ROCK抑制剂通过抑制Rho/ROCK信号通路发挥神经保护、抗炎、抗肿瘤和抗纤维化等作用,因此其在多种疾病中具有潜在治疗价值。ROCK抑制剂在眼部疾病(青光眼、角膜疾病和视网膜疾病等)治疗中展现出巨大潜力,或可为这些疾病的治疗提供一种全新的策略和方法。

Rho激酶抑制剂法舒地尔对中枢神经系统疾病作用及其结构改造的研究进展

法舒地尔于1995年作为治疗蛛网膜下腔出血药物在日本上市,当时对它的定义是新型钙离子拮抗剂,直到Rho激酶(Rho associated kinase,ROCK)被发现后,它的作用机制才真正被阐明。它主要通过抑制ROCK起到强效扩张血管,保护缺血心脑组织的作用。近年来,越来越多的报道指出法舒地尔具有神经保护作用,它对中枢神经系统疾病如脊髓损伤、阿尔茨海默病、多发性硬化症、神经性疼痛等都有着显著的疗效。为提高法舒地尔对ROCK的选择性,对它的结构进行改造,得到一系列类似物,其中一些还显示出比法舒地尔更强的活性和更高的选择性。本文就法舒地尔其类似物对神经系统疾病潜在的治疗作用及联合用药进行了综述。

Rho激酶抑制剂法舒地尔对急性缺血性卒中患者血清C-反应蛋白含量和转归的影响

目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔对急性缺血性卒中患者血清C-反应蛋白(CRP)含量和转归的影响。方法:52例确诊急性缺血性卒中并在72 h内接受治疗的住院患者,根据入院时斯堪的纳维亚卒中量表(SSS)评分和一般情况进行配对,随机分入法舒地尔组和丁咯地尔组。法舒地尔组予盐酸法舒地尔60 mg,静脉滴注,2次/d(年龄>70岁者30 mg,静脉滴注,3次/d);丁咯地尔组予盐酸丁咯地尔100 mg,静脉滴注,1次/d。两组疗程均为14 d。选择同期同龄健康体检人群26例作为对照组。所有患者于确诊次日清晨测定空腹血清CRP含量,并在治疗结束时复查SSS评分和血清CRP含量。CRP含量应用TurboxR特定蛋白分析系统(芬兰)以散射比浊法进行测定。结果:健康对照组血清CRP含量为(13.47±4.54)mg/L,略高于正常水平。丁咯地尔组和法舒地尔组治疗前CRP含量分别为(28.24±8.83)和(31.95±12.95)mg/L,显著高于对照组(P<0.001)。丁咯地尔组治疗后血清CRP含量为(24.10±10.07)mg/L,较治疗前有下降的趋势,但无显著差异;法舒地尔组治疗后为(15.10±3.92)mg/L,较治疗前显著降低(P<0.001),与丁咯地尔组也有显著差异(P<0.05)。丁咯地尔组治疗后SSS评分为34.7±5.2,较治疗前(25.8±8.2)显著增高(P<0.05)。法舒地尔组治疗后SSS评分为47.6±6.1,较治疗前(26.3±7.2)显著增高(P<0.001),与丁咯地尔组治疗后也有显著差异(P<0.01)。结论:Rho激酶抑制剂法舒地尔可显著改善急性缺血性卒中转归,可能与其降低血清CRP含量有关。

Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔对人LECs增生、迁移及ECM合成的抑制作用

背景 白内障囊外摘出术后晶状体囊残留的晶状体上皮细胞（LECs）的生物学行为改变是后发性白内障的主要病理改变.Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔具有抑制细胞骨架的重构、迁移、黏附及纤维化等作用,但对LECs的作用尚不清楚.目的 探讨盐酸法舒地尔对人LECs株HLEB-3细胞增生、迁移的作用及其对细胞外基质（ECM）合成的影响.方法 常规培养HLEB-3细胞,对照组细胞仍进行常规培养,药物组培养液中加入不同浓度的盐酸法舒地尔,使其终浓度分别为10、20、40和60 μmol/L,分别于培养后12、24和48 h采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测各组细胞的增生情况,计算不同剂量盐酸法舒地尔对细胞增生的抑制率;分别于处理后12、24、36和48 h采用Transwell小室迁移实验检测各组的迁移细胞数;并于上述时间点采用ELISA法检测各组细胞上清中Ⅰ型胶原（COL-Ⅰ）、纤维连接蛋白（FN）的质量浓度及细胞内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）质量浓度,对各组间的检测结果进行比较.结果 不同浓度盐酸法舒地尔组HLEB-3细胞增生抑制率均明显高于对照组,随着盐酸法舒地尔浓度的增加,HLEB-3细胞增生抑制率明显增加,组间总体差异有统计学意义（F浓度=966.727,P=0.000）;随着盐酸法舒地尔作用时间的延长,HLEB-3细胞增生抑制率明显增加,总体比较差异有统计学意义（F时间=280.428,P=0.000）.Transwell小室迁移实验显示,实验后48 h,对照组穿过聚碳酸酯膜的细胞数为（29.20±1.28）个,10、20、40和60 μmol/L盐酸法舒地尔组迁移的细胞数分别为（24.40±1.33）、（17.00±1.10）、（14.60±0.68）和（6.60±1.29）个,随着盐酸法舒地尔浓度的增加,HLEB-3细胞的迁移数逐渐减少,差异有统计学意义（F=57.34,P＜0.05）.随着盐酸法舒地尔浓度的增加和作用时间的延长,细胞上清液中COL-Ⅰ和FN质量浓度逐渐降低,差异均有统计学意义（COL-Ⅰ：F浓度=143.992,P=0.000;F时间=113.745,P=0.000.FN：F浓度=81.761,P=0.000;F时间=69.602,P=0.000）;细胞内α-SMA质量浓度逐渐下降,差异均有统计学意义（F浓度=78.156,P=0.000;F时澡 =65.162,P=0.000）.结论 盐酸法舒地尔可抑制体外培养HLEB-3的增生、迁移及ECM的合成,其作用呈剂量和时间依赖性.

Rho激酶抑制剂法舒地尔改善高脂血症白兔阴茎勃起功能的实验研究

目的研究Rho激酶抑制剂法舒地尔改善高脂血症新西兰白兔阴茎勃起功能的效应。方法 20只新西兰大白兔给予1%胆固醇的高脂饲料连续喂养8周。喂养前检测血胆固醇浓度、体重、动脉血压和罂粟碱海绵体注射前后海绵体压力变化。喂养8周后再次检测上述指标。并应用0.75mg、1.5mg、3mg法舒地尔分别直接海绵体注射,检测动脉血压和海绵体压力变化情况。最后应用法舒地尔诱导离体高脂血症白兔阴茎海绵体平滑肌肌条舒张,并记录平滑肌肌张力的变化。结果 (1)高脂喂养后新西兰白兔的体重(2.42±0.24)kg及血总胆固醇水平(24.21±0.84)mmol/L均明显高于喂养前的体重(1.95±0.14)kg和血总胆固醇水平(3.22±0.15)mmol/L。(2)新西兰白兔经高脂饲料喂养后,罂粟碱导致阴茎海绵体内压较喂养前明显下降(7.83±2.51)mmHg Vs(19.81±3.69)mmHg。0.75mg、1.5mg、3mg法舒地尔海绵体内注射后,高脂血症白兔阴茎海绵体内压增高分别为(4.74±0.77)mmHg、(8.73±1.59)mmHg、(18.15±1.60)mmHg。(3)新西兰白兔经高脂饲料喂养后,离体阴茎平滑肌肌条在0.5 μmol、1.25 μmol、5 μmol、12.5 μmol、50 μmol和100μmol剂量法舒地尔诱导下产生的舒张效应分别为(1.56+0.43)%、(5.03±1.02)%、(8.28±1.35)%、(16.77±3.57)%、(39.44±5.08)%和(61.87±4.85)%。结论 Rho激酶抑制剂法舒地尔能够有效改善高脂血症白兔的阴茎勃起功能。

Janus激酶抑制剂治疗儿童难治性特应性皮炎二例

特应性皮炎是一种常见的慢性炎症性皮肤病,严重影响患者的生活质量。近几年,多种新型生物制剂和小分子口服药物已被批准用于治疗特应性皮炎。Janus激酶抑制剂通过抑制多种Th2细胞介导的炎症、表皮屏障功能受损、瘙痒信号传导等途径,对特应性皮炎起到治疗作用。本文报道了两例难治性特应性皮炎儿童患者成功使用JAK抑制剂治疗的案例。

Rho激酶抑制剂（法舒地尔）在急性缺血性脑卒中的临床观察

目的评价1Lho激酶抑制剂法舒地尔治疗急性缺血性脑卒中的I临床疗效与安全性。方法采用随机对照研究，共纳入急性缺血性脑卒中患者160例，随机分为对照组和治疗组。分别给予常规治疗及常规治疗加法舒地尔治疗，14d为一疗程。治疗后14d，一个月对患者进行评分作为临床疗效的指标。安全肚评估主要观察患者的临床不良反应。结果对160侧患者进行疗效分析，治疗组14d的神经功能缺损评分和30d的改良R．ankin评分变化与对照组差异均有统计学意义，提示法舒地尔疗效优于对照组．显着改善患者神经功能缺损程度和临床结局，且法舒地尔耐受性良好，其不良反应与对照组相似。结论本研究表明Raho激酶抑黼剂法舒地尔对急性缺血性脑卒中患者有效且安全。

Rho激酶抑制剂在常见眼科疾病治疗中的作用机制研究进展

眼科疾病的发生发展与细胞生理功能和眼组织功能异常密切相关。Rho激酶抑制剂可参与多种细胞事件,包括诱导细胞骨架重组、细胞黏附、细胞增殖和血管生成,并可在细胞周期进展、细胞分化和细胞凋亡中发挥作用。Rho激酶抑制剂治疗青光眼的有效性在临床观察中已得到证实,一些动物及细胞实验中亦发现其对糖尿病视网膜疾病、增殖性视网膜疾病、角膜内皮功能障碍及角膜新生血管有良好的治疗作用。深入探讨Rho激酶抑制剂在眼部疾病发生发展中的作用机制,或可对眼部疾病的治疗有较好的帮助和促进作用。

PCI术后心肌损伤与Rho激酶抑制剂-法舒地尔

据文献报道,急性冠状动脉综合征(ACS)患者择期行经皮冠状动脉介入治疗术中,Rho激酶参与了血管壁损伤和炎症反应的过程,造成心肌损伤,从而增加了PCI术后心血管事件。法舒地尔作为Rho激酶抑制剂,可能抑制血管壁损伤和炎性反应的过程,因此目前有观点认为,在PCI术前预防性给予法舒地尔,可以减弱PCI术中血管壁损伤和炎症反应、降低术后心血管不良事件的发生率。

Rho激酶抑制剂在神经退行性疾病中应用

人体中的Ros同源类似物(Rho)相关卷曲螺旋形成的蛋白激酶(ROCK)简称为Rho相关激酶(ROK),属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,相对分子质量约为160 kD。1996年,ROCK作为Rho蛋白(又称Rho.GTP蛋白)下游的一个肌动蛋白细胞骨架的调节因子首次被发现。在哺乳动物体内, ROCK存在两种亚型,ROCK1与ROCK2,它们具有不同的分布特点,一级结构的同源性约为65%,但它们具有非常相似的空间构象和功能域的空间排布。

Rho激酶抑制剂联合葛根素通过抑制TGF-β1/Smads信号通路和炎症反应来减轻缺氧诱导肺动脉高压对肺血管的损伤

目的探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔联合葛根素对缺氧诱导的肺动脉高压(hypoxia-induced pulmonary hypertension,HPH)大鼠TGF-β1/Smads通路及其炎症因子的影响。方法将60只SD大鼠按照随机数字表法分为5组:对照组、模型组、葛根素组、法舒地尔组和法舒地尔与葛根素联合治疗组,常压缺氧舱内缺氧处理构建缺氧诱导的肺动脉高压大鼠模型。采用测压导管测定血流动力学指标RVSP、mPAP、PASP和PAWP,并计算右心室肥厚指数RVHI。采用HE染色法观察肺动脉血管平滑肌层的损伤情况。采用Western blot法检测TGF-β1/Smads通路相关因子的表达情况。采用qRT-PCR法检测炎症相关因子的表达情况。采用免疫组化法检测Gal-3蛋白的表达情况。结果与模型组、葛根素组和法舒地尔组相比较,联合治疗组肺动脉血管壁厚度和炎性浸润程度下降,RVSP、mPAP、PASP、PAWP和RVHI下降(P<0.05),TGF-β1/Smads通路相关蛋白、炎症相关因子和Gal-3蛋白的表达量下降(P<0.05)。结论Rho激酶抑制剂法舒地尔联合葛根素能很好的改善缺氧性肺动脉高压对肺血管的损伤,为缺氧性肺动脉高压的临床治疗提供理论依据。

法舒地尔对大鼠脊髓损伤Rho/ROCK2激酶及铁死亡的影响

目的研究法舒地尔(fasudil hydrochloride,Fasudil)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)Rho亚家族蛋白A/相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho/ROCK2)及铁死亡的影响。方法前瞻性研究将12周龄SD成年雄性大鼠36只(225.2~245.5g)按随机数字表法分为三组:Sham组(假手术),SCI组(脊髓损伤),Fasudil组[SCI+法舒地尔10mg/(kg·d)腹腔注射(Rho/ROCK2激酶抑制剂)],各12只。脊髓撞击法制备成年大鼠SCI模型,通过Basso-Beattie-Bresnahan locomotor scale(BBB)评分检测大鼠的运动功能,试剂盒检测脊髓组织中Fe^(2+)及反应性活性氧(ROS)含量,免疫印迹法检测脊髓组织中Rho/ROCK2及铁死亡相关蛋白xCT、GPX4的表达水平。结果与Sham组比较,SCI后大鼠BBB评分显著降低(P<0.05),Fe^(2+)含量(176.7%±31.5%vs.84.2%±11.2%)及ROS含量(162.2%±28.0%vs.95.8%±12.0%)显著增加(P<0.001),SCI后大鼠脊髓组织Rho/ROCK2(0.85±0.13)vs.(0.28±0.039)表达增多,xCT(0.39±0.041)vs.(0.92±0.092)及GPX4(0.36±0.049)vs.(0.84±0.21)表达水平明显减少(P均<0.001);对比SCI组,Fasudil组大鼠BBB评分增多(P<0.05),Fe 2+(127.8±33.1)%及ROS(123.8±27.6)%含量减少(P<0.05),脊髓组织Rho/ROCK2(0.65±0.17)表达减少,xCT(0.64±0.03)及GPX4(0.55±0.11)表达水平增多(P均<0.05)。结论法舒地尔减少了SCI大鼠脊髓组织中RHO/ROCK2激酶,抑制了脊髓组织中的铁死亡,进而改善SCI大鼠的运动功能。

结合虚拟筛选和高通量筛选方法寻找Rho激酶抑制剂

目的（Objective）结合虚拟筛选和高通量筛选，寻找Rho激酶的抑制剂，为心脑血管、神经系统等疾病的治疗和预防提供新的治疗策略。方法（Method）采用Accelrys公司Discovery Studio 2．0软件，通过Commmon Feature Pharmacophore Generation模块对已知Rho激酶抑制剂结构进行分析，找出药效团，对化合物数据库的样品进行初筛。通过Ligandfit模块将初筛得到的先导物进行分子对接，