Rho相关蛋白激酶与动脉粥样硬化关系的研究进展

动脉粥样硬化(AS)是一种累及全身大血管壁的慢性炎性反应和脂质沉积过程,一些危险因素(如高血糖、血脂异常以及高血压等)可以激活多种信号通路参与AS的发展,Rho A/Rho相关蛋白激酶(ROCK)通路就是其中之一。越来越多的证据表明,RhoA/ROCK通路参与AS过程的许多步骤,ROCK可能成为AS的潜在治疗靶点,了解Rho/ROCK通路在AS进展过程中的作用对AS的防治有重要意义[1]。

血必净通过Rho激酶信号通路对脓毒症急性肾损伤后肾小管细胞的影响研究

目的探讨早期应用血必净通过Rho激酶信号通路对脓毒症急性肾损伤后肾小管细胞凋亡的保护作用。方法 2014年8月—2015年6月,54只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、脓毒症组、血必净组,每组18只。脓毒症组和血必净组以盲肠结扎穿孔(CLP)法制造脓毒症模型,脓毒症组大鼠CLP后0.5 h尾静脉注射0.9%氯化钠溶液4 ml/kg;血必净组大鼠CLP后0.5 h尾静脉注射血必净注射液4 ml/kg。造模后6、24 h每组分别选取9只大鼠采用激光多普勒血流仪测定血流灌注(BPU)情况,采用全自动生化仪检测血肌酐、尿素氮、肌酐清除率(Cr Cl),病理组织学检测评定肾小管损伤评分,采用原位末端标记(TUNEL)法计算凋亡指数(AI),Western blotting法检测Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK-1)、肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(MYPT-1)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)的表达水平。结果 3组大鼠造模后6 h BPU及造模后24 h BPU、血肌酐、尿素氮、Cr Cl比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中造模后6 h,脓毒症组大鼠BPU较假手术组升高,血必净组大鼠BPU较假手术组升高、较脓毒症组降低(P<0.05);造模后24 h,脓毒症组大鼠BPU较假手术组降低,脓毒症组大鼠血肌酐、尿素氮、Cr Cl较假手术组升高,血必净组大鼠尿素氮、Cr Cl较假手术组升高,血必净组大鼠BPU较脓毒症组升高,血必净组大鼠血肌酐、尿素氮、Cr Cl较脓毒症组降低(P<0.05)。造模后6 h,3组肾小管损伤评分、AI比较,差异无统计学意义(P>0.05);造模后24 h,3组肾小管损伤评分、AI比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中脓毒症组肾小管损伤评分、AI较假手术组升高,血必净组肾小管损伤评分、AI较假手术组升高,血必净组肾小管损伤评分、AI较脓毒症组降低(P<0.05)。造模后6、24 h,3组ROCK-1、MYPT-1和Caspase-3表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中造模后6 h,脓毒症组和血必净组ROCK-1、MYPT-1和Caspase-3表达水平较假手术组升高(P<0.05);造模后24 h,脓毒症组ROCK-1、MYPT-1和Caspase-3表达水平较假手术组升高,血必净组ROCK-1、MYPT-1表达水平较假手术组升高,血必净组ROCK-1、MYPT-1和Caspase-3表达水平较脓毒症组降低(P<0.05)。结论早期应用血必净可以通过Rho激酶信号通路减少肾小管细胞在脓毒症进程中的凋亡,改善病理学改变,减轻脓毒症导致的急性肾损伤。

瑞舒伐他汀对糖尿病合并冠心病大鼠动脉粥样硬化Rho激酶表达的影响

目的探讨瑞舒伐他汀对糖尿病合并冠心病大鼠动脉粥样硬化的防治作用及其相关机制。方法 Wistar大鼠50只,随机取10只大鼠以普通饮食喂养作为对照组,另40只以链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠内膜损伤存活后,高脂饮食8周,取大鼠20只随机分为模型组、治疗组,每组10只,继续高脂饮食4周,之后治疗组用瑞舒伐他汀20mg/(kg·d)灌胃干预2个月。3组大鼠常规查血脂及RT-PCR检测主动脉血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)及Rho激酶mRNA表达。结果干预前,与对照组比较,模型组和治疗组大鼠TC、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低(P<0.05)。干预后,与对照组比较,模型组大鼠TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低;VCAM-1、ICAM-1和Rho激酶mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,治疗组上述各指标均改善,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论瑞舒伐他汀通过干预 Rho/Rho激酶信号通路表达而抑制血管内皮炎症,起到延缓、抑制动脉管腔狭窄的作用,这可能为其抗动脉粥样硬化的新机制。

阿托伐他汀抑制内皮细胞Rh0/Rho激酶信号通路改善细胞骨架

目的探讨阿托伐他汀对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)Rho/Rho激酶信号通路中Rho激酶和磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)表达的影响。方法体外培养HUVEC,分4组:对照组;AngⅡ组;阻断剂组(Rho激酶阻断剂Y-27632);阿托伐他汀组。硝酸还原酶法检测NO含量;免疫细胞化学法观察p-MLC蛋白定位表达,Western blot法测定Rho激酶和p-MLC蛋白定量表达。结果与对照组比较,AngⅡ组NO含量显著减少(P<0.01);阻断剂组和阿托伐他汀组NO含量较AngⅡ组显著升高(P<0.01)。AngⅡ组细胞质内出现大量棕色颗粒积聚、浓染;阻断剂组和阿托伐他汀组细胞质中仅有少量棕色淡染颗。与AngⅡ组比较,阻断剂组和阿托伐他汀组Rho激酶及p-MLC蛋白表达显著降低(P<0.01),但仍高于对照组(P<0.01);2组间蛋白表达仍有明显差异(P<0.01)。结论阿托伐他汀对AngⅡ诱导的HUVEC保护作用,是通过抑制Rho/Rho激酶信号通路中Rho激酶及其下游的p-MLC蛋白表达,减弱AngⅡ对内皮细胞骨架的损伤。

Rho激酶抑制剂对急性脑梗死患者血浆尾加压素Ⅱ的影响及疗效分析

目的观察Rho激酶抑制剂法舒地尔对急性脑梗死患者血浆尾加压素Ⅱ的影响,评估盐酸法舒地尔治疗急性脑梗死的临床疗效。方法选取2014年10月~2016年4月在上海交通大学附属第一人民医院松江分院神经内科收治的急性脑梗死患者120例,随机分为法舒地尔组60例,对照组60例。另选择我院同期健康体检人员60例作为健康体检组。采用竞争性酶联免疫吸附法测定血浆尾加压素Ⅱ水平,比较法舒地尔组与对照组治疗前和治疗14d美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分。结果法舒地尔组治疗后NIHSS评分较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。法舒地尔组和对照组治疗前血浆尾加压素Ⅱ水平明显高于健康体检组(P<0.01);对照组治疗后血浆尾加压素Ⅱ水平较健康体检组明显升高[(0.20±0.06)μg/L vs(0.14±0.04)μg/L,P<0.01]。法舒地尔组和对照组治疗后血浆尾加压素Ⅱ水平较治疗前明显降低[(0.15±0.03)μg/L vs(0.25±0.04)μg/L,(0.20±0.06)μg/L vs(0.25±0.05)μg/L,P<0.01]。结论 Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔可能通过抑制Rho激酶的活性影响急性脑梗死患者血浆尾加压素Ⅱ表达,并可改善急性脑梗死患者神经功能缺损。

新型Rho激酶抑制剂FSD-C11化合物抑制EAE的作用研究

目的探索新型Rho激酶抑制剂FSD-C11化合物治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的有效性及可能的作用机制,为今后可能的临床治疗提供实验依据。方法采用小鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)多肽诱导雌性C57BL/6小鼠建立EAE模型,于免疫后第3天起FSD-C11组按体质量40mg/(kg·d)腹腔注射FSD-C11化合物,EAE组注射等量生理盐水,实验期间每天定时记录两组小鼠临床症状评分及体质量变化。免疫后第28天取小鼠脊髓进行HE和髓鞘染色,流式细胞术检测脾细胞M1和M2型巨噬细胞表型,Western blot检测脑组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和磷酸化核蛋白因子κB(p-NF-κB)的表达。结果FSD-C11化合物可延迟小鼠的起病时间,降低发病率,减轻临床症状,减少体质量丢失;与EAE组小鼠相比,FSD-C11可减少脊髓炎性细胞浸润和髓鞘脱失(P<0.05);抑制致炎性的M1型巨噬细胞,增加抗炎性和保护性的M2型巨噬细胞;抑制脑组织中iNOS和p-NF-κB蛋白的表达。结论新型Rho激酶抑制剂FSD-C11化合物在治疗EAE中显现出很好的潜力,其作用机制可能与调节巨噬细胞极性、抑制炎性反应有关。

Rho激酶在氢气保护LPS诱导的Caco-2细胞上皮屏障功能障碍中的机制研究

目的探讨Rho激酶(ROCK)在氢气改善离体脓毒症肠屏障功能中的作用。方法常规培养人结肠上皮细胞Caco-2,分为6组(n=3):对照组(C组)、富氢培养基组(H组)、脂多糖(LPS)处理组(L组)、富氢培养基+LPS组(HL组)、Rho激酶抑制剂Y-27632组(Y组)、Y-27632+LPS组(YL组)。H组给予0.6 mmol/L富氢培养基;LPS和Y-27632的处理浓度分别为50 mg/L、25μmol/L。建立Transwell小室模型,定期检测跨上皮电阻值(TEER值),当TEER值达到800Ω·cm^2后给予处理,于6、12、24 h检测TEER值,24 h时检测FITC-右旋糖酐通过率。细胞接种于6孔板,融合达80%~90%后给予处理,实时聚合酶链式反应技术检测闭锁小带蛋白1(ZO-1)mRNA和ROCK mRNA表达情况;蛋白免疫印迹技术检测ZO-1蛋白和ROCK蛋白表达水平。结果与C组比较,H组12、24 h TEER值升高(P<0.05),FITC-右旋糖酐通过率、ZO-1蛋白和ROCK蛋白表达水平差异无统计学意义;Y组6、12、24 h TEER值升高(P<0.05),FITC-右旋糖酐通过率差异无统计学意义,ZO-1 mRNA表达增加,ROCK mRNA表达减少(均P<0.05);L组6、12、24 h TEER值降低,FITC-右旋糖酐通过率增高,ZO-1 mRNA和蛋白表达均下降,ROCK mRNA和蛋白表达均增加(P<0.05)。与L组比较,6、12、24 h YL组TEER值增高,FITC-右旋糖酐通过率降低,ZO-1 mRNA表达增加,ROCK mRNA表达降低(均P<0.05)。与L组比较,HL组6、12、24 h TEER值增高,FITC-右旋糖酐通过率降低,各时间点ZO-1蛋白表达上升,ROCK蛋白表达下降(均P<0.05)。结论氢气可保护脓毒症肠屏障功能,改善肠上皮屏障完整性和通透性,增加肠细胞间紧密连接蛋白表达,这些保护机制可能与氢气抑制LPS诱导的ROCK过度表达有关。

子宫平滑肌RhoA/Rho激酶表达与宫缩乏力性产后出血的关系

目的:探讨产妇子宫平滑肌组织RhoA/Rho激酶表达与宫缩乏力性产后出血的关系。方法:选择30例宫缩乏力性产后出血产妇为病例组,同期无产后出血产妇30例为对照组。采用肌条等长张力测定法检测子宫平滑肌自发收缩活动力、加入Rho激酶抑制剂Y-27632后子宫平滑肌收缩活动力;采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白质印迹法检测子宫平滑肌组织RhoA,ROCKⅠ和ROCKⅡmRNA及蛋白表达水平。结果:①病例组子宫平滑肌自发收缩活动力水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);病例组和对照组加入Y-27632后收缩活动力水平均低于加入前,差异有统计学意义(P<0.01)。②病例组子宫平滑肌组织RhoA,ROCKⅠ和ROCKⅡmRNA表达水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。③病例组子宫平滑肌组织RhoA,ROCKⅠ和ROCKⅡ蛋白表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。④2组子宫平滑肌组织RhoA mRNA及蛋白与ROCKⅠ和ROCKⅡmRNA及蛋白表达水平均呈正相关。⑤2组子宫平滑肌组织RhoA,ROCKⅠ和ROCKⅡmRNA及蛋白水平均与子宫平滑肌基础收缩活动力水平呈正相关。结论:宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌组织RhoA,ROCKⅠ和ROCKⅡ水平均降低,且均与子宫平滑肌收缩活动力呈正相关,提示子宫平滑肌组织RhoA/Rho激酶信号通路表达降低可能是发生宫缩乏力性产后出血的分子机制之一。

Rho激酶抑制剂对大鼠脑缺血再灌注后核转录因子和新型趋化因子表达的影响

目的探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注损伤后的保护作用及可能机制。方法健康成年雄性SD大鼠90只,随机分为3组:假手术组、模型组、法舒地尔组,每组30只,每组再按照再灌注时间不同分为6、12、24 h 3个时间点,每个时间点10只,线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。术后对大鼠进行神经功能评分,RT-PCR检测缺血侧脑组织中新型趋化因子mRNA、NF-κB p65 mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组和法舒地尔组大鼠脑缺血再灌注6、12、24 h NF-κB3 p65 mRNA、新型趋化因子mRNA表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,法舒地尔组大鼠脑缺血再灌注6、12、24 h神经功能缺损评分明显降低,12、24 h NF-κB p65 mRNA、新型趋化因子mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论法舒地尔的脑保护作用可能与其减轻大鼠脑缺血再灌注损伤后的炎性反应有关。

巨噬细胞移动抑制因子经Rho激酶途径促进人胚肺成纤维细胞表型转化

目的:观察重组巨噬细胞移动抑制因子(rMIF)对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)表型转换的作用,探讨哮喘气道重塑的发生机制。方法:不同浓度的rMIF(25～100μg/L)分别作用于MRC-5细胞24 h或48 h,RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达,Western blotting检测α-SMA蛋白合成;100μg/LrMIF刺激MRC-5细胞48 h,刺激前0.5 h加入Rho拮抗剂Y27632,RT-PCR法检测α-SMA mRNA表达,West-ern blotting法检测α-SMA表达;100μg/L rMIF分别刺激MRC-5 6 h、12 h、24 h或48 h,Western blotting检测磷酸化肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1(p-MYP1)蛋白合成。结果:刺激MRC-5 24 h,不同浓度的rMIF对α-SMAmRNA转录未见显著影响(P>0.05)。刺激MRC-5细胞48 h,rMIF可呈剂量依赖地促进α-SMA mRNA(r=0.697,P<0.01)和蛋白(r=0.957,P<0.01)表达。Y27632预刺激后,显著抑制rMIF100μg/L促进α-SMA mR-NA和蛋白表达的作用(均P<0.01)。rMIF刺激6 h后,p-MYPT1表达显著增加(P<0.01),12 h达到高峰(P<0.01),24 h开始下降,但24 h和48 h其水平仍高于对照组(均P<0.01)。结论:rMIF通过Rho信号通路刺激成纤维细胞表型转化,可能在哮喘气道重塑的发病机制中发挥关键作用。

Rho激酶抑制剂和解除狭窄联合治疗重度颈动脉狭窄所致认知功能障碍的研究

目的探讨Rho激酶抑制剂和解除狭窄联合治疗重度颈动脉狭窄所致的认知功能障碍的疗效。方法取造模成功的60只SD大鼠随机选择其中48只分为药物组,法舒地尔8.35 mg/(kg·d),狭窄解除组,联合组(解除狭窄联合法舒地尔治疗)和对照组,每组12只。另选6只大鼠不结扎颈动脉为假手术组。各组以不同干预措施处理2周后,进行Morris水迷宫行为学检测大鼠的认知功能,并观察大鼠海马神经病理形态学,比较治疗前后颈动脉狭窄率。结果治疗后,与对照组比较,3个治疗组大鼠平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),联合组较药物组和狭窄解除组改善更明显(P<0.05);狭窄解除组和联合组大鼠颈动脉狭窄率明显下降(P<0.01)。联合组狭窄率较药物组和狭窄解除组明显下降(P<0.01)。各组海马组织病理形态学变化有不同程度的改善。结论联合治疗可明显改善重度颈动脉狭窄导致的认知功能障碍,疗效优于单纯的药物治疗或解除狭窄治疗。

Rho激酶抑制剂对缺血性脑白质损伤的实验性干预研究

目的探讨Rho激酶对缺血性脑白质损害的影响及Rho激酶抑制剂对缺血性脑白质损害的干预效果。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为对照组、缺血组和治疗组,每组20只。缺血组和治疗组给予双侧颈总动脉结扎,对照组给予假手术处理;术后治疗组给予法舒地尔腹腔注射,对照组和缺血组给予生理盐水腹腔注射。手术1个月后评价测定各组大鼠脑深部白质纤维密度、星形胶质细胞数目以及Rho激酶mRNA表达水平。结果缺血组大鼠脑深部白质纤维密度较对照组明显降低,星形胶质细胞数目明显增多,Rho激酶mRNA表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组大鼠脑深部白质纤维密度较缺血组明显增高,星形胶质细胞数目明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Rho激酶异常活化与缺血性白质损害相关,Rho激酶抑制剂可改善慢性低灌注状态下大鼠脑白质损害。

勿动蛋白及其信号通路分子Rho A与Rho相关蛋白激酶在高血压心肌肥厚与纤维化中的作用

目的探讨勿动蛋白(Nogo)/Rho相关蛋白激酶(ROCK)-去甲肾上腺素转运蛋白(NET)信号通路对自发性高血压大鼠心肌肥厚与纤维化的调节作用。方法选择7周龄SPF级同源同系雄性自发性高血压大鼠20只,随机分为4组:对照组、Nogo受体拮抗剂(NEP1-40)组、ROCK抑制剂(法舒地尔)组和NET抑制剂(氟西汀)组,每组5只,饲养7周。分离称量左心室质量,计算左心室质量指数。实时定量PCR检测心肌肥厚标志物心钠肽、脑钠肽、β肌球蛋白重链(β-MHC)基因表达,以及心肌纤维化标志物结缔组织生长因子(CTGF)、心肌胶原组织Ⅰ型(CollagenⅠ)、心肌胶原组织Ⅲ型(CollagenⅢ)和NET基因表达水平。结果与对照组比较,NEP1-40组左心室质量指数、心钠肽、脑钠肽、β-MHC表达明显增高,法舒地尔组左心室质量指数、心钠肽、脑钠肽、β-MHC表达明显降低(P<0.05)。与对照组比较,NEP1-40组CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢ表达明显增高,法舒地尔组NET表达明显升高,CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢ和NET表达明显降低(P<0.05)。与对照组比较,氟西汀组心钠肽、脑钠肽、β-MHC、CTGF和CollagenⅠ表达明显增高[(1.37±0.05)%vs (1.26±0.03)%,(1.27±0.04)%vs (1.18±0.07)%,(1.26±0.04)%vs (1.22±0.03)%,2.05±0.01 vs 1.44±0.11,1.86±0.06 vs 1.29±0.05,P<0.05]。结论Nogo/ROCK-NET信号通路参与自发性高血压大鼠心肌肥厚与纤维化的调节。

急性冠状动脉综合征患者外周血T细胞Rho激酶活性检测的意义

目的研究急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血T细胞中Rho激酶活化情况及其临床意义。方法选择ACS患者270例,根据冠状动脉造影和临床诊断分为稳定性心绞痛(SAP)组85例、不稳定性心绞痛(UAP)组95例,急性心肌梗死(AMI)组90例和非冠心病患者(对照组)70例。冠状动脉病变程度采用冠状动脉Gensini积分量化。外周血采用RosettSep T细胞提取试剂盒。磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(MYPT1)蛋白表达来表示Rho激酶活性,磷酸化MYPT1蛋白检测采用免疫印迹法,细胞因子水平采用酶联免疫吸附试验检测。结果 UAP组和AMI组外周血T细胞Rho激酶活性明显高于SAP组和对照组(P<0.05)。Rho激酶活性抑制剂Y27632对ACS患者T细胞白细胞介素6分泌有明显抑制作用(P<0.01),对白细胞介素10分泌无明显抑制作用。Gensini积分≥20分患者外周血T细胞Rho激酶活性明显高于Gensini积分<20分患者(P<0.05)。结论 ACS患者T淋巴细胞存在Rho激酶活化异常,并且与ACS患者冠状动脉斑块的稳定性和病变严重程度有关。

杜仲叶总黄酮通过RhoA/ROCK信号通路参与脑出血大鼠神经功能修复

目的从Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)通路探讨杜仲叶总黄酮促进脑出血大鼠神经功能修复的机制。方法取SD雄性大鼠,用改良二次注血法建立脑出血模型,并按随机数字表法分为假手术组、模型组、杜仲叶总黄酮组、RhoA抑制剂组、RhoA激动剂组、杜仲叶总黄酮+RhoA激动剂组,每组20只。杜仲叶总黄酮组灌胃200 mg/kg杜仲叶总黄酮,RhoA抑制剂组腹腔注射1 mg/kg的RhoA抑制剂Y27632,RhoA激动剂组腹腔注射30μg/kg的RhoA激动剂U-46619,杜仲叶总黄酮+RhoA激动剂组灌胃200 mg/kg杜仲叶总黄酮的同时腹腔注射30μg/kg U-46619,模型组及假手术组灌胃10 mL/kg生理盐水,1次/d,连续7 d。给药结束后,观察大鼠行为变化,采用改良神经功能缺损评分(mNSS)对神经功能缺损症状进行评估;取脑组织后称质量,计算脑组织含水量,然后制备脑组织切片并计算脑血肿体积百分比;透射电镜观察血肿周围组织神经突触结构变化;TUNEL染色法观察血肿周围组织神经元凋亡;鬼笔环肽染色观察血肿周围组织神经元骨架变化;蛋白免疫印迹法检测血肿周围组织RhoA、ROCK、细胞骨架蛋白(F-actin)、丝切蛋白(cofilin)、磷酸化cofilin(p-cofilin)、促神经元及突触生长相关蛋白[神经生长因子(NGF)、神经营养因子3(NT3)、突触后致密蛋白-95(PSD-95)、突触素(SYP)]的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑血肿体积百分比升高,血肿周围组织神经元凋亡及骨架结构损伤,神经突触结构改变严重,RhoA/ROCK通路激活,促神经元及突触生长相关蛋白表达降低(P<0.05)。杜仲叶总黄酮或RhoA抑制剂干预治疗均可抑制RhoA/ROCK通路激活介导的神经元骨架结构改变,提高促神经元及突触生长相关蛋白表达,缓解脑出血后血肿周围组织神经元损伤及凋亡,促进神经功能修复(P<0.05)。RhoA激动剂可促进RhoA/ROCK通路激活,加重脑出血后神经功能损伤,并削弱杜仲叶总黄酮的促神经功能修复作用(P<0.05)。结论杜仲叶总黄酮可通过抑制RhoA/ROCK通路活化来改善脑出血大鼠出血症状,促进神经功能修复。

Rho激酶信号通路对小梁网细胞增殖作用机制的研究进展

新型降眼压药物Rho激酶抑制剂直接作用于青光眼根本的致病部位——小梁网及小梁网细胞,通过调节细胞周期、细胞骨架,促进细胞增殖等多种机制降眼压。本文将针对Rho激酶信号通路对小梁网细胞增殖作用机制的研究进展进行综述。

Rho/Rho激酶与动脉粥样硬化的研究进展

随着对促动脉粥样硬化因子的深入研究，Rho／Rho激酶途径逐渐受到人们的关注。现已发现，Rho／Rho激酶参与细胞黏附、迁移、平滑肌细胞收缩及胞质分裂等的调节，而这些细胞功能均参与了动脉粥样硬化的发生与发展。动物实验及临床研究均证明，Rho／Rho激酶与动脉粥样硬化、高血压、心肌缺血等心血管疾病的发病过程相关。因此，对Rho／Rho激酶作用机制的研究，有助于为心血管疾病的防治和康复措施的干预，提供一定的理论依据。

Ras同源基因家族蛋白A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶信号通路与脑梗死关系的研究进展

Ras同源基因家族蛋白A（Ras homolog gene family member A,Rho A）/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶（Rho-associated coiled-coil forming protein kinase,ROCK）信号通路参与许多细胞的调控过程,包括转录、细胞骨架的改变、收缩、黏附、运动、增殖、分化等,同时其与动脉粥样硬化、脑梗死、缺血-再灌注损伤的发生发展密切相关[1]。

氯氧喹通过下调Rho/Rho激酶信号通路抑制乳腺癌细胞转移

目的:通过观察氯氧喹对乳腺癌细胞系细胞骨架的聚合状态及其对Rho/Rho激酶信号通路相关靶点蛋白磷酸化的作用,明确氯氧喹治疗乳腺癌的作用机制。方法:以不同浓度氯氧喹处理乳腺癌Bcap37和MDA-MB--453细胞系,划痕试验检测细胞迁移,Transwell试验检测细胞侵袭,罗丹明标记鬼笔环肽染色法观察F肌动蛋白的聚解状态,免疫荧光法观察α微管蛋白的表达,蛋白质印迹法检测Rho/Rho激酶信号通路关键蛋白磷酸化水平。结果:氯氧喹可剂量依赖性地抑制细胞迁移和侵袭;Bcap37和MDA-MB-453细胞经氯氧喹处理后其细胞形态发生改变,细胞体积减少;F肌动蛋白和α微管蛋白染色形态不规则,荧光染色聚集成团,且呈现剂量依赖性;氯氧喹可下调Rho/Rho激酶信号通路中肌动蛋白解聚因子Cofilin、磷酸化蛋白激酶(Limk)、Rho关联卷曲蛋白激酶2(Rock2)磷酸化表达(均P<0.01)。结论:氯氧喹可抑制乳腺癌细胞骨架聚合从而抑制细胞迁移,该作用可能与抑制Rho/Rho激酶信号通路相关。

Rho激酶抑制剂联合呋塞米及螺内酯对急性左心衰患者心功能及血清AST、LDH、CK-MB水平的影响

目的:探讨Rho激酶抑制剂(RKI)联合呋塞米及螺内酯在急性左心衰(ALHF)治疗中的临床应用价值。方法: 2016年4月~2018年2月我院收治的94例ALHF患者被随机均分为利尿剂组(常规治疗基础上接受呋塞米及螺内酯)和三联治疗组(在利尿剂组基础上加用RKI—盐酸法舒地尔),两组均连续治疗7d。观察比较两组治疗前后LVESV、LVEDV、LVEF、血清谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,临床疗效。结果:三联治疗组治疗总有效率显著高于利尿剂组(95.75%比82.98%), P =0.045。与治疗前比较,治疗后两组LVEF显著升高,LVESV、LVEDV、血清AST、LDH、CK-MB水平均显著降低, P 均=0.001;与利尿剂组比较,三联治疗组治疗后LVEF[(48.27±5.95)%比(55.14±6.74)%]升高更显著,LVESV[(86.29±10.41)ml比(65.96±9.84)ml]、LVEDV [(133.71±13.42)ml比(120.35±11.25)ml]、血清AST[(81.23±10.44)U/L比(57.58±8.42)U/L]、LDH[(184.24±13.51)U/L比(124.65±12.42)U/L]、CK-MB[(187.84±13.45)U/L比(132.54±11.69) U/L]水平降低更显著, P 均=0.001。两组不良反应发生率无显著差异, P 均>0.05。结论: Rho激酶抑制剂联合呋塞米与螺内酯治疗ALHF效果显著,可显著改善心功能、减轻心肌损害,且安全可靠,值得推广。